川芎嗪对百草枯中毒大鼠肾组织核因子-кB及iNOS表达的影响

目的探讨川芎嗪对急性百草枯中毒大鼠肾损伤时核因子-κB（NF-κB）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的影响。方法将50只SD大鼠随机分成空白组、阴性对照组、阳性对照组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组,对肾组织标本进行组织病理学检查,同时测定肾组织NF-κB和iNOS活性。结果与阴性对照组相比,川芎嗪低剂量组肾组织病理显示肾间质充血明显减轻,NF—κB和iNOS也降低（P〈0．01）;而川芎嗪高剂量组无明显改善。结论NF-κB及iNOS在百草枯所致大鼠肾损伤中起重要作用,川芎嗪能降低肾组织NF-κB及iNOS水平,减轻百草枯中毒大鼠的肾组织损伤。     

川芎嗪对急性百草枯中毒大鼠肝组织NO和iNOS的影响

目的探讨川芎嗪对急性百草枯中毒大鼠肝组织一氧化氮（NO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响及作用机制。方法将50只SD大鼠随机分成5组,空白对照组、阴性对照组、阳性对照组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组。观察大体标本、组织病理,测定血清中ALT、AST、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平,同时测定肝组织NO含量和iNOS活性。结果与阴性对照组比较,阳性对照组及川芎嗪低剂量组血清ALT、AST、MDA及肝组织NO浓度、iNOS活性均降低,血清SOD、GSH-Px均升高（P〈0.01,〈0.05）;而川芎嗪高剂量组血清ALT、AST、MDA及肝组织NO浓度、iNOS活性无统计学意义;肝组织病理损伤也显著减轻。结论川芎嗪对百草枯诱导的肝损伤具有保护作用,其作用可能是通过抑制NO水平和iNOS活性而实现的。     

百草枯致大鼠肺损伤时内源性CO和NO的变化

目的：探讨内源性CO和NO在大鼠百草枯（PQ）中毒性急性肺损伤中的作用。方法：肺组织常规HE染色和取血测定血浆丙二醛（MDA）含量来评价肺组织损伤情况;检测血浆中肿瘤坏死因子（TNF-α）水平。检测肺组织中CO和NO含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性。Western B10t方法测定HO-1和iNOS表达的变化。结果：PQ中毒后大鼠肺组织损伤明显加重,血浆MDA含量及TNF-α水平明显升高,应用正铁血红素（Hm）后血中CO含量明显升高,iNOS活性和N0水平则降低。结论：大鼠百草枯中毒性急性肺损伤时内源性CO和N0产生增加,在应用CO的供体氯血红素后CO升高更为明显,而NO产生降低,在一定程度上减轻了百草枯所致的大鼠急性肺损伤。     

西格列汀预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤保护机制的研究

目的：探讨西格列汀对大鼠肺缺血再灌注损伤（LIRI）的作用。方法：通过夹闭左肺动脉30min后松开的方法，创建肺组织缺血再灌注损伤模型。设立空白对照组（Sham组），对照组（I/R组），实验组（sitagliptin组），将30只，SD大鼠，随机分组，每组10只，检测各组肺组织的湿干比（W/D）;HE染色光镜下比较各组肺组织病理改变；测定丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性；测定NF-κB蛋白含量。结果：与假手术组对比，缺血再灌注组和西格列汀组的肺组织W/D、MDA、NF-κB含量升高，SOD、GSH-Px活性降低，而且肺组织病理也有明显变化;与缺血再灌注组对比，西格列汀组的肺组织W/D、MDA、NF-κB含量较低，SOD、GSH-Px活性较高，肺组织病理改变更轻。结论：西格列汀可减轻肺组织缺血再灌注损伤病理改变，并可能通过抑制NF-κB蛋白表达，减轻炎症反应和氧化应激，从而减轻大鼠的肺缺血再灌注损伤。     

一氧化氮对急性肺损伤发病过程中核因子-κB活化的调节作用

目的:探讨一氧化氮(NO)在急性重症胰腺炎急性肺损伤大鼠发病中的作用及肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化的关系．方法:健康雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、硝普钠(SNP)组、左旋精氨酸组、氨基胍组,每组6只．经胰管逆行注入去氧胆酸钠复制大鼠急性重症胰腺炎急性肺损伤模型．采用凝胶电泳迁移率方法检测肺泡巨噬细胞中NF-κB活性,RT-PCR分析iNOS mRNA 的表达,同时亦检测NO、TNF-α、iNOS的水平和肺组织病理学的改变．结果:模型组中NF-κB活性、iNOS mRNA表达及TNF-α、NO、iNOS的含量均显著高于假手术组(P=0．02)．肺组织病理学显示严重损害．NO的供体硝普钠及iNOS选择性抑制剂氨基胍可降低NF-κB活性(213．47±12．34, 222．98±17．69 vs 327．13±13．46,P<0．05),下调iNOS mRNA表达(SNP:2．35±0．34 vs 3．1 ±0．38,P<0．05)以及TNF-α(0．38±0．034, 0．45±0．043 μg/L vs 0．76±0．045 μg/L)、 NO(168．2±0．78,146．4±0．59 mmol/L vs 229．3 ±0．98 mmol/L)的水平,减轻肺组织病理学损伤．而左旋精氨酸组则无明显调节作用．离体实验结果与体内试验一致．结论:外源性NO可抑制NF-κB活化,降低 iNOS mRNA的表达,进而减少NO、TNF-α的释放．同样,经iNOS选择性抑制剂抑制内源性 NO的产生,也可控制机体的过度炎症反应．     

菠萝蛋白酶对哮喘大鼠的治疗作用及其机制

目的制备哮喘大鼠模型,观察菠萝蛋白酶治疗哮喘的作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为4组：模型组（A）、菠萝蛋白酶组（B）、菠萝蛋白酶干预对照组（C）、对照组（D）。用卵蛋白复制大鼠哮喘模型;行支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数;用免疫组织化学染色方法观察核因子-κB（NF-κB）在大鼠肺组织中的表达变化。结果NF-κB主要表达在气道上皮细胞;A、B、C、D组NF-κB胞核阳性的细胞数占气道上皮细胞数百分比分别为（29．86±2．59）％、（19．26±2．43）％、（10．22±3．41）％和（9．42±2．02）％,A、B组高于C、D组（P均〈0．01）,B组低于A组（P〈0．01）。结论菠萝蛋白酶能显著抑制哮喘大鼠气道上皮细胞核内NF-κB的表达,可能是菠萝蛋白酶治疗哮喘的作用机制之一。     

亚低温对急性肺损伤大鼠NF-κB、TNF-α影响的研究

目的探讨亚低温对内毒素（LPS）致急性肺损伤大鼠的保护作用及可能机制。方法雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为常温内毒素组（A组,n=12）、亚低温内毒素组（B组,n=12）、常温空白对照组（C组,n=12）、亚低温空白对照组（D组,n=12）。腹腔注射内毒素制备急性肺损伤大鼠模型,观察不同时间段各组大鼠血气变化、血清NF-κB、TNF-α含量变化以及处死后各组大鼠肺组织病理形态学变化和干湿重变化。结果与两组空白对照组相比,内毒素两组大鼠PCO2、肺含水量、肺血清NF-κB、TNF-α含量均明显升高（P〈0．05）,病理形态学显示肺组织中性粒细胞浸润、毛细血管充血、水肿及出血明显。与常温内毒素组相比,亚低温内毒素组大鼠肺组织病变明显减轻,各生物学指标及NF-κB、TNF-α水平也相应下降（P〈0．05）。结论亚低温能明显减少急性肺损伤大鼠血清中NF-κB、TNF-α含量,延缓了急性肺损伤的发展进程。     

抑制核因子κB对缺血再灌注大鼠心肌组织的保护作用

目的探讨丹参注射液对心肌组织的保护作用及其抑制NF-κB活化的可能机制。方法通过观察NF-κB抑制剂PDTC和丹参注射液处理的缺血再灌注（I/R）大鼠心肌,测定心肌组织MDA、MPO、SOD、NF-κB及ICAM-1、TGFβ1蛋白表达。结果心肌匀浆MDA含量、MPO活力明显高于对照组（P〈0.01）,SOD活性显著低于对照组（P〈0.01）;PDTC和丹参注射液组,MDA含量、MPO活性较I/R组明显减少（P〈0.01）,SOD较I/R组明显恢复（P〈0.01）。I/R组心肌细胞中NF-κBp65与ICAM-1蛋白表达信号显著增强,TGFβ1表达信号减低;在PDTC和丹参注射液组,NF-κBp65与ICAM-1表达水平较IR组明显降低,而TGFβ1呈相反变化。结论丹参注射液能增加I/R大鼠心肌SOD活性,减少脂质过氧化物MDA产生。减弱心肌MPO活力,减轻中性粒细胞对心肌细胞的浸润损害,抑制NF-κB的活化,保护I/R大鼠心肌组织。     

罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎NF-κB和ICAM-1的作用

目的探讨大鼠重症急性胰腺炎（SAP）时罗格列酮对核因子-κB（NF-κB）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的作用。方法急性胰腺炎模型组（SAP组）逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型;假手术组（SO组）逆行胆胰管注射等量生理盐水;罗格列酮组（R组）于造模前30min给予罗格列酮。检测血清淀粉酶（AMY）的变化,取胰头部胰腺组织行病理学检查;免疫组化检测胰腺组织NF-κB和ICAM-1的表达情况。结果SAP组各时间点AMY、胰腺组织病理评分及NF-κB和ICAM-1的表达较SO组增高（P〈0．01）;R组各时间点上述指标较SAP组均下降,但仍高于SO组（P〈0．01）;NF-κB和ICAM-1两者在SAP组和R组具有相关性（P〈0．01）。结论罗格列酮能减轻大鼠SAP胰腺病理损伤,其机制可能与通过抑制NF-κB的活性、降低ICAM-1的表达有关。     

气管内滴入核仁素shRNA表达载体对脂多糖肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞活化的影响

目的建立气管内滴人核仁素shRNA表达载体的实验模型,观察其对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡巨噬细胞（AM）活化的影响,探讨AM膜核仁素在LPS致大鼠ALI中的作用及机制。方法选择健康雄性SD大鼠40只,随机分为A组（空白对照组）,B组（ALI组）,C组（转染重组质粒pBS-U6-C23shRNA并ALI组）,D组（转染对照质粒pBS-U6-ControlshRNA并ALI组）。大鼠经尾静脉注射LPS以建立Au模型,气管内滴人法转染重组质粒pBS-U6-C23shRNA表达载体,免疫印迹（Westernblot）检测AM膜核仁素蛋白表达;核酸电泳迁移率实验（EMSA）检测AM中核因子（NF-κB）活性;酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）表达。结果转染pBS-U6-C23shRNA表达载体后可以显著下调AM膜核仁素蛋白表达;减轻肺病理损伤;降低NF-κB的活性以及肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的含量。与A组相比,B组及D组的大鼠AM膜核仁素蛋白表达显著增加,组间有统计学差异（P〈0．01）;C组大鼠AM膜核仁素蛋白表达明显下调,与B组相比,组间差异有统计学意义（P〈0．01）;而D组与B组中的大鼠AM膜核仁素蛋白表达组间没有统计学差异（P〉0．05）。经LPS处理后,各组大鼠AM中NF-κB活性显著增加,与A组相比,组间差异非常明显（P〈0．01）。c组大鼠AM中NF-κB活性明显降低,与B组比较,差异显著（P〈0．05）;而D组与B组比较,组间无明显差异（P〉0．05）。经LPS诱导肺损伤后,显著增加了大鼠BALF中促炎因子TNF-α和IL-6的表达,各组和A组相比差异显著（P〈0．01）;C组大鼠BALF中TNF-α和IL-6的含量显著降低,与B组相比差异显著（P〈0．01）;而D组与B组相比,组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论气管内滴入法可以安全有效转染核仁素shRNA表达载体,抑制AM活化,减轻肺损伤,AM膜核仁素参与了LPs致大鼠ALI的发病过程。     

气体信号分子硫化氢对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时,内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)生成的变化以及应用外源性H2S后对ALI的影响.方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)+LPS组以及NaHS+生理盐水(normal saline,NS)组(n均=12).LPS组大鼠每只气管内滴注LPS(100 μg/200 μl),对照组滴注等量NS.NaHS+LPS组大鼠滴注LPS前10 min腹腔注射NaHS(28 μmol/kg).各组均于滴注后4 h和8 h测定大鼠肺系数变化,光镜下观察肺组织形态学改变,检测肺组织中氧化性损伤产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白含量及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)计数的改变,并测定血浆中的H2S含量.结果 与对照组相比,LPS滴注4 h和8 h后,大鼠肺系数、肺组织中MDA含量、BALF中PMN数目及蛋白含量均明显升高(P值均＜0.01);而血浆中H2S含量则明显降低(P值均＜0.01);光镜下见肺泡萎陷、甚至结构消失,肺泡腔及间质弥漫性炎细胞浸润,部分肺泡代偿性气肿,且其病理改变随LPS滴注时间的延长而逐渐加重.与相应时间点的LPS组比较.NaHS+LPS组大鼠肺系数、肺组织中MDA含量、BALF中PMN数目及蛋白含量明显降低,血浆中H2S含量则明显升高(P值均＜0.01);光镜下肺间质和肺泡中炎细胞浸润程度明显减轻.结论 内源性H2S生成不足参与了ALI的形成过程,外源性H2S可以部分拮抗ALI,对肺组织起到细胞保护作用.     

L-精氨酸对慢性阻塞性肺病大鼠模型的肺功能保护

目的探讨L-精氨酸对被动吸烟致肺损伤大鼠的肺功能保护作用。方法采用香烟熏吸加气道内注入脂多糖法建立慢性阻塞性肺病（COPD）大鼠模型,并应用L-精氨酸干预,检测各组大鼠的肺功能、动脉血气,检测肺组织匀浆的NO及一氧化氮合酶（NOS）含量,观察肺组织病理学改变并进行形态学定量检测,检测肺组织内皮型NOS（eNOS）和诱生型NOS（iNOS）的表达情况。结果大鼠模型基本符合人类COPD组织病理学改变特点,应用L-精氨酸干预后,大鼠的肺组织损伤减轻,肺功能改善。结论应用L-精氨酸干预,对于COPD的形成有预防保护作用。     

异丙酚预处理对急性肺损伤脑组织Gq/11蛋白表达的干预作用

目的 观察异丙酚预处理后Gq/11蛋白在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠脑组织中的动态变化,探讨异丙酚是否通过影响Gq/11蛋白的表达对脑组织起保护作用.方法 用尾静脉注射油酸法复制ALI大鼠模型,将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、ALI组和异丙酚预处理组.检测各组大鼠血气(pH值、PaO2、PaCO2)、平均动脉血压(MABP)以及血浆和脑组织乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA).Western blot检测各组大鼠脑组织中的Gq/11蛋白含量.结果 异丙酚预处理组Gq/11蛋白含量为(133.89±21.59)%,较对照组增加(33.89±21.59)%(P＜0.01),但低于ALI组[(165.84±30.27)%,P＜0.05].异丙酚预处理组及ALI组PaO2较对照组明显降低(P值均＜0.01),但异丙酚预处理组高于ALI组(P＜0.01).异丙酚预处理组及ALI组MABP均较对照组降低(P值均＜0.01),异丙酚预处理组低于ALI组(P＜0.01).异丙酚预处理组脑组织LDH和CK活性分别为(1.51±0.58)U/mg、(35.83±7.09)U/mg,MDA含量为(4.70±1.59)U/mg,均低于ALI组[分别为(2.38±0.72)U/mg(P＜0.01),(44.31±8.15)U/mg(P＜0.01),(6.78±1.38)U/mg(P＜0.05)].血浆LDH和CK活性、MDA含量呈现与之相似的变化趋势.结论 异丙酚预处理能减轻ALI时脑的损伤程度,其保护作用可能与下调Gq/11蛋白有关.     

PTEN在支气管哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的 探讨PTEN在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道炎症中的作用.方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为2组,对照组和哮喘组.以卵清白蛋白致敏激发法复制大鼠哮喘模型,每只大鼠左肺留取肺组织,右肺进行支气管肺泡灌洗并留取支气管肺泡灌洗液(BALF).对BALF进行细胞分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4、IL-12浓度;采用免疫组织化学法和Western blot法测定PTEN蛋白的表达和量的变化.结果 ①BALF IL-4的浓度哮喘组显著高于对照组,BALF中IL-12的浓度哮喘组显著低于对照组(P值均＜0.01);②免疫组织化学显示PTEN蛋白主要表达细胞是支气管上皮细胞,Western blot法显示哮喘组支气管PTEN蛋白的表达显著低于对照组(P＜0.01);③支气管上皮细胞PTEN蛋白表达量分别与BALF中的IL-4浓度呈显著负相关,与BALF中的IL-12浓度呈显著正相关.结论 哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,它能减少Th2因子的表达,可能与哮喘大鼠气道炎症中Th1/Th2平衡密切相关.     

细胞因子对大鼠胰岛细胞凋亡影响和机制的实验研究

大鼠胰岛体外培养,根据是否加入细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)]及是否使用RNA干扰(RNAi)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因,将胰岛分为5组:空白对照组(A),阴性RNAi对照组(B),RNAi组(C),RNAi+细胞因子组(D)和细胞因子组(E).检测胰岛iNOS表达、培养液NO浓度和组织iNOS活性、胰岛细胞凋亡和胰岛素分泌.E组组织iNOS活性和培养液NO水平显著升高,凋亡细胞明显增多,胰岛存活率降低,胰岛素分泌减少(P<0.05或P<0.01).经RNAi沉默iNOS后,胰岛组织iNOS活性和培养液NO水平显著降低,凋亡细胞明显减少,胰岛功能均得到改善(P<0.05或P<0.01).本研究提示,iNOS/NO通路是细胞因子IL-1β和TNF-α对胰岛损害的重要机制,是促使细胞凋亡,影响胰岛存活与功能的重要因素.     

骨髓间充质干细胞移植对百草枯所致急性肺损伤治疗的研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSC)移植对百草枯所造成大鼠急性肺损伤的治疗效果.方法 分离培养大鼠BM-MSC,应用流式细胞技术及向成骨诱导分化来鉴定BM-MSC,大鼠48只,3只用于制备BM-MSC,剩余45只随机分为5组,每组9只.A组为正常对照组,B、C、D、E四组使用百草枯腹腔注射诱导造成肺损伤模型.造模...     

吡咯列酮对雨蛙肽诱导急性胰腺炎氧化应激过程的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡咯列酮在雨蛙肽诱导大鼠急性胰腺炎中对氧化应激产物的影响及保护作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、雨蛙肽+不同剂量吡咯列酮组、雨蛙肽组、雨蛙肽+吡咯列酮+GW9662组.每组6只.急性胰腺炎造模30 min后处死大鼠,光镜下观察胰腺组织病理学变化,测定各组大鼠胰腺组织质量与体重比,比色法检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)及组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量.结果 与对照组比较,雨蛙肽组胰腺组织水肿严重胰腺净重/体重(0.0072比0.0042)],MPO活性、MDA、NOS及iNOS含量升高(P＜0.01).与雨蛙肽组比较,吡咯列酮20 mg/kg及40 mg/kg组胰腺损伤减轻,胰腺净重/体重、MPO活性、MDA和NOS及iNOS含量降低(P＜0.05);与吡咯列酮40 mg/kg组比较,PPARγ拮抗剂GW9662逆转了吡咯列酮的保护作用(P＜0.05).结论 在雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎发病中,胰腺腺泡细胞的氧化应激损伤起了重要的作用,PPARγ激动剂吡咯列酮预先干预,通过降低氧化应激过程,对雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎有一定的保护作用.     

Protective effect of inducible nitric oxide synthase inhibitor on pancreas transplantation in rats

AIM： To investigate the effect of inducible nitric oxide synthase inhibitor, aminoguanidine, on pancreas transplantation in rats. METHODS： A model of pancreas transplantation was established in rats. Streptozotocin-induced diabetic male Wistar rats were randomly assigned to sham-operation control group （n = 6）, transplant control group （n = 6）, and aminoguanidine （AG） treatment group （n = 18）. In the AG group, aminoguanidine was added to intravascular infusion as the onset of reperfusion at the dose of 60 mg/kg, 80 mg/kg, 100 mg/kg body weight, respectively. Serum nitric oxide （NO） level, blood sugar and amylase activity were detected. Nitric oxide synthase （NOS） test kit was used to detect the pancreas cNOS and inducible NOS （iNOS） activity. Pancreas sections stained with HE and immunohistochemistry were evaluated under a light microscope. RESULTS： As compared with the transplant control group, the serum NO level and amylase activity decreased obviously and the evidence for pancreas injury was much less in the AG group. The AG （80 mg/kg body weight） group showed the most significant difference in NO and amylase （NO： 66.0 ± 16.6 vs 192.3 ± 60.0, P 〈 0.01 and amylase： 1426 ± 177 vs 4477± 630, P 〈 0.01）. The expression and activity of tissue iNOS, and blood sugar in the AG （80 mg/kg body weight） group were much lower than those in the transplant control group （iNOS： 2.01 ± 0.23 vs 26.59 ±5.78, P 〈 0.01 and blood sugar： 14.2 ±0.9 vs 16.8 ± 1.1, P 〈 0.01）. CONCLUSION： Selective iNOS inhibitor, aminoguanidine as a free radical, has a protective effect on pancreas transplantation in rats by inhibiting NO and reducing its toxicity.