斑点免疫渗滤技术ICS金标法快速测试试剂盒使用评估分析

目的 探讨斑点免疫渗滤技术(dot immunofiltration assay，DIFA)在临床上推广应用的可行性。方法 用华美和ORTHO ELISA试剂盒及快速测试试剂盒分别检测卫生部抗-HCV血清盘和本中心的无偿献血样本。结果 试剂盒对血清盘测试的结果特异性和符合率达90％以上；灵敏度、特异性和符合率同华美试剂完全一致，灵敏度略低于ORTHO试剂。结论 该试剂同ELISA国产和进口试剂盒相比均具有较高的灵敏度、特异性和符合率，可以在临床上推广应用。     

五种国产与进口小鼠病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较研究

目的评价国产小鼠病毒抗体ELISA检测试剂盒。方法选择国产与进口小鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、肝炎病毒(MHV)、仙台病毒(SV)、腺病毒(MAV)、细小病毒(MPV)ELISA抗体检测试剂盒,进行敏感性、特异性、精密性、稳定性、可信度试验比较。结果国产与进口试剂盒:同种试剂盒之间灵敏度相差最低为2倍,差异显著(P<0.05),最高为16倍,差异极显著(P<0.01);特异性试验显示每种试剂盒,与其他4种病毒均无交叉反应;精密性试验显示5种试剂盒批内平均变异系数均小于10%;稳定性试验显示5种试剂盒相对偏差均小于25%;分别选择已知36份小鼠血清进行检测,国产和进口LCMV、MHV、SV、MPV符合率均为100%;国产MAV符合率为86.1%,进口MAV符合率均为100%,二者之间差异极显著(P<0.01)。结论除国产MAV试剂盒敏感性、可信度低于进口外,国产LCMV、MHV、SV、MPV试剂盒与进口同种试剂盒相比,在敏感性、特异性、精密性、稳定性和可信度方面均良好。     

量子点快速检测弓形虫IgG抗体方法的建立及初步应用

目的 建立一种简便、快速的人弓形虫(Toxoplasma,TOXO)IgG抗体检测新方法,并在临床初步应用.方法 应用TOXO抗原包被羧基磁珠作为固相载体,量子点标记羊抗人IgG作为检测抗体,建它TOXO IgG检测方法,同时优化检测条件;对255份临床血清标本进行了检测,并与意大利DiaSorin TOXO IgG ELISA试剂进行比较.结果 检测最佳条件为:抗原包被浓度100 μg/ml,量子点标记二抗工作浓度为1∶200,待测血清稀释度为1∶100.本方法的诊断敏感性、特异性分别为93.3%、96.7%,与进口试剂盒的总符合率为96.5%.结论 基于量子点标记及免疫磁珠技术检测TOXOIgG,操作简便、快速,具有较高的特异性、敏感性和有较好的临床应用价值.     

抗核抗体谱IgG检测酶联免疫吸附法试剂盒的临床试验

目的根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》要求,对由欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司生产的酶联免疫吸附法(ELISA)二类体外诊断试剂盒中抗核抗体谱IgG检测试剂盒进行临床验证试验,以评价该试剂盒的临床应用性能。方法收集2017年11月至2018年3月本院83例系统性红斑狼疮、夏普综合征(MCTD)、干燥综合征、进行性系统性硬化症、皮肌炎/多肌炎等患者有效血清样本及32例有效同源血浆,对照组为健康人群,其中血清27名、血浆26名。使用欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司拟注册的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)分别与苏州浩欧博生物医药有限公司、INOVA Diagnostics,Inc.及EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的酶联免疫吸附法检测系统检测ANA谱,通过计算符合率和Kappa检验评价分析拟注册试剂盒与其他3种试剂的一致性。结果待评价试剂盒(抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)与对比试剂盒,包括[对比试剂盒1[抗核抗体筛查试剂盒(ELISA)]/对比试剂盒2[抗核糖体P蛋白抗体检测试剂盒(ELISA)]检测不相符的样本,以第三方试剂盒EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)的检测结果为准,最终待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂的血清检测阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%,Kappa值为1.00。待评价试剂盒检测血清与同源血浆检测阳性符合率为100%,阴性符合率为97%,总符合率为98%,Kappa值为0.96。结论待评价试剂盒经过临床试验验证,待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂血清及血浆检测结果符合性良好,具备应用性能。     

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

目的评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果,探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景。方法以Ni-NTA Agarose和割胶电渗两步纯化法,获取弓形虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG,以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板,分别检测弓形虫急性和慢性感染血清,评价试剂盒检测的敏感性和特异性。结果经Ni-NTAAgarose和割胶纯化,得到了纯度为95.86%的弓形虫多表位重组可溶性抗原。以3!g/ml的抗原浓度包被ELISA微孔板,对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测。结果检测小鼠血清141份,其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份,检测体系的敏感性为88.88%,特异性为91.67%,一致性为89.36%。检测兔血清24份,其中急性感染弓形虫兔血清18份,正常兔血清6份,阳性血清检出率为94.4%,总一致性为91.5%。结论以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清,又可以检测弓形虫慢性感染血清,具有一定的应用前景。     

国产和进口HIV酶联免疫试剂盒精确性检测比较

目的通过检测东莞市中心血站购进的进口及国产HIV抗体酶联免疫试剂盒的精确性,以评价其质量及实用性。方法对所购进口、国产试剂盒每批次进行随机抽样,采用国家标准品的考核血清盘共47个样本进行检测,计算每批次的特异性、灵敏度、精密度等指标,计算其批间变异系数并进行比较分析。结果进口抗-HIV诊断试剂盒有3个批号的特异性为95％,7个为100％;国产抗-HIV诊断试剂盒,2个批号的特异性为95％,8个为100％;灵敏度全部为100％,两者比较没有统计学差异。采用10批次的进口和国产试剂盒平行检测47个血清盘标准样本,比较其吸光度值的变异系数,有统计学差异。结论第四代进口抗-HIV诊断试剂盒与国产比较,都符合国家有关规定,第四代进口试剂检测灵敏度和特异性并没有明显优势,但其总体稳定性优于国产试剂。     

第四代人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂特异性及灵敏度的比较及其意义

目的比较和分析国产、进口第四代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体诊断试剂的特异性及灵敏度。方法用2种第四代HIV诊断试剂分别检测8093份献血者标本和HIV-1 p24抗原国家参考品,并进行分析和评价。结果试剂A的阴性符合率为100%(8085/8085),阳性符合率为100%(8/8),总符合率为100%(8093/8093),试剂B的阴性符合率为99.94%(8080/8085),阳性符合率为100%(8/8),总符合率为99.94%(8088/8093)。结论国产第四代HIV诊断试剂在特异性及灵敏度与进口同类产品具有较高的一致性,可以同时检测HIV1/2抗体和HIV-1 p24抗原,可降低成本。     

实验小鼠豚鼠弓形虫抗体ELISA试剂盒的研制及应用

本文研究了快速、特异性强、敏感性好的弓形虫抗体ELISA诊断试剂盒。IHA、IFAT和ELISA平行检测3份阳性血清和30份阴性血清，符合率均为100％。IHA和ELISA检测61份小鼠和84份豚鼠血清，结果表明ELISA法敏感于IHA。用本ELISA诊断试剂共检测了319份血清，小鼠阳性率为0．67％．豚鼠为2.22％．说明弓形虫在实验小鼠、豚鼠中感染率报低。     

无偿献血者HBsAg筛检方法与试剂价值评价

目的: 评价无偿献血者HBsAg筛检方法与试剂筛检价值. 方法: 以卫生部临床检验中心HBsAg临床科研血清盘样本60份及随机抽取200份西安市无偿献血者血清为评价样本;用国产试剂条法、国产ELISA试剂及进口ELISA试剂对评价样本作盲法筛检;以卫生部临床检验中心血清盘及献血者HBsAg阳性并经中和试验证实者为金标准,用四格表法计算评价真实性及可靠性指标,并对ELISA法cut-off值的合理性进行评价. 结果: 国产艾康试剂条、国产英科新创ELISA与进口意大利富源ELISA试剂的灵敏度分别为62%,86%,100%;特异度分别为99%,100%,96%;尤登指数分别为0.61,0.86,0.96;3种试剂的重复符合率均为100%;国产英科新创规定的cut-off值较合理,进口意大利富源HBsAg ELISA试剂盒cut-off值规定值偏小. 结论: 3种方法与试剂的灵敏度以进口意大利富源试剂盒最好,但特异度比国产试剂差,3种试剂的重复性均好,3种试剂联合筛检可保证输血的安全性,试剂条法灵敏度虽差,但特异度达99%,在无偿献血者的粗筛快检中可降低血液报废率,仍有其临床应用价值. 如能使国产HBsAg筛检试剂灵敏度提高,进口HBsAg筛检试剂特异度增高,将使临床应用价值更大.     

三种抗-HCV检测试剂盒对无偿献血者筛检价值评价

目的：评价3种抗．HCV筛检试剂对无偿献血者的筛检价值。方法：以卫生部临床检验中心抗-HCV临床科研血清盘标本50份为评价标本，分别用快速试剂法，国产ELISA试剂及进口ELISA试剂对评价标本作盲法检测，以卫生部临床检验中心血清盘标本所提供的阴性和阳性结果为金标准，用四格表法计算出评价真实性及可靠性指标，并对ELISA法的cut-off值的合理性进行评价．结果：快速试剂法，国产英科新创ELISA试剂盒与进口傲拓ELISA试剂盒的灵敏度分别为48％，88％，76％，特异度均为100％，准确度分别为74％，94％，88％．约登指数分别为0．48，0．88，0．76．3种试剂盒的重复符合率均为100％．国产英科新创ELISA试剂盒规定的cut-off值是合理的，而进口傲拓ELISA试剂盒规定的cut-off值太高．结论：3种试剂盒的灵敏度与准确度以国产ELISA试剂盒为最好，3种试剂盒的重复性均好，因此使用2种优选的国产ELISA试剂盒对血液进行联合筛检，既可以保证输血的安全性，又可以减低筛检成本．     

弓形虫(TOXO)IgG抗体ELISA诊断试剂盒的研制

目的用间接ELISA法检测人弓形虫(TOXO)IgG抗体进行了优化改良，建立了快速法诊断TOXO-IgGELISA试剂盒。方法用自己生产的原材料采用间接ELISA法研制TOXO-IgG检测试剂，对随机选择的352份临床孕妇血清标本进行了检测，并与德国DIMATOXO-IgGELISA试剂进行比较。结果自制试剂盒敏感性、特异性和诊断指数分别为91．4％，94．6％和186．0％，两者符合率为94．3％。结论本试剂盒的质量与国外商品试剂相似，有较好的特异性和敏感性，可广泛应用于临床优生优育检测。     

破伤风抗体(IgG)定量检测试剂盒(酶联免疫法)使用评价

目的 应用破伤风抗体(IgG)定量检测试剂盒(酶联免疫法),对健康人群进行抗体水平检测,与标准法检测进行比较,评价试剂盒的灵敏度和特异性.方法 根据试剂盒说明书,采用双盲法检测300份健康人血清,依照标准品绘制标准曲线,计算破伤风抗体浓度,通过与标准检测方法比较,计算敏感性、特异性、相关性等指标.结果 通过检测标准品,计算线性回归方程y=7.7489x-0.0018,r=0.99,国产试剂敏感性为94.1%,特异性为96.8%,约登指数为0.909,阳性预测值为98.5%,阴性预测值为88.5%.相关性分析结果r=0.987798,P<0.05,标准法测定结果与国产试剂盒测定结果之间有显著的正相关.结论 该国产试剂操作规范,简单快捷,不受条件限制,利于大量标本的快速检测,对该病的临床诊断、流行病调查,提供了一种更为简捷精确切实可行的检测手段.     

风疹病毒特异性IgM诊断试剂盒的研制和临床应用

目的 :建立风疹病毒特异性IgM诊断试剂的技术方法并应用于临床。方法 :对传统的间接ELISA方法进行了改良 ,定性检测人血清中风疹病毒IgM。结果及结论 :本法克服了类风湿因子 (RF)和特异性IgG对实验的干扰 ;与HSV 1、HSV 2和HCMV抗原无交叉反应 ;具有快速、敏感、特异性强、重复性好等优点。在 16 5例临床可疑风疹病例中检出阳性 142例 ,用进口风疹病毒捕获法试剂盒检出阳性 133例 ,阴阳符合率为 84.0 %。     

豚鼠弓形虫抗体ELISA检测方法的建立及应用

目的 建立以弓形虫重组抗原的豚鼠弓形虫抗体ELISA方法,并进行初步应用.方法 根据重组抗原的工作浓度包被酶标板,确定酶标二抗浓度,对方法的特异性、灵敏度、稳定性和重复性等进行测试.结果 确定酶标二抗最佳稀释度为1∶8000;与豚鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCM)、仙台病毒(SV)、肺炎病毒(PVM)及呼肠孤3型(Reo3)阳性血清均无交叉反应;对已知阳性血清的检测上限可达1∶2560;6个月的稳定性试验显示A490值的相对偏差均小于15％;批内变异系数(CV)5.7％ ～ 9.5％,批间变异系数(CV)1.9％～9.0％;对182份样本的检测表明豚鼠弓形虫抗体阳性率为7.14％(13/182),与IFA检测结果的符合率为100％,与商品化试剂盒的阳性符合率为92.3％,阴性符合率为100％.结论 建立的豚鼠弓形虫重组抗原ELISA检测方法可用以弓形虫抗体的常规检测.     

白喉抗体(IgG)定量检测试剂盒(酶联免疫法)使用评价

目的 应用白喉抗体(IgG)定量检测试剂盒(酶联免疫法),对健康人群进行抗体水平检测,与标准法检测进行比较,评价试剂盒的灵敏度和特异性.方法 根据试剂盒说明书,采用双盲法检测300份健康人血清,依照标准品绘制标准曲线,计算白喉抗体浓度,通过与标准检测方法比较,计算敏感性、特异性、相关性等指标.结果 通过检测标准品,计算线性回归方程y=8.1119x+0.0358,r=0.9987,敏感性为98.2%,特异性为99.3%,约登指数为0.97,阳性预测值为99.4%,阴性预测值为97.8%.相关性分析结果r=0.992676,P<0.05,标准法测定结果与国产试剂盒测定结果之间有显著的正相关.结论 该国产试剂操作规范,简单快捷,不受条件限制,利于大量标本的快速检测,对该病的临床诊断、流行病调查,提供了一种更为简捷精确切实可行的检测手段.     

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 ,有待进一步改进     

两种丙肝抗体试剂用于献血员人群筛查的价值分析

目的通过对2种丙型肝炎试剂检测的比较,选择适合血站工作特点的HCV筛查试剂。方法采用国产和进口ELISA法试剂盒试剂对1687例无偿献血者的HCV进行筛查,并将2种试剂的阳性率及性价比进行比较。结果经过比较,国产试剂盒检测阳性率为1.42%,而进口试剂盒检测阳性率为1.65%,进口试剂盒的阳性率高于国产试剂盒的阳性率,但是两者差异无明显的统计学意义(χ2=0.45,P>0.05);经过价格比较发现国产试剂盒的C/E值为2.34,而C进口试剂盒为22.45,差异存在明显的统计学意义(P<0.01)。结论国产与进口ELISA法筛查HCV均有较高的灵敏度和特异性,但国产试剂性价比较高,适合于血站HCV的筛查工作。     

两种胎儿纤维连接蛋白检测试剂盒的比较研究

目的:评估国产和进口的两种胎儿纤维连接蛋白(fetal fibronectin,fFN)检测试剂盒在早产快速诊断的一致性?方法:招募前来产科就诊的18~40岁?孕周在22~35周的孕妇245例,对其宫颈阴道分泌物分别予以两种fFN试剂盒检测?结果:以进口试剂盒作为标准,国产试剂盒的灵敏度为97.37%,特异度为96.45%,阳性预测值为92.50%,阴性预测值为98.79%,两者的Kappa一致性检验为Kappa = 0.924 (P < 0.001)?结论:进口与国产的fFN检测试剂盒在诊断早产方面具有高度一致性;国产fFN检测试剂盒适用于临床上进行早产诊断?     

重组弓形虫P30抗原诊断弓形虫病的初步探讨

为探讨重组弓形虫P30抗原（rP30）对弓形虫病的诊断价值,将rP30包被于酶标反应板微孔,用常规ELISA检测血清抗体。结果4例染色试验阳性血清,抗-rP30 IgG全部阳性,阳性符合率为 100％;27例虫体IgG/IgM抗体阳性血清中,22例rP30I-ELISA阳性,符合率为85.2％;100例门诊病人和50例献血员血清的阳性检出率分别为9.0％和8.0％。说明rP30检测弓形虫病患者血清具有一定的敏感性和特异性,可望替代天然的弓形虫抗原用于弓形虫病的诊断。     

应用丝虫特异性IgG4检测试剂盒在湖南省消除丝虫病地区的监测

目的探讨丝虫特异性IgG4抗体ELISA检测试剂盒的敏感性和特异性,评价其在消除丝虫病地区监测的应用价值。方法应用山东省寄生虫病防治研究所和深圳市康百得生物科技有限公司联合研制的丝虫特异性IgG4抗体ELISA检测试剂盒,盲法检测滤纸干血样本共521份,并与病原学检查方法进行平行对照。结果检测原班氏微丝蚴血症转阴者76人,丝虫特异性IgG4抗体全部阴性,病原学血检亦未发现微丝蚴血症者;检测消除丝虫病地区居民69人,丝虫特异性IgG4抗体阳性2例,阳性率为2.90%,病原学血检未发现微丝蚴血症者。检测基本消除丝虫病后地区出生儿童143人和非流行区儿童200人,丝虫特异性IgG4抗体均为阴性;检测慢性丝虫病及其他寄生虫病病人33例,未检出丝虫特异性IgG4抗体阳性者;对血吸虫病、并殖吸虫病、华支睾吸虫病等未见交叉反应。结论丝虫特异性IgG4检测试剂盒敏感性和特异性较高,可以用于消除丝虫病地区监测的筛查和防治效果评价。