鼠疫组分疫苗免疫后小鼠血清抗体滴度检测与豚鼠效力观察

目的 根据对小鼠血清抗体滴度检测和对豚鼠的保护力观察,评估鼠疫组分疫苗的免疫效果.方法 通过氢氧化铝佐剂吸附15μg F1、15μg rV、15μg F1+15μg rV抗原,分别制成鼠疫单组分疫苗和双组分疫苗.采用2剂(0、2周)皮下接种途径,分别免疫NIH小鼠和豚鼠.以皮上划痕人用鼠疫活疫苗1剂免疫作为对照.免疫6周后,采用间接ELISA法检测小鼠血清IgG滴度,采用t检验作组间比较.与此同时,使用强毒鼠疫杆菌141株对豚鼠进行皮下攻击,以观察疫苗效力.结果 小鼠血清抗体检测结果表明,鼠疫组分疫苗组血清F1抗体或/和rV抗体滴度均高于鼠疫活疫苗组,差异有统计学意义(t=3.041、3.472、15.958、16.264,P值均＜0.01).豚鼠攻击试验结果显示,F1+rV组的存活率可达到90%(9/10),而F1组和rV组分别为50%(5/10)和20%(2/10).结论 鼠疫F1+rV双组分疫苗是有效的抗鼠疫疫苗,而单组分F1或rV鼠疫疫苗不能有效防御鼠疫杆菌攻击.     

用加入脂质体的病毒亚单位疫苗肺部免疫雌鼠后能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA应答

作者将流感病毒血凝素(HA)亚单位疫苗〔由甲型流感病毒NIB26(H3N2)制备〕与脂质体(蛋黄卵磷脂:胆固醇:三十二烷磷酸盐=4:5:1)混合,经下呼吸道免疫雌性小鼠,能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA抗体。 实验分4组进行。每组5只8～10周龄的雌性Balb/c小鼠。第1组于麻醉状态下鼻腔滴注50μl脂质体疫苗(全呼吸道免疫);第2组于未麻醉状态下鼻腔滴入20μl脂质体疫苗(上呼吸道免疫);第3组于麻醉状态下作气管切口,直接将50μl脂质体疫苗注入肺中;第4组肌肉注射或口服50μl疫苗作为对照组。肌肉或鼻腔接种的HA抗原均为5μg,脂质体剂量为1mg。免疫后4周,收集支气管洗液。连续三天以PBS冲洗阴道,收集洗液,合并每只小鼠的冲洗物。最后一次冲洗后,处死小鼠采血。用ELISA检测血清中抗HA特异性     

用呼吸道合胞病毒亚单位疫苗粘膜免疫接种小鼠

作者评价了用纯化的呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白和霍乱毒素（CT）佐剂疫苗粘膜免疫接种小鼠的保护效力。 取4周龄小鼠进行实验。用于鼻内接种的10μl疫苗中含CT2.5μg、F蛋白3μg;肌肉接种的0.1ml明矾疫苗中含F蛋白3μg,用PBS作安慰剂。活病毒疫苗为2.5μl中含2×10~6空斑形成单位（PFU）病毒。在0和4周各免疫1次,8周时用RSV Long株5×10~6PFU攻击。病毒攻击后4天杀死小鼠,取血清,用酶免疫试验测定抗F蛋白和CT的IgG抗体,并作微量中和试验。无菌取鼻洗液,一部分立刻用HEp-2细胞滴定病毒滴度,一部分测定IgA。 动物共分9组,每组6只。实验结果表明,鼻内接种活RSV组血清中有高滴度抗F特异IgG具有强的中和力,鼻洗液中有IgA,病毒攻击后,所有小鼠均未检出病毒。鼻内和肌肉同时接种PBS组,无抗体产生,不能阻止病毒复制,鼻内病毒滴度为log_210.1±0.2PFU。鼻内或肌肉接种F蛋白组,鼻洗液中均无IgA,不能阻止病毒复制,但后者有血清抗体。鼻内和肌肉同时接种F蛋白组亦有高滴度血清抗体但无鼻洗液IgA,病毒复制力比PBS组低。鼻内单独接种CT组,虽无抗F抗体,但能轻度抑制病毒复制,鼻洗液中病毒滴度为log_26.8±2.2 PFU,每只小鼠皆查到病毒说明与免疫接种无关。鼻内接种F+CT组,血清中有高滴度F和CT特异性IgG并     

对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗局部免疫的体液、粘膜和细胞免疫应答

本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体.     

粘膜或注射给予微球化炭疽杆菌保护性抗原可保护小鼠抵抗炭疽感染

现行的英国肌注炭疽疫苗和美国皮下注射的吸附炭疽疫苗 ( AVA)都需多次接种才能获得恒定的保护性免疫。试验表明疫苗抗原微球化的优点多于传统疫苗配方。作者以小鼠为模型测定了将重组炭疽杆菌保护性抗原 ( r PA)制成微球进行免疫的效果。　　将 r PA按一定程序包入分子量为1 0 0 k Da的聚 - L-丙交酯中制成微球 ,分别在1和 2 1天肌注、鼻腔接种或者采用联合途径(初免用肌注、加强用鼻腔接种 )免疫 A/J小鼠 2次 ,2 8天时采血以 EL ISA测定血清抗体水平 ,于第 55天用剂量为 1 0 3平均致死量的炭疽杆菌 STI株芽胞腹腔注射攻击小鼠 ,或…     

HIV-1 DNA-单磷酰脂质A佐剂疫苗鼻内与肌肉免疫的比较

最近作者对1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)DNA疫苗接种的研究证明,从细菌脂多糖取得的单磷酰脂质A(MPL)免疫佐剂可有效增强抗原特异性免疫力.免疫对象为BALB/c小鼠,DNA疫苗用pCMV160ⅢB和pCREV(ⅡB/REV)构建,使用稳定乳剂中的MPL(MPL-SE)作佐剂.肌肉免疫方法为:ⅢB/REV各2μg(总量4μg)溶于灭菌PBS,加(或不加)50μl MPL-SE,在小鼠股二头肌注射100μl疫苗.鼻内免疫的DNA剂量相同,仅MPL-SE改为5和20μl.用乙醚麻醉小鼠后,将30μl疫苗渐渐滴入小鼠鼻孔,让小鼠用自然方式吸入.肌肉和皮内途径均只接种1次.用ELISA检测血清IgG、IgG1和IgG2a及粪便中分泌性IgA(SIgA)滴度;用小鼠足垫试验评估迟发型超敏(DTH)反应;用标准~51Cr释放试验测定免     

甲型肝炎疫苗接种方法:喷射注射法与针头注射法的比较

甲型肝炎疫苗及免疫球蛋白均对甲型肝炎病毒 (HAV)感染具有防御作用 ,但 HAV疫苗可提供完全保护作用。有效的接种方法与抗 HAV抗体形成的关系尚不清楚。作者用针头注射法与喷射注射法接种 HAV疫苗以确定血清阳转率或抗 HAV抗体水平的差异。　　作者将 32 0名成年志愿者随机分为两组 ,分别采用喷射技术 (Biojector系统 )和针头注射法于三角肌接种疫苗。受试者于 0、6月各接种 1剂 1 44 0 EL.U疫苗 ,并于接种后1 5、 30天及 7个月采血 ,用 Boehringer-Mannheim法测血清抗 HAV Ig G滴度 ,抗体水平≥ 2 0 m IU者即为 HAV抗体阳转。…     

医务人员皮内接种乙型肝炎疫苗

作者在一项大规模临床试验中对医务人员皮内接种低剂量乙型肝炎疫苗或肌肉接种标准剂量疫苗以比较两者的免疫原性。受试者是来自North Arundel医院的成年雇员和社会上的卫生保健人员。所有受试者均无任何免疫抑制病或服用免疫抑制药物、怀孕、预先接种过乙型肝炎疫苗或乙型肝炎免疫球蛋白等情况。将受试者随机分成两组,Ⅰ组皮内接种2μg疫苗,Ⅱ组肌肉接种20μg疫苗。均在三角肌区接种,程序为0、1、6月,于第1针后3、8、12和24个月采血,检测抗-HBc和抗-HBs。研究期间,肌肉接种组的抗-HBs阳转率和抗体滴度高于皮内接种组。8个月时,肌肉组抗体阳转率为92.6%,皮内组为81.0%。肌肉组抗体几何平均滴度(3649mIU/ml)显著高于皮内组(1174mIU/ml)。     

麻疹DNA疫苗的成功免疫

作者将编码麻疹病毒 ( MV)血凝素 ( H)和融合 ( F)糖蛋白的 DNA质粒疫苗在恒河猴模型中作了免疫应答、保护力及安全性试验。　　将 1 4只猴子分为 5组 ,( 1 ) F质粒皮内注射 50 0 μg,2只 ;( 2 ) H质粒皮内注射50 0 μg,3只 ;( 3) H+ F质粒 ,皮内注射各50 0μg,3只 ;( 4) H质粒 8μg,基因枪接种 ,3只 ;( 5) H+ F质粒 ,各 8μg,基因枪接种 ,3只。另有 2只猴子注射麻疹减毒活疫苗作为对照。　　蚀斑减少中和试验表明 ,单剂 DNA疫苗可在所有猴子中诱生中和抗体。抗体产生的时间过程和中和作用水平各 DNA疫苗组相似 ,且抗体水平保持稳定…     

IL-12可作为鼻腔保护性粘膜免疫的有效佐剂

作者用流感病毒亚单位疫苗和白细胞介素 12 ( IL- 12 )同时进行粘膜接种以分析 IL-12在粘膜表面的佐剂作用。　　实验以 BALB/c小鼠为模型 ,于第 0、14、2 8天鼻内接种 2 5μl含 1μg流感病毒( H1N1)亚单位疫苗的磷酸盐缓冲盐水( PBS) ( PBS- H1N1) ,该疫苗由从流感病毒A/PR8/34株纯化得到的可溶性血凝素( H1)和神经氨酸酶 ( N1)组成。再于第 0、1、2、3、2 8天鼻内接种含 1μg重组小鼠 IL- 12和 1%正常小鼠血清 ( NMS)的 PBS( PBS-NMS- IL12 ) ,对照组小鼠则在接种 H1N1疫苗后仅给予 PBS- NMS。从小鼠脾脏和肺脏中分离…     

联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

皮内和肌肉接种低剂量乙型肝炎疫苗

本文综述了抗-HBc阴性者接种低剂量乙型肝炎疫苗后的免疫应答情况。当用2μg血源疫苗替代推荐的20μg重组疫苗时,67～100%的健康志愿者(18～40岁)在皮内接种3～4针后,抗体滴度能逐步上升到10mIU/ml以上。经比较,皮内接种3针2μg疫苗和肌肉接种3针20μg。疫苗者的血清阳     

登革热和乙型脑炎DNA疫苗在肌肉组织中产生抗原及其对小鼠免疫原性之间的关系

登革病毒与乙型脑炎病毒属黄病毒科成员 ,该类病毒含有三种结构蛋白 :核壳 ( C)、前膜 ( pr M)和包膜 ( E) ,其中 pr M与 E的共同表达能够诱导小鼠产生最高水平的中和抗体及保护作用。　　为使抗原的产生达到可检测水平 ,日本神户大学医学院 Konishi等采用无针头喷射注射装置分别将 1型登革病毒 ( pc D1 ME)、 2型登革病毒( pc D2 ME)和乙型脑炎病毒 ( pc JEME) DNA疫苗对小鼠进行肌肉注射 ,接种后取大腿四头肌制成 1 0 %肌肉匀浆以 ELISA检测抗原含量。接种 5 0μgpc JEME后第 1、2、3、4天小鼠肌肉匀浆 E抗原含量分别为 :1 .1…     

淋球菌NspA核酸疫苗小鼠体内诱生保护性抗体研究

目的进一步研究前期构建淋球菌NspA真核细胞表达质粒pcNspA作为淋病核酸疫苗的可行性。方法将pcNspA分别通过肌内注射(IM)、滴鼻(IN)和阴道接种(IVAG)等3种途径免疫BALB/c小鼠,对免疫鼠的血清、支气管肺泡和阴道洗液等样品分别用间接ELISA检测淋球菌特异性抗体的类型和效价,比较不同接种途径刺激小鼠体内特异性抗体水平的差异以及相应抗体的体外溶菌活性。结果 pcNspA质粒经滴鼻免疫和肌内注射均可在小鼠体内诱导产生较高的特异性体液免疫水平,尤其是滴鼻免疫途径不仅可诱生较高水平的血清IgG抗体(1∶1600),而且在支气管肺泡洗液和阴道洗液中均可检测到特异性sIgA的存在。而阴道接种pcNspA质粒仅能在阴道局部检测到较低水平的特异性sIgA。用pcNspA质粒诱生的血清IgG抗体做体外溶菌活性实验,证实滴鼻免疫小鼠血清具有溶菌活性。结论淋球菌NspA基因疫苗可在小鼠体内诱导产生特异性抗体,并对机体有免疫保护作用;滴鼻可能是淋球菌NspA核酸疫苗的一个有效接种途径。     

黄热病和伤寒联合免疫接种的比较试验

为评价冻干黄热病17D(YF)减毒活疫苗和液体伤寒Vi多糖(ViPS)菌苗联合免疫的效果,作者将209名志愿者分成4组。A组单独接种YF疫苗,B组于不同部位同时接种YF疫苗和ViPS菌苗,C组接种以液体ViPS菌苗为稀释剂的YF疫苗(联合疫苗),D组单独接种ViPS菌苗。接种方法为一侧或双侧上臂三角肌区皮下注射,剂量均为0.5ml。对志愿者于接种疫苗当天进行体检和采血。接种后7天再次体检。以局部红晕和硬结大小(直径,cm)打分,0分(无反应),1分(0.5～1.5cm),2分(2～3cm),3分(>3cm)。以注射局部疼痛程度打分,0分(无痛感),1分(压痛),2分(影响运动),3分(影响睡眠)。据此计分,最大的平均局部症状总分(TLSS)为72。于接种疫苗后35天采血,用蚀斑抑制试验(PRT)测定抗YF病毒中和抗体,若蚀斑减少80％则认为血清阳性。用放射免疫试验(RIA)检测特异性抗Vi抗体,免疫后血清抗体水平增高0.15μg/ml以上,判为阳转。 结果表明,各组未见明显的全身症状,并且局部反应轻微,持续时间短。平均TLSS值:A组5.3,B组4.0(YF)/8.4(ViPS),C组9.5,D组6.2。统计学分析表明,与单独接种YF和ViPS疫苗相比,两种疫苗分部位同时接种或接种联合疫苗对局部和全身反应,疫苗的安全性和耐受性均无不良影响。     

DNA免疫能保护小鼠抵抗2型单纯疱疹病毒阴道内攻击

本文报道已构建的1型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白D(gD1)基因表达质粒pK-TS 153在小鼠中的免疫原性和对HSV-2粘膜攻击的抵抗作用.将DNA疫苗间隔3周肌肉接种体重为18～21g的雌性小鼠3次,每次接种含gDl质粒DNA 200μg的无菌盐水0.1ml,取第3次接种后3周的血清和用PBS冲洗的阴道分泌物,用ELISA测定抗体.对照组为年龄配对的未处理小鼠.结果从免疫的两组Swiss Webster小鼠和一组BALB/c小鼠的血清中均测到HSV特异性IgG,平均滴度为3.5～3.6log_(10).9只Swiss Webster小鼠中有7只阴道分泌物中测到HSV IgG,3组平均滴度分别为1.9、1.6和2.8log_(10).未从3     

流感HA和霍乱毒素B亚单位联合疫苗经鼻内、口腔或非肠胃途径免疫的比较

本文用不同剂量流感病毒A/PR/8/34HA疫苗和霍乱毒素B亚单位(CTB)联合免疫小鼠,比较了鼻内、非肠胃、腹腔或皮下接种小鼠4周后的抗体应答和用A/PR/8/34小鼠适应株鼻腔攻击3天后的保护作用的观察。作者首先检测呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgA抗体,发现鼻内接种比其它途径产生较高水平的抗病毒IgA抗体。同时,分析呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgG抗体,发现当CTB的剂量为0.1μg时,鼻内与非肠胃接种产生的IgG抗体水平相似;当     

DNA重组乙型肝炎疫苗的加强特性

最近,通过DNA重组技术已在酵母细胞中表达出HBsAg以生产安全的疫苗。了解能否应用酵母源性疫苗增高以前用血源疫苗免疫者的抗体水平甚为重要。作者首先用固相放射免疫法测定了约在3年前接种3针(0、1和6个月)血源疫苗的维也纳大学医学研究所工作人员的血清抗-HBs滴度。对抗体滴度低于100IU/L者用酵母源性疫苗作加强接种,每剂疫苗含20μgHBsAg。     

BVDV减毒或灭活疫苗诱导犊牛产生1型和2型抗体应答

用 8种含细胞致病性 ( CP)和非细胞致病性 ( NCP)牛病毒性腹泻病毒 ( BVDV)的商品疫苗 ( 1种疫苗为 1、2型病毒混合疫苗 ,其余为 1型 )分别肌肉注射 48头犊牛。减毒疫苗 ( ML V)组在 0日接种 1次 ,灭活疫苗组在0和 2 8日各免疫 1次 ,在 42日和 1 40日收集犊牛血清 ;34头犊牛在 1 40日用同种疫苗复免 1次 ,在 1 54和 1 6 8天收集血清。用微量病毒中和试验 ( VNT)检测血清抗体 ,并以此衡量疫苗的免疫原性。　　结果表明 ,免疫犊牛的抗体滴度在 42日最高 ,在 1 40日普遍降低。免疫 1型 BVDV疫苗的动物产生抗多种 1型病毒株的抗体 ,而 2…     

对单剂多部位皮内及肌肉注射蜱传脑炎疫苗的免疫应答

皮内接种与肌肉接种相比,可降低注射剂量50～90%,而免疫应答无明显减弱。作者对18名健康青年志愿者(平均年龄26岁)进行皮内(9人)或肌肉(9人)注射单剂同一批号疫苗,疫苗为0.2%氢氧化铝溶液0.5ml,内含0.35μg甲醛灭活蜱传脑炎病毒(TBEV)。A组于0和28天在两前臂掌侧和两小腿跖侧分别皮内注射1/4剂量,而B组在三角肌注射单剂疫苗。在0、7、10、14、21、