荧光原位杂交检测染色体易位畸变对人大肠癌细胞的放射敏感性

预测肿瘤组织的放射敏感性是提高肿瘤放疗疗效和减少放射损伤的关键。近年来，国内外研究多采用FISH技术对细胞内在放射敏感性预测进行了可行性探讨，但有关大肠癌方面的研究不多。笔者应用FISH技术检测两株大肠癌细胞照射后的染色体易位畸变，分析其与细胞存活率的相关性，探讨该技术预测人大肠癌细胞内在放射敏感性的可行性。     

应用凋亡和微核检测法预测细胞辐射敏感性的可行性研究

细胞辐射敏感性的预测一直是放射生物学和肿瘤治疗研究领域的重要内容 ,是肿瘤放射治疗方案尤其放疗个体化方案制定的关键。在动物实验和临床研究中 ,已提出了许多检测细胞内在放射敏感性的方法[1 ] 。其中微核 (ＭＮ)检测法是被广泛应用的方法之一[2 ,3 ] 。但是人们仍对将其作为预测细胞辐射敏感性的可行性有争议。有作者报告 ,ＭＮ发生率与克隆形成率之间存在着内在联系 ,但也有报告认为并不存在这种相关性。影响这种相关性的因素一般认为有以下几个方面 :细胞受照射时所处的细胞周期、双核细胞的百分比、ＤＮＡ含量、细胞放射敏感性的不…     

用染色体畸变研究AT细胞系辐射敏感性和适应性反应

目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线,分析染色体畸变。结果G1期的GM细胞在预照射2cGy60Coγ射线的诱导剂量后能非常显著地降低随后照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发的染色体畸变率,染色体畸变的观察值非常显著地低于预期值(P<0.001),而对AT细胞则没有观察到这种现象,染色体畸变的观察值与预期值差异无统计学意义(P>0.05);另外,1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发AT细胞的各种畸变率(包括着丝粒畸变、无着丝粒畸变和染色单体型畸变)均显著地高于GM细胞(P<0.001)。结论低剂量电离辐射不能诱导AT细胞产生细胞遗传学适应性反应;AT细胞对电离辐射诱发染色体畸变高度敏感,可能是由于不能正确修复DNA双链断裂的结果。     

鼻咽癌细胞系放射敏感性的异质性

鼻咽癌多发于我国南方 ,放射治疗为首选治疗手段。鼻咽癌患者放射治疗后 5年生存率为 34%～ 5 3% ,多数死于局部复发和 或远处转移。肿瘤细胞群中存在放射敏感性差的亚群是复发和转移的主要原因 ,更有效的治疗方案的设计应针对这些放射抵抗的细胞。本室已从鼻咽癌细胞系ＣＮＥ 2Ｚ中分离出 2 5个单克隆株 ,这些克隆株在倍增时间、细胞分裂指数、成瘤率、体外侵袭能力、转移能力和途径等方面存在异质性[1 ] 。为分离出放射敏感性不同的细胞亚系并研究产生放射抵抗的机理 ,本实验对这 2 5个克隆株中生物学特性差异较大的 10个克隆作进一步研究…     

中性单细胞电泳检测肿瘤细胞放射敏感性

目的　探讨中性单细胞电泳检测肿瘤细胞放射敏感性的可行性。方法　应用克隆形成法和中性单细胞电泳技术 ,检测辐射诱导的人红白血病细胞株K562 、人结肠腺癌细胞株LS T 1 1 7和鼠胶质瘤细胞株C6的初始DNA双链断裂数及双链断裂后的修复 ,以及两者与细胞放射敏感性之间的关系。结果　 3种细胞系的放射敏感性依次为K562 >LS T 1 1 7>C6;3种细胞系的DNA迁移长度都随着照射剂量的增加而增大 ,呈良好的剂量效应关系。在相同剂量下辐射诱导的DNA双链的初始断裂数目 ,也依次为K562 >LS T 1 1 7>C6;3种细胞系经 1 0GyX射线照射 ,并在PBS中培养不同时间后DNA迁移长度 ,都有较大幅度的下降 ,但下降幅度依次为C6>LS T 1 1 7>K562 。在相同剂量下辐射诱导的DNA双链断裂后的修复能力 ,也依次为C6>LS T 1 1 7>K562 。结论　辐射诱导的DNA双链断裂及修复 ,与细胞放射敏感性有很好的相关性 ,可望用于肿瘤细胞内在放射敏感性的预测     

机体的内在放射敏感性与放射治疗

放射治疗是目前临床卜常用的医疗手段。决定放射治疗效果的因素很多，但靶组织的放射敏感性是其中关键的因素之一，尤其是肿瘤组织与正常组织间的放射敏感性差异更具有重要意义“’。研究患者对放射治疗的敏感性对于实施放射治疗，以期达到最佳效果，更具临床实用价值。本文就临床工作中涉及最多的细胞或组织的放射敏感性及其在放射治疗巾的预测作用作一综述。1组织或细胞的放射敏感性测定方法以实验手段测定组织或细胞的放射敏感性是继放射治疗学后出现的新的研究领域，其H的在于应用正常或肿瘤组织细胞进行体外放射敏感性试验，为判断、…     

鼻咽癌的放射敏感性预测初探

目的　探索原位缺口平移、早熟凝集染色体分析和胞质分裂阻断微核法等技术成为判断鼻咽癌放射敏感性预测指标的可能性。方法　以原位缺口平移法研究了鼻咽癌细胞株ＣＮＥ、ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞对γ射线的放射效应;以早熟凝集染色体分析技术和胞质分裂阻断微核法研究了鼻咽癌活检组织的放射敏感性。结果　在０ ～８ Ｇｙ 之间,ＣＮＥ 及ＣＮＥ－ ２Ｚ 的脱氧三磷酸核苷（ｄＮＴＰ） 掺入率与照射剂量间有良好的剂量效应关系,来源于低分化肿瘤的ＣＮＥ－ ２Ｚ细胞株的放射敏感性高于ＣＮＥ;３２ 例鼻咽活检标本进行早熟凝集染色体分析,其早熟凝集染色体周期分布与鼻咽癌患者放疗疗效有明显关系,临床上对放疗呈高敏的患者,晚Ｇ１ 细胞比例显著升高;胞质分裂阻断微核法提示２０ 例患者照射后微核形成有显著个体差异,其中低反应者２ 例有复发倾向。结论　实验结果提示上述３ 项指标可望成为综合判断鼻咽癌放射敏感性的重要参数。     

肝癌细胞辐射敏感性与G2期染色体畸变的线性关系及其应用研究

目的 研究人肝癌细胞系HepG2细胞辐射敏感性与G2期染色体断裂畸变关系及临床应用的可行性.方法 用Calyculin-A诱导的早熟染色体凝集技术测定细胞G2期染色体断裂畸变,用克隆形成实验测定细胞受照后的克隆形成率.结果 γ射线照射24 h后,G2期细胞内残存的等点染色单体断裂和染色单体型断裂与剂量之间存在良好的相关性;两类畸变与受照后的细胞存活分数均有一定的相关性,但等点染色单体断裂畸变的相关性（r为0.989）比染色单体型的（r为0.853）强.结论 细胞照后24 h,残存G2等点染色单体断裂畸变可以作为预测HepG2细胞内在辐射敏感性的指标,也可为临床诊断和治疗肝癌提供依据.     

酵母TEL1基因对辐射诱发A-T细胞染色体畸变的影响

目的研究酵母TEL1基因在毛细血管扩张-运动共济失调症(ataxia-telangiectasia,A-T)A-T细胞中的异位表达对辐射诱发A-T细胞染色体畸变的影响.方法稳定转染酵母TEL1全基因序列、酵母TEL1基因片断和pRep5空载体的AT-TEL1、AT-deltaTEL1、AT-rep、GM-rep细胞分别在含100μg/ml潮霉素的DMEM培养液中培养;A-T细胞和正常对照的GM639细胞分别在DMEM培养液中常规培养.应用60Co源对处于指数生长期的上述细胞进行γ射线照射,吸收剂量分别为0,1和3Gv.应用常规染色体技术制片,并进行染色体畸变分析.结果传代培养的AT-TEL1、AT-deltaTEL1、AT-rep、A-T、GM639、GM-rep细胞的染色体数目均是非整倍体;无论是A-T细胞染色体自发畸变率还是辐射诱发的染色体畸变率均明显高于正常对照的GM639纤维母细胞;A-T细胞的高染色体畸变率主要是由于染色体双着丝粒体和染色体断片所至的染色体型畸变;稳定转染酵母TEL1全基因序列的AT-TEL1细胞染色体自发畸变率与A-T细胞之间差异无显著性(P＞0.05);辐射诱发AT-TEL1细胞的染色体畸变率明显低于A-T细胞(P＜0.01);辐射诱发AT-deltaTEL1、AT-rep细胞染色体畸变率则高于A-T细胞.结论酵母TEL1基因在A-T细胞中的异位表达,能够明显降低电离辐射诱发的A-T细胞染色体畸变率.     

小剂量低LET辐射诱发哺乳动物生殖细胞染色体畸变规律

大剂量辐射诱发人类和哺乳动物细胞染色体畸变的研究已有数十年历史,体细胞及生殖细胞染色体的损伤规律比较明确。近年来,人们开始研究小剂量辐射的生物效应[1、2]。     

放射工作人员染色体畸变研究现状

长期暴露于低剂量电离辐射会对放射工作人员的辐射敏感组织器官造成损伤。目前,常用于评价慢性低剂量电离辐射所致辐射损伤的主要细胞遗传学指标是外周血淋巴细胞染色体畸变。本文对国内外放射工作人员暴露于低剂量电离辐射所致细胞遗传学效应的调查和研究进行综述,了解目前放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变检测的现状及存在的问题,为国内开展放射工作人员染色体畸变检测与评价提供参考。     

神经纤毛蛋白1对非小细胞肺癌放射敏感性的影响

目的 探讨神经纤毛蛋白1 (neuropilin 1,NRP1)在不同种类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系的表达情况及其与肿瘤放射敏感性的关系.方法 通过Western blot技术检测不同来源的5种人NSCLC细胞系(H358、H460、H1299、A549、SK-MES-1)NRP1的基础表达水平,MTT方法检测经不同剂量X射线照射后肺癌细胞的存活情况,初步筛选5种细胞中辐射敏感和辐射抵抗的2种细胞;采用克隆形成实验及流式细胞术分别检测细胞存活分数及凋亡率的变化,分析2种肺癌细胞的放射敏感性,采用Western blot检测2种细胞受X射线作用后 NRP1 的表达变化,通过克隆形成实验检测靶向抑制NRP1对A549细胞放射敏感性的影响.结果 5种肿瘤细胞NRP1表达量由高到低依次为:A549>SK-MES-1>H358>H460>H1299;X射线对肿瘤细胞的抑制能力呈剂量依赖性增强,其抑制率由高到低依次为:H460>H1299>H358>SK-MES-1>A549,因此选取A549细胞和 H460细胞做后续研究.克隆形成实验显示,A549在2 Gy照射下的存活分数(SF₂)是0.887,而H460细胞为0.313.A549细胞受照后的凋亡率为对照组的122.54%,明显低于H460细胞的238.88%.辐射可以诱导A549细胞NRP1的表达上调达40%,同时靶向抑制NRP1则可以增强A549细胞的放射敏感性.结论 在NSCLC细胞中A549细胞具有较强的辐射抗性,且辐射抗性的形成与其NRP1表达上调有关.     

辐射诱发生殖细胞和体细胞染色体畸变规律之比较

电离辐射诱发体细胞染色体畸变的研究[1~2]属于"水平传递",不能反映电离辐射对后代的影响。为了了解辐射对后代的影响,首先要了解辐射对生殖细胞染色体损伤的规律,但人类生殖细胞染色体的研究不易被接受。故人们寻求是否能①从哺乳动物的生殖细胞研究外推到人;②从人体细胞染色体畸变的规律外推其生殖细胞染色体损伤程度。Brewen 等[1、3、4]对第一个问题作了大量的研究,得出有价值的结论。Brook 等[5~15]报道了关于生殖与体细胞染色体畸变研究的比较,看法不一。下面就国内外研究情况作一综述。     

细胞凋亡与辐射敏感性

随着细胞凋亡与放射治疗关系的深入研究,有必要搞清楚细胞凋亡与肿瘤细胞辐射敏感性的关系。为临床放疗提供新的预测及评估指标,近年来的研究表明,细胞凋亡与辐射敏感性存在着微妙而复杂的关系。本文着重讨论细胞凋亡的速率,周期时相及辐射剂量速率等方面与辐射敏感性的关系。     

亚急性放射损伤的细胞遗传学特点

文报道了3例受源强320GBq的¹³⁷Cs连续照射达120～180天。临床诊断为亚急性重度 放射病。根据照后一年多系统观察外周血淋巴细胞染色体畸变发现3例患者的畸变细胞率均在30～40%,明显增高,证实她们曾受到大剂量的照射。进一分析各种类型畸变, 非稳定性畸变(Cu)和稳定性畸变(Cs)均占一定比例,表明连续照射所致亚急放射损伤者,他们既有近期受照所诱发的Cu畸变; 向时又有早期受照残存的Cs畸变, 因此对亚急性放射病患者的畸变观察,除采甩常规分析Cu畸变的方法外,应同时采用核分析方法,观察Cs畸变,这是亚急性放射损伤者细胞遗传学反应的特点。     

细胞凋亡与辐射敏感性

随着细胞凋亡与放射治疗关系的深入研究,有必要搞清楚细胞凋亡与肿瘤细胞辐射敏感性的关系。为临床放疗提供新的预测及评估指标,近年来的研究表明,细胞凋亡与辐射敏感性存在着微妙而复杂的关系。本文着重讨论细胞凋亡的速率,周期时相及辐射剂量速率等方面与辐射敏感性的关系。     

重离子与X射线辐照细胞的敏感性比较

离体的肿瘤细胞和正常细胞的固有辐射敏感性的研究表明 ,不论同种组织间还是不同种类组织间 ,它们的敏感性均存在明显差别[1 ] 。在肿瘤的放射治疗中 ,正常组织的敏感性限定着肿瘤的辐射量 ,而肿瘤组织细胞的敏感性又限定着该剂量杀灭肿瘤的程度 ,所以肿瘤及其周围正常组织的固有细胞辐射敏感性的区别很可能是影响肿瘤疗效的重要因素之一。影响辐射敏感性的因素有许多 ,其中 ,包括ＤＮＡ损伤及其修复 ,细胞增殖率及细胞周期不同时相的细胞比例 ,细胞周期的检查点 ,ＤＮＡ含量 ,等等。为此 ,我们研究了重离子与Ｘ射线辐照细胞的敏感性比较。…     

放射抗拒肺癌细胞亚系D6-R的建立及其细胞周期研究

目的 探讨放射抗拒肺癌细胞系的放射抗拒机理。方法 应用X射线照射肺癌D6细胞系8次，每次吸收剂量650cGy，对存活细胞单克隆化，采用克隆形成实验测定所得的新细胞亚系D6-R细胞及其亲本的放射敏感性，流式细胞术检测它们的细胞周期特征。结果 与亲本D6细胞相比，D6-R细胞显示出放射抗性，其D0、Dq及N值增大，细胞存活曲线肩区增宽，在SR2水平上，D6-R细胞的放射抗性是其亲本细胞D6的1．65倍。D6-R细胞S期比例较其亲本D6细胞明显增高，而G2／M，G1期比例则下降。结论 新的细胞亚系D6-R比其亲本对射线更加抗拒，并且显示出与亲本不同的细胞周期特征。     

放射肿瘤学：抗癌基因与放射敏感性关系研究进展

提高肿瘤放射敏感性是放射治疗的关键。从总体角度，细胞水平研究肿瘤放射敏感性未能给临床提供足够的信息。抗癌基因，特别是Ｐ＾５３及其相关基因与放射敏感性关系的研究为提高放射治疗效果提供了新的思路和方法。     

生物剂量学技术在放射流行病学中的应用

低剂量电离辐射致癌危害的流行病学研究遇到了很大的困难，以研究电离辐射与生物效应定量关系主核心的放射生物剂量学与相关技术可望对流行病的剂量重建，辐射致癌危险估算，生物学模型建立和危险预测有人群中癌易感性和辐射致癌敏感性检测等提供帮助，两者的结合将把放射流行病学推向分子放射流行病学的新阶段。