Faecalibacterium prausnitzii治疗大鼠TNBS结肠炎的机制研究

背景:NLRP3炎症小体在炎症性肠病中的作用受到广泛关注。Faecalibacterium prausnitzii(Fp)是一种具有抗炎作用的共生菌,研究显示其对大鼠结肠炎具有防治作用。目的:探讨Fp治疗大鼠实验性结肠炎的可能机制。方法:50只大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=40),模型组以5%TNBS和无水乙醇灌肠诱导结肠炎,造模24 h后随机分为PBS组、介质组、Fp活菌组和Fp上清组,每天予相应成分1 mL灌胃,连续7 d。第8天处死动物,评估结肠炎症程度,以蛋白质印迹法和real-time PCR检测NLRP3炎症小体组分NLRP3、ASC、caspase-1表达;分别以real-time PCR和ELISA法检测结肠和血浆NLRP3炎症小体下游效应分子IL-1β、IL-18水平。结果:模型组大鼠存在不同程度的体质量减轻、结肠缩短和结肠炎症损伤,Fp活菌组和Fp上清组上述表现较PBS组和介质组明显减轻。PBS组和介质组结肠组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白和mRNA表达显著高于对照组(P0.05),结肠和血浆IL-1β水平增高(P0.05),IL-18水平降低(P0.05)。Fp活菌组和Fp上清组IL-18水平较PBS组和介质组进一步降低(P0.05),其余参数增高趋势均明显改善(P0.05)。结论:NLRP3炎症小体参与介导TNBS大鼠结肠炎发生,而Fp可通过抑制NLRP3炎症小体及其下游效应分子而减轻结肠炎症。     

Faecalibacterium prausnitzii对LFA-1基因敲除的结肠炎小鼠中Treg细胞和细胞因子的影响

背景:Faecalibacterium prausnitzii(Fp)可促进Treg细胞的分化,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)亦参与Treg细胞的分化调节。目的:探讨Fp对LFA-1基因敲除(LFA-1~(-/-))的结肠炎小鼠中Treg细胞和细胞因子的影响。方法:将同样遗传背景下野生型小鼠和LFA-1~(-/-)小鼠随机分为野生型对照组、野生型治疗组、LFA-1~(-/-)对照组、LFA-1~(-/-)治疗组。小鼠饮用DSS溶液诱导结肠炎模型,治疗组小鼠予Fp灌胃。观察各组小鼠一般状况和组织病理学评分,以流式细胞术检测脾脏和肠系膜淋巴结中Treg细胞比例,ELISA法检测外周血清IL-10、TGF-β1含量,实时PCR法检测结肠组织IL-10、TGF-β1 mRNA表达。结果:与相应对照组相比,野生型治疗组结肠组织学评分显著下降(P0.05);野生型治疗组和LFA-1~(-/-)治疗组脾脏和肠系膜淋巴结中Treg细胞比例显著升高(P0.05),血清IL-10、TGF-β1含量显著升高(P0.01),TGF-β1 mRNA表达显著升高(P0.05);LFA-1~(-/-)治疗组IL-10 mRNA表达显著降低(P0.01)。与野生型治疗组相比,LFA-1~(-/-)治疗组血清TGF-β1含量显著降低(P0.05),IL-10、TGF-β1 mRNA表达显著降低(P0.05)。结论:Fp在LFA-1~(-/-)小鼠中可上调Treg细胞比例,促进Treg细胞分泌抗炎因子IL-10、TGF-β1。Fp治疗野生型结肠炎小鼠的疗效优于LFA-1~(-/-)小鼠,可能与LFA-1缺失对Treg细胞功能的发挥和细胞因子分泌受限有关。     

DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎模型的动态评估

目的:通过葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,D S S)诱导建立小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)急、慢性模型,并动态监测小鼠结肠损伤、病理变化及血浆、结肠黏膜中白介素(interleukin,IL)-1β、I L-18、I L-33等细胞因子的变化,以评估该模型.方法:64只C57BL/6小鼠随机分为正常组和模型组.模型组采用3%DSS(分子量36000-50000)饮水1 wk造成结肠损伤,再恢复正常饮水3 wk,分别于第1、2、3、4周4个时间点对小鼠进行动态观察:小鼠粪便性状改变;结肠长度及结肠质量变化;结肠病理变化;结肠黏膜炎症评分;血浆与结肠黏膜中IL-1β、IL-18、IL-33变化.结果:造模1 wk后,小鼠出现腹泻、血便、懒动、蜷缩成堆,病理观察见结肠上皮糜烂、出血、多病灶浅溃疡,大量炎性细胞浸润黏膜及黏膜下层;与正常组相比,模型组结肠质量增加(P<0.05),结肠长度缩短(P<0.01),结肠黏膜炎症评分明显增高(P<0.01);血浆和结肠黏膜中炎症因子I L-1β、IL-18、IL-33的含量显著升高(P<0.05、P<0.01);造模2 wk后,模型小鼠血便逐渐减少,结肠黏膜下可见大量炎细胞浸润,结肠质量增高(P<0.01),结肠长度减少(P<0.01),结肠黏膜炎症评分增高(P<0.01),血浆中IL-1β、I L-18的浓度与结肠黏膜中I L-18的浓度仍明显高于正常组(P<0.05);造模后3、4wk,小鼠活动及粪便性状恢复正常,结肠黏膜仍可见炎细胞浸润,肌纤维排列紊乱,结肠质量增加(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.01),黏膜炎症评分、血浆与结肠黏膜中IL-1β、IL-18、IL-33含量与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:上述指标的动态监测结果在一定程度上体现了DSS诱导的小鼠UC模型从急性到慢性的病理变化过程,可以为临床及相关药物作用研究提供病理模型.     

姜黄素对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效

目的:观察姜黄素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效,并探讨其作用机制.方法:选♀BALB/c小鼠60只,随机分为4组,每组15只.A组:正常对照组:B组:DSS结肠炎组,小鼠每日自由摄取5%DSS溶液:C组:姜黄素治疗组,小鼠自由摄取5%DSS溶液,每日腹腔注射姜黄素悬液30 mg/kg;D组:地塞米...     

不同浓度DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎模型的比较

目的对比研究不同浓度葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,从不同角度监测炎症反应程度,为实验造模提供理论数值,并选择最佳的造模方案。方法用BALB/C小鼠自由饮用DSS溶液的方法建立低浓度(3%)和高浓度(5%)模型组,正常对照组饮用蒸馏水,每组24只。分别于第0天、3天、7天对小鼠进行动态观察:疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠组织病理学改变、血清中HGB、CRP、TNF-α的表达、结肠黏膜中MOP、SOD、NF-κB的表达及NF-κB核转位情况、绘制小鼠生存曲线。结果 HGB、SOD与UC疾病活动程度呈负相关,CRP、TNF-α、MOP、NF-κB与UC疾病活动程度呈正相关,均表现出明显的时间和剂量依赖性。结论随着造模浓度和时间的增加,小鼠模型UC的炎症程度也逐渐加重,但死亡率也随之增加,得出3%DSS溶液喂养7 d建立的UC小鼠模型为最佳。     

Faecalibacterium prausnitzii对实验性结肠炎中TLR4/NF-κB信号通路的影响

背景:Faecalibacterium prausnitzii(Fp)是一种肠道共生菌,其数量减少是炎症性肠病(IBD)患者肠道菌群紊乱的重要特征之一。既往研究显示Fp上清液在实验性结肠炎中具有明显的抗炎效应。目的:探讨Fp上清液在实验性结肠炎中的抗炎效应是否与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关。方法:24只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、结肠炎模型组和Fp上清治疗组。通过予小鼠连续5 d饮用3.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立急性结肠炎模型,观察小鼠体质量和结肠组织病理学变化,分别以real-time PCR和免疫组化法检测结肠组织TLR4 mRNA和磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)表达,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)水平。结果:与正常对照组相比,结肠炎模型组小鼠体质量明显下降,结肠缩短,结肠组织病理学评分、TLR4 mRNA和p-NF-κB p65表达以及血清TNF-α、IL-6、COX-2水平均显著升高(P0.05)。Fp上清治疗组上述指标均较结肠炎模型组显著改善(P0.05),其中血清炎症因子水平与正常对照组相比无明显差异(P0.05)。结论:Fp上清液通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活及其下游炎症因子表达,在实验性结肠炎中发挥抗炎效应。     

健脾清肠方对DSS诱导结肠炎小鼠肠道动力学影响的研究

[目的]探讨健脾清肠方(JQD)对DSS诱导结肠炎小鼠肠道动力的作用机制。[方法]C57BL/6小鼠随机分为Control组、DSS组、JQD组、5-ASA组。除Control组外,余各组小鼠用5%DSS自由饮用诱导结肠炎模型,造模7d后灌胃给药。第15天处死小鼠收集结肠组织,检测结肠组织病理学,ICC的超微结构,结肠组织IL-1β、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量,c-kit mRNA、LC3-II mRNA、Beclin-l mRNA、NF-κB p65表达和结肠平滑肌张力。[结果]与DSS组比较,JQD组结肠黏膜表面上皮细胞移行修复,少量炎症细胞浸润,黏膜腺体基本恢复正常;ICC与其他细胞间连接完好,内部细胞器结构相对完整,可见到少量自噬泡存在;结肠组织IL-1β、TNF-α含量降低,IL-10、IFN-γ含量上升;c-kit mRNA表达上调,LC-3II mRNA、Beclin-1mRNA、NF-κB p65表达下降;结肠平滑肌条收缩振幅上升、收缩频率减少。[结论]JQD调节DSS模型小鼠异常肠道动力,其机制可能是通过抑制NF-κB/TNF-α通路及调节细胞因子IL-1β、IL-10、IFN-γ表达,抑制了肠道炎症的级联放大反应;抑制ICC过度自噬,调控ICC/SMC网络通路。     

粪菌移植对DSS诱导的结肠炎小鼠内脏敏感性的影响

背景:粪菌移植(FMT)能减轻炎症性肠病(IBD)患者肠黏膜炎症、改善临床症状,但具体作用机制尚未明确。目的:探讨FMT对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠内脏敏感性的影响。方法:小鼠饮用2. 0%DSS溶液制备结肠炎模型。将40只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、双歧杆菌三联活菌组(C组)、粪便滤液组(D组),分别给予0. 9%NaC l溶液、0. 9%NaC l溶液、双歧杆菌三联活菌液、粪便滤液灌肠。计算小鼠疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分;测定不同结直肠扩张(CRD)容积时腹壁肌电幅值变化;免疫组化法测定腰骶髓P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)表达。结果:B组小鼠DAI、结肠组织病理学评分和腰骶髓SP表达明显高于A组、C组和D组(P 0. 05);而A、C、D三组相比差异无统计学意义(P 0. 05)。扩张容积为0. 04、0. 06、0. 08 mL时,B组腹壁肌电幅值显著高于A组、C组和D组(P 0. 05),且与SP表达之间存在正相关关系(P 0. 05)。四组小鼠腰骶髓CGRP表达相比差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:FMT可改善结肠炎小鼠的内脏敏感性、减少腰骶髓SP表达,其降低内脏敏感性的作用可能与抑制脊髓背角SP表达有关。     

瘦素和BDNF在DSS诱导的小鼠结肠炎中的作用及其机制研究

背景：瘦素、脑源性神经营养因子（BDNF）表达异常是溃疡性结肠炎（UC）发生的重要环节,但两者在UC中的作用机制尚不明确。目的：探讨瘦素、BDNF对DSS诱导的小鼠结肠炎的影响及其机制。方法：选取36只雄性8～10周龄健康瘦素缺陷型ob小鼠和瘦素正常表达的野生型（WT）小鼠,随机分为WT实验组、ob实验组、WT对照组、ob对照组。实验组小鼠给予3%DSS溶液自由饮用7 d诱导结肠炎模型,对照组给予蒸馏水。造模结束后评估小鼠疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度、行为学状态和内脏敏感性,以实时荧光定量PCR法检测结肠和海马中瘦素、BDNF mRNA表达,蛋白质印迹法检测结肠BDNF蛋白表达。结果：与相应对照组相比,WT实验组和ob实验组小鼠DAI评分和内脏敏感性明显增高（P<0.05）,结肠BDNF mRNA和蛋白表达显著增加（P<0.05）。与WT对照组相比,WT实验组小鼠出现焦虑、抑郁样行为,海马中瘦素、BDNF mRNA表达显著降低（P<0.05）。相关性分析结果显示WT实验组小鼠焦虑与结肠长度呈正相关（P<0.05）,与DAI评分呈负相关（P<0.05...     

人参皂苷Rg1对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠凝血功能的调节作用

[目的]探讨中药三七有效成分人参皂苷Rg1治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能机制.[方法]采用5％葡聚糖硫酸钠(DSS)建立UC小鼠模型,将小鼠随机分为人参皂苷Rg1高剂量组、人参皂苷Rg1低剂量组、美沙拉嗪肠溶片(5-ASA)组、模型1组、模型2组和正常组(每组10只).模型1组于造模7d处死,其余各组于造模第7天开始灌胃给药,连续给药7d处死.小鼠眼球采血检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT);放免法检测血浆中血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量.[结果]与正常组相比,模型1组及模型2组PT、APTT、TT明显缩短(P＜0.01),血浆TXB2明显升高(P＜0.01),6-keto-PGF1 α降低(P＜0.01),TXB2/6-keto-PGF1α比值升高(P＜0.01);人参皂苷Rg1高剂量组、人参皂苷Rg1低剂量组、5-ASA组经用药干预后,PT、APTT、TT均有不同程度的延长,血浆TXB2水平降低、6-keto-PGF1α表达增加,与模型1组和模型2组比较差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]人参皂苷Rg1可延长出凝血时间,下调血浆TXB2水平,上调6-keto-PGF1α含量,缓解UC小鼠的血液高凝状态,改善机体微循环,从而抑制或降低炎症反应的扩大,以达到缓解UC的症状作用.     

葡萄糖调节蛋白78对单核巨噬细胞分化的影响

目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对单核巨噬细胞分化的影响。方法:利用佛波酯(PMA)诱导形成THP-1单核细胞来源巨噬细胞模型。实验分为4组,分别为对照组(PMA浓度为50 ng/ml)、GRP78 10 ng/ml组(GRP78浓度10 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 20 ng/ml组(GRP78浓度20 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 40 ng/ml组(GRP78浓度40 ng/ml+PMA 50 ng/ml),培养72 h。应用流式细胞术检测巨噬细胞M1型特异表面标志物CD86、M2型特异表面标志物CD163的表达;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞M1型相关因子iNOS、M2型相关因子FIZZ-1、TGF-β、ARG-1及IL-10的mRNA表达。结果:与对照组比较,其他3组的CD163阳性巨噬细胞百分比显著增加(P0.01);而各实验组CD86阳性巨噬细胞百分比没有明显改变。与对照组相比,GRP78实验组中各组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平均有增加,其中GRP78 40 ng/ml组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平明显增高(P0.01);各组其他因子iNOS、IL-10和ARG-1的mRNA水平则没有明显变化。结论:GRP78可诱导THP-1单核巨噬细胞极化成M2型巨噬细胞。     

葡萄糖调节蛋白78对单核巨噬细胞分化的影响

目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对单核巨噬细胞分化的影响。方法:利用佛波酯(PMA)诱导形成THP-1单核细胞来源巨噬细胞模型。实验分为4组,分别为对照组(PMA浓度为50 ng/ml)、GRP78 10 ng/ml组(GRP78浓度10 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 20 ng/ml组(GRP78浓度20 ng/ml+PMA 50 ng/ml)、GRP78 40 ng/ml组(GRP78浓度40 ng/ml+PMA 50 ng/ml),培养72 h。应用流式细胞术检测巨噬细胞M1型特异表面标志物CD86、M2型特异表面标志物CD163的表达;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞M1型相关因子iNOS、M2型相关因子FIZZ-1、TGF-β、ARG-1及IL-10的mRNA表达。结果:与对照组比较,其他3组的CD163阳性巨噬细胞百分比显著增加(P0.01);而各实验组CD86阳性巨噬细胞百分比没有明显改变。与对照组相比,GRP78实验组中各组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平均有增加,其中GRP78 40 ng/ml组FIZZ-1、TGF-β的mRNA水平明显增高(P0.01);各组其他因子iNOS、IL-10和ARG-1的mRNA水平则没有明显变化。结论:GRP78可诱导THP-1单核巨噬细胞极化成M2型巨噬细胞。     

黄连解毒汤通过抑制ApoE-/-小鼠巨噬细胞极化和炎症减轻高脂饮食诱导的动脉粥样硬化

目的 探讨黄连解毒汤(HLJDD)抑制巨噬细胞极化和炎症对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及作用机制。方法 构建ApoE-/-小鼠AS模型,随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量(HLJDD-H)组和黄连解毒汤低剂量(HLJDD-L)组,另设C57BL/6J小鼠为正常(Control)组,每组6只,分别给予相应浓度药物及生理盐水灌胃,每日1次,连续6 w。给药结束后,收集小鼠血清和主动脉组织,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察主动脉组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-4和IL-10水平;荧光染色和免疫组化检测主动脉M1、M2型巨噬细胞标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD197和CD206分子的表达。结果 与Model组比较,HLJDD不同剂量组主动脉斑块面积和脂滴明显减少,血清TC、TG、LDL-C、hs-CRP、TNF-α和IL-6...     

DSS、TNBS、OXZ诱导结肠炎动物模型的对比

目的 对比研究DSS、TNBS、OXZ诱导的结肠炎动物模型.方法 本研究选取了一般状态、DAI评分和组织学损伤评分几个方面来评价.结果 DSS组大鼠造模安全性较高,在整个实验过程中无大鼠出现死亡,而TNBS组及OXZ组均有2只大鼠出现死亡,DSS组大鼠DAI评分升高较快,于实验第7天时各模型组DAI评分差异无统计学意义,TNBS组组织学损伤最重,但各造模组之间差异无统计学意义.结论 三种造模方法均可以成功诱导大鼠实验性结肠炎模型,各造模组DAI评分和组织学损伤没有显著的差异.DSS造模方法具有较高的安全性.     

缺氧诱导因子-2α在小鼠DSS结肠炎中的作用及其机制研究

背景:对炎症性肠病(IBD)发病机制的研究发现微循环缺氧是IBD的重要特征之一,转录因子缺氧诱导因子(HIFs)在缺血缺氧损伤的调节中起关键作用。目的:探讨HIF-2α在小鼠葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎中的作用及其可能机制。方法:以Mx-Cre/LoxP重组方法获得HIF-2α基因条件性敲除(HIF-2α-/-)小鼠,将C57BL/6、HIF-2α+/+和HIF-2α-/-小鼠分别随机分入DSS模型组和饮水对照组,前者予4%DSS溶液自由饮用7 d制作结肠炎模型,造模过程中每天评估疾病活动指数(DAI)。各组小鼠分别于造模开始后第1、3、5、7 d处死,取结肠组织观察组织病理学变化,real-time PCR检测HIF-2α、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达。结果:造模过程中,C57BL/6和HIF-2α+/+DSS模型组小鼠结肠黏膜HIF-2αmRNA表达明显升高,DAI和结肠黏膜炎症评分显著高于C57BL/6饮水对照组(第5、第7 d,P0.05)。HIF-2α-/-DSS模型组小鼠结肠黏膜炎症损伤较HIF-2α+/+DSS模型组进一步加重,DAI和炎症评分进一步升高(除第7 d炎症评分外,P均0.05),结肠黏膜TNF-αmRNA表达亦较HIF-2α+/+DSS模型组显著升高(第5、第7 d,P0.05)。结论:HIF-2α可能通过抑制TNF-α表达发挥减轻小鼠DSS结肠炎炎症损伤的作用。     

原花青素对DSS诱导的结肠炎小鼠抑郁样行为的保护作用及机制

目的 研究原花青素(PCA)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠抑郁样症状的作用及相关机制.方法 24只清洁级雄性小鼠随机分为对照(NS)组、模型(UC)组和PCA组,UC组和PCA组给予5％右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用水7 d,而NS组给予正常饮用水对照,造模的同时,PCA组给予75 mg/kg PCA灌胃,1次/d,连...     

盐酸青藤碱对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症损伤的影响及其机制

目的 探讨盐酸青藤碱（SIN）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症损伤的影响及其机制。方法 选择雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为对照组、模型组、SIN组,每组6只。模型组和SIN组予3%DSS溶液自由饮用诱导结肠炎。SIN组在建模同时予100 mg/（kg·d） SIN溶液灌胃。建模结束,评估疾病活动指数（DAI）评分,处死小鼠,剪取结肠组织,测量结肠长度,观察结肠组织病理形态学变化并评估组织学损伤评分表达。采用ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-6、IL-10含量,采用免疫组化法检测结肠组织自噬相关蛋白Beclin1、LC3B、p62表达。结果 与对照组比较,模型组DAI评分显著升高,结肠长度显著缩短,结肠黏膜结构遭到破坏并出现明显炎症细胞浸润,组织学损伤评分显著升高,结肠组织TNF-α、IL-6含量及p62相对表达量显著升高,而IL-10含量及Beclin1、LC3B相对表达量显著降低（P均<0.05）。与模型组比较,SIN组DAI评分有所降低,结肠长度有所延长,结肠黏膜结构破坏及炎症细胞浸润有所改善,组织学损伤评分显著降低,结肠组织TNF-α、...     

小鼠肠道粘膜固有层Lineage~-CD127~+淋巴细胞参与DSS诱导的早期急性结肠炎

目的对DSS诱导小鼠急性结肠炎早期分泌IL-17A和IL-22的主要淋巴细胞来源和分布情况进行初步探索。方法用3%DSS诱发C57BL/6J小鼠急性结肠炎;多色流式细胞术检测表面染色的淋巴细胞表面标记和胞内染色的IL-17A和IL-22的分泌情况。结果 DSS处理导致C57BL/6J小鼠肠道上皮内淋巴细胞所占比例下降,固有层淋巴细胞发生明显聚集。C57BL/6J小鼠肠道能产生IL-22和IL-17A的固有层Lineage+CD4+淋巴细胞所占的比例分别是:对照组为(0.26±0.08)%和(0.31±0.09)%,实验组为(0.29±0.08)%和(0.57±0.28)%,即固有层的Lineage+CD4+的淋巴细胞几乎不参与DSS诱导的早期急性结肠炎中IL-17A和IL-22的分泌。在DSS诱导的小鼠早期急性结肠炎中,分泌IL-22和IL-17A的固有层Lineage-CD127+淋巴细胞所占的比例分别是(45.13±2.39)%和(16.71±2.05)%,即肠道固有层Lineage-CD127+淋巴细胞是DSS诱导的小鼠早期急性结肠炎中IL-22和IL-17A的主要细胞来源之一。结论 DSS诱导的小鼠急性结肠炎早期IL-17A和IL-22的淋巴细胞来源之一是肠道固有层Lineage-CD127+淋巴细胞。     

艾拉莫德通过抑制TNF-α减轻博来霉素诱导的小鼠间质性肺病

目的观察艾拉莫德(IGU)对博来霉素(BLM)诱导的小鼠间质性肺病(ILD),分析艾拉莫德治疗ILD有效性和作用机制。 方法C57/BL6小鼠随机分为5组：空白对照组(Normal组)、间质性肺病组(BLM组)、艾拉莫德治疗组(BLM+IGU组)、TNF-α组(BLM+TNF-α组)、TNF-α+艾拉莫德治疗组(BLM+TNF-α+IGU组);建模后BLM+IGU组和BLM+TNF-α+IGU组予90 mg/kg IGU灌胃,BLM+TNF-α组和BLM+TNF-α+IGU组腹腔注射重组鼠肿瘤坏死因子-α(rmTNF-α),每只200 ng;于第28天处死小鼠;观察小鼠体重变化;Masson染色观察肺组织病理改变;Western blot法检测相关标志物蛋白表达水平。 结果BLM+TNF-α组小鼠体重较BLM组降低(P<0.05),BLM+TNF-α+IGU组小鼠体重较BLM+TNF-α组上升(P<0.05);Masson染色发现BLM+TNF-α组肺部胶原沉积较BLM组增多,纤维化评分升高,胶原面积增加(P均<0.05);BLM+TNF-α+IGU组胶原沉积较BLM+TNF-α组明显减少(P<0.05);BLM+TNF-α组α-SMA、MMP-2、Vimentin蛋白表达水平较BLM组升高,E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);BLM+TNF-α+IGU组较BLM+TNF-α组α-SMA、MMP-2、Vimentin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。 结论艾拉莫德可能通过抑制TNF-α和上皮间充质转化,减轻博来霉素引起的间质性肺病。     

Faecalibacterium prausnitzii产物对大鼠脾细胞促炎因子IL-17分泌的抑制作用

背景：Faecalibacterium prausnitzii（F.prausnitzii）在炎症性肠病（IBD）患者肠道内减少,与IBD发生有一定相关性。目的：研究Fprausnitzii及其产物体外对大鼠脾细胞分泌促炎因子白细胞介素（IL）-17的抑制作用和机制。方法：以IL-6、转化生长因子（TGF）-B或骨髓来源树突细胞（BMDC）分别刺激大鼠脾细胞。将脾细胞分为阳性对照组、Fprausnitzii上清液组、Fprausnitzii组、长双歧杆菌组、丁酸钠组,以未进行任何干预的脾细胞作为阴性对照。以ELISA法检测细胞培养液中IL-10、IL-12、IL-17、IL-23含量。结果：以细胞因子或BMDC刺激后,与阴性对照组相比,阳性对照组脾细胞IL-17含量均明显升高[（309．24±21．30）pg／mL对（182．20±89．12）pg／mL;（20．54±2．12）pg／mL对（17．36±0．38）pg／mL]（P〈0．05）。与阳性对照组相比,Fprausnitzii上清液可明显抑制细胞因子或BMDC诱导的脾细胞IL-17含量[（58．11±19．20）pg／mL对（309．24±21．30）pg／mL;（17．25±0．42）pg／mL对（20．54±2．12）pg/mL]（P〈0．05）。结论：Fprausnitzii可通过其产物调节免疫反应,可能与抑制Th17细胞活化有关。