猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染猴模型的建立

目的：在先前已建立了模拟人艾滋病感染者和患者的猴免疫缺陷病毒（ＳＩＶ）急性感染猴和中、晚期猴艾滋病（ＳＡＩＤＳ）模型的基础上,再摸索建立ＳＩＶ慢性感染猴模型,以期为抗区滋病药物的体内药效学介研究提供更合适的动物模型。方法：用ＳＩＶｍａｃ２５１感染恒河猴１７只,追踪观察其临床表现,体征变化,病程进展,血浆和全血病毒症规律,淋巴细胞亚群ＣＤ４的动态等。结果：临床体征有特征性,病程较长,１年内死亡２只（     

PCR在猴艾滋病模型中检测SIV基因的应用

我们设计了两对特异的聚合酶链式反应(PCR)扩增SIV基因的引物，建设了SIV感染的PCR基因扩增检测法，实验结果表明，PCR方法可检出0．01Pg水平的SIV基因．PCR法、检测与病毒分离相比较，PCR检查敏感性高，特异性强，特别是恒河猴实验感染后期，病毒分离多为阴性，而PCR检查均获阳性结果。PCR基因扩增检测法应用于猴艾滋病模型的研究．将有助乎艾滋病药物的体内实验治疗和艾滋病疫苗的效果评价。     

SIV感染猴血浆病毒RNA拷贝数指标的研究

目的:研究血浆病毒RNA拷贝数作为猴艾滋病（SAIDS）模型病毒学指标的必要性和重要性。方法:用SIVmac239静脉感染恒河猴,定期采血,血浆标本分别用血浆病毒分离法测定病毒水平,RT-PCR法测定血浆病毒RNA拷贝数。结果:52份标本中,除2份外,其余的标本凡是血浆病毒RNA拷贝数值>58.6×10～4cps/ml的,其血浆病毒分离结果为阳性;凡是病毒拷贝数值≤58.6×10～4cps/ml的,其血浆病毒分离结果为阴性,符合此规律的标本比例高达96.15％,且两种方法测出的血浆病毒变化趋势是一致的。结论:血浆病毒RNA拷贝数是猴艾滋病模型不可缺少的病毒学指标。     

SIV实验感染猴淋巴结病的免疫病理研究

活检或尸检SIV实验感染的恒河猴淋巴结38个，观察到SIV感染时淋巴结病的病变过程是淋巴结从增生到萎缩、耗竭的动态变化经过；SIVp27抗原检查显示阳性的淋巴细胞、组织细胞和吞噬细胞，IgM、IgG和IgA广泛沉着于生发中心及灶性沉着于副皮质区内，66.7%的猴感染后2个月，IgM开始沉着，88．9%的猴在感染后5个月IgG出现，沉着区为一种或两种以上的免疫球蛋白。免疫球蛋白沉着的滤泡出现成纤维细胞、毛细血管普遍增生；CD4^ 、CDB^ 淋巴细胞分析，感染后5个月，CDB^ 淋巴细胞普遍较CD4^ 淋巴细胞数量为多。     

猴免疫缺陷病毒(SIV)实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立快速、敏感、特异的猴免疫缺陷病毒(SIV)TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,对SIV病毒核酸进行定量检测。方法 RT-PCR扩增SIVmac251保守gag基因序列796 bp片段,进行TA克隆,构建标准品质粒pMD-SIVgag。通过对SIV定量外标准品的定量分析,优化反应体系,检测TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性和重复性。结果所建立的SIV QPCR检测方法,质粒DNA模板在107～102拷贝之间表现较好线性和相关性,标准曲线所得斜率为-3.26,相关系数为0.999。检测灵敏度达到200拷贝,方法重复性测试,检测25份临床样品CV%均小于1%。结论建立的SIV QPCR检测方法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)核酸拷贝量。     

PCR技术在猴免疫缺陷病毒(SIV)感染模型中的应用

目的(1)建立RT PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA。(3)检验DNA PCR和RNA PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性。方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合的SIV前病毒DNA的细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性。结果DNA PCR和RNA PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段。9只实验猴感染SIV后7d,RNA PCR结果为79阳性,DNA PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有59阳性;此后一直到感染后的42d,RNA PCR和DNA PCR的结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到49,到42d时下降为零。结论PCR方法比病毒分离方法的敏感性高。尤其是DNA PCR,既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞,所以在感染的早期和中后期———血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。     

恒河猴（Macaca Mulatta）SIV血清抗体调查

本文用免疫荧光法(IFA)检查了云南、贵州、四川的528只恒河猴的猴免疫缺陷病毒（SIV)血清抗体，查出抗体阳性动物12只(2．3%)，除一只动物血清抗体滴度为1：28外，其余荧光反应较弱(滴度≤1：16)。云南省捕获的25个猴群中，4个猴群查出抗体阳性动物，分布在思茅地区的三个县．临沧地区、玉溪地区和文山州未查出阳性动物。结果表明，西南三省存在有SIV血清抗体阳性动物，阳性动物的分布有地理和群间差异。     

猴免疫缺陷病毒急性及慢性感染淋巴结的病理变化

【目的】观察猴免疫缺陷病毒(SIV)急性及慢性感染猴淋巴结的病理改变，以掌握评价抗艾滋病药物、疫苗及免疫调节剂疗效指标，并探索猴艾滋病毒感染及猴艾滋病(SIV／SAIDS)的发病机制。【方法】采用SIVmax病毒急性及慢性感染恒河猴40只，先后分别在不同时间作淋巴结活检68例次及尸检死亡猴7只的淋巴结，对淋巴结进行病理常规切片、染色、光镜检查。【结果】淋巴结的病理变化可分为3个型：(1)增生型(感染后3～6或9个月)；(2)退化型(感染后6～12或14个月)；(3)耗竭型(11个月以上及部分中途死亡猴)。猴SIV感染的淋巴结病变与人HIV／AIDS的淋巴结的病变比较，两者的病变极为相似。【结论】猴SIV感染淋巴结病变的3个型可以作为猴艾滋病发生、发展和恶化的观察指标，SIV感染猴模型可以作为抗艾滋病药物、疫苗和免疫调节剂的疗效评价的动物模型和研究艾滋病发病机制的理想动物模型。     

青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒感染中国恒河猴模型T淋巴细胞活化的调节作用

目的:观察注射用青蒿琥酯对猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)感染中国恒河猴模型免疫异常激活的改善情况,探讨青蒿琥酯对艾滋病的干预作用。方法:选用8只SIV感染平台期中国恒河猴模型,随机分为治疗组和对照组,每组各4只,治疗组按每天3 mg·kg~(-1)剂量肌肉注射青蒿琥酯注射液8周,对照组肌肉注射等剂量生理盐水。分别于给药前,给药后2周、4周、6周、8周,停药后4周、8周检测血浆病毒载量、全血细胞计数、淋巴细胞亚群及免疫活化相关标记物CD_(69)~+、CD_(25)~+、HLA-DR~+和CD_(38)~+表达情况。结果:青蒿琥酯可在4周内下调CD_8~+细胞CD_(69)~+、HLA-DR~+和CD_(38)~+表达水平(P0.05),对CD_4~+细胞影响较小。给药第4周出现一过性嗜中性粒细胞下降,后回升至正常水平。结论:青蒿琥酯可改善SIV感染中国恒河猴细胞毒性T细胞免疫异常激活,嗜中性粒细胞下降是可逆的。     

SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA拷贝数方法的建立

目的建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法，测定猴免疫缺陷病毒（SIV）前病毒DNA。方法巢式RT-PCR扩增SIVmac251病毒RNA gag基因上1360-1837之间的长度为477bp的片段，将该片段克隆到pGEMT载体上，构建pGEM-SIV gag477质粒。该质粒经大量扩增纯化后定量，10倍系列稀释后，做出标准曲线，作为SIV前病毒DNA荧光定量检测的外标准品。结果应用Roche公司FastStart DNA Master SYBR Green Ⅰ Kit，该标准品可精确定量到10copies／μL。结论制备的pGEM-SIV gag477质粒外标准品纯度高，SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR法特异性、敏感性高，稳定性好，可用于定量测定猴免疫缺陷病毒（SIV）前病毒DNA载量。     

猴免疫缺陷病毒感染猕猴快速进展型死亡特征

观察猴免疫缺陷病毒（ｓｉｍｉａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ,ＳＩＶ）ＳＩＶｍａｃ和ＳＩＶｍａｃ２５１毒株感染猕猴快速进展型死亡的感染特征。方法用ＳＩＶｍａｃ和ＳＩＶｍａｃ２５１静脉接种,实验性感染８０只恒河猴和４只食蟹猴,定期采集静脉血浆进行病毒分离测定血浆病毒水平,间接免疫荧光法测定血浆病毒抗体水平,并取淋巴组织进行常规理组织学检查。结果８４只猕猴感染ＳＩＶｍａｃ和ＳＩＶｍａｃ２     

艾滋病与心脏损害

自从1981年世界上首例获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)报道以来,艾滋病开始在全球范围大流行。作为一种致命性疾病,艾滋病病人全身多器官均受累及,病理学研究提示50％人类免疫缺陷病毒阳性病人有心脏异常,心包、心肌和心内膜等均可发生病变,超声心动图表现异常,可导致肺动脉高压、扩张性心肌病等的发生。HIV-1在心脏病变中的作用如何,目前尚不是十分明确。本文试从HIV的生物学和病理学出发,研究一系列的心脏并发症,为艾滋病的临床诊断和治疗提供客观证据。     

2004-2010年广西龙胜各族自治县淋病、梅毒、AIDS/HIV疫情分析

目的:了解龙胜县近7年法定传染病中的梅毒、淋病、AIDS和HIV阳性病例情况,分析其流行特征和规律,为制定防治策略和措施提供科学依据.方法:收集该县2004-2010年法定传染病梅毒、淋病、AIDS/HIV阳性病例疫情资料,采用Excel软件进行统计学分析.结果:全县总人口数为17万多,近7年报告梅毒、淋病、AIDS和HIV阳性病例共1146例,人群年均发病率为95.11/10万,其中淋病368例,梅毒646例,AIDS 35例(死亡10例),HIV阳性97例(死亡22例).以上4种疾病高发年龄在15～44岁年龄组,占总发病人数的68.32%.农民发病人数占61.78%.梅毒、AIDS/HIV阳性病例数近几年呈逐年上升趋势,特别是梅毒和AIDS/HIV阳性病例呈现平行上升的态势.结论:龙胜县梅毒、AIDS/HIV阳性总病例不断增多,其防治任务仍然非常严峻.     

非洲绿猴在艾滋病研究中的应用进展

人类在人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV-1）感染后,通常经过一段潜伏期,进展为艾滋病（acquired immunodeficiency syndromes,AIDS）。非洲绿猴（African green monkeys,AGM）是SIV（simian immunodeficiency virus,SIV）的天然宿主,虽然体内的病毒水平与HIV感染者相似,但不表现出艾滋病症状。因此,探索AGM控制病毒复制和疾病进展的分子机制,可以很好地促进对HIV感染致病机理的认识和AIDS疫苗与治疗方法的研究。本文简要介绍AGM在艾滋病研究中的应用和最新研究进展,为艾滋病动物模型的研究提供更多参考。     

正常人群、HIV感染者及获得性免疫缺陷综合征患者外周血CD28分子表达变化及临床意义

目的 探讨正常人群、HIV感染者及AIDS患者外周血CD28分子表达变化及临床意义.方法 选取AIDS患者、HIV感染患者及正常健康者各50例,分别设为A、B、C三组,比较三组间CD4+CD28+、CD8+CD28+T淋巴细胞计数和百分比,并分析血浆HIV病毒载量与CD4+、CD4+CD28+T淋巴细胞计数相关性.结果 A、B组CD4+T淋巴细胞计数和百分比水平显著低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组CD4+T淋巴细胞计数和百分比水平显著低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);B组CD8+T淋巴细胞计数水平显著高于A、C组,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B组CD8+T淋巴细胞百分比水平显著高于C组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组CD8+T淋巴细胞百分比水平显著高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B组CD4+CD28+T淋巴细胞计数和百分比水平显著低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组CD4+CD28+T淋巴细胞计数和百分比水平显著低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组CD8+CD28+T淋巴细胞计数水平显著低于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B组CD8+CD28+T淋巴细胞百分比水平显著低于C组,差异有统计学意义(p＜0.05);A组CD8+CD28+T淋巴细胞百分比水平显著低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);A组血浆HIV病毒载量水平显著高于B组,差异有统计学意义(p＜0.05);CD4+和CD4+CD28+T淋巴细胞计数与血浆HIV病毒载量呈负相关(r=-0.781,-0.549,P=0.001,0.003).结论 HIV感染和AIDS患者随病情进展外周血T淋巴细胞CD28分子水平下降,可作为预后评价重要指标之一.     

艾滋病25年回顾:机遇与挑战

自1981年美国报道首例艾滋病患者到目前有效的抗艾滋病病毒治疗的不断发展,25年中人类对艾滋病的研究已取得举世瞩目的成就。此外,在艾滋病的流行病学、病毒学、免疫学、致病机制和检测方法方面,也有多项突破性进展。近年,中国艾滋病相关研究发展迅速,并取得了很大进步。     

50例艾滋病尸体解剖材料的病理学分析

目的：探讨艾滋病的病理学特点。方法：总结50例艾滋病尸体解剖资料。结果：50例艾滋病中病原体感染以寄生虫和病毒感染较为常见，其次为细菌和真菌感染。艾滋病患者所患疾病主要是卡氏肺孢子虫肺炎、弓浆虫脑炎、念珠菌病、多脏器巨细胞病毒感染和卡波西肉瘤。最常累及的脏器是肺、消化道、脑、皮肤和淋巴结等。结论：艾滋病患者往往同时或先后有数种病原体感染而造成多脏器病变。患者临床症状复杂且难以医治，80%患者的生存期小于2年。     

AIDS局灶脑炎MRI分析

目的探讨AIDS局灶脑炎MRI特征。方法回顾性分析21例经综合诊断为AIDS局灶脑炎病例,所有病例均行MRI平扫、钆对比增强及DWI成像。结果 AIDS局灶脑炎病灶95.23%多发,主要分布在基底节区及皮髓交界区;形态为环状或不规则状,少数为结节状。MRI平扫病灶实质区主要为等T1WI等T2WI信号,坏死区为稍长T1WI长T2WI信号,T2 Flair上为高信号;增强扫描明显强化,可呈环状、结节状、"靶征"样强化。DWI上病灶主要为高信号。结论 AIDS局灶性脑炎MRI平扫、钆对比剂增强、DWI成像特征明显;综合各种检查信息能为病灶定性诊断、区分各种成份及确定病程提供有力依据。     

Procedure and clinical assessments of malariotherapy:recent experience in 20 HIV patients

Objective To demonstrate the side effects of malariotherapy and to explore safe procedures in conduct of malariotherapy for human immunodeficiency virus (HIV) infected patients.Methods Twenty HIV/acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients were selected for the study of malariotherapy and were intravenously infected with Plasmodia vivax to induce therapeutic malaria. Malaria was terminated with chloroquine after 10 -20 malarial febrile episodes. Clinical assessments were made before (baseline), during (malarial phase) and after (post) termination of malaria. The density of Plasmodia in peripheral blood from the HIV/AIDS patients were compared to that from HIV-negative naturally infected malarial patients who donated the blood for the therapeutically induced malaria. CD4 cell baseline levels were correlated to the severity of malarial symptoms and parasitemia.Results There were no significant differences of Plasmodium density between the HIV/AIDS patients injected with P, vivax and the HIV-negative blood donors. However, it was found that the HIV-positive patients had milder malarial symptoms and parasitemia with progressively lower CD4 cell baseline levels. All patients developed every day or every other day fever episodes with headache and shaking chill. These symptoms were well tolerated with the aid of anti-pyretic medications. Spleen and liver enlargement were seen in 15 of 20 and 4 of 20 patients respectively. Transitory liver effects with increase of serum glutamic-pyruvic transaminase were seen in 2 of 20 during malarial phase. Most patients experienced mild to medium anemia and 6 of 20 patients developed thrombocytopenia during malarial phase. All these side effects disappeared after termination of malaria or within one month thereafter. No complications occurred in these patients.Conclusions Therapeutically induced acute vivax malaria was well tolerated in 20 HIV-positive subjects who represented a range of CD4 cell levels from 1868/μ1 to 15/μ1. Malariotherapy did not induce complications while increasing CD4 cell levels in most treated HIV/AIDS patients (results published elsewhere).     

国际视角下“中国AIDS问题”研究的文献计量分析

目的从文献计量的角度反映近年来国际学术界对于中国AIDS问题的研究状况。方法选用WebofSci-ence引文数据为检索来源,通过以China及AIDS相关的名词构成的检索式搜集文献记录。利用SPSS、Metalab、Excel等软件从文献量、参与研究的国家机构、文献内容及合作有效性等4个方面进行统计分析。结果近10年来,有关我国AIDS的文献量呈逻辑曲线型增长,目前处于拐点位置,年文献增量接近峰值。从国家和机构的发文量来看,中、美两国都是主要研究力量。文献集中分布在医学、公共卫生及社会科学领域。核心作者的研究内容也十分集中,重点关注高危地区及高危人群,试图找到可行的干预模式,有效预防AIDS发展。合作有效性分析表明,存在国际合作关系的文献拥有较高的被引量且发表在影响因子较高的期刊上。结论中国AIDS问题已经引起了国内外研究者的广泛关注,相关文献在未来一段时间仍会保持高速增长。相关学者关注的领域存在许多共同点,研究热点较为鲜明。此外,国际合作与机构合作有利于增加文献的影响力。