中国汉族家族性肥厚型心肌病肌球蛋白重链基因G823E突变分析

目的 研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系.方法 在1个中国汉族HCM家系中进行心脏肌钙蛋白T基因(TNNT2)、心脏肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)和心脏β-肌球蛋白重链基因(MYH7)的突变筛查,聚合酶链反应(PCR)扩增基因功能区外显子片段,并对PCR产物进行测序分析.以120名正常志愿者为对照组.结果 在该家系接受调查的12名成员中有4名成员携带MYH7基因G823E杂合突变,该突变位点位于MYH7基因的22号外显子并使823位的甘氨酸(G)转换为谷氨酸(E),该突变在西方人中未见报道,其导致的临床表型在家系内部呈现较明显的异质性,携带该突变的家族成员发病年龄和临床症状差异较大.该家系成员TNNT2及MYBPC3基因未发现突变且对照组相同位置未发现异常.结论 MYH7基因为我国家族性HCM的致病基因之一,G823E突变所致肥厚型心肌病呈现明显的个体异质性表型.     

家族性与散发性肥厚型心肌病基因突变的对比研究

目的 研究中国家族性及散发性肥厚型心肌病（HCM）患者的致病基因突变位点的异同。方法 对10个家系中36例HCM患者及50例散发的HCM患者进行B肌球蛋白重链（MYH7）、肌钙蛋白T（TNNT2）及肌球结合蛋白C（MYBPC3）扫描,聚合酶链式反应扩增,双脱氧末端终止法测序。结果家族性HCM患者中,3个家系的13例HCM患者发现MYH7错义突变,分别为18号外显子发生G12601A突变（Arg663His）、23号外显子发生G15373A突变（Glu924Lys）、20号外显子发生T13659C突变（Ile736Thr）,散发的50例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上T13659C突变。所有HCM患者均未发现TNNT2基因突变。家族性HCM患者中有2个家系共4例发现MYBPC3基因突变：2例为18号外显子上的Arg502Trp、2例为13号外显子碱基插入突变,即在7425～7426间插入CGGCA,导致Arg346fs移码突变;50例散发性HCM患者中未发现此基因突变。结论 MYH7和MYBPC3可能为我国家族性HCM的主要致病基因之一,而我国散发性HCM患者MYH7和MYBPC3基因突变率低;TNNT2可能不是我国HCM患者的主要致病基因。     

新疆3个家系HCM基因突变检测分析

目的：研究家族性肥厚型心肌病（HCM）的主要致病基因β肌球蛋白重链（MYH7）突变位点。方法：对3个HCM家系成员的MYH7基因3~23外显子及附近上下游序列采用DHPLC及直接测序分析。结果：P、L、Y三个家系的先证者具有MYH7基因错义突变,测序结果显示：发现三个家系患者MYH7基因均有一定的突变。P家系21号患者MYH7基因测序结果分析发现外显子3存在密码子Thr63第三位密码子c〉t转换及19号内含子第90位的a〉g的转换。L家系发现外显子3存在Thr63第三位密码子c〉t转换,并且,第14外显子有单碱基突变,造成Thr 441M et,在中国人中是首次发现。Y家系其他成员测序结果发现携带有第8外显子最后一位碱基存在t〉c突变。结论：MYH7基因在HCM家系中具有较高的突变率,不同突变基因型以及基因突变携带个体在临床表型上有所差异。采取基因突变检测和分析,有利于对HCM家族成员的诊断、患病风险预测及疾病早期预防和治疗。     

一个汉族肥厚型心肌病家系中首次发现肌球连接蛋白-C基因Arg346fs突变

目的研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法对5个经过MYH7基因扫描未发现异常的家族性HCM的先证者进行肌球连接蛋白-C基因(MYBPC3)扫描,聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区外显子片断,双脱氧末端终止法测序。对阳性结果者进行家系中其他成员筛查,并分析患者临床表型特点。结果在1个家系中发现MYBPC3基因的13号外显子的Arg346fs突变,而正常对照组同一位置未见异常,Arg346fs突变为我国患者中首次发现。结论MYBPC3基因为我国家族性HCM的的致病基因之一。其临床表型的异质性提示多因素参与了HCM的发生及外显。     

中国肥厚型心肌病与肌钙蛋白T基因的相关性研究

目的研究肌钙蛋白T(Troponin T,TNNT2)在中国肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)患者中的突变情况。方法对95例无血缘关系的HCM先证者(其中22例为家族性HCM先证者)进行肌钙蛋白T基因(TNNT2)突变筛查,利用聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区8、9、10、11、14、15、16号外显子片段,双脱氧末端终止法测序。家系资料调查包括:临床表现、体格检查、心脏超声和心电图。结果 16例FHCM患者及79例SHCM患者均未发现TNNT2基因的错义突变、移码突变、剪接突变。仅在9号外显子检出一同义突变,为ATC→ATT,均编码异亮氨酸(Ile)。结论 TNNT2不是我国肥厚型心肌病的常见致病基因。     

首次发现肥厚型心肌病肌球蛋白结合蛋白C基因Arg856fs突变

目的： 研究中国人群肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因突变位点，并对基因型与临床表型之间的关系进行分析。方法: 对76例HCM先证者进行聚合酶链反应(PCR)扩增心肌肌球蛋白结合蛋白C基因（MYBPC3）第15 16,18,26,28,34号外显子，产物做单链构象多态性(SSCP)分析，出现异常条带者将其目的片段和正常对照组该片段送检测序。结果: 在1例52岁男性患者的MYBPC3基因第26号外显子上发现了一个新的移码突变位点Arg856fs。由于在100名正常对照组中未见异常，故我们认为此突变位点为该患者的致病基因位点。结论: MYBPC3基因是我国HCM的致病基因之一。     

利用变性高效液相色谱方法进行HCM家系MYH7基因突变筛查研究

目的:研究利用变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测家族性肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)的主要致病基因β-肌球蛋白重链(beta-myosin heavy chain gene,MYH7)突变情况.方法:采用DHPLC结合DNA测序方法对3个新疆地区HCM家系成员的MYH7基因8、14外显子及附近上下游序列进行检测分析.结果:在其中一个家系中发现MYH7基因14外显子中存在Thr441Met突变,该突变在中国人中是首次发现.另外两个家系也发现有不同位点的突变.结论:MYH7基因在HCM家系中具有较高的突变率,不同突变基因型以及基因突变携带个体在临床表型上有所差异.运用变性高效液相色谱技术,能够快速有效地进行基因突变筛查,有利于对HCM家族成员的诊断、患病风险预测及疾病早期预防和治疗.     

安徽地区汉族人家族性与散发性肥厚型心肌病MYH7基因18及20号外显子突变分析

目的分析安徽地区汉族家族性及散发性肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)突变位点的异同。方法对3个家系中8例HCM患者及20例散发的HCM患者进行MYH7基因18及20号外显子扫描,双脱氧末端终止法测序。结果3个家族性HCM(FHCM)家系8例患者中,有2例患者发现MYH7基因20号及18号外显子发生突变,分别为20号外显子发生Arg723Gly突变;18号外显子发生Arg663His突变;散发的20例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上发生Ile736Thr突变,未发现18号外显子发生突变。结论MYH7基因中18号、20号外显子突变可能是安徽地区FHCM的常见突变位点之一;散发性HCM(SHCM)可能与FHCM具有相似的发病机制,但与FHCM相比,在MYH7基因中突变率较低。     

一个May-Hegglin异常家系非肌性肌球蛋白重链9基因突变位点的鉴定

目的：鉴定一个May-Hegglin异常（MHA）家系非肌性肌球蛋白重链9基因（MYH9）突变的类型及临床表型特点。方法：用聚合酶链反应（PCR）技术扩增先证者及其父亲的非性肌球蛋白重链9基因（MYH9）的25、31－32、38、40号外显子,分析PCR产物的核苷酸序列。确定突变位点后,分别扩增正常对照、后天获得性血小板减少症患者的对应基因区域并行核苷酸序列分析以资对照。进而进行PCR扩增片段的CpoI(RsrII）限制性内切酶图谱分析。结果：本家系中May-Hegglin异常患者具有典型的“血小板减少、巨大血小板、粒细胞包涵体”三连征。先证者及其父亲在MYH9的38号外显子上第5521位核苷酸存在G→A突变（GAG→AAG),并导致特征性的CpoI限制性内切酶图谱改变。结论：中国人的May-Hegglin异常存在MYH9基因突变。本家系中,其突变位点位于38号外显子（G5521A）,MYH9基因突变的传递规律与家系中临床表型分布相符。     

汉族家族性肥厚型心肌病患者的MYH7基因R663H、E924K突变

目的研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法对5个家族性HCM的先证者进行β-肌球蛋白重链基因(β-MHC)扫描,聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区外显子片段,双脱氧末端终止法测序。对阳性测序结果者进行家系中其他成员筛查,并分析患者临床表型特点。结果在其中2个家系中分别发现R663H、E924K杂合突变,而正常对照组同一位置未见异常,E924K在我国HCM患者中首次发现。结论β-MHC为我国家族性HCM的致病基因之一。其临床表型的异质性提示多因素参与了HCM的发生及外显。     

Ligase chain reaction for diagnosis of familial hypertrophic cardiomyopathy

ＬｉｇａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙＳｕｎＷｅｉｄｏｎｇ孙维东，ＨａｎｓｅｌＳｔｅｄｍａｎ，ＣｈｅｎＸｉａｏｌｉ，ＷｅｉＹｕ，ＬｉｕＭｅｉｚｈｅｎ，Ｘｕ...     

心肌肌球蛋白结合蛋白C基因双突变致家族性肥厚型心肌病的相关表型分析

目的:研究中国人心肌肌球蛋白结合蛋白C 基因(MYBPC3) 突变, 分析其基因型与表型的关系。方法:对一个肥厚型心肌病家系成员进行MYBPC3 突变筛查, 利用聚合酶链反应(PCR) 扩增其功能区外显子片段, 双脱氧末段终止法测序。表型分析包括临床特点、二维心脏超声及组织多普勒(TDI)。结果:在此家系中, 同时发现MYBPC3 基因C.2526C > G 和C.2971G>A 两个位点的突变, 而正常对照组同一位点未见异常。此家系共27 人, 其中4 人患病, 7 人携带, C.2526C >G 位于第25 号外显子, 编码蛋白由谷氨酸变为终止子, C.2971G>A 位于第28 号外显子, 编码蛋白由缬氨酸变为蛋氨酸。4 名患者均表现为室间隔中部肥厚, 2 名双突变患者同时合并心尖部肥厚, 舒张功能均明显受损, 而7 名携带者中有3 名出现局部心肌舒张功能的异常。结论:MYBPC3 基因双位点突变可能会导致其肥厚范围扩大, 心肌受损程度加重。MYBPC3 基因突变可能直接影响左室舒张功能。     

Mutation of Arg723Gly in β-myosin heavy chain gene in five Chinese families with hypertrophic cardiomyopathy

Background Hypertrophic cardiomyopathy （HCM） is a form of cardiomyopathy with an autosomal dominant inherited disease, which is caused by mutations in at least one of the sarcomeric protein genes. Mutations in the beta-myosin heavy chain （β-MHC） are the most common cause of HCM. This study was to reveal the disease-causing gene mutations in Chinese population with HCM, and to analyze the correlation between the genotype and phenotype. Methods The exons 3 to 26 of MYH7 were amplified by PCR, and the PCR products were sequenced in five non-kin HCM patients. A 17-year-old patient was detected to be an Arg723Gly mutation carrier. Then his family was gene-screened, and the correlation between genotype and phenotype was analyzed. Results The mutation of Arg723Gly in a Chinese family with HCM was detected for the first time. With a C-G transversion in nucleotide 13 619 of the MYH7 gene, located at the essential light chain interacting region in S1, the replacement of arginine by glycine took place at amino acid residue 723. A two-dimensional echocardiogram showed moderate asymmetrical septal hypertrophy with left atria enlargement. There was no obstruction in the left ventricular outflow tract. In his family, a total of 13 individuals were diagnosed HCM and 5 of them were dead of congestive heart failure at a mean age of 66-year-old. Eight living members were all detected to carry the mutation, in which 3 developed progressive heart failure. Moreover, the heart function of the people evidently deteriorates when their age are older than 50. The mutation and the disease show co-separated. Conclusion The Arg723Gly mutation is a malignant type. In Chinese the mutation has the similar characters to the former report but has low degree malignant.     

肥厚型心肌病肌钙蛋白T基因突变的研究

目的调查中国人群肥厚型心肌病(HCM)患者基因突变的发生情况并对基因型与临床表型之间的关系进行分析。方法对71例HCM先证者及100名正常对照的聚合酶链反应扩增产物行单链构象多态性分析,于肌钙蛋白T(TNNT2)基因第8、9、10、11、16外显子范围内寻找突变位点,并了解基因型明确的HCM患者的临床特点。结果 在1例患者TNNT2基因的第9外显子上发现了一个新的错义突变位点124A>C(K124N)。由于在100名正常对照中未见该错义突变,故我们认为此突变位点为该患者的致病基因位点。该患者38岁起出现临床症状,超声表现为室间隔中度肥厚,家族中无心源性猝死发作史。结论肌钙蛋白T的尾端对于其连接功能起着至关重要的作用,该区域的基因突变可导致肥厚型心肌病的发生。证实了该病具有异质性遗传的特点。     

Novel mutation and polymorphism of PRSS1 gene in the Chinese patients with hereditary pancreatitis and chronic pancreatitis

Background Mutations in the cationic trypsinogen gene （PRSS1） have been detected in patients with hereditary pancreatitis （HP）. This study investigated the prevalence of the R122H （c.365G〉A）, A121T （c.361 G〉A） and D162D （c.488 C〉T） mutations or polymorphisms in the common, non-hereditary forms of chronic pancreatitis and in an HP family.
Methods DNA was prepared from blood samples of 54 patients with chronic pancreatitis （35 alcoholic, 17 idiopathic and 2 hereditary） and 120 normal controls. The PRSS1 genes were amplified by polymerase chain reaction （PCR） and their products were analyzed by sequencing and related clinical data were also collected.
Results A new polymorphism （c.488 C〉T） of PRSS1 was found in 25 patients with chronic pancreatitis （including one affected member of the HP family） and six members of the normal controls. The C/T genotype was significantly increased in chronic pancreatitis （OR： 16.379, 95% CI： 5.7522-52.3663）, the frequency of c.488 C〉T change was in according with the Hardy-Weinberg equilibrium, but it doesn＇t affect the clinical phenotype. The commonly reported change of R122H （c.365G〉A） was not detected in any of the study subjects, c.361 G〉A was found in 2 affected members and one unaffected carrier in an HP family. One of the affected members of an HP family had c.361 G〉A mutation and polymorphism （c.488 C〉T） in the PRSS1 gene at the same time. The patient＇s clinical values （C3, C4, CA19-9 and HbA1c） were higher than those of the other patients with chronic pancreatitis. The two patients with HP developed diabetes mellitus and their father died with pancreatic cancer.
Conclusion A new polymorphism （c.488 C〉T） in the PRSS1 gene is associated with chronic pancreatitis, but it did not affect the clinical phenotype while the A121T （c.361 G〉A） mutation in the gene shows a significant correlation in the patients with HP.