肌球蛋白轻链激酶抑制剂对急性肺损伤的保护作用

目的 探讨肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂ML-7对细菌脂多糖(LPS)诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAEC)和急性肺损伤(ALI)的影响.方法 体外培养HPAEC,待4～6代予ML-7(10 μmol/L)孵育60 min后,再给予LPS刺激60 min,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测HPAEC活性;荧光显微镜下观察磷酸化肌球蛋白轻链激酶(p-MLCK)免疫反应细胞.20只雌性BALB/c小鼠随机分组,LPS组鼻内注入LPS(1 μg/g);ML-7组在LPS滴鼻前进行ML-7干预.观察小鼠肺湿/于重(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和病理学改变;用免疫组化法检测肺组织MLCK和CD11b阳性免疫反应细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织MLCK mRNA表达,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测肺组织MLCK蛋白表达.结果 与LPS组比较,HPAEC在ML-7孵育下吸光度(A)值增加(P<0.01),p-MLCK免疫反应细胞明显减少(P<0.05).肺W/D比值、肺组织MPO活性、BALF蛋白含量均明显降低(P<0.05或P<0.01).病理结果显示,LPS组小鼠肺部炎症反应明显,以中性粒细胞浸润为主,肺泡充血、水肿;ML-7组肺部炎症及充血明显改善.免疫组化显示位于内皮的MLCK免疫反应细胞和位于炎性细胞的CD11b在ML-7组均较LPS组明显减少.ML-7组肺组织MLCK的mRNA和蛋白表达均较LPS组降低(P均<0.05).结论 MLCK特异性抑制剂ML-7能提高LPS诱导的HPAEC生长活性,降低p-MLCK表达;减轻LPS诱导的中性粒细胞在肺内浸润、肺水肿及MLCK、CD11b蛋白和MLCK mRNA的表达.表明抑制MLCK活性可能通过减弱MLCK磷酸化而达到稳定血管屏障功能,防治ALl的作用.     

肌球蛋白轻链激酶与冠心病的相关性研究

目的:探讨肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CHD)间的相关性。方法:将72例行冠状动脉造影术的患者根据造影结果分为对照组及CHD组,CHD组患者根据病情再分为急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)和稳定性CHD 2个亚组。采集对照组患者入院24 h内及造影后24 h内血样和CHD组患者入院24 h内、造影后24 h内及入院第5天血样,应用双抗体夹心ABC-ELISA法测定其血清MLCK水平。结果:血清MLCK水平与血脂、血糖水平相关,且对CHD有一定诊断价值;院内发生不良事件的CHD患者血清MLCK水平显著升高,且ACS患者血清MLCK水平高于稳定性CHD组,而后者高于对照组(P均<0.05)。同时,血清MLCK与高敏C反应蛋白(hsCRP)间呈显著正相关。结论:血清MLCK水平可能与炎症反应及动脉斑块的不稳定性相关,对CHD的诊断和院内预后评估有一定价值。     

烫伤后微血管通透性升高与肌球蛋白轻链激酶有关

以往的研究证明，肌球蛋白轻链磷酸化致使血管内皮细胞收缩可引起微血管通透性增高。肌球蛋白轻链激酶在肌球蛋白轻链磷酸化过程中起关键作用。最近国外医学人员研究了烫伤后血管内皮细胞屏障受损时肌球蛋白轻链激酶的作用。肌球蛋白轻链激酶-210（MLCK-210）主要表达于血管内皮细胞，科研人员采用敲除MLCK-210基因的小鼠造成25％总体表面积（TBSA）Ⅲ度烫伤模型。     

Rho／Rho激酶系统在缺血性脑血管病中的作用

Rho作为Ras同源物于1985年首先被克隆出来,此后的研究发现Rho作为信号转导调节分子联系细胞表面受体与肌动蛋白细胞骨架,在细胞代谢过程中发挥重要作用。近年来,越来越多的研究发现Rho／Rho激酶系统在多种脑血管意外的发生发展中扮演了重要的角色,也成为脑血管病药物治疗的新靶点。     

维生素E对动脉粥样硬化兔动脉肌球蛋白轻链激酶活性及内膜通透性的影响

目的 :探讨维生素 E(Vit E)对动脉粥样硬化兔动脉肌球蛋白轻链激酶 (ML CK)活性及内膜通透性变化的影响。方法 :复制兔动脉粥样硬化模型 ,用γ 32 P掺入法检测动脉 ML CK活性 ,免疫荧光检测内膜通透性 ,同时用苏木精伊红 (HE)染色观察动脉壁的形态结构。结果 :在喂饲胆固醇膳食 4周的动物组 ,动脉 ML CK活性与正常对照组比较显著升高 (P<0 .0 5 ) ;但在喂饲胆固醇膳食 12周或同时添加 Vit E后 ,动脉 ML CK活性与正常对照组比较升高不明显 (P>0 .0 5 )。荧光显微镜下观察显示 ,兔动脉内膜通透性在喂饲胆固醇膳食后 4周有所增加 ,12周后显著增加 ;12周组膳食中同时加 Vit E后 ,通透性有所下降。结论 :在动脉粥样硬化早期 ,内膜屏障完整性的改变可能与 ML CK活性增强有关 ,Vit E可能是降低动脉内膜 ML CK活性的因素 ,并能降低动脉粥样硬化模型兔动脉内膜通透性。     

肌球蛋白轻链激酶的变化影响严重创伤后急性肺损伤的发展

以往研究报道,肌球蛋白轻链激酶(MYLK)单核苷酸多态性表达是脓毒症诱发急性肺损伤(ALI)和哮喘的危险因素之一。MYLK能对炎症过程中(如细胞凋亡、血管通透性改变和白细胞渗出等)复杂的蛋白亚型进行编码。美国科研人员研究了严重创伤引起ALI发展过程中MYLK的变化。研究共纳入273例严重创伤患者(创伤严重度评分≥16分),由3名临床医生查阅所有X线胸片和临床资料,将ALI归为一类。MYLK中总共有17个标记单核苷酸多态性属于基因型,逐个分析单核苷酸多态性水平,采用复杂的逻辑回归模型调节基线变量,进行2~5个单核苷酸多态性单倍型分析。在创伤发生5 d内,273例受试者中有91例符合ALI标准(33%)。3个编码单核苷酸多态性分别与ALI相关,21位组氨酸(CC基因,比值比=1.87,95%可信区间(CI)1.06~3.33,P=0.022)和147位丝氨酸(TT,比值比=2.13,95%CI 1.14~4.10,P=0.011)频率高于335位苏氨酸(CC基因,比值比=0.42,95%CI 0.20~0.85,P=0.010)。这些关联在遭受创伤的非裔美国人身上更加明显。多元统计分析显示,每个ALI MYLK单...     

免疫细胞在支气管哮喘发病机制中的作用

支气管哮喘是多种免疫细胞及其因子参与的慢性呼吸道炎症.免疫细胞及其分泌的细胞因子与支气管哮喘发生、发展与病情转归等关系密切,通过对近年来免疫细胞及其分泌的细胞因子的认识可以促进人们在细胞与分子水平对支气管哮喘发病机制的理解,为支气管哮喘的及早诊断及进一步防治提供理论基础,并为支气管哮喘的新药开发开辟新的途径.     

补肾法治疗支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘发病与患者先天禀赋不足及后天虚损密切相关,尤与肾脏亏虚有关,肾虚贯穿于哮喘发病的全过程,近年来人们给予补肾法与哮喘更多的关注,理论及临床都取得较大的突破,现将其综述如下。     

哮喘患者血清MLCK水平与肺功能等指标的相关性研究

目的探讨哮喘患者血清肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和肺功能检测指标的关系及MLCK在哮喘中的可能作用机制。方法收集呼吸内科哮喘患者59例,正常对照47例,检测血清MLCK、用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比和FEV1/FVC等肺功能参数,采用Spearman等级相关分析各指标与血清MLCK的相关性,同时分析包括年龄、性别等因素对血清MLCK的影响。结果哮喘组患者血清MLCK表达比正常组明显增高(P<0.05),差异具有统计学意义;与肺功能等检测指标进行相关性分析得出,血清MLCK水平与年龄、性别之间无相关性;与FVC、FEV1pred%、FEV1/FVC%成正相关。结论患者血清MLCK高表达且肺功能等指标的正相关提示MLCK可能参与了哮喘患者的气道高反应。     

气道上皮细胞在支气管哮喘发病机制中的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病.气道在环境激发因子的作用下,气道上皮细胞是首先受累的细胞,气道上皮损伤与气道慢性炎症、气道高反应性、气道重塑等密切相关,气道上皮细胞可合成和释放多种炎症介质和细胞因子,在哮喘的发病机制中起着重要作用[1-2].气道上皮细胞已成为哮喘发病机制及治疗靶标的研究热点,本文就气道上皮细胞在哮喘发病机制中的研究进展作一综述.     

支气管哮喘的病因研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)尽管存在国家、地区和人群的差异,但近20多年来哮喘患病率在世界大部分地区正以惊人的速度上升,已成为最常见的慢性呼吸道疾病和全球关注的公众健康问题[1].     

支气管热成形术治疗难治性支气管哮喘的研究进展

支气管热成形术(bronchial thermoplasty,BT)是一种新兴非药物治疗手段,通过可控的射频热量消融气管壁平滑肌(airway smooth muscle,ASM),可减轻气管收缩,具有较好的疗效且安全性高。目前已被美国食品药品监督管理局(FDA)和我国国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准用于难治性支气管哮喘的临床治疗。本文就支气管热成形术的工作原理、操作方法和发展现状作一综述。     

A cardiac myosin light chain kinase regulates sarcomere assembly in the vertebrate heart

Marked sarcomere disorganization is a well-documented characteristic of cardiomyocytes in the failing human myocardium. Myosin regulatory light chain 2, ventricular/cardiac muscle isoform (MLC2v), which is involved in the development of human cardiomyopathy, is an important structural protein that affects physiologic cardiac sarcomere formation and heart development. Integrated cDNA expression analysis of failing human myocardia uncovered a novel protein kinase, cardiac-specific myosin light chain kinase (cardiac-MLCK), which acts on MLC2v. Expression levels of cardiac-MLCK were well correlated with the pulmonary arterial pressure of patients with heart failure. In cultured cardiomyocytes, knockdown of cardiac-MLCK by specific siRNAs decreased MLC2v phosphorylation and impaired epinephrine-induced activation of sarcomere reassembly. To further clarify the physiologic roles of cardiac-MLCK in vivo, we cloned the zebrafish ortholog z-cardiac-MLCK. Knockdown of z-cardiac-MLCK expression using morpholino antisense oligonucleotides resulted in dilated cardiac ventricles and immature sarcomere structures. These results suggest a significant role for cardiac-MLCK in cardiogenesis.     

支气管哮喘精准靶向治疗的研究进展

哮喘是一种慢性、异质性炎性疾病,具有复杂的病理机制和多种临床表型。随着分子生物学及基因测序等现代技术的不断进步,“精准医学”、“精密医学”越来越多的被提起并用于各种疾病的探讨。支气管哮喘的治疗也逐渐实现了从局部对症治疗到细胞再到分子水平的精准靶向治疗。本综述旨在对目前支气管哮喘精准靶向治疗研究现状进行分析,探讨精准治疗在哮喘疾病中的应用及发展。     

支气管哮喘病人居家护理研究进展

从支气管哮喘病人居家护理的定义和目的、程序、形式、内容等方面进行综述,探讨适合我国支气管哮喘病人的居家护理方案.     

支气管哮喘病人居家护理研究进展

从支气管哮喘病人居家护理的定义和目的、程序、形式、内容等方面进行综述,探讨适合我国支气管哮喘病人的居家护理方案。     

支气管哮喘病人吸入疗法研究进展

介绍了支气管哮喘吸入治疗的常用药物、吸入装置、吸入技术,为提高吸入治疗效果,改善哮喘控制质量、维持病情长期稳定提供借鉴.     

电子鼻检测技术在支气管哮喘诊断方面的研究进展

支气管哮喘的诊断主要依靠病史及肺功能检查,但对有禁忌证、配合欠佳的患者易误诊、漏诊。对支气管哮喘患者采用电子鼻检测技术检测呼出挥发性有机化合物,用于早期快速筛查支气管哮喘、评估类固醇治疗效果以及预测类固醇反应,是一种经济、快速和高诊断率的诊断方法。     

A role for long chain myosin light chain kinase (MLCK-210) in microvascular hyperpermeability during severe burns

Microvascular leakage has been implicated in the pathogenesis of multiple organ dysfunction during trauma. Previous studies suggest the involvement of myosin light chain (MLC) phosphorylation-triggered endothelial contraction in the development of microvascular hyperpermeability. Myosin light chain kinase (MLCK) plays a key role in the control of MLC-phosphorylation status; thus, it is thought to modulate barrier function through its regulation of intracellular contractile machinery. The aim of this study was to further investigate the endothelial mechanism of MLC-dependent barrier injury in burns, focusing on the long isoform of MLCK (MLCK-210) that has recently been identified as the predominant isoform expressed in vascular endothelial cells. An MLCK-210 knockout mouse model was subjected to third-degree scald burn covering 25% total body surface area. The mesenteric microcirculation was observed using intravital microscopy, and the microvascular permeability was assessed by measuring the transvenular flux of fluorescein isothiocyanate-albumin. In a separate experiment, in vivo mesenteric hydraulic conductivity (Lp) was measured using the modified Landis technique. The injury caused a profound microvascular leakage, as indicated by a 2-fold increase in albumin flux and 4-fold increase in Lp at the early stages, which was associated with a high mortality within the 24-h period. Compared with wild-type control, the MLCK-210-deficient mice displayed a significantly improved survival with a greatly attenuated microvascular hyperpermeability response to albumin and fluid. These results provide direct evidence for a role of MLCK-210 in mediating burn-induced microvascular barrier injury and validate MLCK-210 as a potential therapeutic target in the treatment of burn edema.