Effect of tetrandrine on expression of bFGF in lung tissue of rat with chronic hypoxic pulmonary hypertension]

OBJECTIVE: To evaluate effect of tetrandrine (Tet) on chronic hypoxic pulmonary by observing expression of bFGF in lung tissue of rat with chronic hypoxic pulmonary hypertension. METHODS: 30 rats were divided into 3 groups: hypoxia group, hypoxia + Tet group and control group. On the 21st day of hypoxia, the hemodynamic parameters were measured and the intra acinar pulmonary arteries (IAPA) changes were studied under light microscopes. Immunohistochemical staining with monoclonal antibody against human recombinant bFGF was performed in the paraffin section of rat lung. RESULTS: Tetrandrine could reduce pulmonary artery mean pressure (mPAP) and pulmonary vascular resistance (PVR), (P < 0.01), decrease the expression of bFGF in wall of IAPA, and inhibit hypoxic structural remodeling of IAPA. CONCLUSION: Tetrandrine could decrease the expression of bFGF in wall of IAPA and in that connection to inhibit remodeling of IAPA and pulmonary hypertension.     

汉防已甲素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内bFGF表达的影响

目的　观察汉防已甲素 ( tetrandrine,Tet)对慢性低氧大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子( b FGF)表达的影响 ,探讨 Tet降低低氧性肺动脉高压的机制。方法　建立低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,检测血流动力学 ,观察肺腺泡内动脉 ( IAPA)结构的变化 ,用免疫组化法检测肺组织 b FGF表达。结果　 Tet能明显降低肺动脉压 ,抑制肺腺泡内动脉壁 b FGF表达 ,阻抑肺腺泡内动脉重建。结论　 Tet通过抑制 b FGF表达 ,从而阻抑肺腺泡内动脉重建是其降低肺动脉压的机制之一     

低氧肺动脉高压时血红素氧合酶基因表达状况的研究

目的 探讨血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)基因在低氧肺动脉高压大鼠肺动脉组织中的表达及一氧化碳(carbon monoxide,CO)对其的影响.方法 60只Wistar大鼠随机分为5组:常氧组;低氧肺动脉高压组;血晶素组;锡原卟啉组;低浓度CO组(n=12).采用紫外分光光度计、逆转录-聚合酶链反应、免疫组织化学染色和原位杂交进行检测.结果 ①HO-1活性:低氧组、血晶素组、低浓度CO组肺动脉组织HO-1活性以胆红素生成量计算,均升高,其中血晶素组最高,与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01).②逆转录-聚合酶链反应:各组大鼠肺动脉HO-2 mRNA表达没有明显变化,均保持稳定.缺氧组、血晶素组、锡原卟啉组和低浓CO组HO-1 mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加深2～3级,低浓度CO组肺动脉外、中、内膜细胞质均明显加深4级.处理前后HO-2的染色变化不大.结论 低氧肺动脉高压时,肺动脉组织HO-1基因的表达升高,可能在肺动脉高压的发生和发展中起一定作用. mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加深2～3级,低浓度CO组肺动脉外、中、内膜细胞质 明显加深4级.处理前后HO-2的染色变化不大.结论 低氧肺动脉高压时,肺动脉组织HO-1基因的表达升高,可能在肺动脉高压的发生和发展中起一定作用. mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加     

缺氧时肺动脉平滑肌细胞血红素氧合酶/一氧化碳系统的变化及其对Ⅰ型胶原的影响

目的 :研究缺氧时大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)诱导型血红素氧合酶 (HO 1 ) /一氧化碳 (CO)系统的变化及其对胶原合成的影响 ,探讨血红素氧合酶 /一氧化碳 (HO/CO)系统对缺氧性肺血管重建中胶原代谢的作用及其机制。方法 :原代培养的大鼠PASMC ,用分光光度计检测PASMC培养液中CO相对含量的变化 ,Westernblot检测PASMCHO 1和转化生长因子 β3 (TGF β3 )表达的变化 ,用免疫细胞化学法分别观察PASMCHO 1、TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测Ⅰ型前胶原mRNA表达的变化。结果 :缺氧 2 4h诱导PASMC表达TGF β3 、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA ,与对照组比较缺氧使HO 1蛋白表达增加 6 7.4 5 % (P <0 .0 1 )、CO含量增加35 .4 1 % (P <0 .0 5 )。ZnPP(HO 1抑制剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量降低 7.88% (P <0 .0 1 )、HO 1蛋白表达减少 2 3.9% (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达增高 393% (P <0 .0 1 )、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均增加。Hemin(HO 1诱导剂 )使缺氧 2 4h大鼠PASMC的CO含量增加 8.83% (P <0 .0 1 )、HO 1表达增高 1 0 5 % (P <0 .0 5 )、TGF β3 蛋白表达降低 6 8.1 2 % (P <0 .0 1 ) ,Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达均减少。结论 :缺氧刺激下大鼠PASMCHO/CO系统上调 ,内源性CO能够抑制Ⅰ型胶原     

The Inhibitory Effect of Radix Salviae Miltiorrhizae on Hypoxic Structural Remodeling of Intra－acinarPulmonary Arteries

(席思川)(车东媛)(张婉蓉)ＴｈｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＥｆｆｅｃｔｏｆＲａｄｉｘＳａｌｖｉａｅＭｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａｅｏｎＨｙｐｏｘｉｃＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＲｅｍｏｄｅｌｉｎｇｏｆＩｎｔｒａ－ａｃｉｎａｒＰｕｌｍｏｎａｒｙＡｒｔｅｒｉｅｓ￥ＸＩＳｉ－ｃ...     

低氧性肺动脉高压大鼠肺组织相关凋亡基因表达的研究

目的 探讨bcl-1、bax、Fas、FasL凋亡相关基因在低氧肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及其与发病的关系。方法 60只Wistar大鼠随机分为5组：正常对照组；低氧肺动脉高压组；血晶素组；锡原卟啉；低浓度CO组；每组12只。采用组织的原位细胞凋亡、DNA片段检测，免疫组织化学染色，原位杂交等方法进行检测。结果 低浓度CO组和血晶素组肺组织有典型的DNA梯带，bcl-2、bax、Fas、FasL免疫组化显示的表达呈强棕黄色，比低氧组均显著升高，原位杂交可见，低浓度CO组和血晶素组肺内支气管和小血管壁细胞胞浆呈强的紫蓝色，bcl-2基因呈棕黄色，比低氧组降低，原位杂交可见呈紫蓝色，结论 CO可以调节bcl-2、bax、Fas、和FasL凋亡基因的表达，而这些凋亡基因又通过不同途径参与低氧肺动脉高压肺组织的细胞凋亡的调节，并在慢性阻塞性肺疾病的发生与发展中发挥重要作用。     

The inhibitory effects of Radix Astragali on hypoxic pulmonary hypertension of rats

Ｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｏｆｉｎｔｒａａｃｉｎａｒｐｕｌｍｏｎａｒｙａｒｔｅｒｉｅｓ（ＩＡＰＡ）ｉｓａｐａｔｈｏｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｃｈｒｏｎｉｃｐｕｌｍｏｎａｒｙｈｙｐｅｒ...     

一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉血小板源性生长因子表达的影响

目的　探讨一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中血小板源性生长因子 (PDGF)表达的影响。方法　将大鼠随机分为 3组 :常氧组 (n =12 )、低氧组 (n =12 )和低氧 +血红素加氧酶组 (低氧 +HO组 ) (n =12 )。以光学显微镜观测 3组大鼠肺中型动脉及小型动脉的相对中膜厚度 (RMT)。应用PDGF的单克隆抗体经免疫组织化学技术对 3组大鼠肺动脉PDGF进行定位及半定量分析。结果　低氧组大鼠中型肺动脉及小型肺动脉RMT均高于常氧组和低氧 +HO组 (P <0 .0 1)。 3组大鼠各级肺动脉内皮细胞中均有PDGF的表达 ,低氧组高于常氧组和低氧 +HO组 (P <0 .0 1)。中型肺动脉内皮细胞中PDGF的表达与相应中型肺动脉RMT之间呈正相关(r为 0 .82 3 5,P <0 .0 1) ;小型肺动脉内皮细胞中PDGF的表达与相应的小型肺动脉RMT之间呈正相关 (r为0 8642 ,P <0 .0 1)。结论　一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中PDGF表达有抑制作用     

IGF-1R mRNA在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达

目的 :探讨胰岛素样生长因子 -1受体 (IGF 1R)mRNA在低氧大鼠肺小动脉壁的变化。方法 :采用原位杂交方法检测低氧性肺动脉高压大鼠和正常大鼠肺小动脉壁IGF 1RmRNA的表达 ,用图像分析技术检测肺小动脉的形态改变和半定量技术检测IGF 1RmRNA的表达强度。结果 :低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄 ,反映管壁增厚的两个指标MT %和MA %均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。正常对照组大鼠肺小动脉壁IGF 1RmRNA有微弱表达 ,低氧组肺小动脉壁IGF 1RmRNA表达呈强阳性 ,低氧组表达强度显著大于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。结论 :低氧情况下 ,肺小动脉壁IGF 1RmRNA表达水平与低氧性肺血管重建密切相关     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺动脉高压的治疗作用

目的：通过手术建立大鼠肺动脉高压模型,探讨采用骨髓间充质干细胞（MSCs）对肺动脉高压的治疗作用,阐明其可能机制。方法：分离、培养并鉴定MSCs。48只大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量MSCs（MSCL）和高剂量MSCs（MSCL）组,除对照组外,其余各组大鼠通过腹主动脉-下腔静脉分流术制备大鼠肺动脉高压模型,8周后MSCL和MSCH组大鼠注入相应剂量（3×10⁵和6×10⁵个）MSCs,模型组大鼠注入等量生理盐水。6周后,测定大鼠右心室收缩压（RVSP）、平均右室压（MRVP）、平均肺动脉压（MPAP）和右心室系数（VDI）;采用试剂盒检测大鼠血清和肺组织中一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;Q-PCR法测定大鼠肺组织中NADPH mRNA表达水平;HE染色法观察大鼠肺组织形态表现。结果：成功分离鉴定原代MSCs,MSCs分离纯度>85%。治疗结束后,与对照组比较,模型组大鼠RVSP、MRVP、MPAP和VDI明显升高（P<0.05）;与模型组比较,MSCL和MSCH组大鼠MRVP和MPAP明显下降（P<0.05）,MSCH组大鼠RVSP和VDI明显下降（P<0.05）。与对照组比较,模型组大鼠血清及肺组织中NO和TNF-α水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,MSCL和MSCH组大鼠肺组织中的NO和TNF-α水平明显降低（P<0.01）,MSCH组大鼠血清中NO和TNF-α水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,模型组大鼠NADPH mRNA表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,MSCH组大鼠NADPH mRNA表达水平明显降低（P<0.01）。MSCL和MSCH组大鼠的肺组织结构损伤明显减轻,同时肺壁未见明显增厚。结论：MSCs具有治疗肺内高压的作用,并且可以抑制NO和TNF-α的产生,其作用机制与抑制NADPH基因表达有关。     

缺氧性肺动脉高压大鼠泡内肺动脉与右心室胶原表达及黄芪的干 …

目的 观察缺氧性肺动脉高压大鼠胞内肺动脉与右心室胶原表达及黄芪的干预作用,初步探讨其作用机制。方法 将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组：（１）缺氧组：在常压缺氧舱内缺氧,每日１２小时,连续３周;（２）黄芪组：缺氧条件同缺氧组;自缺氧第一天起给大鼠每天腹腔注０．２ｍｌ黄芪注射液;（３）正常组对照组：室内空气正常饲养,用心导管和Ｆｉｃｋ’ｓ法测定肺动脉压和右心排血量,苦味酸天狼猩红染色切片观察泡内肺动     

大蒜素对大鼠缺氧性肺动脉高压功能形态的影响

观察大蒜素对缺氧性腺泡内肺动脉高压是否具有阻抑效应,在常压缺氧条件下,选用42只大鼠,分正常组、缺氧组、缺氧加大蒜素组,分别在15 d和30 d测右心室收缩压,并利用光镜、电镜观察肺血管病变.结果大蒜素不仅能降低肺动脉压,减轻缺氧对内皮细胞的损伤,还能阻抑腺泡内肺动脉肌化增强现象.提示大蒜素有明显阻抑缺氧性腺泡内肺动脉构型重组和预防缺氧性肺动脉压升高的作用,从而为该药防治肺动脉高压提供了有力的实验依据.     

伊洛前列素对低氧性肺动脉高压大鼠肺部内皮素-1表达的影响

目的 探讨伊洛前列素对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺部内皮素-1(ET-1)的影响.方法 雄性SD大鼠32只,分为正常(NC)组,正常治疗(NT)组,低氧(HC))组,低氧治疗(HT)组,每组8只.NC组和NT组在常氧条件下饲养3周;HC和HT组放置于低氧舱(O2浓度10％)进行缺氧处理3周(8 h/d);NT和HT组每天进行伊洛前列素雾化吸入治疗(2μg/kg).第3周结束时,测量各组平均肺动脉压(mPAP),右心室收缩期末压力(RVSP),右心室肥厚指数.HE染色观察各组肺动脉形态学变化,计算肺小动脉的血管壁厚百分比(WT％),RT-PCR分析各组肺组织匀浆中ET-1的变化趋势.结果 HC组大鼠血流动力学指标较其他组明显升高,HT组相关指标表达与NC组比较差异无统计学意义(P＞0.05).HC组较其他组肺动脉管壁增厚、管腔狭窄明显;HT组则有不同程度逆转.HC组大鼠肺组织匀浆中ET-1表达较NC组明显升高,HT组中ET-1表达与NC组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 伊洛前列素对HPH有明显的治疗作用,可以降低HPH大鼠肺部ET-1的释放,阻止肺血管重塑.     

DDPH对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的阻抑和逆转效应

实验观察1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基乙胺基)丙烷盐酸盐(简称DDPH)对低氧大鼠肺动脉高压(HPHT)和腺泡内肺动脉(IAPA)构形重组的影响.结果表明,在缺氧后期和常氧恢复期使用DDPH的大鼠右心室收缩压(RVSP)分别比未用药组降低18.98%和17.85%;右心室肥大指数(RVHI)分别减小18.18%和12.50%;腺泡内环肌型动脉数量减少、中膜厚度变薄;无肌型动脉数量增多、管径明显扩大(P<0.05).肺动脉收缩压的改变与腺泡内血管构形的改变密切相关(R~2=0.9865,P<0.01).提示DDPH对HPHT的形成和IAPA构形重组具有阻抑和逆转效应.     

低氧性肺动脉高压大鼠肺内 fractalkine 的变化

目的探讨趋化因子fractalkine在低氧性肺动脉高压发病机制中的作用。方法将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和低氧组,每组10只,低氧组以常压低氧建立肺动脉高压模型。以右心导管法检测平均肺动脉压(mPAP),图像分析法测量肺小动脉壁厚度,计算出管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%),逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察大鼠肺组织fractalkine mRNA的表达和酶联免疫法观察肺组织匀浆fractalkine的变化。结果对照组大鼠mPAP为(16.3±2.1)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),低氧组为(28.7±3.8)mmHg,两组比较差异具有统计学意义(P<0.01);对照组大鼠WT%为(10.20±1.56)%、WA%为(38.11±2.30)%,低氧组大鼠WA%和WT%分别为(21.28±4.60)%和(67.08±9.44)%,两组比较差异均具有统计学意义(P均<0.01);低氧组大鼠肺组织fractalkine mRNA的含量较对照组增加〔(0.49±0.05)vs(0.29±0.02),P<0.01〕,肺组织匀浆fractalkine浓度亦高于对照组〔(7622.6±938.4)pg/mL vs(4168.5±403.5)pg/mL,P<0.01〕。相关分析表明,fractalkine mRNA和蛋白与WA%和WT%均呈正相关(P<0.05)。结论慢性低氧大鼠肺组织fractalkine的合成和释放增多,fractalkine增加可能与低氧性肺动脉高压的发生有关。     

氧化应激在大鼠慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压形成中的作用

目的:观察低氧高二氧化碳对肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量的影响,探讨氧化应激于低氧高二氧化碳肺动脉高压形成发展中的作用.方法:复制低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠模型.测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室/(左心室 室间隔)[RV/(LV S)]比.比色法测定肺组织SOD、CAT活力及MDA含量.电镜观察肺血管组织细胞超微结构.结果:与对照组相比,各低氧高二氧化碳组mPAP、RV/(LV S)比明显升高(均P＜0.01),肺组织SOD、CAT活力均显著降低,而MDA含量明显升高(分别P＜0.05,P＜0.01).电镜下,低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺中小肌型动脉内皮细胞及平滑肌细胞增殖、肥厚、肿胀,胶原纤维亦增生插入平滑肌细胞.结论:低氧高二氧化碳时大鼠肺组织氧化应激参与肺动脉高压的形成与发展.     

Alleviation of hypoxic pulmonary vascular structural remodeling by L-arginine

目的探讨L-精氨酸(L-Arg)对低氧性肺血管结构重建的干预作用及其可能机制.方法将18只Wistar大鼠配伍后随机分为对照组、低氧组和低氧+L-Arg组(共6个配伍组).以右心导管法测定肺动脉压力,并对大鼠肺组织标本进行显微结构观测和超微结构观察,同时以分光光度法测定血浆一氧化氮(NO)含量,并对肺组织以内皮素-1(ET-1) cRNA探针进行原位杂交,研究肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA的表达.结果低氧组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组(20.33±2.18?mm?Hg vs 15.38±1.05?mm?Hg, P<0.05).低氧后大鼠肺血管显微及超微结构发生明显改变,肺血管结构重建形成.同时低氧组大鼠血浆NO间接含量明显低于对照组 (P<0.05 ).低氧后肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达明显增强.然而,低氧+L-Arg组大鼠PAMP较低氧组明显降低(16.73±1.35?mm?Hg vs 20.33±2.18?mm?Hg, P<0.05).L-Arg缓解了低氧性肺血管结构重建的形成.同时低氧+L-Arg组大鼠血浆NO间接含量明显高于低氧组(P<0.05).L-Arg使低氧大鼠肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达明显受抑制.结论 L-Arg对低氧性肺血管结构重建以及低氧性肺动脉高压的形成有重要的调节作用,其机制可能与通过促进低氧大鼠体内NO生成,从而抑制肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达有一定的关系.