全人源抗人肿瘤坏死因子α单克隆抗体注射液对食蟹猴的长期毒性试验

目的评价全人源抗人肿瘤坏死因子α单克隆抗体(抗-h TNF-αFHMA)注射液对食蟹猴的长期毒性。方法将40只食蟹猴随机分成5组,分别为阴性对照组、阿达木单抗10 mg·kg~(- 1)对照组和抗-h TNF-αFHMA 2,10和50 mg·kg~(- 1)组,经皮下注射每周给药1次,连续给药5次,停药后恢复期4周。实验期间进行临床观察、体质量、体温、心电图、血细胞计数、凝血功能、血液生化、尿液、眼科、免疫指标、脏器及组织病理观察,同时进行血药浓度检测,分析毒代动力学参数。结果实验期间各组食蟹猴的观察、体质量、体温、心电图参数、眼科检查、血细胞计数、凝血功能、血生化、尿液分析、淋巴细胞亚群、细胞因子、血清免疫球蛋白和血清补体等指标均未见与给药相关的具有毒理意义的改变;抗-h TNF-αFHMA和阿达木单抗均可引起食蟹猴体内产生抗药抗体,且具有中和活性。抗-h TNF-αFHMA在体内基本呈线性动力学特征。相同剂量下与阿达木单抗呈现相似的免疫原性和代谢动力学特征。结论抗-h TNF-αFHMA未观察到不良反应的剂量为50 mg·kg~(- 1),相当于临床拟用剂量(0.67 mg·kg~(- 1))的75倍,表明抗-h TNF-αFHMA临床应用安全性较好。     

食蟹猴sc重组人干扰素β-1a注射液30 d安全性评价

目的 研究重组人干扰素β-1a （rhIFN β-1a）注射液的毒副反应靶器官及其恢复情况,预测可能引起的临床不良反应,为临床用药提供参考。方法 食蟹猴sc重复给予rhIFN β-1a注射液3.9、13.2、45.0 μg/kg,连续30 d,每组6只动物,雌雄各半,停药后恢复16 d。观察药物对一般体征、饮食、肛温、体质量的影响,同时进行尿液分析、血液学、血液生化、心电图、眼科检查、骨髓涂片、免疫学指标、免疫原性检查,在给药结束和恢复结束进行大体剖检并进行组织病理学检查。结果 45.0 μg/kg rhIFN β-1a组动物出现一过性肛温升高,以及活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）延长,血浆纤维蛋白原（FIB）浓度降低,该变化在给药期内能恢复。其余一般指标、心电图、血液生化、尿液生化、骨髓检查、大体解剖、脏器质量及系数、组织学检查、免疫学指标检查未见异常。免疫原性试验可见给药20 d后绝大部分动物开始出现抗体,给药30 d时所有动物均出现抗体,各剂量组绝大多数产生结合抗体的动物血清可检测到具有中和rhIFN β-1a注射液活性的抗体,结合抗体以及中和抗体的滴度均与剂量呈非相关性关系,具有随给药时间延长抗体强度增强的趋势。结论 食蟹猴连续sc重复给予rhIFN β-1a注射液30 d,无可见有害作用水平（NOAEL）为13.2 μg/kg,该剂量为人临床拟用剂量0.135 μg/kg的97.8倍。rhIFN β-1a注射液对食蟹猴具有一定的免疫原性。     

注射用灯盏花素在比格犬与食蟹猴的体内毒性比较

目的:比较注射用灯盏花素对比格(Beagle)犬和食蟹猴的体内毒性。方法:普通级Beagle犬32只,雌雄各半,设生理氯化钠溶液(NS)对照和注射用灯盏花素40,80,120 mg·kg~(-1)剂量组。食蟹猴4只,设NS对照和注射用灯盏花素200 mg·kg~(-1)组。2种动物均静脉滴注给药13周,停药恢复4周,观察体内毒性。结果:Beagle犬80和120 mg·kg~(-1)组出现呕吐、腹泻、流涎等不良反应。120 mg·kg~(-1)组有1只动物给药11d皮肤出现斑疹、荨麻疹;给药第11周有1只动物出现呕血、便血后死亡。食蟹猴200 mg·kg~(-1)组仅发现1只动物出现间断性流涎。Bea- gle犬和食蟹猴各剂量组体重增长,进食量正常,血液、生化等其他各项检测指标未见明显异常。结论:食蟹猴和Beagle犬对注射用灯盏花素的耐受性、敏感性和毒性反应均存在种属差异。     

重组人白细胞介素-12对食蟹猴的反复给药毒性研究

目的:观察重组人白细胞介素-12(rhIL-12)对食蟹猴的长期毒性。方法:食蟹猴皮下注射给予rhIL-12,剂量分别为0.5,5和40μg·kg-1,每周3次,共13周。检测指标包括临床症状、血液学、血生化、免疫、血清抗体和组织病理学检查。结果:rhIL-12给药后导致动物出现腹泻、面部及眼睑部肿胀、腹股沟淋巴结肿大、溃疡、及注射局部红斑和硬结等临床症状,并出现贫血和白细胞分类异常,血液生化指标出现肝脏转氨酶升高,免疫学指标出现外周血总T淋巴细胞比例增加,CD4细胞百分率下降,CD8细胞百分率增加。第7次给药后,给药组动物产生了rhIL-12抗体。结论:食蟹猴皮下注射给予rhIL-12,毒性靶器官和组织为血液系统、肝脏、心脏、肾脏和淋巴结等免疫调节系统,其安全剂量为0.5μg·kg-1。     

食蟹猴静脉注射抗HER2人源化抗体急性毒性研究

目的 评价抗HER2 人源化抗体的急性毒性。方法 将食蟹猴随机分为4 组,包括溶媒对照和抗HER2 人源化抗体75、150 和250 mg/kg 组,单次iv 溶媒对照组或供试品,进行各项毒理学指标检测。结果 给药后各组动物临床症状、体质量、摄食量、体温、心电图、血压和血液学检测均未见明显异常;血清生化结果显示,150 mg/kg 组与250 mg/kg 组动物给药后血清IgG 水平出现一过性增加;各组动物均未见大体病理学改变。结论 食蟹猴单次iv 抗HER2 单抗,总体上动物具有良好的耐受性,最大耐受剂量可达250 mg/kg,这些结果为进一步临床前评价抗HER2 人源化单克隆抗体的安全性奠定了基础。     

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在食蟹猴体内的毒性研究

目的 评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在食蟹猴体内的毒性。方法 30只食蟹猴,分为溶媒对照组(静脉注射溶媒)、GC304低剂量组(3×10¹³ vg·kg^-1)和高剂量组(1×10¹⁴ vg·kg^-1)。试验期间,所有动物进行临床症状和注射部位观察,每周进行摄食量和体重测定。在给药前后不同时间点进行免疫原性检测(包含抗AAV5结合抗体、中和抗体及抗LPL结合抗体)、血液学、血清生化、血凝和尿生化检查,并同时进行T淋巴细胞分型、细胞因子、心电、血压、体温和眼科检查。给药后4周和6个月解剖,动物进行大体观察、脏器称重和组织病理学检查,同时进行GC304的生物分布研究及表达产物测定,并在不同时间点对血液中目的基因DNA进行检测。结果 受试物对食蟹猴临床症状、注射部位、体重、摄食量、眼睛各项指标、体温、血压、心电图、血凝、血清生化、T淋巴细胞分型、尿液、细胞因子、脏器重量等指标未见影响。高剂量组动物给药后4周血小板下降。与给予受试物相关的组织病理学改变为脾脏和腹股沟淋巴结生发中心活跃...     

食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1的毒性研究

目的：考察食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后的体内毒性,探索安全剂量范围,为后续临床试验提供参考信息。方法：30只食蟹猴随机分成3组,包括溶媒对照组和低、高剂量(1.0×10⁸、4.0×10⁸ pfu)组,每组10只,雌雄各半。采用肌肉注射给药,每周给药2次,连续给药6周,恢复期8周。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每次给药后1～2天观察注射部位症状,每周称量体重。分别在检疫期、首次给药后、给药期结束、恢复期结束的不同时间点进行安全药理(体温、血压、心电图)测定、临床病理(血液学、血凝、血清生化、尿生化)检查、免疫学(T淋巴细胞、细胞因子、免疫原性)测定、组织病理学检查和脏器称重。结果：给药后,动物未见异常症状、注射部位刺激性、体重和摄食量改变,未见安全药理和临床病理指标有意义的变化。与溶媒对照组比较,第41天,低剂量会引起动物CD3⁺CD4⁺T细胞比例升高,高剂量未见明显变化。第13至97天,低、高剂量均能引起动物产生抗载体结合抗体、抗抗体,以及个别动物检出hPD-1表达...     

利用无创遥测技术开展伴随重复给药毒性试验的食蟹猴安全药理学研究

目的 应用食蟹猴重复给药毒性伴随安全药理学研究的实例,探究利用无创遥测技术进行伴随于重复给药毒性试验的心血管、呼吸系统安全药理学研究的可行性。方法 重复给药毒性试验取食蟹猴40只（雌雄各半,其中32只进行安全药理学研究）,分为4组,即空白对照组、佐剂对照组和四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）低、高剂量组,分别为不给任何受试物,每次im佐剂对照品1 mL（2人份）/猴、四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）0.5 mL（1人份）/猴和1 mL（2人份）/猴,每4周给药1次,共给药4次。食蟹猴经穿脱马甲和猴椅固定的适应性训练后开始正式试验;安全药理学试验数据的采集安排在首次与第3次给药时,使用马甲式遥测系统采集给药后0~24 h的呼吸、心电、体温等相关参数,并增加采集给药后0~2、5~6、23~24 h时间段的血压数据（将猴保定在猴椅上）。结果 单次及3次给予四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）低、高剂量以及佐剂对照品对食蟹猴呼吸、心电、血压、体温等各项指标均未见明显影响。部分时段的指标波动均属猴正常的应激（受束缚状态下）变化或昼夜生理节律性变化。结论 在本试验剂量条件下,单次及多次im四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）,对食蟹猴呼吸系统、心血管系统均未见明显影响;利用马甲式无创遥测系统结合重复给药毒性试验进行安全药理学研究（心血管、呼吸系统）具有良好的可行性,符合动物福利3R原则,尤其适合于重复给药后的安全药理学研究。     

乙肝核酸疫苗安全性的初步研究

目的:研究乙肝核酸疫苗对小鼠和豚鼠的长期毒性.方法:健康小鼠和豚鼠分别按体重随机分为低、中、高剂量组(小鼠剂量分别为0.5,1.5,4.5 mg·kg-1,豚鼠剂量分别为0.1,0.4,0.8 mg·kg-1)和溶媒对照组.2种动物均每周后肢肌内注射2次,共8周.末次给药后24 h和停药后30 d分别测血液学、血液生化、病理检查和小鼠的各项免疫指标(包括IgG 1和IgG 2a亚型血清水平、血清抗核抗体、血清抗体总水平、γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)血清水平、外周血中各淋巴细胞亚群的分布情况和染色体整合检测).结果:两种动物各剂量组的各项常规检测指标均未见有任何异常变化,与空白及溶媒对照组相比均无显著性差异.小鼠免疫指标未出现与治疗目的无关的改变.结论:受试疫苗在两种动物未观察到明显的生化、病理学、免疫学指标异常.小鼠和豚鼠肌内注射乙肝核酸疫苗的安全剂量分别为4.5和1.2 mg·kg-1.     

鼠疫疫苗在食蟹猴模型中的免疫学评价

目的 通过将鼠疫耶尔森菌的F1抗原和重组V抗原组成的鼠疫疫苗免疫食蟹猴,对疫苗的免疫效果进行评价.方法 将20只食蟹猴按简单随机法分成低剂量组、高剂量组和生理盐水对照组,分别于0和2周肌内免疫,并于1剂后2周和2剂后2周采血.用ELISA检测免疫动物血清中的总IgG抗体;另外,分离外周血淋巴细胞,用酶联免疫斑点试验检测分泌IFN-γ的外周血淋巴细胞.用t检验对结果进行比较.结果 免疫后,对照组均未产生抗体,而疫苗组产生了较强的抗体应答.2剂免疫后2周,低、高剂量组的抗F1抗原IgG抗体几何平均滴度分别为(4.71±0.32)1g和(5.09±0.21)lg(t=-2.76,P＜0.05),两组的抗重组V抗原IgG抗体几何平均滴度分别为(4.75±0.52) lg和(5.12±0.58) lg(t=-1.37,P＞0.05).经F1和V抗原体外刺激产生IFN-γ的外周血淋巴细胞,细胞数均无明显增加.F1抗原刺激后,低、高剂量组分泌IFN-γ的外周血淋巴细胞数分别为(1±1)/106和(1±2)/106(t=-0.16,P＞0.05).重组V抗原刺激后,两组分别为(7±15)/106和(6±7)/106(t=0.88,P＞0.05).结论 鼠疫疫苗在食蟹猴模型中能诱导较强的体液免疫应答,但不能诱导明显的细胞免疫应答.     

治疗用皮卡乙型肝炎疫苗（CHO细胞）及其组分的小鼠急性毒性实验研究

目的比较治疗用皮卡乙型肝炎疫苗（CliO细胞）及疫苗组分（重组乙型肝炎疫苗（CliO细胞）、皮卡佐剂）对小鼠的急性毒性反应。方法ICR小鼠按体重随机分为溶媒对照组,皮卡佐剂高剂量组（原液）和低剂量组（2倍稀释液）,重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）组（原液）,治疗用皮卡乙型肝炎疫苗（CliO细胞）高剂量组（原液）和低剂量组（2倍稀释液）,每组小鼠后肢im0．2mL受试物,给药后连续14天观察其状态及毒性反应。结果各组小鼠全部存活,摄食和体重指标正常,注射部位肌肉、外观体征、行为活动、呼吸、排泄、各组织脏器肉眼观察及组织病理学检查均未见异常。结论在本实验条件下,治疗用皮卡乙型肝炎疫苗（CliO细胞）及疫苗组份对小鼠无明显毒性反应。     

重组抗CD52单克隆抗体的食蟹猴单次静脉注射毒性研究

目的：开展食蟹猴静脉注射重组抗CD52人源化单克隆抗体注射液单次给药毒性研究,考察动物体内耐受性、给药后出现的毒性反应及严重程度和药物毒性作用靶器官,评价其安全性。方法：首先应用流式细胞术检测方法,筛选出8只红细胞表面CD52抗原阴性食蟹猴,用于单次给药毒性研究。将动物随机分成4组,包括溶媒对照组和3、10、30 mg·kg^-1剂量组,每组2只,雌雄各半。采用静脉推注给药,给药1次。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每周称量1次体质量。分别在给药第2、8、15 d采集动物外周血液进行临床病理检查,包括血液学(含凝血)、血清生化(含电解质)。分别在给药第2、6、8、15、21 d采集动物外周血液进行T淋巴细胞及亚群和B淋巴细胞的分类计数。于给药第22 d解剖动物并进行大体病理学检查。结果：动物给药后,在10 mg·kg^-1和30 mg·kg^-1剂量下,会引起白细胞总数、淋巴细胞、单核细胞数量和比例、T淋巴细胞数量及其亚群细胞数量下降,这些变化与药物的免疫抑制作用相关。受试物还会引起血红蛋白浓度下降,网织红细胞数量和...     

注射用重组人成纤维细胞生长因子-21食蟹猴急性毒性试验研究

目的 观察食蟹猴单次sc注射用重组人成纤维细胞生长因子-21（RH-FGF-21）的急性毒性反应。方法 8只健康食蟹猴,随机分成RH-FGF-21组和对照组,RH-FGF-21组6只,对照组2只,均雌雄各半,分别单次sc最大给药浓度和最大给药体积的供试品RH-FGF-21（9.0 mg/kg）和最大体积的对照品灭菌注射用水（1.0 mL/kg）,给药后连续观察21 d。在给药前适应期和给药后观察期内进行动物的一般观察（外观、行为、饮食、反应能力、分泌物和排泄物等）、死亡情况、体质量变化、肛温、进食量、眼科和心电图检查、血液学和血液生化学检测、尿液观察和分析;观察期结束安乐死全部存活动物,进行组织病理学检查。结果 动物体质量、肛温、进食量、心电图检查和眼科检查与同期对照组比较均未见明显异常;血液学检测、血液生化检测、尿液观察和分析结果、组织病理学检查也未见由药物引起的异常变化。结论 在本试验条件下未发现由药物引起的急性毒性症状,9.0 mg/kg可认为是食蟹猴单次sc RH-FGF-21的最大给药量。     

4种疫苗引起小鼠异常毒性检查中腹膜刺激症状的原因探讨

目的:探讨4种疫苗引起小鼠异常毒性检查中腹膜刺激症状的原因。方法:按照2010年版《中国药典》(三部)"异常毒性检查法"项下规定,除阳性对照组(0.6%冰醋酸溶液)的给药剂量为每只0.2 ml外,其余组剂量均为每只0.5 ml,每组5只小鼠,给药方式为腹腔注射。分别进行甲型肝炎灭活疫苗(简称甲肝疫苗)、重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞,简称乙肝疫苗)、流感病毒裂解疫苗(简称流感疫苗)、麻疹风疹联合减毒活疫苗(简称麻疹疫苗)、阴性对照(0.9%氯化钠注射液)、阳性对照的ICR小鼠异常毒性检查;甲肝疫苗、流感疫苗的ICR和昆明种小鼠异常毒性检查;甲肝疫苗、吸附前甲肝疫苗、吸附后甲肝疫苗、氢氧化铝佐剂、0.1%甲醛溶液、阳性对照、阴性对照的ICR小鼠异常毒性检查。观察出现腹膜刺激的动物数、出现时间、消失时间、其他异常表现以及7 d后体质量变化情况。结果:甲肝疫苗、乙肝疫苗和阳性对照均致3⁵只小鼠出现腹膜刺激,出现时间在15只小鼠出现腹膜刺激,出现时间在1¹5 min,消失时间除阳性对照外均在30 min内,麻疹疫苗和阴性对照均未引起腹膜刺激;甲肝疫苗和流感疫苗均致所有ICR和昆明种小鼠出现腹膜刺激,出现时间在115 min,消失时间除阳性对照外均在30 min内,麻疹疫苗和阴性对照均未引起腹膜刺激;甲肝疫苗和流感疫苗均致所有ICR和昆明种小鼠出现腹膜刺激,出现时间在1⁵ min,消失时间在85 min,消失时间在8¹0 min;甲肝疫苗、吸附后甲肝疫苗、氢氧化铝佐剂和阳性对照均致所有小鼠出现腹膜刺激,出现时间在110 min;甲肝疫苗、吸附后甲肝疫苗、氢氧化铝佐剂和阳性对照均致所有小鼠出现腹膜刺激,出现时间在1⁵ min,消失时间除阳性对照外均在12 min内,全部小鼠均无其他异常表现且体质量正常。结论:疫苗中的氢氧化铝佐剂可能是导致小鼠腹膜刺激症状出现的原因。     

剀西菜联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的：观察凯西莱联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法：将我院收治的83例慢性乙型肝炎患者随机分为治疗组43例和对照组40例。两组均不用其他褪黄、降酶及抗病毒药物。在基础治疗相同的基础上,治疗组给予静脉滴注凯西莱200rag／d＋胸腺肽20mg／d;对照组则给予静脉滴注还原型谷胱甘肽1200mg／d,两组疗程均为4周。观察治疗前后血清转氨酶（ALT、AST）、白蛋白（Atb）、球蛋白（G1b）、胆红素（rrBil、DBil）变化。结果：两组肝功能、临床症状均明显改善,两组ALT、AST、A11）、Glb、TBil较治疗前均下降,差异有非常显著性（P〈0．01）,但组间比较差异无显著性（P〉0．05）。两组总有效率分别为95．35％~85％,差异有显著性（P〈0．01）。结论：凯西莱注射液联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎不但疗效确切,而且安全可靠。     

大剂量654—2辅助治疗重型乙肝300例疗效观察

目的：研究大剂量654—2治疗重型肝炎疗效。方法：两组患者均采用常规综合性治疗，治疗组则加用大剂量654—2。结果：治疗组在主要临床症状改善，复常率，肝功能指标恢复等方面均明显优于对照组。结论：大剂量654—2治疗重型肝炎能取得较好效果。     

还原型谷胱甘肽治疗慢性乙型肝炎142例临床观察

目的：观察还原型谷胱甘肽治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法：通过对照观察还原型谷胱甘肽治疗慢性乙型肝炎的临床资料,观察患者恢复情况,分析治疗结果。结果：治疗组改善临床症状显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：还原型谷胱甘肽对慢性乙型肝炎有较好的治疗作用。     

Pre-clinical toxicity and immunogenicity evaluation of a MUC1–MBP/BCG anti-tumor vaccine

Mucin 1 (MUC1), as an oncogene, plays a key role in the progression and tumorigenesis of many human adenocarcinomas and is an attractive target in tumor immunotherapy. Our previous study showed that the MUC1–MBP/BCG anti-tumor vaccine induced a MUC1-specific Th1-dominant immune response, simulated MUC1-specific cytotoxic T lymphocyte killing activity, and could significantly inhibit MUC1-expression B16 cells' growth in mice. To help move the vaccine into a Phase I clinical trial, in the current study, a pre-clinical toxicity and immunogenicity evaluation of the vaccine was conducted. The evaluation was comprised of a single-dose acute toxicity study in mice, repeat-dose chronic toxicity and immunogenicity studies in rats, and pilot toxicity and immunogenicity studies in cynomolgus monkeys. The results showed that treatment with the MUC1–MBP/BCG anti-tumor vaccine did not cause any organ toxicity, except for arthritis or local nodules induced by BCG in several rats. Furthermore, the vaccine significantly increased the levels of IFN-γ in rats, indicating that Th1 cells were activated. In addition, the results showed that the MUC1–MBP/BCG anti-tumor vaccine induced a MUC1-specific IgG antibody response both in rats and cynomolgus monkeys. Collectively, these data are beneficial to move the MUC1–MBP/BCG anti-tumor vaccine into a Phase I clinical trial.     

Biochemical and morphological effects of K-111, a peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)alpha activator, in non-human primates

K-111 has been characterized as a potent peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)alpha activator. Antidiabetic potency and amelioration of disturbed lipid metabolism were demonstrated in rodents, which were accompanied by elevations of peroxisomal enzymes and liver weight. To examine the possible therapeutic application of K-111 we have now assessed its efficacy in non-human primates with high transferability to humans. For this purpose obese, hypertriglyceridaemic, hyperinsulinaemic prediabetic rhesus monkeys were dosed sequentially with 0, 1, 3 and 10mg/kg per day orally over a period of 4 weeks each. In addition, the effect of K-111 on the peroxisome compartment was analyzed in cynomolgus monkeys using liver samples obtained following a 13-week oral toxicity study. In prediabetic monkeys, the reduction of hyperinsulinaemia and improvement of insulin-stimulated glucose uptake rate indicated amelioration of insulin resistance. These effects were nearly maximal at a dose of 3mg/kg per day, while triglycerides and body weight were lowered significantly in a dose-dependent manner. This reduction of body weight contrasts sharply with the adipogenic response observed with thiazolidinediones, another family of insulin-sensitizing agents. In young cynomolgus monkeys at a dosage of 5mg/kg per day and more, K-111 induced an up to three-fold increase in lipid beta-oxidation enzymes with an 1.5- to 2-fold increase in peroxisome volume density. This moderate increase in peroxisomal activity by K-111 in monkeys is consistent with its role as an PPARalpha activator and corresponds to the observations with fibrates in other low responder mammalian species. The increase in beta-oxidation may explain, at least in part, the lipid modulating effect as well as the antidiabetic potency of K-111. This pharmacological profile makes K-111 a highly promising drug candidate for clinical applications in the treatment of type 2 diabetes, dyslipidaemia, obesity and the metabolic syndrome.