Effects of Extracellular ATP on Survival of Sensory Neurons in the Dorsal Root Ganglia of Rats

After the peripheral nerve injury,degenerationor even necrocytosis will happen in some inflictedneurons and then the axons sprout from the survivalneurons and the nerve regenerate.Hence,the pro-tection of neurons plays a crucial role in the repair ofperipheral nerve injury.It has been proved that ex-tracellular ATP has protective effect on the neuronsof CNS. But whether it has the same effect on thesensory neurons of the dorsal root ganglia is still un-known.In this study,we employed the ce…     

NGF和bFGF联合治疗大鼠坐骨神经损伤的实验研究

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor，NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFCF)联合应用对大鼠坐骨神经损伤的治疗作用，为周围神经损伤的临床治疗提供实验依据。方法96只Wistar大鼠随机分为生理盐水组、NGF组、bFGF组和NGF bFGF组，将大鼠坐骨神经手术造成5mm缺损后用2．Omm内径、1．Ocm长的硅胶管桥接，术中硅胶管中局部滴加药物、术后大鼠小腿肌内注射药物1日1次(10ng/100g）体重)，术后3、6、9、12周行大体观察、坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index，SFI)、运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity，MCV)，神经肌肉动作电位幅值(muscle evoked action potential，MAP)和再生轴突计数检查。结果各组大鼠硅胶管中3周时已有不同程度的神经组织再生。计量分析表明，NGF组、bFGF组SFI、MCV、MAP、再生轴突数优于NS组，NGF bFGF组SFI、MCV、MAP和再生轴突计数结果显高于其余各组，差异有显性。结论NGF。和bFGF联合应用对大鼠坐骨神经损伤的促修复作用优于单独使用NGF或bFGF。     

Favorable Effect of Local VEGF Gene Injection on Axonal Regeneration in the Rat Sciatic Nerve

This study is to investigate the effect of local phVEGF165 injection on sciatic nerve re- generation in the rats and to search for a new way in the further treatment of peripheral nerve injuries. Forty-five adult male Wistar rats received a neurotomy to bilateral sciatic nerves, which were subse- quently reconnected with 10/0 epineurial nylon sutures. The injured segments was locally injected with normal saline (group A), or 25 μg of phVEGF165 (group B) or 50 μg phVEGF165 (group C). Nerve conduction and regeneration were evaluated in terms of the histological changes, weight of gastrocnemius muscles, electrophysiology and morphometric results. Our study demonstrated that rats of group C showed the best results in terms of nerve regeneration, followed by group B and group A. Our findings suggested that local injection of phVEGF165 can facilitate nerve regeneration and promote functional recovery in a dose-dependent manner.     

嗅鞘细胞移植促进大鼠坐骨神经的再生

目的:研究嗅鞘细胞(OECs)移植对大鼠坐骨神经再生的作用.方法:30只SD大鼠随机分为OECs组和对照组,每组15只; 切除3 mm右侧坐骨神经并用预先充填可吸收明胶的硅胶管套接修复,OECs组和对照组硅胶管内分别给予体外培养纯化的OECs和生理盐水; 术后4、8和12周分别行电生理和组织学检查.结果:术后4、8和12周,OECs组和对照组修复神经均有不同程度再生,OECs组运动神经传导速度、神经肌肉动作电位幅度、有髓神经纤维数目和直径均明显高于对照组(P<0.05).结论:外源性OECs移植能明显促进大鼠坐骨神经再生.     

Protective Effect of Interleukin-lβ on Motor Neurons after Sciatic Nerve Injury in Rats

Summary Protective effect of interleukin-1β (IL-1β) on motor neurons was studied after peripheral nerve injury. Twenty Wistar rats were divided into 2 groups randomly. The right sciatic nerve of each rat was resected. After silicon tubulization of sciatic nerve in rat, 15 μl 1 ng/ml IL-1β and PBS solution were injected into the silicon capsule respectively. Enzyme histochemistry was performed to show acctyle cholesterase (AchE) and nitric oxide staining (NOS) activity of spinal α motor neurons in spinal segments 2 weeks later. Neurons were counted and the diameter and cross sectional (c/s) area of neurons were analyzed by using computer image analysis system. The results showed that as compared with the normal side, both enzyme activities significantly changed in motor neurons in PBS group. The diameter and c/s area of both neurons changed significantly too (P<0.01). These results suggest that exogenous IL-1β protects α-motor neurons from degeneration and necrosis after peripheral nerve injury. WENG Yuxiong, male, born in 1971, Doctor in Charge     

枸杞多糖对大鼠坐骨神经损伤修复后影响的实验研究

目的：评价应用枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对大鼠坐骨神经损伤修复后再生的影响。方法:取SD大鼠40只，随机分为4组，切断右侧坐骨神经后原位吻合，造成损伤模型。术后实验组给以枸杞多糖腹腔注射。对照组给等量生理盐水。各组分别于术后第4、8周行运动神经传导速度、形态学及图像分析等测定各项指标。结果:LBP实验组在术后4周、8周时吻合口远段再生神经纤维轴突的数目、有髓神经纤维直径均不如对照组。术后8周时。运动神经传导速度恢复率低于对照组。结论:枸杞多糖有抑制大鼠坐骨神经断伤吻合后神经再生的作用。     

管壁不同厚度的聚乳酸管对周围神经再生影响的实验研究

目的 探讨可吸收性聚乳酸管管壁厚度对周围神经再生的影响。方法 选用wister大鼠45只，分为三组，分别以0.1,0.3,0.5mm三种不同管壁厚度的聚乳酸管桥接单侧坐骨神经10mm缺损，同时管内植入相同浓度的雪旺细胞和白芨胶混合液，旨在提高神经再生率，术后8周，12周进行显微解剖学，组织学等检查。结果 管壁为0.3mm的聚乳酸管内有较多的再生神经纤维。三个月内管壁变薄，但无软化变形。结论 壁厚0.3mm的聚乳酸管为缺损的周围神经再生最佳管道。     

联合应用NGF和GM1对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响

目的：探讨联合应用神经生长因子（NGF）和神经节苷脂（GM1）对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响。方法：选用SD大鼠96只，分为对照组、NGF组、CM1组和NGF＋GM1组，将大鼠坐骨神经造成5mm的缺损，术中将远近神经断端纳入硅胶管内局部滴加药物、术后于大鼠损伤侧小腿肌注药物．．术后行坐骨神经功能指数（SFI）评定及传导速度（NCV）检测；电镜下观察再生坐骨神经纤维数量和髓鞘厚度的变化。结果：术后4、6周时。NGF组和CM1组SFI、NCV及再生坐骨神经纤维数量及髓鞘厚度均明显高于对照组俨均〈0．01）；NCF＋CM1组各指标均高于对照组、NGF组和CMl组（P均〈0．01）；而在术后8周时，NCF＋CM1组、NGF组、CMl组各指标均高于对照组（P〈0．01），但各实验组之间差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论：①CM1能够介导NGF促进坐骨神经损伤后再生及功能恢复，表现出良好的生物学效应，并且效果优于单用NGF，GM1；②与单用NGF或CM1相比，NCF＋CM1能更早期的在坐骨神经损伤后发挥再生及功能恢复的作用。     

IGF-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响.方法 建立大鼠坐骨神经切割伤模型,通过硅胶管进行桥接,实验组于再生室内注入胰岛素样生长因子-1,对照组注入等量生理盐水,于术后3、5、7、9、11 d取材,用SABC免疫组化法检测轴突再生情况以及雪旺细胞数目、形态和排列方式的变化.结果 ①雪旺细胞:在对照组,术后3 d,断端间隙内仅可见少量雪旺细胞,术后7 d,雪旺细胞数量明显增多,术后11 d,整个间隙内的雪旺细胞排列呈有序的条索状.在实验组,术后3 d,雪旺细胞即明显增多,以后各相同时相点雪旺细胞数目均明显高于对照组.②再生轴突:在对照组,术后5 d,轴突开始长出,术后7 d轴突快速增长,至第11天,再生的轴突已长过5 mm的间隙到达神经远端.在实验组,术后3 d轴突即开始长出,9 d就快到达远端.结论 胰岛素样生长因子-1能促进轴突延伸和雪旺细胞增殖,明显促进坐骨神经再生.     

自体骨髓间充质干细胞促进大鼠坐骨神经缺损修复的实验研究

目的　观察自体骨髓间充质干细胞在神经再生室中的作用 ,探讨其作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法　成年Wistar大鼠 2 4只 ,随机分成 3组 ,每组 8只 ,硅胶导管桥接右侧 13mm的坐骨神经缺损 ,A组在神经再生室内植入骨髓间充质干细胞 ECM (extracellularmatrix ,ECM )凝胶 ;B组植入ECM凝胶 ;C组注入生理盐水。术后 12周 ,进行大体观察及坐骨神经功能指数测定、电生理检测、神经组织学等观察。结果　A、B两组均有再生神经生成 ,但A组各项检测指标均优于B组 (P <0 0 5或 0 0 1)。结论　自体骨髓间充质干细胞能够促进周围神经再生 ,可以作为种子细胞应用于外周神经组织工程。     

免疫抑制对大鼠周围神经损伤再生的影响

目的:探讨免疫抑制治疗对周围神经损伤再生的影响.方法:49只SD大鼠随机分为7组,每组7只,分别为空白对照组、坐骨神经钳夹、横断、缺损损伤动物模型免疫抑制治疗组以及各自生理盐水对照组.各损伤免疫抑制治疗组大鼠术后腹腔内注射免疫抑制剂环磷酰胺,生理盐水对照组大鼠腹腔内注射生理盐水.术后采用足迹分析、电生理以及组织形态学观察评价神经再生和功能恢复的情况;采用免疫组化方法检测损伤局部自身免疫反应状况.结果:神经损伤后免疫抑制治疗组神经功能指数优于生理盐水对照组,电生理(神经传导速度)和组织形态观察显示免疫抑制治疗组神经功能恢复优于生理盐水对照组.免疫组化结果表明免疫抑制治疗使神经损伤局部免疫球蛋白沉积明显少于生理盐水对照组.结论:免疫抑制治疗可减轻周围神经损伤后发生的自身免疫反应,从而改善了周围神经损伤后再生的微环境,促进了神经的再生.     

吡咯喹啉醌对离断周围神经的促再生作用

目的:观察吡咯喹啉醌(PQQ)对离断周围神经再生效果的影响。方法:40只SD大鼠随机分配入PQQ组与对照组。所有动物均实施手术造模,离断左侧坐骨神经后予以10-0缝线神经外膜间断缝合。PQQ组术后隔日术侧肌肉注射PQQ 0.5 ml(250μg/kg),对照组仅给以等量生理盐水。术后定期行坐骨神经功能评估,神经电生理指标测定。于12周时,取材行再生神经形态学观察。结果:PQQ组在坐骨神经功能、神经电生理及形态学指标上均优于对照组(P<0.05)。结论:吡咯喹啉醌可显著促进离断周围神经的再生。     

胆囊收缩素促大鼠坐骨神经再生的电生理检测及意义

目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)促大鼠坐骨神经损伤修复的效果。方法:24只健康SD大鼠随机分成实验组(CCK-8治疗组)和对照组(生理盐水治疗组)两组,每组12只,采用右侧坐骨神经离断后缝合外膜的损伤模型。CCK-8组大鼠腹腔注射CCK-8(8nmol/kg),每天一次,连续7d,对照组则用生理盐水代替CCK-8,在术后第12周检测大鼠坐骨神经干动作电位传导速度及肌电图。结果:实验组行为方面比对照组恢复早。术后第12周,两组大鼠坐骨神经干动作电位传导速度、肌电图潜伏期及波幅差异均有统计学意义(t分别为11.60、-8.83、4.51,P均<0.001),实验组的神经干动作电位传导速度快,肌电图潜伏期短、波幅值大,实验组恢复情况优于对照组。结论:CCK-8能有效地促进周围神经再生。     

HRP逆行示踪对人工组织神经移植物辅加NRF修复大鼠坐骨神经缺损的评价

目的：用HRP逆行示踪法评价人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的效果。方法：壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维组成人工组织神经移植物并辅加神经再生素，修复大鼠的坐骨神经缺损（10mm)。术后24周时，进行大鼠HRP逆行示踪试验。结果：脊髓及背根神经节中均出现数量不等的被HRP标记的神经元胞体。结论：人工组织神经移植物辅加神经再生素对缺损的神经修复具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。     

bFGF对晚期周期神经再生作用的电生理评价

评价外源性bFGF对晚期周围神经再生生理功能恢复的影响。方法：50只SD大鼠随机分治疗组、对照组各25只,切断右侧坐骨神经,12周后予以修复,术后每日分别给予bFGF和生理盐水、行小腿三头肌残存率,神经电生理和靶肌肉组织学检查,结果：计量分析治疗组小腿三头肌残存率,运动神经传导速率、肌肉动作电位幅值明显优于对照组,结果瑶明,bFGF能促进晚期周围神经生理功能的恢复。     

坐骨神经损伤与再生过程中背根节神经元基因表达模式分析

目的：探讨坐骨神经损伤与再生过程中,背根节神经元轴突再生的分子调控模式和机理。方法：采用表达谱芯片分析坐骨神经离断后,14-6背根节神经元基因表达的变化,并分析差异基因所反映的核心生物学过程的变化。结果：（1）坐骨神经离断后,近端坐骨神经差异基因的数量表现为先上升再下降的趋势,但背根节神经元呈现为波浪形的增加。（2）核心生物学过程的差异基因数量变化：刺激检测、G-蛋白偶联受体信号通路、细胞表面受体连接信号转导均呈波浪形变化。防御反应、炎症反应、免疫反应、轴突生成表现为持续性增加。（3）与轴突生成相关的差异基因表达变化结果显示：Lhx4、Nkx2-9、Efnb3、Titfl、Apoa4表现为波浪形增加。Mapk8ip3、Zfp312、Gap43在长时间点表达增加。Tnn、Efnbl-开始降低,Notchl、Nefl、Bmprlb等基因表现为长时间点表达降低。结论：坐骨神经离断后,背根节神经元差异基因和核心生物学过程的变化趋势,反映了周围神经损伤与再生过程中轴突再生的分子调控模式。     

电损伤后局部应用bFGF促进周围神经再生

目的：通过ｂＦＧＦ局部应用,观察其对神经电损伤后再生的促进作用。方法：随机分为实验组和对照组,每组根据观察时间的长短再分为２ｗｋ组、１ｍｏ组和３ｍｏ组,用６０Ｈｚ１２５Ｖ交流电在梨状肌下缘以远损伤３ｃｍ神经,持续时间３ｓ。伤后第２日起实验组每日注射ｂＦＧＦ５００ＡＵ。对照组注射生理盐水。结果：实验组神经的传导速度、肌张力均较对照组有明显的增加。超微结构改变在各时间点上亦较对照组轻微,再生纤维结构较     

冷冻保存神经后自体和异体移植的实验研究

目的：探讨冷冻保存神经自体和异体移植对神经再生的影响。方法：４０只ＳＤ大鼠用反复冷冻、复温的神经和未经任何处理的坐骨神经移植体,进行自体和异体移植。Ａ组为冷冻神经移植于自体原位中;Ｂ组为冷冻神经移植于异体中;Ｃ组为未冷冻神经移植于异体中;Ｄ组为未冷冻神经移植于自体原位中。术后６,１２周光镜、电镜下行组织学观察,检测各项电生理指标。结果：Ａ 组可见到较多的再生轴突通过移植体;Ｂ组可以看到炎性细胞侵润,但仍可见再生轴突通过移植体;Ｃ组可见到大量炎性细胞侵润,有极少量再生轴突通过移植体;Ｄ组可见到大量再生轴突通过移植体。电生理指标和伸趾长肌恢复率Ａ,Ｄ两组明显好于Ｂ,Ｃ两组。结论：神经冷冻处理可以降低抗原性,本实验为同种异体神经移植提供理论依据。     

外源性表皮生长因子对大鼠坐骨神经损伤后感觉神经元超微结构变化的影响

目的应用外源性表皮生长因子(EGF)观察神经损伤后对背根神经节感觉神经元超微结构改变的影响。方法雄性SD大鼠18只,体重180～220g,随机分成对照组和EGF组,选用大鼠坐骨神经切断近端双重结扎的动物实验模型。对照组于神经结扎近端注入生理盐水5μl,EGF组注入hEGF5μl(10μgEGF溶于5μl生理盐水中)分别于手术后7、14、28d用4%多聚甲醛灌注后取腰5背根神经节观察感觉神经元超微结构的改变。结果腰5背根神经节超微结构均发生改变,随着时间的推移,对照组内感觉神经元细胞核逐渐缩小,核质淡,稀疏,线粒体肿胀,嵴消失,基质丢失,卫星细胞从与神经元紧密相连到与之分离。EGF组神经元仅出现线粒体轻度的变性改变,其余结构基本正常。结论EGF对神经损伤后感觉神经元有一定的保护作用     

血管化同种异体神经复合体桥接修复兔坐骨神经缺损的实验研究

目的 探讨将经化学去细胞处理的同种异体神经复合体预血管化处理后移植修复兔长段坐骨神经缺损的可行性,以及早期血管化移植体对神经功能恢复的影响.方法 将雪旺细胞与血管内皮细胞联合培养后种植于经化学去细胞处理的同种异体神经段中,形成预血管化的神经复合体并将其用于修复兔坐骨神经缺损（实验组）,对照组移植体中单纯种植雪旺细胞无血管内皮细胞.术后4、8、16周对2组动物行肌电图检查,观察神经功能恢复情况,然后,手术取材,应用光镜、电镜观察坐骨神经再生和髓鞘形成情况,应用图像分析系统对髓鞘厚度以及有髓神经纤维轴突的直径、数目进行量化分析.结果 大体观察,术后4、8、16周2组动物全身及局部均未出现明显的排斥反应.无论是在足部溃疡恢复,还是在神经传导速度、再生神经纤维的数量、超微结构的恢复方面实验组均优于对照组.结论 应用预血管化的组织工程人工神经移植体修复兔坐骨神经缺损,能有效地促进受损神经的功能恢复.