血小板活化因子对人肾小球系膜细胞的影响

利用体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）观察了血小板活化因子（ＰＡＦ）对其增殖、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响，发现ＰＡＦ在较低浓度时（１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ），对ＧＭＣ摄取四唑盐（ＭＴＴ）的影响甚微，而较高浓度时（１０－６和１０－５ｍｏｌ／Ｌ）则有明显的抑制作用。经ＰＡＦ刺激１８ｈ的ＧＭＣ上清，对ＴＮＦ敏感的Ｌ９２９细胞株的杀伤能力有所增强，在ＰＡＦ１０－７ｍｏｌ／Ｌ时达高峰。此外，高浓度的ＰＡＦ尚具有促进ＧＭＣ释放ＬＤＨ的作用。这些结果说明：ＰＡＦ可以通过多种机理损伤肾小球系膜细胞，在肾小球的炎症反应中起重要作用     

异氟醚和七氟醚及地氟醚对大鼠肺微血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响

目的:观察异氟醚、七氟醚和地氟醚对大鼠肺微血管内皮细胞(RLMVECs)ICAM-1和VCAM-1表达的影响,探讨吸入性麻醉药物保护肺泡毛细血管屏障功能的可能机制.方法:0.7 MAC、1.0 MAC、2.0 MAC的异氟醚、七氟醚和地氟醚处理经LPS(100 ng/ml)诱导6 h的RLMVECs,采用Western blot检测ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达量,RT-PCR半定量法检测ICAM-1水平.结果:1.0 MAC的异氟醚对LPS诱导的RLMVECs ICAM-1的表达有上调作用(P＜0.05);1.0 MAC的七氟醚、地氟醚对LPS诱导的RLMVECs ICAM-1的表达有下调作用(P＜0.05);2.0 MAC的地氟醚对RLMVECs ICAM-1的表达有上调作用(P＜0.05).不同吸入麻醉药物对LPS诱导的RLMVECs VCAM-1的表达作用随浓度上升而下调,呈剂量依赖性.结论:1.0 MAC的七氟醚和地氟醚对LPS诱导的RLMVECs ICAM-1的表达有下调作用,这可能是其在急性肺损伤时减少中性粒细胞募集、保护肺泡毛细血管屏障功能的分子学机制.     

银杏内酯B对血小板活化因子激活的大鼠中性白细胞功能的影响

探讨了银杏内酯Ｂ对体外血小板活化因子激活的大鼠中性白细胞某些功能,包括溶酶体酶的释放,超氧阴离子的产生以及细胞内游离钙浓度改变的影响。结果显示：银杏内酯Ｂ在０．５￣１００μｍｏｌ／Ｌ终浓度下,可使β－葡萄糖苷酸酶释放量降低４４．２％￣７３．２％,在０．１￣４０μｍｏｌ／Ｌ终浓度下,可使超氧阴离子生量降低２７．４％￣５０．０％;在０．１￣１００μｍｏｌ／Ｌ终浓度下,使ＰＡＦ和ｆＭＬＰ刺激引起的细胞内     

氨基胍抑制丙酮醛介导的脑微血管内皮细胞缺糖缺氧损伤

目的:研究氨基胍对丙酮醛加重脑微血管内皮细胞(HBMEC)缺糖缺氧损伤的保护作用。方法:在培养的HBMEC上,利用丙酮醛加重缺糖缺氧诱导的损伤,通过MTT检测细胞活力,LDH释放检测细胞死亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-blot检测晚期糖基化终产物的形成,观察氨基胍的作用和机制。结果:丙酮醛呈浓度依赖地诱导细胞损伤,在2 mmol/L时细胞的存活率为56.1%,而丙酮醛合并缺糖缺氧后,细胞的损伤率增加到90.0%。氨基胍(1 mmol/L)能抑制丙酮醛和缺糖缺氧诱导的LDH释放和AnnexinV/PI的形成。进一步研究发现氨基胍能抑制丙酮醛和缺糖缺氧诱导晚期糖基化终产物的形成。结论:氨基胍对丙酮醛加重HBMEC的缺糖缺氧损伤具有保护作用,这可能与其抗糖基化作用有关。     

沙土鼠及大鼠局部脑缺血时血小板活化因子的变化

为了探讨脑缺血后血小板活化因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）含量的变化，采用沙土鼠单侧脑缺血和大鼠局部脑缺血模型，用薄层层析（ＴＬＣ）结合生物法测定了缺血后脑组织ＰＡＦ的含量结果：（１）沙土鼠右侧颈总动脉结扎３ｈ再灌２ｈ，右侧大脑组织ＰＡＦ含量较左侧明显升高，分别为（４４０±０９０）和（１３０±０４２）ｐｇ／ｇ（Ｐ＜００５）；（２）大鼠左侧大脑中动脉（ＭＣＡ）凝闭后４８ｈ，左侧大脑组织ＰＡＦ含量右侧亦明显升高，分别为（５７４±０７４）和（０７６±０２４）ｐｇ／ｇ（Ｐ＜００５）据此分析了ＰＡＦ在脑缺血继发神经元损伤发病机制中的可能作用     

沙土鼠及大鼠局部脑缺血时血小板活化因子的变化

沙土鼠及大鼠局部脑缺血时血小板活化因子的变化（摘要）研究生方思伟导师李麟仙，王子灿（昆明医学院病理生理教研室，昆明６５００３１）探讨脑缺血后血小板活化因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ａｃｔｉ－ｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）含量的变化。实验采用沙土鼠单侧脑...     

山莨菪碱对缺氧复氧损伤血管内皮细胞凋亡的影响

目的探讨山莨菪碱(anisodamine,Ani)对缺氧复氧损伤血管内皮细胞凋亡的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞缺氧复氧方法观察血管内皮细胞凋亡的变化,实验分5组:对照组、生理盐水组、肾上腺素组、Ani组、肾上腺素+Ani组。采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用RT-PCR法检测血管内皮细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)mRNA表达水平。结果 5组血管内皮细胞复氧12 h、24 h的细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中生理盐水组复氧12 h、24 h细胞凋亡率与肾上腺素组、Ani组、肾上腺素+Ani组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾上腺素组与Ani组复氧12 h、24 h细胞凋亡率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而这两组与肾上腺素+Ani组复氧12 h、24 h的细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。复氧12 h、24 h后5组的Bcl-2 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾上腺素+Ani组Bcl-2 mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ani可以降低缺氧血管内皮细胞的凋亡。Ani干预缺氧所...     

血小板活化因子对中耳黏膜细胞黏性糖蛋白分泌的影响

目的　探讨血小板活化因子 (PAF)对体外培养的中耳上皮细胞分泌功能的影响。方法　用放射性核素3 H标记体外培养的中耳黏膜上皮细胞合成的黏性糖蛋白 (MGP) ,研究了不同浓度 ( 5 ,10 ,2 0 ,40 ,80 μg/ml)PAF作用及PAF作用后不同时间 ( 4 ,8,16,2 4,48h)对MGP分泌量的影响 ,MGP的量以放射活性 (dpm)表示。结果　量效关系的结果显示各浓度组与对照组相比MGP量均增加 (P <0 0 5或 <0 0 1) ;时效关系的结果显示PAF作用后 4hMGP的量即明显高于对照组 (P <0 0 1) ,此后MGP量呈缓慢而持续性地增加 ,而且到 48h仍明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论　PAF的确可引起体外培养的中耳黏膜上皮细胞MGP分泌的增加 ,这一作用可能是其引起中耳积液产生的重要机制     

丹参注射液对重症急性胰腺炎患者血清血小板活化因子变化的影响

目的探讨丹参注射液对重症急性胰腺炎(SAP)患者血清血小板活化因子(PAF)变化的影响。方法将50名患者按治疗方法的不同分为对照组(A组)和丹参治疗组(B组),各25例。比较两组患者治疗前后PAF水平。结果两组治疗前PAF水平差异无统计学意义(>0.05),治疗3、5及10d后差异均有统计学意义(<0.05)。结论丹参注射液可以通过降低SAP患者PAF水平,从而达到对SAP患者的治疗作用。     

山莨菪碱对特重度烧伤患者血小板计数的影响

目的 探讨山莨菪碱对特重度烧伤患者血小板计数的影响.方法 对122例特重度烧伤患者血小板计数变化进行回顾性研究,根据早期使用山莨菪碱的情况,将使用了山莨菪碱的患者设为治疗组,未使用山莨菪碱的患者设为对照组.结果 治疗组血小板计数在不同的住院时间都高于对照组.结论 山莨菪碱能减少特重度烧伤患者血小板的消耗,缓解患者血小板计数的下降.     

血小板激活因子对大鼠任意皮瓣成活力的影响

目的 检测随意皮瓣移植时,皮瓣局部组织中的血小板激活因子（ＰＡＦ）水平,探讨其在皮瓣移植过程中的作用机制。方法 皮瓣移植术后０,２,４,６和８ｈ将皮瓣取下,分蒂段、中段,末段匀浆提取组织液,检测血小板激活因子前体（ｌｙｓｏ－ＰＡＦ）的水平变化;皮瓣移植术前０．５ｈ皮瓣局部ｓｃ银杏苦内酯Ｂ（ＢＮ５２０２１）,分别于术后３,６和９ｈ采用＾９９Ｔｃ＾ｍ体内标记红细胞的方法进行ＥＣＴ检测和免疫组织化学检查     

心房钠尿肽对脂多糖引起肺微血管内皮细胞损伤的治疗作用

目的:探索心房钠尿肽(ANP)对脂多糖(LPS)引起 肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤的治疗作用.方法:培养大 鼠PMVECs,分为对照组、LPS(1mg/L)组和ANP治疗组(LPS+ANP),流式细胞技术检测各组细胞的周期,MTT比色 试验检测细胞活力,并测试上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力 和丙二醛(MDA)浓度.结果:ANP可以抑制LPS引起的S期 和G2 M期细胞比例的降低.另外,LPS作用6h后,0.01,0.1 和1μmol/L3种浓度的ANP治疗和LPS作用0、6、12和24h 后0.1μmol/L的ANP治疗,可以抑制LPS引起的A490nm值降 低和LDH活力增强(P<0.05),治疗浓度越大,治疗越早,抑制 作用越明显(P<0.05);MDA含量与LDH活力变化相似,仅 24h组无差异.结论:ANP可以减轻LPS引起的PMVECs损伤.     

血小板激活因子和维甲酸对中性粒细胞功能和ICAM－1，ELAM－1表达的影响

目的：探讨血小板激活因子（ＰＡＦ）和维甲酸（ＲＡ）对多形核中性粒细胞（ＰＭＮ）功能和肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）ＩＣＡＭ－１和Ｅ－选择素（ＥＬＡＭ－１）表达的影响。方法：采用作者创建的无创性分离法分离培养ＰＭＶＥＣ；将ＰＡＦ和ＲＡ分别加入培养有ＰＭＶＥＣ的９６孔板中，观察二者对ＰＭＮ－ＰＭＶＥＣ粘附的影响；ＥＬＩＳＡ法测定ＰＭＶＥＣ上ＥＬＡＭ－１和ＩＣＡＭ－１的表达；测定ＰＡＦ和ＲＡ对ＰＭＮ的趋化性、聚集和酸性磷酸酶的释放的影响。结果：（ｌ）ＰＭＶＥＣ用ＰＡＦ处理３．５ｈ后，它与ＰＭＮ的粘附率从５７．３％增加到７２．８％（Ｐ＜０．０１）。而用ＰＡＦ处理ＰＭＮ同样可增加ＰＭＮ－ＰＭＶＥＣ的粘附率。（２）ＲＡ可阻断未刺激ＰＭＮ与ＰＡＦ刺激的ＰＭＶＥＣ之间的粘附，但对ＰＡＦ刺激的ＰＭＮ与未刺激的ＰＭＶＥＣ之间的粘附却无作用。（３）ＰＡＦ可增加ＰＭＶＥＣ上ＩＣＡＭ－ｌ和ＥＬＡＭ－ｌ的表达、增加酵母多糖激活血清和组胺对ＰＭＮ的趋化性、增加ＰＭＮ的聚集和ＰＭＮ酸性磷酸酶的释放。（４）ＲＡ则可抑制ＰＡＦ诱导的ＰＭＮ聚集、酸性磷酸酶的释放及ＰＭＮ对酵母多糖刺激血清和组胺的趋化性，而ＩＣＡＭ－１和ＥＬＡＭ－１的表达却未改变     

血管紧张素转换酶2在大鼠肺微血管内皮细胞上的表达

目的研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)上的表达。方法体外培养大鼠PMVEC,分别采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测ACE2的表达。结果RT-PCR法从细胞总RNA中检测出ACE2的扩增条带;用Western blot法检测大鼠PMVEC蛋白提取液,可见ACE2的蛋白印迹条带;免疫组化法显示ACE2免疫组化反应产物主要分布于细胞的胞膜和胞浆。结论从核酸和蛋白水平证实了大鼠PMVEC可以表达ACE2,表达主要位于细胞的胞膜和胞浆部分。     

不同剪切力对豚鼠微血管内皮细胞形态学的影响

目的 观察不同剪切力对体外培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞的影响.方法 用自制的流体力学装置在不同时相点、以不同剪切力对豚鼠脑、耳蜗微血管内皮细胞进行力学作用,获得形态学图像并进行形状参数Pyx的测定分析.结果 通过胶原酶消化法可获得单层培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞.对于耳蜗微血管内皮细胞,剪切力为0.883 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.184 dyn/cm2时,作用8 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化,随时间延长,变化趋势更明显.而脑微血管内皮细胞在剪切力0.267 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.069 dyn/cm2时,作用4 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化.结论 耳蜗、脑微血管内皮细胞在受到剪切力作用后其形态学不同于静态培养的内皮细胞.     

白细胞介素6、肿瘤坏死因子对体外培养的血管内皮细胞的损伤作用

目的：研究白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)对人脐静脉内皮细胞（HVEC）的损伤作用。方法：以原代培养的HVEC为模型,将IL-6、TNF及其抗体与HVEC共同孵育,观察内皮细胞（EC）形态变化和培养液中血管紧张素转化酶（ACE）和乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果： TNF和IL-6可引起细胞间隙增大,甚至细胞脱落;并且随着TNF和IL-6浓度加大及作用时间延长,培养液中ACE和LDH水平升高。结论： IL-6和TNF对血管EC有损伤作用。     

银屑病皮损血管内皮细胞CD105的表达

目的 探讨转化生长因子β的结合蛋白CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达及其作用。方法 采用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ和CD105在银屑病皮损及正常对照皮肤的血管内皮细胞的表达。结果 与正常皮肤相同,TGF-β1、TGF-βRⅠ在银屑病皮损血管内皮细胞均无明显表达;TGF-βRⅡ在银屑病皮损和正常皮肤的血管内皮细胞均有明显表达,但两者差异无显著性;CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达明显强于正常皮肤,差异有显著性（P〈0．01）。结论 CD105在银屑病皮损血管内皮细胞的表达明显上调可能与银屑病真皮浅层血管增生、炎症细胞浸润的病理机制有关。     

川芎嗪对脂多糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)RhoA、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK2)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)磷酸化及细胞骨架连接蛋白(ezrin-radxin-moesin,ERM)磷酸化水平的影响。方法:以体外培养的HUVEC为实验对象,分为对照组、LPS组和TMP组(0.5、1.0、1.5 mg/mL),荧光定量PCR测定内皮细胞RhoA、ROCK2和信使RNA(p-Ezr mRNA)的表达,Western blot法测定内皮细胞RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白水平的表达。结果:与对照组比较,LPS组RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及RhoA、ROCK2和p-Ezr mRNA表达均显著升高(P<0.01);与LPS组比较,TMP 3组RhoA蛋白表达与mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05),ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及ROCK2、p-Ezr mRNA表达均降低(P<0.05~P<0.01),且TMP 3组之间ROCK2、p-MLC和p-ERM的分子表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:TMP对LPS诱导的HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制Rho/ROCK信号通路中ROCK2、p-MLC和p-ERM的表达,以减弱LPS对内皮细胞骨架的损伤。     

模拟失重对肺微血管内皮细胞F-actin的影响

目的：观察回转模拟失重对肺微血管内皮细胞纤维肌动蛋白（F-actin）的影响,探讨其在失重环境下的损伤机制。方法：组织块贴壁法原代培养肺微血管内皮细胞,采用回转器模拟失重效应。PMVEC回转培养24h、48h和72h,同时设1g同步对照静置培养。采用免疫荧光技术标记PMVEC内的F-actin,以激光共聚焦显微镜观察采集荧光图像。结果：与同步对照相比,不同时间回转的PMVEC微丝骨架均发生明显破坏,且这种破坏随着回转模拟失重时间的延长而加重。结论：模拟失重可破坏PMVEC内F-actin,导致PMVEC损伤。