三七总皂苷抗缺血再灌注损伤机制研究进展

三七总皂苷(panax notoginseng saponins PNS)是中药三七主要有效活性成分,具有抗缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury I/R)损伤作用。近年研究表明主要通过抑制炎症反应、抗氧化应激、阻滞细胞内钙超载、改善能量代谢、减少细胞凋亡等途径保护组织器官再灌注损伤。现对三七总皂苷的具体成分、抗I/R损伤作用机制进行系统的总结和综述。     

三七总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的药理研究进展

三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)是中药三七的主要有效成分,广泛应用于心血管系统疾病的治疗,如以缺血再灌注损伤为病理基础的急性冠脉综合征。近年来大量研究表明PNS主要通过抗氧化应激、阻滞钙离子超载、抑制中性粒细胞活化黏附、调节能量代谢、抑制细胞凋亡、调节血管内皮细胞功能等途径保护心肌,防止再灌注损伤。对三七中主要活性皂苷类化合物的抗心肌缺血再灌注损伤药理作用进行系统综述,为进一步开发利用三七类药物并指导其临床提供理论支持。     

海马CA1区缺血再灌注损伤的形态学改变及三七总皂苷的影响

目的：探讨大鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷(PNS)的影响。方法：线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等为评价指标。结果：三七总皂苷组神经症状明显减轻，海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加，与模型组间差异有显著性意义。结论：三七总皂苷能明显减轻脑缺血再灌注引起的神经损伤症状及海马CA1区神经元损伤的程度。     

三七总皂苷药理学研究进展

本文综述了三七总皂苷的止血、促进血细胞合成、抗炎症等药理学作用以及防治心血管疾病、保护肺肠缺血再灌注损伤、抗肿瘤作用等,为临床使用和科学研究提供参考。     

海马CA1区缺血再灌注损伤的形态学改变及三七总皂苷的影响

目的 :探讨大鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷 (PNS)的影响。方法 :线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等为评价指标。结果 :三七总皂苷组神经症状明显减轻 ,海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加 ,与模型组间差异有显著性意义。结论 :三七总皂苷能明显减轻脑缺血再灌注引起的神经损伤症状及海马CA1区神经元损伤的程度。     

三七总皂苷胃肠道生物黏附片的体外释药及黏附特性考察

 目的考察三七总皂苷胃肠道生物黏附片中的总皂苷及主要单体皂苷的体外释药动力学、生物黏附片体外对离体家兔肠粘膜的黏附力。方法释放度测定按中国药典2000年版附录转篮法,采用显色法测定黏附片中三七总皂苷的释放,采用高效液相方法测定三七皂苷R₁,人参皂苷Rg₁,人参皂苷Rb₁的释放特征,分别用零级释放、一级释放模型、Higuchi方程P、eppas方程对4者的释放曲线进行动力学模拟,阐明其释药机制,并采用相似因子法判断各单体皂苷和总皂苷的释放曲线是否相似;采用自制的黏附力测试装置测定生物黏附片对兔肠粘膜的黏附力,对黏附力进行体外评价。结果三七总皂苷,三七皂苷R₁,人参皂苷Rb₁的释放符合Peppas方程,人参皂苷Rg₁的释放曲线符合一级释放动力学;相似因子法判断3种单体的释放曲线均与总皂苷的释放曲线相似。生物黏附片对肠粘膜的黏附力明显大于普通片(P<0.01)。结论三七总皂苷胃肠道生物黏附片中单体皂苷与总皂苷的释放机制不同,但释放曲线相似。生物黏附片对于肠粘膜具有较大的黏附力。     

三七总皂苷预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠NF-κBp65、IL-1β表达的影响

目的:探讨不同剂量三七总皂苷预处理后对大鼠肾缺血再灌注损伤NF-κB信号通路的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白对照组,肾缺血再灌注损伤组,三七总皂苷40、80、160 mg/kg组,前两组给予生理盐水,后3组分别给予三七总皂苷40、80、160 mg/kg连续给药5天。后4组在最后1次给药1h后通过切除右肾、夹闭左肾动脉45min再灌注3h的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。术后处死大鼠,检测血肌酐、尿素氮,HE染色观察肾组织病理学改变,免疫组化法和PT-PCR法分别检测核因子-κBp65、白细胞介素-1β蛋白水平和mRNA表达。结果:肾缺血再灌注损伤组BUN、SCr水平明显增高,光镜下可见肾小管损伤明显,肾组织NF-κBp65、IL-1β蛋白水平和mRNA表达明显增高。三七总皂苷40、80、160 mg/kg组BUN、SCr水平明显降低,肾组织病理学改变明显减轻,NF-κBp65、IL-1β蛋白水平和mRNA表达显著降低,其中三七总皂苷160 mg/kg组的效果最明显。结论:三七总皂苷可能通过抑制肾缺血再灌注损伤肾组织中NF-κBp65、IL-1β的表达,减轻氧化应激损伤,从而对肾组织起到有效的保护作用。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护研究

目的：观察三七总皂苷（PNS）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用栓线阻断大鼠大脑中动脉血流制备脑缺血模型,进行神经病学体征观察,TTC染色测定缺血侧大脑脑梗死面积。另取大鼠分别测定颈总动脉血栓形成时间和血小板聚集率。结果：与模型组相比,脑梗死面积缩小,大鼠神经功能缺损症状得到不同程度的改善。与空白组相比,血栓形成时间延长,血小板聚集率下降。结论：三七总皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

三七茎叶总皂苷对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

目的：研究三七茎叶总皂苷（PNSSL）对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用,为PNSSL的开发利用提供基础。方法：将SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组40,80,160 mg·kg-1组、地奥心血康组,连续给药七天,末次给药后通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。观察缺血再灌注大鼠II导联心电图ST段的变化情况,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测心肌梗死面积,测定大鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性以及心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量,通过苏木精-伊红（HE）染色法观察缺血再灌心肌的病理形态。结果：与模型组相比,PNSSL各剂量组对于大鼠心电图ST段升高均具有降低作用,能够减少心肌梗死范围,其中PNSSL80,160 mg·kg-1组降低显著（P<0.05）;PNSSL160 mg·kg-1剂量能够明显降低血清中心肌酶活性（P<0.05）,PNSSL80 mg·kg-1显著升高心肌组织中SOD和GSH-Px的活性（P<0.05）。病理染色中,PNSSL组心肌组织间质水肿明显减轻,纤维排列整齐,心肌组织损伤降低。结论：三七茎叶总皂苷能够改善 由缺血再灌注引起的心肌组织损伤,改善心电图变化,提高细胞膜稳定性,清除氧自由基,减少炎性浸润,具有心肌保护作用。     

血栓通粉针(三七总皂苷)对大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2蛋白表达的影响

目的 观察血栓通粉针(三七总皂苷)对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞Bcl-2表达的影响,探讨其神经保护作用机制.方法 60只大鼠被随机分成血栓通大剂量组、血栓通小剂量组、川芎嗪组、模型组、假手术组,采用大脑中动脉栓塞法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,用免疫组织化学法检测脑组织中Bcl-2表达.结果 缺血再灌注组大鼠与假手术组比较、Bcl-2蛋白阳性细胞数目均增多,与缺血再灌注组比较,血栓通大剂量组、川芎嗪组Bcl-2阳性细胞数明显增多(P＜0.01);与血栓通小剂量组比较,血栓通大剂量组Bcl-2阳性细胞增高有显著性(P＜0.05).血栓通大剂量组与川芎嗪组比较未见明显差异(P＞0.05).结论 脑缺血再灌注24h后Bcl-2蛋白表达增强,血栓通大剂量组可上调Bcl-2蛋白的表达,能减轻脑组织的缺血再灌注损伤,改善神经功能缺失,其作用机制可能与增加Bcl-2表达有关.这可能是血栓通粉针(三七总皂苷)治疗缺血性脑血管病的机制之一.     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨三七总皂苷注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：40只Wistar大鼠被随机分为4组：假手术组、缺血再灌注损伤模型组、尼莫地平对照（Nim）组、三七总皂苷注射液处理组（PNS）。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，对脑水肿和脑梗死进行测量，并采用硫代巴比妥酸盐法测定MDA含量、邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。结果：PNS组与模型组比较，脑组织含水量减少（P〈0．01），脑梗死面积显著减小（P〈0．05）；SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA含量显著降低（P〈0．05）。结论：MDA是反映组织损伤程度的物质、SOD是体内重要的内源性保护物质，三七总皂苷注射液可降低缺血脑组织MDA的含量、增加SOD活性而发挥对脑的保护作用。     

人参总皂苷与三七总皂苷中枢神经系统活性比较

人参总皂苷和三七总皂苷在组成成分、原人参二醇型原人参三醇型的比值（PPD/PPT）存在差别,不过两者在抗脑缺血再灌注损伤、促智、抗帕金森、抗老年性痴呆以及抗抑郁等方面均表现出相同的活性,但目前活性的强弱并不清楚,两者活性的不同之处在于三七总皂苷还有抗炎、抗凋亡活性。在作用机制方面,两者也表现出相似的作用机理。活性强弱以及作用机制的差异将可能影响两者在治疗神经系统疾病方面的精准应用范围。此外,这些差异是否与特有成分三七皂苷R1,或二者的PPD/PPT比值有关尚有待研究。本课题组将对两者的活性以及机制进行对比性研究,并采用成分敲除技术阐述两者的药效物质基础差异,将有助于两者在临床上更精准的应用以及制定更合理的质量控制标准。     

以卡波普为黏附材料的三七总皂苷生物黏附片的研制与体外评价

 目的研制三七总皂苷生物黏附片,考察其体外释药动力学、对离体肠黏膜的黏附力。方法释放度测定方法按2005年版《中国药典》附录,采用显色法测定黏附片中三七总皂苷的释放,用零级释放、一级释放模型、Higuchi方程、Peppas方程对释放度进行动力学模拟,考察药物释放机制。以自制的黏附力测试装置测定生物黏附片对兔肠黏膜的黏附力。结果三七总皂苷生物黏附片体外释放符合设计要求,生物黏附片对于肠黏膜具有较大的黏附力。结论生物黏附片处方设计与制备工艺合理,达到了设计要求。     

黄芪甲苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马NSCs的保护作用

目的探讨黄芪甲苷(AS)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经干细胞(NSCs)的保护作用。方法无血清法培养新生大鼠海马NSCs,将NSCs分为对照组、缺糖缺氧-再灌注(OGD-R)组、AS和PNS配伍组。对照组常规培养,OGD-R组无糖缺氧处理后常规孵育,AS和PNS配伍组在OGD-R基础上用AS和PNS干预培养。比色法测定NSCs的乳酸脱氢酶(LDH),MTT法测定NSCs存活率,DAPI染色检测NSCs凋亡,Nestin/Brd U染色检测NSCs增殖。结果与对照组比较,OGD-R组NSCs的存活率及DAPI核染、Nestin/Brd U阳性反应显著降低,LDH漏出率显著升高(P0.01)。与OGD-R组比较,AS和PNS组NSCs的存活率、DAPI核染、Nestin/Brd U阳性光密度、面密度及细胞数显著增多,LDH漏出率显著降低(P0.01)。结论 AS和PNS可提高OGD-R新生大鼠海马NSCs的存活率,抑制NSCs凋亡,促进NSCs增殖。     

三七总皂苷药理研究进展

三七总皂苷对各种疾病有广泛的药理作用,其保护心脏、抗动脉粥样硬化等作用较为突出,但是其作用总是围绕抗血小板聚集、抗氧化、抗炎、对Ca^2＋运转的影响、提高NO水平等方面,进而发挥其药理作用。虽然目前对三七总皂苷的研究已经取得了一定进展,但是对其作用机制及应用研究仍有许多需要阐明的内容。随着基础研究的深入,对三七总皂苷应用规律的认识必将得到进一步加深,为临床应用提供实验室的科学研究依据。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护机制研究

目的:探讨三七总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:SD大鼠分成假手术组,模型组,三七总皂苷组。模型组和三七总皂苷组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注损伤模型,三七总皂苷组在缺血前15 min和缺血后6 h分别ip三七总皂苷100 mg.g-1,模型组ip等量生理盐水。术后24 h评价神经行为学变化,测定脑梗死体积,脑组织中伊文思蓝含量及白介素-β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8)水平。结果:三七总皂苷可有效降低脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积,明显减轻脑缺血区血脑屏障破坏的程度。三七总皂苷组脑组织中细胞因子及伊文思蓝的含量较缺血再灌注组显著降低(P<0.05)。结论:三七总皂苷对脑缺血再灌注损伤有显著的脑保护作用,其作用机制与降低脑缺血再灌注损伤中脑部细胞因子的表达和降低血脑屏障通透性有关。     

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞的细胞间黏附分子-1的影响

目的 研究三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白(ox LDL )损伤血管内皮细胞的保护作用,以探讨其治疗动脉硬化闭塞症 (ASO)的机制。方法 以培养原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为靶细胞, 用ox LDL造成HUVEC损伤模型,以三七总皂苷进行干预。光镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性;采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的黏附率;用流式细胞仪测定HUVEC的细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的蛋白表达。结果 ox-LDL作用HUVEC后12、24 h时,HUVEC损伤明显,细胞活性显著降低,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC的ICAM 1的蛋白表达水平也明显升高, 均明显高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),而三七总皂苷能使ox-LDL损伤的HUVEC形态趋于正常,活性增强,并明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率,显著降低ICAM-1蛋白的表达水平,与ox-LDL组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。结论 三七总皂苷能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核－血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,这可能是其治疗ASO的机制之一。     

三七总皂苷对神经元蛋白表达的影响

通过综述三七总皂苷（PNS）对神经元蛋白表达的影响，为进一步研究PNS对神经元蛋白的药理作用提供参考，也为临床上对神经系统方面疾病的治疗、药物的研究开发提供新的思路和途径。     

三七总皂苷调节哮喘小鼠气道炎症的免疫分子机制研究

目的观察三七总皂苷(PNS)对哮喘小鼠气道炎症的疗效及对免疫细胞Th1/Th2平衡的调节作用,从免疫平衡的角度寻找其作用靶点,探讨PNS防治支气管哮喘的可能作用机制。方法将SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分成正常对照组、哮喘模型组及PNS低、中、高剂量组。以卵清白蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法构建哮喘模型。观察小鼠肺组织病理变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清中IL-4、IFN-γ的变化。结果 PNS低、中、高剂量组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻,且小鼠血清中IFN-γ的表达具有升高趋势,以低、中剂量组效果明显(P0.05和P0.01),PNS中剂量组和PNS高剂量组血清IL-4浓度明显降低(P0.01)。结论 PNS可减轻哮喘小鼠肺组织炎性细胞浸润,减少气道上皮黏液分泌,改善气道炎症状态。PNS防治哮喘的机制之一可能是通过上调哮喘小鼠IFN-γ的分泌,抑制IL-4的分泌,进而促进Th0向Th1分化,抑制Th0向Th2分化,恢复Th1/Th2平衡状态。     

三七总皂苷对小鼠脑缺血再灌注损伤海马Bax、 Bcl-2表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对脑缺血再灌注损伤小鼠海马Bax和Bcl-2表达的影响。方法:采用双侧颈总动脉夹闭法构建缺血再灌注损伤模型,选用健康的6周龄昆明小鼠33只,分为空白组、PNS组、缺血9d组(缺血再灌注9d后取脑)、缺血24h组(缺血再灌注24h后取脑)。PNS组于缺血前3d开始腹腔注射PNS[30mg/(kg·d)],直至再灌注9d后取脑,缺血9d组和缺血24h组予以等体积0. 9%氯化钠注射液腹腔注射。各组取脑后制作冰冻切片,采用免疫组织化学法检测小鼠海马区脑组织Bax和Bcl-2阳性表达细胞数。结果:与空白组比较,缺血9d组Bcl-2、Bax水平均明显增高,差异有统计学意义(P 0. 05)。与缺血9d组比较,PNS组Bax的表达水平平均值明显降低,Bcl-2/Bax的表达水平明显增高,差异均具有统计学意义(P 0. 05);缺血9d组Bax和Bcl-2的表达均较缺血24h组增高,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论:PNS对短暂性双侧颈动脉闭塞型小鼠缺血再灌注损伤的作用机制是早期通过降低Bax表达,增大Bcl-2/Bax比值,抑制神经元凋亡,从而对大脑海马神经元起保护作用,且再灌注第9天损伤程度可能更大。