γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在吸烟气道上皮细胞表达的研究

目的通过观察吸烟大鼠支气管上皮细胞及慢性吸烟人气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的研究,探讨γ-GCS在吸烟所致慢性气道炎症及氧化/抗氧化失衡中的作用。方法①自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起慢性气道炎症的动物模型,将40只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、吸烟2个月组、吸烟3个月组,每组各10只;②选择2007年9月至2008年10月行支气管镜检查的患者60例。吸烟指数>300支,平均年龄(50±10)岁,分为吸烟组(慢性支气管炎组、非慢性支气管炎组),不吸烟组(慢性支气管炎组、非慢性支气管炎组),每组各15例。通过支气管镜刷检获取支气管气道上皮细胞,分别采用免疫组织化学、免疫细胞化学法检测支气管上皮细胞中γ-GCS蛋白的表达水平。结果 (1)吸烟3个月组大鼠出现了肺气肿的病理改变;吸烟1个月、2个月和3个月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCS蛋白表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.01)。(2)在气管镜下取人气道上皮细胞γ-GCS蛋白的表达:①吸烟组[慢性支气管炎组(0.20±0.10)、非慢性支气管炎组(0.35±0.11)]的气道上皮细胞γ-GCS的表达水平,低于不吸烟组[慢性支气管炎组(0.40±0.10)、非慢性支气管炎组(0.50±0.15)]差异均有统计学意义(P均<0.05);②慢性支气管炎组(0.40±0.10)的气道上皮细胞γ-GCS的表达水平,低于非慢性支气管炎组(0.50±0.15)的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论①随着吸烟时间的延长,大鼠支气管上皮细胞中γ-GCS蛋白表达水平逐渐增高;②吸烟者气道内上皮细胞γ-GCS的免疫活性降低,γ-GCS在不吸烟非慢性支气管炎者表达最强,而在吸烟者与慢性支气管炎者的气道内表达下调;γ-GCS在香烟所致慢性气道炎症、氧化应激及氧化/抗氧化失衡中可能发挥一定的作用。     

红霉素对吸烟大鼠肺组织激活蛋白-1铜锌超氧化物歧化酶表达的影响

目的通过研究红霉素对吸烟大鼠肺组织激活蛋白-1(AP-1)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)表达的影响,探讨其在慢性阻塞性肺疾病(COPD)抗氧化治疗中的作用及其机制。方法Wistar大鼠30只,随机分为对照组、吸烟组和红霉素组。分别采用免疫组织化学法、免疫细胞化学法和原位杂交半定量技术检测支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞中AP-1(c-Jun和c-Fos亚单位)和CuZn-SOD蛋白及其mRNA的表达水平。结果吸烟组大鼠支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞c-Jun、c-Fos、CuZn-SOD蛋白及其mRNA表达均高于对照组(P均<0.05);红霉素组c-Jun、c-Fos表达水平明显低于吸烟组(P均<0.01),而CuZn-SOD表达水平明显高于吸烟组(P均<0.01)。结论红霉素可能通过影响AP-1、CuZn-SOD的表达而在COPD治疗中发挥一定抗氧化作用。     

γ-GCS及TGF-β1在MRL/1pr雌性小鼠肾组织表达研究

目的:对狼疮小鼠肾组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达水平进行研究,发现γ-GCS的表达量改变在转化生长因子β1(TGF-β1)促纤维化中的作用.方法:以C57BL/6小鼠为对照,荧光定量PCR法检测MRL/1pr雌性小鼠肾组织γ-GCS和TGF-β1的mRNA表达.结果:狼疮小鼠组肾组织中γ-GCS的mRNA及蛋白表达减少,TGF-β1的mRNA表达水平升高,与C57BL/6小鼠组比较有显著差异(P＜0.05).结论:γ-GCS表达降低导致谷胱甘肽(GSH)合成减少,抗氧化能力减弱,促使肾间质纤维化.     

黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨黄芩总黄酮(total flavonoids of scutellariabaicalensis georgi,TFSB)对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用。方法气管内注入博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型,给予TFSB灌服28 d,每天1次后,计算肺系数、测定肺组织和血清中肺纤维化部分相关生化指标,观察大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,RT-PCR检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3 mRNA的表达水平,Western blot检测平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)与过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)的蛋白表达水平。结果与模型组相比,TFSB各剂量组大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)含量、血清与肺组织匀浆中丙二醛(MDA)含量降低(P<0.05,P<0.01),血清与肺组织匀浆中谷胱甘肽(GSH)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清总抗氧化能力(T-AOC)升高(P<0.05,P<0.01),TFSB各剂量组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度降低(P<0.01),RT-PCR和Western blot结果显示:TGFβ-1、Smad2、Smad3 mRNA的表达水平升高(P<0.05),α-SMA蛋白表达水平降低(P<0.05),PPAR-γ蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 TFSB对博莱霉素致大鼠肺纤维化有一定的防治作用,其机制可能与机体内的抗氧化和下调TGF-β1信号通路有关。     

盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺TGF-β3表达的影响

目的 比较产前给药盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺转化生长因子-β3(TGF-β3)基因和蛋白表达的影响.方法 9只孕鼠随机分为生理盐水对照组、地塞米松组、盐酸氨溴索组,每组3只.孕16、17、18 d腹腔注射给药3剂.孕19 d取胎鼠肺, RT-PCR法检测TGF-β3基因表达水平;免疫组织化学法检测TGF-β3蛋白表达水平.结果 地塞米松组和盐酸氨溴索组TGF-β3基因和蛋白的表达均明显高于对照组 (P＜0.05).地塞米松组TGF-β3基因和蛋白的表达高于盐酸氨溴索组(P＜0.05).结论 产前给药盐酸氨溴索、地塞米松均能促进胎肺发育相关因子TGF-β3基因及蛋白的表达,从而促进胎肺功能的发育.     

预先给予盐酸氨溴索对吸烟所致支气管炎大鼠气道炎症的影响

目的 探讨细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在吸烟诱导的慢性支气管炎模型大鼠气道炎症中的作用,以及盐酸氨溴索预先给药对慢性支气管炎模型大鼠气道炎症的影响及其机制。方法 将雄性Wistar大鼠30只随机分为正常对照组、吸烟模型组和氨溴索干预组各10只。采用单纯吸烟方法建立慢性支气管炎大鼠模型。氨溴索干预组自模型建立开始每天预先腹腔内注射氨溴索,35 mg&#8226;kg-1,每周6 d,连续75 d后处死大鼠。光镜下观察支气管肺组织病理形态学改变,分析支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数和分类,免疫组化方法检测ICAM-1在各组支气管肺组织中的表达。结果 模型组病理形态学改变符合人类慢性支气管炎特点,支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数成显著正相关（均P＜0.01）;与正常对照组比较,模型组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM 1表达强度明显增强（均P＜0.01）;与模型组比较,氨溴索干预组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度明显减弱（均P＜0.01）。结论 吸烟诱导的慢性支气管炎模型大鼠气道炎症与ICAM-1表达上调有关。氨溴索可能通过下调ICAM-1表达,抑制中性粒细胞在气道中的聚集、活化而减轻气道炎症反应。     

穿山龙总皂苷经TGF-β1/α-SMA通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的实验研究

摘要：目的:探讨穿山龙总皂苷（TSRDN）经转化生长因子-β1/α-平滑肌动蛋白（TGF-β1/α-SMA）通路减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的作用机制。方法:96只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、泼尼松组（3 mg·kg-1）,以及TSRDN低、中、高剂量组（20,40,80 mg·kg-1）,每组16只。以博莱霉素5 mg·kg-1滴入气管建立肺纤维化动物模型,连续给药28 d后,检测羟脯氨酸含量、肺系数,观察肺组织病理变化,同时采用反转录·聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织中TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达量。结果:假手术组肺组织结构正常,无间质纤维组织增生,偶见炎性细胞;模型组大鼠组织巨噬细胞活化,炎性细胞浸润,肺泡隔增宽,表面有较多出血灶,形成弥散性肺纤维化,多呈3级纤维化和2级肺泡炎改变;泼尼松组和TSRDN给药组胶原组织增生降低,肺泡间隔增宽不明显,多数肺组织结构较为清晰,多呈2级和1级纤维化改变,炎性细胞浸润减少。与假手术组比较,模型组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;与模型组比较,泼尼松组和TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标均降低（P<0.05）,且随着TSRDN剂量的升高,TSRDN各剂量组大鼠上述相关指标逐渐降低,呈剂量依赖性（P<0.05）;与泼尼松组比较,TSRDN低、中剂量组大鼠肺系数、肺组织羟脯氨酸含量、肺泡炎评分、肺纤维化评分、TGFβ1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.05）,TSRDN高剂量组大鼠上述相关指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论:TSRDN具有一定的抗肺纤维化作用,其机制可能通过TGF-β1/α-SMA信号途径干预纤维蛋白形成和沉积。     

白藜芦醇通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路抑制肺纤维化

目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)和Res组(n=40),后两组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,d 2起Res组大鼠予100 mg.kg-1Res灌胃,其余两组相同条件下给予生理盐水,模型组和Res组分别于d 7、d 14、d 28、d 56随机处死10只大鼠,而对照组于d 56全部处死作为总体对照,取出肺组织行HE染色和Masson染色,用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA及蛋白表达,分离血清,并采用酶联免疫吸附法检测血清I型前胶原羧基端前肽(PICP)和Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PⅢNP)浓度。结果 Res组大鼠肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组肺组织ADAMTS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmR-NA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度增加(P<0.05或0.01);相比于模型组同期,Res组各时间点ADAMTS-1mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度则降低(P<0.05或0.01)。结论 Res通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路降解肺组织ColⅠ、ColⅢ发挥抗肺纤维化的作用。     

吲哚-3-原醇对博莱霉素所致小鼠肺纤维化的干预作用及其机制

目的观察吲哚-3-原醇(indole-3-carbinol,I3C)对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用并初步探讨其机制。方法Imprinting Control Region(ICR)小鼠随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组(6.67 mg.kg-1)、吲哚-3-原醇小、中、大剂量组(25、50、100 mg.kg-1)。小鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型后,第2天给予相应药物,每天1次。连续给药28 d后处死小鼠检测其肺系数、血清和肺组织羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)、血清总抗氧化能力(To-tal antioxidative capacity,T-AOC);取固定部位肺组织切片HE染色,进行病理学观察;RT-PCR法检测肺组织中α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β、Smad2 mRNA的表达;Western blot法检测肺组织中α-SMA、TGF-β、Smad2蛋白的表达。结果吲哚-3-原醇能够提高小鼠血清的总抗氧化能力(P<0.05或P<0.01),同时可以降低肺系数和肺组织中的HYP含量(P<0.05或P<0.01);光镜观察表明吲哚-3-原醇能明显减轻肺纤维化小鼠肺泡炎和肺纤维化程度(P<0.05或P<0.01);RT-PCR检测发现吲哚-3-原醇能明显降低肺组织α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β、Smad2基因表达水平(P<0.05或P<0.01);Western blot分析结果说明吲哚-3-原醇能明显降低肺组织α-SMA、TGF-β、Smad2蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论吲哚-3-原醇可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路来减轻博莱霉素致小鼠肺纤维化。     

二黄汤对哮喘大鼠气道重塑中转化生长因子-β1及体内白介素-33表达的影响

摘要 目的：观察二黄汤对哮喘大鼠气道重塑中转化生长因子β1(TGF-β1)及体内白介素-33(IL-33)的影响。方法：50 只SD大鼠随机均分为正常组（A）、哮喘组（B）、布地奈德组（C）、高剂量二黄汤组（D）和低剂量二黄汤组（E）。以卵清白蛋白（VOA）致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。用免疫组化法检测肺组织TGF-β1蛋白的表达,酶联免疫法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中IL-33的浓度。结果：与A组比较,B组支气管壁厚度（Wat）、平滑肌厚度（Wam）、血清、BALF中IL-33的浓度和肺组织中TGF-β1的蛋白表达均增高（P<0.05）。经布地奈德和二黄汤干预后,与B组比较,C组、D组和E组以上指标均下降（P<0.05）;与C组比较,C组、D组各检测结果无差异（P>0.05）,C组、E组各检测结果有差异,但不显著（0.01相似文献   

HO-1与γ-GCS在COPD大鼠肺组织中的表达及大蒜素的治疗作用

目的探讨HO-1、γ-GCS在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用及观察大蒜素的治疗干预作用。方法香烟熏吸加气管内滴入脂多糖制作COPD模型,将30只Wistar大鼠随机分成COPD组、对照组和大蒜素干预组,采用免疫组化法检测HO-1、γ-GCS在各组大鼠中的表达。结果各组之间HO-1、γ-GCS表达强度分别有显著差异(P<0.01),且呈正相关。结论γ-GCS反应性表达增高是COPD抗氧化主要机制之一;HO-1的表达影响γ-GCS的表达;大蒜素通过增加肺组织中HO-1、γ-GCS的表达而有一定的COPD治疗作用。     

超氧化物歧化酶在吸烟大鼠气道上皮细胞中的表达

目的通过观察超氧化物歧化酶(SOD)在吸烟大鼠气道上皮细胞表达的水平,探讨SOD在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失衡中的作用。方法自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起慢性阻塞性肺疾病的动物模型,将30只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、3个月组,每组10只。采用免疫组织化学染色半定量检测各组支气管上皮细胞Cu-ZnSOD蛋白的表达。结果吸烟3个月组大鼠出现了肺气肿的病理改变;吸烟1个月组(7.5±1.6)、吸烟3个月组(10.4±2.2)大鼠支气管上皮细胞Cu-ZnSOD蛋白的表达水平均较不吸烟组(2.6±0.4)明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),3个月组较1个月组表达增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论随着吸烟时间的延长,大鼠支气管上皮细胞中Cu-ZnSOD蛋白表达增高,提示SOD在吸烟所致COPD氧化/抗氧化失衡中发挥一定作用。     

糖皮质激素调控哮喘大鼠气道重塑中TGF-β_1/Smad信号通路的研究

目的观察糖皮质激素对哮喘大鼠气道重塑中转换生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路的作用。方法以卵清白蛋白(OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。SPF级♂SD大鼠40只分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、布地奈德组(C组)和地塞米松干预组(D组),每组10只。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1的浓度,免疫组化法检测肺组织TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7蛋白的表达。结果与A组比较,B组支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam)、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均增高,Smad6、Smad7的蛋白表达低于A组,经布地奈德组和地塞米松干预后,Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均下降,Smad6、Smad7的蛋白表达增强。C组和D组Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7的蛋白表达比较无明显差异。免疫组化显示TGF-β1和Smad6蛋白表达于胞质,Smad7、P-Smad3和P-Smad2蛋白表达于胞质和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。大鼠肺组织中Smad6蛋白和Smad7蛋白表达呈正相关,P-Smad2蛋白和P-Smad3蛋白表达呈正相关。结论糖皮质激素可通过调控TGF-β1/Smad信号通路而拮抗哮喘气道重塑。     

多肽调控因子AcSDKP对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的:观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾间质纤维化的抑制作用并初探其机制。方法:将18只大鼠随机均分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、治疗组(400μg·kg-1AcSD-KP),皮下注射给药1d(每天2次)后,后2组建立UUO模型,各组给药至造模后第14天处死大鼠,观察各组肾组织病理改变,检测肾组织转化生长因子β(1TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及二者mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组和治疗组大鼠肾小管变性及肾间质纤维化程度严重(P<0.05),TGF-β1及其mRNA表达水平明显增强(P<0.05),VEGF蛋白及其mRNA表达水平明显减弱(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠肾小管变性及肾间质纤维化程度明显改善(P<0.05),TGF-β1及其mRNA表达水平明显减弱(P<0.05),VEGF蛋白及其mRNA表达水平明显增强(P<0.05)。结论:AcSDKP可能通过减弱TGF-β1、增强VEGF的表达以达到抑制肾间质纤维化的作用。     

转化生长因子-β_1对气道上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对气道上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法原代培养新西兰兔气道上皮细胞,采用免疫细胞化学法检测TGF-β1作用下气道上皮细胞CTGF蛋白的表达水平。结果①TGF-β1不同处理时间各组气道上皮细胞CTGF蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P均<0.01);②TGF-β15ng/mL处理组、10ng/mL处理组气道上皮细胞CTGF蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论 TGF-β1可上调气道上皮细胞CTGF蛋白的表达水平,从而引起气道重塑。     

布地奈德早期干预对急性哮喘模型大鼠转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨布地奈德早期干预对急性哮喘模型大鼠转化生长因子-β1(TGFβ-1)/Smad信号传导通路影响。方法30只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组(C组)、哮喘模型组(A组)和布地奈德组(B组)等3组,每小组10只,用卵白蛋白(OVA)制备哮喘大鼠模型,通过早期布地奈德混悬液雾化吸入方式对急性哮喘模型大鼠进行干预,用双抗体夹心ELISA法测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1浓度,免疫组化方法检测肺组织TGF-β1以及磷酸化Smad2/3(P-Smad2/3)、Smad7蛋白表达水平。结果C组的血清、BALF中TGF-β1浓度分别低于A组和B组,B组血清、BALF中TGF-β1浓度较A组下降;A组肺组织P-Smad2/3蛋白表达较C组和B组增高,而Smad7蛋白表达下降。结论布地奈德早期干预可抑制急性哮喘大鼠体内TGFβ-1和P-Smad2/3的过度表达及上调Smad7,从而阻断TGFβ-1的胞内信号转导,可在一定程度上减轻急性哮喘大鼠气道炎症和抑制气道重塑的发生发展。     

大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响

目的 研究大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCs表达的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素治疗组,每组10只.模型组及大蒜素治疗组用两次气管内滴入脂多糖和每日熏香烟法制成大鼠慢性气道炎症模型,大蒜素治疗组在模型制作成功后腹腔注射大蒜素注射液.通过肺组织HE观察气道炎症改变,支气管肺泡灌洗(BALF)细胞记数并分类,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NRF2mRNA及γ-GCSmRNA表达,检测肺组织GSH、ROS、T-AOC含量.结果 大蒜素治疗组气道炎症浸润较模型组明显减轻,大蒜素治疗组BALF中中性粒细胞数目较模型组降低(P＜0.05);模型组的γ-GCSmRNA及NRF2mRNA表达高于大蒜素治疗组(P＜0.01);大蒜素治疗组中GSH含量较模型组减少,ROS含量降低,T-AOC上升(P＜0.01).结论 大蒜素可抑制被动吸烟大鼠肺部炎症.     

慢性饮酒对大鼠肺组织TGF-β1和bFGF mRNA表达的影响

目的:观察慢性饮酒后大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达,探讨慢性饮酒对肺间质的影响。方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠20只随机分为无乙醇液体饲料的对照组和乙醇液体饲料的乙醇组,每组10只。喂养16周后观察所有大鼠肺泡内炎性细胞浸润程度并评分,Masson染色观察肺间质胶原沉积情况,电镜观察肺组织超微结构变化,实时荧光定量PCR检测肺组织TGF-β1和bFGF mRNA的表达量。结果:光镜下肺泡内炎性细胞浸润程度评分乙醇组高于对照组,差异有统计学意义(Z=50,P<0.05)。乙醇组电镜可见线粒体膜和嵴均有不同程度融合、模糊不清,细胞间隔均可见不同程度的胶原纤维沉积。乙醇组肺组织中TGF-β1和bFGF mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(t分别为3.702和3.487,均P<0.01)。结论:慢性饮酒可增加大鼠肺组织中TGF-β1、bFGF mRNA表达量,使肺组织胶原沉积,引起肺泡炎症和肺间质疾病。     

沙苑子总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的探讨沙苑子总黄酮(FAC)对博莱霉素(BLM)所致实验性大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法采用气管内滴注博莱霉素法制作大鼠肺纤维化模型,并随机分为6组。给予沙苑子总黄酮灌胃(ig)治疗28 d后,腹主动脉放血法处死动物,测定血清和总抗氧化能力(T-AOC)及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;ELISA的方法检测实验大鼠肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6的含量;取固定部位肺组织作HE及Masson染色,进行病理组织学观察;电镜观察大鼠肺组织的超微结构变化;Westen blot法检测沙苑子总黄酮TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。结果与模型组相比,沙苑子总黄酮各组大鼠肺组织中HYP含量明显降低(P<0.01或P<0.05),且有剂量依赖趋势;大鼠血清及肺组织中T-AOC增强(P<0.01或P<0.05);肺泡灌洗液中细胞因子IL-1β及IL-6的含量明显降低(P<0.01或P<0.05);组织病理学观察肺泡炎症(P<0.01或P<0.05)及肺组织纤维化(P<0.01或P<0.05)的程度明显减轻;West-ern blot检测结果显示TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β、Smad2、α-SMA含量均明显降低。结论沙苑子总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化病变有一定的治疗作用,其作用机制可能与其抑制炎症细胞因子的活化、抗氧化作用、抑制胶原的形成以及调控TGF-β/Smad信号通路有关。     

止喘胶囊对哮喘大鼠气道重建的TGF-β1及Smads蛋白表达的影响

目的:探讨止喘胶囊对哮喘大鼠气道重建TGF-β1及其胞内信号转导分子Smads蛋白的影响。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、哮喘模型组、止喘胶囊组、地塞米松组和止喘胶囊+地塞米松组,每组8只。通过ip卵清蛋白及右腿im氢氧化铝凝胶致敏,并雾化吸入卯清蛋白,建立哮喘模型,在哮喘激发4 wk后检测肺组织TGF-β1蛋白及mRNA以及Smad-2、Smad-7 mRNA表达。计量资料用ANOVA程序进行分析,并用LSD进行两两比较。结果:哮喘模型组气道上皮TGF-β1以及TGF-β1 mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0．05,P＜0．01)。哮喘模型组Smad-2 mRNA较正常对照组表达明显升高(P＜0．05),止喘胶囊组、止喘胶囊+地塞米松组和地塞米松组TGF-β1,TGF-β1 mRNA,Smad-2 mR- NA表达显著低于哮喘模型组(P＜0．01或P＜0．05),止喘胶囊组可显著上调Smad-7 mRNA表达水平,与哮喘模型组相比有显著的差异(P＜0．05)。结论:止喘胶囊可下调哮喘大鼠生长因子TGF-β1蛋白及mR- NA、Smad-2 mRNA表达,上调Smad-7 mRNA的表达,阻断TGF-β1的信号转导,从而减轻哮喘大鼠气道重建,为止喘胶囊的临床使用提供实验依据。