缺血预处理对兔主动脉阻断脊髓细胞凋亡的影响

在胸腹主动脉手术中常需阻断主动脉血流以便于手术顺利实施,这一过程可导致程度不同的脊髓缺血再灌注损伤,重者瘫痪。其病理基础一般认为是脊髓神经细胞坏死,近年相关研究证实,在脊髓缺血再灌注损伤中也存在脊髓细胞凋亡,特别是迟发性瘫痪与神经细胞凋亡密切相关,因而人们企图从细胞凋亡角度探讨保护脊髓功能的措施。研究表明,在心、脑等器官缺血再灌注实验模型中,缺血预处理(IPC)能明显抑制其细胞凋亡的发生,产生良好的器官功能保护作用。本实验旨在观察IPC对家兔主动脉阻断所致脊髓细胞凋亡的影响及其可能作用机制。     

缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓一氧化氮、后肢神经功能和肌电图的影响

目的　探讨缺血预处理 (IPC)对缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓功能和一氧化氮(NO)的影响。方法　 2 4只日本大白兔随机分为假手术组 (A组 )、缺血再灌注组 (B组 )和IPC保护组 (C组 ) ,每组 8只。分别于首次预处理即刻 (C 40 )、缺血即刻 (I0 )、缺血 45min(I45)、再灌注后 60min(R60 )和术后 7d处死动物前即刻 (R7d)采血检测血清和R7d脊髓组织NO的浓度。术后观察后肢神经功能的评分、后肢针电极肌电图 (EMG)和脊髓组织病理学的改变。结果　缺血再灌注损伤后B组血清NO浓度较缺血前和A、C组对应时点值显著升高 (P <0 .0 1)。C组R7d血清NO浓度明显低于其他时点及A组R7d测定值 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。B组脊髓组织NO浓度显著高于A、C组(P <0 .0 1)。B组后肢神经功能和脊髓病理学评分均显著性低于A、C组 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ,其后肢EMG亦较C组有显著性病理改变 (P <0 .0 1)。结论　IPC对家兔主动脉阻断后脊髓缺血再灌注损伤有良好的保护作用 ,其保护作用机制与抑制NO的生成有关。     

缺血后处理和缺血预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

缺血预处理及后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤，但对脊髓缺血再灌注损伤的作用有待进一步探讨。本研究拟观察缺血预处理、缺血后处理及二者联合应用对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用。     

缺血预处理对犬脊髓损伤及热休克蛋白70表达影响的研究

目的评价缺血预处理对犬脊髓损伤及热休克蛋白70表达的影响。方法41条杂种犬随机分成假手术组6只、预处理组21只、对照组14只。预处理组主动脉阻断6min后开放6min,反复2次,之后阻断35min;对照组主动脉阻断35min。术后进行神经功能评分,检测脊髓组织中热休克蛋白70表达。结果在再灌注后6h、24h预处理组热休克蛋白70于胞质和胞核均有表达,且强于对照组;而且神经功能评分预处理组高于对照组。在再灌注后7d预处理组神经功能评分无明显改变,且仍见热休克蛋白70表达。结论缺血预处理可以增加脊髓的缺血耐受;热休克蛋白70在胞质和胞核中表达可能在缺血耐受中起到一定的作用。     

胸降及胸腹主动脉外科手术中的脊髓保护

在胸降及胸腹主动脉外科手术中,由于主动脉阻断可引起脊髓损伤这一不可避免的并发症,其发生率高达4%～32%[1]。Ｓｖｅｎｓｓｏｎ[2]总结了影响主动脉疾病手术后发生脊髓损伤的因素:(1)脊髓缺血的时间及程度;(2)主动脉修复后没能重建脊髓血运;(3)生化介导的脊髓再灌注损伤。现就脊髓损伤的有关问题综述如下。1.根髓动脉(ａｒｔｅｒｉａｒａｄｉｃｕｌａｒｉｓｍａｇｎａ,ＡＲＭ)的识别及脊髓血供的重建:脊髓的血供主要来自于一些节段性动脉,这些动脉起源于自左锁骨下动脉开口以下至腹主动脉分叉处之间的主动脉,包括胸部的起源于Ｔ3或Ｔ4～Ｔ1…     

缺血预处理对缺血脊髓微循环影响的实验研究

目的 探讨缺血预处理（IPC）对缺血损伤脊髓的保护作用及其相关机制.方法 48只健康新西兰大白兔随机分为缺血预处理组（IPC组）和缺血组,应用腹主动脉夹闭法建立脊髓缺血模型.观察两组脊髓组织缺血前、缺血40min及再灌注后2、8、24、72 h内皮素-1（ET-1）、血栓素A2（TXA2）与前列环素（PGI2）含量,并观察脊髓组织病理形态学改变及双后肢神经功能评分.结果 IPC组各时间点ET-1含量、TXB2/6-keto-PGF1α比值均显著低于缺血组（P＜0.05）.两个时间点上IPC组后肢神经功能评分明显高于缺血组（P＜0.001、0.01）,病理学累积评分明显低于缺血组（P＜0.001）.结论 IPC对主动脉阻断所致脊髓缺血再灌注损伤有良好的保护作用,抗“无再灌流”作用可能是其保护作用的重要机制之一.     

远处缺血预处理减轻肾上腹主动脉阻断后肾脏损伤的实验研究

急性肾功能衰竭 (acuterenalfailure, ARF)是腹主动脉瘤破裂修补术及肾上腹主动脉瘤术后的严重并发症。经典的缺血预处理 (ischemicpreconditioning, IPC)及远处缺血预处理(remoteischemicpreconditioning, RIP)作为一种内源性抗缺血再灌注损伤 (ischemiareperfusioninjury, IR     

不同高压氧预处理方案对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同高压氧预处理方案对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响.方法 新西兰大白兔45只,月龄4～5月,体重2.0～2.5 kg,随机分为5组:假手术组(S组,n=5)开腹剥离左肾动脉下段腹主动脉但不阻断血流,20 min后关腹;脊髓缺血再灌注组(IR组,n=10)采用左肾动脉下段腹主动脉阻断法建立脊髓缺血再灌注损伤模型,缺血20 min后恢复灌注;不同方案高压氧预处理组(H_(1～3)组,n=10)分别接受连续5 d(H_1组)、10 d(H_2组)或20 d(H_3组)高压氧预处理(2.5 ATA,吸入氧浓度100%),1h/d,末次高压氧预处理结束后24 h时,建立脊髓缺血再灌注模型.再灌注48 h时,采用修正Tarlov评分,评价后肢运动功能.然后取L_5脊髓节段,分别行HE、TUNEL和nuoro-Jade B染色,计数脊髓正常神经元、凋亡神经元和变性神经元.结果 与S组比较,IR组后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数降低(P<0.01);与IR组比较,H_1组和H_2组后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数升高,凋亡神经元计数和变性神经元计数降低(JP<0.01),H_3组各指标差异无统计学意义(P>0.05);H_1组和h_2组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与H_1组和H_2组比较,H_3组后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数降低,凋亡神经元计数和变性神经元计数升高(P<0.01).结论 连续5 d或10 d高压氧预处理(2.5 ATA,吸入氧浓度100%)可减轻脊髓缺血再灌注损伤;而连续20 d高压氧预处理无神经保护作用.     

肢体缺血预处理对兔颈髓慢性缺血后再灌注损伤的影响

目的：探讨肢体缺血预处理对兔颈髓慢性缺血后再灌注损伤的影响及其机制。方法：建立兔颈髓慢性压迫损伤模型，随机分为实验组和对照组。实验组在脊髓减压再灌注前给予肢体缺血预处理，对照组不做预处理。两组兔在减压前和减压后2h、8h、24h，7d、21d分别进行后肢神经功能评分。在减压后即刻、0．5h、1h和以上时间点分别进行脊髓血流测定。处死动物取脊髓(C1～T1)进行组织病理学检查。结果：实验组于再灌注8h后神经功能评分明显好于对照组。实验组脊髓组织丙二醛含量于再灌注8h后显著低于对照组。两组再灌注后脊髓血流均显著下降，实验组优于对照组。病理学检查示对照组神经元呈缺血改变，白质水肿、脱髓鞘；实验组病理改变轻微。实验组热休克蛋白70表达阳性，对照组为阴性。结论：肢体缺血预处理对脊髓慢性缺血后的再灌注损伤具有明显保护作用。     

缺血预处理对肺缺血再灌注损伤的影响

目的观察缺血预处理（ＩＰＣ）对肺缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）损伤的影响。方法建立兔单肺原位热缺血再灌注损伤模型。３０只兔分Ｉ／Ｒ组、ＩＰＣ组和对照组。对比观察各组平均动脉压、动脉血氧分压、肺组织１２５Ｉ标记牛血清白蛋白漏出量、肺湿干重比、髓过氧化物酶活性。结果经９０分钟缺血１８０分钟再灌注后,ＩＰＣ组肺组织１２５Ｉ标记牛血清白蛋白漏出量、肺湿干重比、髓过氧化物酶活性低于Ｉ／Ｒ组（Ｐ＜０．０５）,平均动脉压、动脉血氧分压高于Ｉ／Ｒ组（Ｐ＜０．０５）。结论ＩＰＣ能减轻肺Ｉ／Ｒ导致的肺毛细血管通透性增高、中性粒细胞浸润,减轻肺Ｉ／Ｒ引起的平均动脉压和动脉血氧分压的下降程度,表明ＩＰＣ能减轻肺Ｉ／Ｒ损伤。     

Ischemic Preconditioning to Prevent Lethal Ischemic Spinal Cord Injury in a Swine Model

Objective: Paraplegia is a serious complication of thoracic and thoracoabdominal aortic operations and is the result of ischemic spinal cord injury induced by low perfusion pressure during cross-clamping of the aorta. Ischemic preconditioning (IPC) of the heart or brain with reversible sublethal ischemic injury induces resistance to subsequent lethal ischemia. The aim of this study is to investigate whether ischemic tolerance can be induced by IPC of the spinal cord in a swine model. Study Design: The animals were randomly divided into three groups: the sham group (n = 3), control group (n = 6) and IPC group (n = 8). In the sham group, we performed a left thoracotomy without any ischemic injury. In the IPC group, the swine received a reversible ischemic spinal cord injury by aortic clamping for 20 min, whereas in the control group, no aortic cross-clamping was performed. Forty-eight hours later, the animals in both the IPC and control groups underwent aortic clamping for 30 min. Neurological examination was done 24 h later, and then the animals were euthanized for histopathology and a malonedialdehyde spectrophotometry assay of the spinal cord tissue. Results: A statistically significant difference in neurological outcome was observed between the control and IPC groups at 24 h after ischemic injury. The incidence of paraplegia and severe paresis was 100% in the control group and 62.5% in the IPC group (p =. 028). Between control and IPC groups, there was no statistically significant difference in histopathology and only a borderline statistical difference in the malonedialdehyde assay of the ischemic spinal cord (p =. 0745). Conclusion: In this study, IPC induced protection against a 30-min ischemic insult of the spinal cord, although complete recovery was not achieved (standing up or walking). We expect that combining this IPC with other existing protective methods might lead to a synergistic effect, which warrants further investigation.     

低温对缺血预调心肌保护作用的影响

目的:为确定体外循环心脏直视手术时应用"缺血预调"(IPC)的可能性,分别在两部分实验中研究了(1)IPC对长时间低温缺血心肌的保护作用.(2)IPC期间心肌低温对IPC诱导心肌保护作用的影响.方法:建立离体灌注的大鼠工作心脏模型,稳定后施行不同的预调方案,进而缺血停搏.在预调处理前和缺血再灌注后两次测定工作心脏的主动脉流量(AF).在第一部分研究中,离体心脏在18℃低温条件下缺血60分钟,IPC方案为1b组:5分钟缺血+5分钟再灌注(5×1);1c组:5分钟缺血+5分钟再灌注,反复2次(5×2);1d组:5分钟缺血+5分钟再灌注,反复3次(5×3).1a组为对照组,缺血前不施行预调处理.在第二部分研究中,离体心脏在37℃条件下常温缺血15分钟,实验组(包括6组:Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ和Ⅶ组)的预调方案均为5×1,但IPC期的心肌温度不同,其中:Ⅱ组为37℃,Ⅲ组32℃,Ⅳ组27℃,Ⅴ组22℃,Ⅳ组17℃,Ⅶ组12℃.Ⅰ组为对照组,缺血前不施行预调处理.结果:在第一系列研究中,对照组的主动脉流量(AF)仅恢复到缺血前的2.7%.预调各组的AF恢复程度显著提高,与对照组比较1b组为22%(P＜0.01),1c组为34%(P＜0.0,1d组为14,9%(P＜0.05).5×2的预调方案具有最强的心肌保护作用.在第二系列研究中,预调期温度高于22℃的各组AF恢复程度显著提高.其中Ⅱ组为76%,Ⅲ组70%,Ⅳ组71%,Ⅴ组62%.而对照组AF恢复不足20%(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与对照组比较,P＜0.05),Ⅵ组和Ⅶ组的AF恢复值与对照组比较差异均不显著,表明IPC期心肌温度低于22℃时,无心肌保护作用.结论:无论在常温或低温(＞22℃)条件下进行缺血预调均有显著的心肌保护作用,IPC有可能应用于改进体外循环合并中度低温时心脏手术的心肌保护.     

肾缺血预处理对肾小管上皮细胞内钙超载的影响

目的：通过观察肾缺血预处理（IPC）和缺血再灌注（I/R）过程中血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）含量的变化,进一步探讨肾IPC的保护机制。方法：将雄性SD大鼠88只随机分为11组,摘除右肾,分离并夹闭左肾动脉制备肾I/R和缺血预处理后缺血再灌注（IPC-I/R）动物模型。Ⅰa～Ⅴa（I/R）组为缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Ⅰb～Ⅴb（IPC-I/R）组为缺血预处理后缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Sham组为假手术组。比色法测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、SOD、MDA含量,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞内[Ca^2＋]i水平,TUNEL原位标记法观察细胞凋亡情况。结果：除0h组外,IPC-I/R与I/R各组比较肾功能损害、细胞凋亡均明显减轻,SOD升高,MDA降低,[Ca^2＋]i水平下降;两种模型中均以再灌注24h组损伤最严重,Scr、BUN、MDA和[Ca^2＋]i水平最高,SOD水平最低,细胞凋亡最多;再灌注24h前损伤呈加重趋势,24h后逐渐减轻;组间比较,[Ca^2＋]i与血清SOD水平呈负相关,与MDA呈正相关。结论：肾IPC可以减轻I/R过程中膜脂质过氧化损伤和细胞内钙超载,从而减轻肾脏形态及功能损伤;膜脂质过氧化和细胞内钙超载相互作用,共同发挥对肾I/R损伤的保护作用。     

缺血预处理对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IP)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。 方法　采用SD大鼠原位肝移植动物模型 ,供肝冷保存时间 10 0min ,无肝期 2 5min。 64只SD大鼠随机均分成两组 :对照组 ,获取供肝前仅以肝素生理盐水经门静脉灌注 ;IP组 ,获取供肝前阻断肝门血供 10min ,再灌注 10min ,然后再以肝素生理盐水经门静脉灌注。每组受体的一半 (n =8)用于观察存活率 ,另一半 (n =8)用于移植肝脏再灌注 2h后取血及肝脏检测。结果　IP组的 1w存活率、胆汁分泌量、抗氧化酶活力、血清NO水平均明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,血清ALT、AST、LDH、TNF及肝组织中的过氧化产物含量均明显低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,组织的病理改变也轻于对照组。结论　IP能够提高血清NO水平 ,降低血清TNF含量 ,对大鼠移植肝脏的缺血再灌注损伤具有保护作用     

常温缺血预处理对幼兔未成熟心肌的保护作用

目的研究常温缺血预处理(IP)对幼兔未成熟心肌的保护作用。方法将24只幼兔分为四组。组1IP1次;组2IP2次;组3IP3次;对照组。应用Langendorff心脏灌注方法,对3～4周龄幼兔离体心脏实施不同次数的5分钟缺血、5分钟再灌注的常温IP,常温缺血45分钟,再灌注30分钟。于平衡灌注末、缺血前、再灌注3分钟、5分钟、10分钟、20分钟和30分钟分别测定左心室发展压(LVDP)、左心室最大上升及下降速率(±dp/dtmax),再灌注末测定心肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果再灌注30分钟时,组1和组2LVDP、+dp/dtmax恢复率显著高于对照组（P<0.05,P<0.01）,组3LVDP、±dp/dtmax的恢复率与对照组比较差别无显著性意义。再灌注末组1、组2和组3心肌ATP含量显著高于对照组（P<0.05）。组2MDA含量显著低于组1、组3和对照组（P<0.05）。结论IP对未成熟心肌具有保护作用,其中2次IP的保护作用最好,而3次的保护作用减弱,表明IP对未成熟心肌的保护作用具有饱和效应和累计现象。     

脊髓损伤细胞内Ca^2＋变化及其与脊髓神经功能损害的关系

目的：观察脊髓损伤（ＳＣＩ）后细胞内Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）的动态变化，探讨其与脊髓神经功能损害的关系。方法：Ａｌｅｎ＇ｓ法致伤大鼠脊髓，于伤后１、４、８、２４、７２和１６８小时，采用原子吸收光谱分析和Ｌａ３＋阻断技术测定伤段脊髓［Ｃａ２＋］ｉ含量，参照Ｋｏｎｒａｄ的方法记录脊髓运动诱发电位（ＭＥＰ），应用斜板试验评价大鼠的运动功能。结果：ＳＣＩ后伤段脊髓［Ｃａ２＋］ｉ显著升高（Ｐ值＜０．０５或０．０１），与脊髓ＭＥＰ的变化和大鼠运动功能的损害呈显著相关关系。结论：ＳＣＩ后，伤段脊髓［Ｃａ２＋］ｉ超载可能在ＳＣＩ的病理发展机制中有重要意义。     

应用激光多普勒血流仪监测兔急性脊髓缺血损伤后腰髓血流动力学变化及病理学观察的研究

目的：应用激光多普勒血流仪监测兔脊髓缺血再灌流后腰髓血流的动态性变化，讨论腰髓血流的动力学特点。方法：通过阻断腹主动脉，造成脊髓腰尾段缺血。按缺血和再灌流各时间段分别连续测定腰髓血流变化。取缺血前、缺血４０分钟、再灌流４小时局部脊髓行组织病理和透射电镜检查。结果：在缺血４０分钟腰髓局部血灌流量迅速下降至基线值的－８１．５７％（Ｐ值＝２．０１Ｅ－１７）。再灌流时，局部血流迅速增高并超过基线水平。再灌流１０分钟，局部血灌流量与基线的百分比变化值为５７．９８％（Ｐ值＝３．３Ｅ－０７）。随后逐渐降低，再灌流１小时后，局部血灌流量基本恢复基线水平（３．９７％，Ｐ值＝０．５５７８９９）。以后血灌流量低于基线水平，出现缺血后延迟性低灌流。直至再灌流４小时（－２３．５％，Ｐ值＝１．８４Ｅ－０３）低灌流保持相对稳定，血流未见恢复。缺血４０分钟，有明确病理学改变；再灌流４小时后，病理学改变明显进一步加重。结论：上述结果对于脊髓缺血性损伤后继发性功能障碍提供了理论依据。     

脊髓损伤大鼠脊髓组织的病理形态学观察

目的：研究脊髓损伤（SCI）用高压氧（HBO）处理后脊髓的病理学变化。方法：用SD大鼠复制SCI模型，0．1MPa和0．25MPaHBO处理后，取损伤脊髓作HE染色。结果：正常对照组脊髓结构完整，细胞形态正常，分布均匀，胞膜，胞核正常，组织间隙正常，单纯损伤组示组织出血，疏松水肿，细胞空泡变性，神经纤维溶解，消失；处理后，0．25MPaHBO组及0．25MPaHBO＋激素（L，M）组脊髓恢复最明显，组织水肿，细胞空泡变性减轻，细胞形态恢复，结构排列完整，结论：HBO治疗可明显阻止或减轻脊髓损伤的病理变化，有利于脊髓功能的恢复。     

缺血预适应对老年大鼠缺血-再灌注心肌的影响

目的探讨缺血预适应（ischemic preconditioning,IPC）对老年大鼠缺血-再灌注损伤（I/R）后心肌的影响。方法取Wistar大鼠56只,其中21~23月龄（老年鼠）和4~5月龄（青年鼠）各28只,建立离体心脏Langendorff灌注模型,按随机数字表法分为7组（每组8只）：青年对照组、青年I/R组、青年IPC组、老年对照组、老年I/R组、老年IPC组、老年强化IPC组。对照组采用全心灌流90 min,不做任何处理;I/R组采用心脏平衡灌流30min后,缺血30 min,再复灌30