新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响

目的:研究新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响,及成年期记忆功能和惊厥阈的长期改变.方法:将生后7天(postnatal 7 d,P7)的SD大鼠随机分成两组,每组16只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1 次,每次持续30 min,连续6 d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚.两组大鼠于出生后第61～65天(P61～P65)行Morris水迷宫实验,于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑测定大鼠的惊厥阈.随即处死大鼠,分别采用免疫组化方法和RT-PCR方法观察大鼠大脑皮层及海马GABA A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位表达的变化.结果:惊厥组大鼠在P64的寻找水下平台时间[(82 424±35 622)ms]较对照组[(40 712±29 467)ms]明显延长(P=0.001).在P65,惊厥组大鼠120 s内穿越原平台位置次数[(1.2±0.9)次]较对照组 [(3.1±1.3)次]明显减少(P＜0.001).惊厥组大鼠注射戊四唑后发生惊厥的潜伏期[(1 487±662) s]与对照组[(1 841±648)s]比较差异无统计学意义(P=0.137).惊厥组大鼠GABAAR α1亚单位免疫化学累积光密度在顶叶及海马CA1、 CA2和CA4区较对照组明显降低(P＜0.05);惊厥组大鼠GABAAR γ2亚单位免疫化学累积光密度在额叶和海马CA4区较对照组明显降低(P＜0.05).惊厥组大鼠大脑皮层GABAAR γ2亚单位和海马区α1亚单位mRNA的表达较对照组明显减少(P＜0.05).结论:新生大鼠反复惊厥可造成脑内GABAAR α1和γ2亚单位表达的长期改变,这种改变可能与新生期反复惊厥导致的成年期记忆障碍相关.     

GABAARα1在弥漫性皮质发育障碍鼠大脑皮质和海马中的表达

目的：观察γ-射线辐照诱导的弥漫性皮质发育障碍（DCD）模型鼠大脑皮质和海马结构中γ-氨基丁酸A受体α1亚型（GABAARα1）的表达,探讨其与癫痫发生的关系。方法：建立弥漫性皮质发育障碍大鼠模型,察看其行为、EEG改变,喂养到14～16周处死,采用常规HE染色、Nissl染色和Timm’s硫化银组织化学方法染色,免疫组织化学方法用SABC法,肉眼观察,光镜下观察大脑皮质和海马结构形态及CA3苔藓纤维发芽情况,大脑皮质和海马中GABAARα1阳性细胞形态结构及表达情况,免疫组化图象系统分析。结果：F1代组大鼠有自发性癫痫发作,头皮EEG示小波幅节律为主。小脑畸形、胼胝体发育不全、大脑皮质和海马CA1结节状物,皮质下灰质异位,海马异位神经元。双侧海马CA3区均有苔藓纤维发芽,与正常对照组和假手术组比较有显著差异（P〈0．05）。GABAARα1阳性细胞在F1代组的Fr、HL、Par1、Par2、CA1、CA2、CA3和DG区GABAARα1阳性细胞较母鼠组及正常对照组显著减少,有统计学意义（P值均〈0．05）。结论：大脑皮质和海马结构异常及抑制性GABAARα1的下调可能是弥漫性皮质发育障碍导致癫痫发作的重要因素之一。     

脑室内注射BDNF抗体对大鼠海马NOS表达的影响

目的：探讨脑室内注射脑源性神经营养因子（BDNF）抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马-氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的影响。方法：脑室内注射BDNF抗体一周后,采用Morris水迷宫进行行为检测;并用NADPH-黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。结果：与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降（P〈0．01）;实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目（38．37±5．23）明显少于对照组（49．53±5．74）（P〈 0．01）;实验组DG区NOS阳性神经元数目（48．77±5．51）明显少于对照组（60．40±7．39）（P〈0．01）。结论：脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降,海马NOS阳性神经元数目减少,提示BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关。     

常规与隔日生酮饮食干预对新生期反复惊厥大鼠神经行为损伤的比较研究

目的比较常规与隔日生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠神经行为损伤的干预作用。方法采用随机数表法将48只日龄8d的Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分成四组：单纯对照组、单纯惊厥组、惊厥＋常规生酮饮食组、惊厥＋隔日生酮饮食组,每组12只。通过三氟乙醚反复吸入建立新生期大鼠反复惊厥模型。各组大鼠禁饮食1d后,于日龄28d给予饮食干预并于日龄28d、35d检测血酮。于日龄35d进行神经行为测评（平面翻正测试、悬崖回避测试、负向趋地测试）。结果（1）平面翻正测试：单纯惊厥组平面翻正时间[（0．17±0．39）s]较单纯对照组[（0．67±0．49）s]明显缩短（P〈0．05）;惊厥＋常规生酮饮食组平面翻正时间[（0．5±0．52）s]较单纯惊厥组[（0．17±0．39）s]明显延长（P〈0．05）;惊厥＋隔日生酮饮食组[（0．17±0．39）s]与单纯惊厥组[（0．17±0．39）s]相比差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）悬崖回避测试：单纯惊厥组[（12．58±4．83）s]较单纯对照组[（1．92±0．90）s]悬崖回避时间明显延长（P〈0．05）;惊厥＋常规生酮饮食组[（3．33±1．50）s]较单纯惊厥组[（12．58±4．83）S]时间明显缩短（P〈0．05）;惊厥＋隔日生酮饮食组[（5．58±1．93）s]较单纯惊厥组[（12．58±4．83）s]时间明显缩短（P〈0．05）;惊厥＋隔日生酮饮食组[（5．58±1．93）s]与惊厥＋常规生酮饮食组[（3．33±1．50）s]相比时间明显延长（P〈0．05）。（3）负向趋地测试：单纯惊厥组[（3．17＋1．70）s]较单纯对照组[（1．42±0．67）S]时间明显延长（P〈O．05）;惊厥＋常规生酮饮食组[（1．42±0．52）s]较单纯惊厥组[（3．17±1．70）S]时间明显缩短（P〈0．05）;惊厥＋隔日生酮饮食组[（2．33±0．78）s]与单纯惊厥组[（3．17±1．70）s]相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论常规生酮饮食和隔日生酮饮食都可改善新生期大鼠反复惊厥所致的神经行为损伤,常规生酮饮食的干预效果优于隔日生酮饮食。     

脑慢性低灌注老龄大鼠海马α-分泌酶ADAM17 mRNA表达及其酶活性的变化

目的 探讨α-分泌酶在脑缺血后认知障碍发生机制中的作用。方法 将48只老龄Wistar大鼠随机分为低灌注组和假手术组,每组细分为术后1、2、4及16周4个亚组。永久性阻断大鼠双侧颈总动脉构建脑慢性低灌注模型;用Y迷宫测试大鼠学习记忆能力;用荧光定量PCR法检测大鼠海马α-分泌酶ADAM17 mRNA表达;用直接荧光法检测海马α-分泌酶活性。结果 低灌注组术后2、4及16周Y迷宫测试成绩均显著下降。术后2、4和16周低灌注组α-分泌酶ADAM17mRNA表达（与参照物比值分别为0．78±0．03、0．78±0．02和0．54±0．03）显著低于假手术组（分别为1．12±0．05、0．99±0．04和1．01±0．04）,差异有统计学意义（均P〈0．01）;而低灌注组α-分泌酶活性则于术后1、2、4和16周（荧光值分别为33880±1086、37496±817、32295±864和30069±1111）持续性显著降低,与假手术组（分别为39497±838、39802±1052、40137±776和39894±1076）相比,差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论脑慢性低灌注下调海马组织d．分泌酶ADAM17mRNA表达并抑制α-分泌酶活性,推测可能因此增加了α-分泌酶作用底物APP的量,间接激活APP代谢的β-分泌酶途径,最终增加脑内Aβ的生成量,进而损害大鼠学习记忆能力。     

糖尿病大鼠深二度烫伤创面中成纤维细胞生物学功能的改变

目的探讨糖尿病（DM）合并深二度烫伤创面中成纤维细胞（FB）主要生物学功能及其超微结构的变化,以及该变化与DM创面愈合延迟的病理关系。方法将80只SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组,各组分别于烫伤前及伤后3、7、14、21α采集创面皮肤组织标本。用流式细胞仪检测创面真皮组织中FB的增值周期;采用氯胺T氧化法测定创面组织羟脯氨酸（OHP）含量;应用ELISA技术检测Ⅰ／Ⅲ胶原比例;SP免疫组化法检测α-肌动蛋白（α—SMA）的表达;透射电镜观察FB超微结构的改变。结果DM大鼠烫伤前处于G0／G1期细胞较低（DM组66％±5％,正常组82％±10,P〈0．01）,烫伤后各时相点处于G0／G1期细胞比例高于正常大鼠（烫伤后3d,DM组70％±4％,正常组42％±13％,P〈0．01）,S期细胞低于正常大鼠（P〈0．05,P〈0．01）;DM大鼠皮肤组织单位面积OHP含量,烫伤前（DM组0．72μg／cm^2±0．06μg/cm^2,正常组1．42μg／cm^2±0．28μg/cm^2,P〈0．01）和烫伤后均低于正常大鼠（均P〈0．01）,且伤后7、14和21d,创面Ⅰ／Ⅲ胶原比例明显高于正常组（烫伤后7d,DM组为5．54％±0．47％,正常组为4．01％±0．32％,P〈0．01）;DM组n—SMA的表达延迟,上升缓慢,且伤后各时相点的峰值均低于正常组;伤后DM组真皮层成纤维细胞的内质网扩张,高尔基复合体欠发达,微管微丝缺乏,且胞浆中溶酶体明显增多。结论DM创面修复延迟可能与FB增殖异常、胶原合成能力减弱、α—SMA表达不足以及FB超微结构改变等有关。     

慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c—fos和caspase-3蛋白的表达

目的探讨慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白的表达，以探讨老年抑郁症的发病机制。方法将20只Wistar老年大鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。实验组大鼠每天强迫游泳20min，并每周给予电刺激和强光照射各1次，经过21天应激制作老年大鼠慢性应激抑郁模型，对照组正常喂养，不给予上述处理。采用特异性抗体标记的免疫组织化学方法，检测实验21天后老年大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白的表达情况，并观察大鼠开场行为和排便情况。结果实验组老年大鼠中央格停留时间延长，水平穿越格数减少，修饰行为减少，排便次数增多，C—fos平均灰度值：实验组166．56±9．73VS对照组149．62±12．91（P=0．000），阳性细胞数：实验组41．12±4．72VS对照组31．12±3．25（P=0．000），caspase-3平均灰度值：实验组202．59±2．64VS对照组179．74±8．24（P=0．000），阳性细胞数：实验组24．73±2．57VS对照组18．86±1．13（P=0．000）。结论慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白表达增加，行为表现异常，可能与慢性应激所致细胞凋亡增强、海马区脑组织损伤有关。     

不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子（BDNF）及突触后致密质95（PSD-95）的表达变化，探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程（1周、2周、4周）吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后，应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降（P〈0．01），吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升（P〈0．05），但仍低于生理盐水对照组（P〈0．01），吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降（P〈0．01）。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低，吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。     

神经元型一氧化氮合酶在快速衰老小鼠海马中的增龄性改变

[目的]通过观察快速衰老小鼠（SAM）在衰老过程中海马中nNOS的分布和表达变化,探讨NO/nNOS在中枢神经系统衰老中的作用。[方法]采用雄性快速衰老亚系8小鼠（SAMP8）及抗快速衰老亚系1小鼠（SAMR1）为研究对象,其中SAMP8为实验组,SAMR1为对照组,每组动物再分为青年组（2月龄）和老年组（10月龄）两组,每个年龄组随机分配6只动物。用免疫组织化学法标记SAM海马中nNOS神经元,观察海马CA1,CA2和CA3区nNOS神经元的形态和分布,并计数nNOS神经元的数量;用RT-PCR法检测海马中nNOSmRNA表达水平（用平均灰度值表示）。 [结果]老龄SAMP8海马中阳性神经元的形态与其它组比较无明显差别,但CA1和CA2区阳性神经元密度明显减低,CA3区阳性神经元密度无明显改变。SAMP8老年组与青年组相比,海马CA1和CA2区nNOS阳性细胞的数量显著减少（73±14vs144±38,P〈0.01;71±30vs126±39,P〈0.05）,CA3区阳性神经元数量无显著差别;SAMP8与SAMR1比较,青年组海马nNOS阳性细胞的数量无显著差别,老年组海马CA1和CA2区阳性细胞的数量显著减少（73±14vs139±24,P〈0.01;71±30vs120±37,P〈0.05）。SAMP8老年组海马nNOSmRNA水平明显低于青年组（0.43±0.17vs0.92±0.15,P〈0.01）,且低于相应月龄SAMR1（0.43±0.17vs0.86±0.13,P〈0.01）。[结论]海马中nNOS催化产生不足量NO可能加速SAMP8衰老,致使学习记忆能力下降,为通过调节NO产量来延缓衰老及衰老相关学习记忆能力下降提供了理论依据。     

断乳前丰富环境暴露促进海马神经发生及其机制研究

目的探讨断乳前丰富环境暴露对海马神经发生的影响及其可能机制。方法36只10日龄的SD大鼠随机分为对照组和丰富环境组,每组18只。10-24日龄时两组大鼠隔日予以Brdu50mg／kg腹腔注射,丰富环境组大鼠每日予以丰富环境暴露20min。24日龄时丰富环境暴露结束后两组各取6只大鼠取海马提核蛋白行钙调蛋白和磷酸化CREB Western印迹检测。63日龄时处死其余大鼠取脑行冰冻切片,取前囟后3．6mm部位切片行尼氏染色,计数右侧海马齿状回细胞数目。BIdu免疫组化后计算右侧海马DG区BrdU阳性细胞数目。免疫荧光双标后计算BrdU阳性细胞分化为神经元（BrdU／NeuN共表达）和星性胶质细胞（BrdU／GFAP共表达）的比率。结果Western印迹检测结果显示与对照组比较,丰富环境组大鼠海马核蛋白的钙调蛋白（0．605±0．03 5 vs 0．245±0．035,t=-10．182,P=0．01）和磷酸化CREB（0．485±0．007 vs 0．220±0．014,t=-23．702,P=0．002）水平较高。尼氏染色后计数前囟后3．6min部位右侧海马齿状回细胞数目,结果显示丰富环境组细胞数目明显多于对照组（1580±72 vs 1375±62,t=-7．461,P〈0．01）。丰富环境组大鼠右侧海马区BrdU阳性细胞数明显多于对照组（5363±487 vs 2984±318,t=-14.177,P〈0.01）,且神经元分化率（85．0％±2．8％ vs 80．2％±2．8％,t=-4．166,P〈0．01）和星形胶质细胞分化率也高于对照组（4．0％±0．5％vs2．6％±0．6％,t=-6．493,P〈0．01）。结论断乳前丰富环境暴露可以促进海马神经发生,其机制有可能与丰富环境暴露促进海马钙调蛋白和CREB活化有关。     

五味子乙素对ICR小鼠的抗焦虑作用及其作用机制

目的：探讨五味子乙素（SchB）对ICR小鼠的抗焦虑作用,并阐明其相关机制。方法：ICR小鼠分为空白对照组（灌胃给予双蒸水）、2.5 mg·kg^-1SchB组、5.0 mg·kg^-1SchB组和10.0 mg·kg^-1SchB组（灌胃给予相应剂量SchB）。各组小鼠连续灌胃给药7d后,进行十字迷宫及零迷宫实验;实验结束后,取空白对照组及SchB 10 mg·kg^-1组小鼠外周血及脑组织。采用酶联免疫吸附试验检测小鼠外周血和脑组织中γ氨基丁酸（GABA）及谷氨酸（Glu）水平,计算GABA/Glu比值;采用Western blotting法检测小鼠脑组织中GABAA受体α1亚单位（GABAARα1）与GABAA受体γ2亚单位（GABAARγ2）的表达水平。结果：与空白对照组比较,5.0和10.0 mg·kg^-1SchB组小鼠在高架十字迷宫中进入开臂的次数百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,开臂滞留时间百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,在高架零迷宫中进入开臂次数百分率明显增加（P<0.01）,开臂探头次数百分率明显增加（P<0.01）。与空白对照组比较,10.0 mg·kg^-1SchB组小鼠外周血及脑组织中GABA水平明显增加（P<0.01）,Glu水平明显降低（P<0.01）,GABA/Glu的比值明显升高（P<0.01）,脑组织中GABAA Rα1和GABAA Rγ2表达水平明显升高（P<0.01）。结论：SchB对小鼠具有抗焦虑作用,该作用可能与调节外周血和脑组织中GABA和Glu水平及脑组织中GABAARα1和GABAARγ2表达水平有关。     

遗传性癫病易感大鼠惊厥后脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基NR1、NR2A、NR2B蛋白的表达

目的:探讨惊厥后大脑皮质N-甲基-D天冬氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体亚基蛋白表达与癫癎发病机制的关系.方法:利用免疫组化技术,观察听源性癫癎易感大鼠P77PMC惊厥后不同时间大脑皮质、海马等脑区NMDA受体亚基NR1,NR2A,NR2B蛋白表达状况.结果:惊厥后大脑皮质,海马齿状回,CA1、CA3等脑区NR1蛋白表达呈时间依赖性增高.大脑皮质在惊厥后4 h NR1蛋白表达即开始增加,24～48 h达高峰,海马齿状回、CA1和CA3等脑区4 h达高峰,8 h开始下降,24 h后恢复正常.惊厥后4～8 h,在海马CA1区NR2A亚基蛋白表达短暂性降低.而在大脑皮质、海马齿状回和CA3等脑区,惊厥后各时间点NR2A,NR2B蛋白表达均无明显改变.结论:听源性惊厥后NMDA受体亚基蛋白表达的变化提示NMDA受体亚基组成的改变,这种改变可能与神经网络兴奋性增高及癫癎易感性的保持有关.     

神经肽Y基因转染对大鼠癫痫发作及海马磷酸化Tau蛋白的影响

目的 探讨神经肽Y基因（rAAV2/1-hNPY-EGFP）转染对大鼠癫痫发作行为、脑电图（electroencephalogram,EEG）及其海马磷酸化Tau蛋白的影响.方法 将实验组动物分为3组：对照组、KA组及NPY组,每组24只.NPY组向侧脑室注射10μl的rAAV2/1-NPY-EGFP（滴度为5×1011v.g./ml）,KA组向侧脑室注射等量生理盐水.对照组在海马CA3区及侧脑室注射等量生理盐水.利用视频监视系统观察注射后2周和4周各组大鼠癫痫发作情况、发作潜伏期以及EEG,同时应用Western blotting方法检测大鼠海马中磷酸化Tau蛋白的表达.结果 （1）2周时NPY组大鼠行为学发作级别[（12.13±8.06）分]与KA组相比[（12.10±8.07）分]无明显差异（P＞0.05）,4周时NPY组大鼠行为学发作级别降低[（6.06±3.78）分]、发作潜伏期延长[（79.06± 8.83） min]、脑电图癫痫波放电频率减少、波幅降低（P＜0.05）,对照组无发作;（2）与对照组相比,KA组和NPY组大鼠在2周和4周时磷酸化Tau蛋白表达水平均明显增加（P＜0.05）;与KA组相比（1.87±0.23 RQ value）,4周时NPY组大鼠海马组织中磷酸化Tau蛋白表达水平（1.15±0.16 RQ value）显著降低（P＜0.05）.结论 磷酸化Tau蛋白在癫痫大鼠海马组织中的表达变化与癫痫发作密切相关;rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可以明显减轻大鼠癫痫发作级别,并可延长发作潜伏期.rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可能通过抑制KA诱导的大鼠癫痫发作时磷酸化Tau蛋白的表达而发挥抗癫痫作用.     

β-肾上腺素能激动剂对急性肺损伤大鼠肺泡液体的清除效应

目的探讨β-肾上腺素能激动剂(多巴酚丁胺)对内毒素诱导急性肺损伤肺泡液体清除的效应。方法内毒素静脉注射复制大鼠急性肺损伤模型。清洁级雄性SD大鼠32只随机分为正常对照组、急性肺损伤组、多巴酚丁胺对照组和多巴酚丁胺治疗组。单核素示踪技术测定1h肺泡液体清除率(AFC)。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织α、β、γ钠通道(rENaC)mRNA表达。结果急性肺损伤组AFC显著低于正常对照组(14·0%±1·2%vs21·0%±3·9%,P<0·05)。多巴酚丁胺对照组AFC显著高于正常对照组,多巴酚丁胺治疗组AFC(20·0%±3·9%)显著高于急性肺损伤组(均P<0·05)。急性肺损伤组和多巴酚丁胺治疗组肺组织α、β-rENaC mRNA表达显著高于正常对照组和多巴酚丁胺对照组(1·40±0·40、0·70±0·8、1·38±0·13、0·71±0·17vs1·01±0·14、0·58±0·12,均P<0·05)。多巴酚丁胺治疗组和多巴酚丁胺对照组γ-rENaC mRNA表达显著高于急性肺损伤组和正常对照组(0·90±0·19、0·97±0·15vs0·69±0·10、0·70±0·32,均P<0·05)。结论β-肾上腺素能激动剂通过上调γ-rENaC的表达,增加急性肺损伤肺泡液体清除。     

尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

目的 探讨尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区(VTA)烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)部分亚单位mRNA表达的影响.方法 39只出生35 d的雄性Wistar大鼠随机分为实验组(N组,n=20),和对照组(C组,n=19),N组大鼠进行为期10d的尼古丁(1.0mg·kg-1·d-1)皮下注射,C组大鼠以生理盐水对照处理10d.其后,在N组和C组大鼠中各随机抽取6只(分别为NE组,n=6,和CE组,n=6)大鼠断头取脑分离VTA区提取mRNA,实时定量检测nACh受体α4、α5、α7和β2亚单位表达.N组和C组其余大鼠(分别为NA组n=14,CA组n=13)在出生后60d以Samson糖水递减程序诱导建立双瓶自由选择饮酒行为模型,共计69d,之后以相同程序定量检测VTA区标本相同指标.结果 ①因素分析显示:两因素(尼古丁暴露、饮酒行为)对VTA区nAChRα4、α5亚单位表达水平均有调节作用(F值分别为6.13,5.407,5.186,7.132,P＜0.05);饮酒行为因素对β2亚单位表达水平有调节作用(F=5.896,P＜0.05);两因素对α7亚单位表达有极强的交互作用(F=13.894,P＜0.001),对α5、β2亚单位表达有交互作用(F值分别为6.149,4.222,P＜0.05).②NA组α4、α5、α7和β2亚单位mRNA表达不同程度的显著高于CA组(F值分别为7.941,13.517,17.438,9.272,分别P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01),NA组的α4、α5、α7、β2亚单位表达水平显著高于NE组(F值分别为5.293,8.500,6.149,4.837,P＜0.05);CA组α7亚单位表达水平显著低于CE组(F=12.750,P＜0.01).结论 尼古丁和乙醇共同作用于VTA区包含有α4、α5、α7、β2亚单位的nAChR亚型.     

睡眠呼吸暂停综合征及鼾症患者事件相关电位的研究

目的　研究睡眠呼吸暂停及鼾症患者事件相关电位 (P3)的情况 ,探讨可能的机制。方法　入组受试者分为睡眠呼吸暂停患者组 2 1例、鼾症组 2 1例及正常对照组 2 1例 ,均进行睡眠多导仪、听觉诱发事件相关电位 (P3)、临床记忆量表检查及神经系统查体。结果采用GLM程序分析。结果　睡眠呼吸暂停患者组记忆商 (MQ) 90± 12 ,P3潜伏期Fz记录点 :36 3ms± 2 3ms ,Cz记录点 :36 9ms± 2 8ms;鼾症组MQ :10 1± 17,P3潜伏期 :Fz记录点 :337ms± 31ms ,Cz记录点 :340ms± 32ms ;正常对照组MQ :114± 12 ,P3潜伏期 :Fz记录点 :341ms± 2 9ms ,Cz记录点 338ms± 30ms。睡眠呼吸暂停患者组与鼾症组、正常对照组的P3潜伏期和记忆商比较差异有显著意义 (P <0 0 5 )。鼾症患者记忆商较正常对照组降低。结论　睡眠呼吸暂停患者有认知功能损害。鼾症患者记忆功能减退。夜间低氧血症可能起重要作用     

胡椒碱对癫痫模型鼠海马氨基酸受体的影响

目的探讨胡椒碱对戊四氮致痫大鼠海马谷氨酸受体ξ1(N-methyl-D-aspartate recepterξ1,NMDAξ1)和γ-氨基丁酸受体αl(γ-aminobutyricacid-A reeepter,GABAARαl)的影响。方法24只成年SD大鼠随机分为对照组、模型组和胡椒碱组,每组8只。模型组和胡椒碱组大鼠腹腔注射戊四氮60mg/kg,诱导癫痫发作。胡椒碱组于注射戊四氮之前1h经腹腔注射胡椒碱60mg,并观察1h。然后处死大鼠取脑,应用SP法检测大鼠海马NMDAξ1和GABAARαl的变化。结果胡椒碱组海马NMDAξ1阳性细胞数较模型组减少,平均光密度值降低(P0.01),但较正常对照组增多(P0.05);胡椒碱组GABAARαl阳性细胞数较模型组增多,平均光密度值增强(P0.01),但较正常对照组降低(P0.05)。结论胡椒碱可以通过抑制NMDAξ1的表达,促进GABAARαl的表达,在癫痫发作中发挥保护作用。     

惊厥和亚惊厥剂量戊四唑对大鼠脑内NMDA受体亚单位蛋白表达的影响

目的:研究不同剂量戊四唑刺激对大脑皮层内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR1、NR2A和NR2B 3种亚单位表达量的影响.方法:腹腔注射亚惊厥剂量(35 mg/kg)和惊厥剂量(50 mg/kg)的戊四唑,注射后不同时间点分离大脑皮层,用免疫印迹法检测NMDA受体NR1、NR2A、NR2B 3种亚单位的蛋白含量.结果:注射戊四唑亚惊厥剂量和惊厥剂量组大鼠的行为学差异非常显著(P＜0.001),但NMDA受体3种亚单位仅NR2A亚单位在1 h点有显著性增高,且惊厥剂量组NR2A的表达量比亚惊厥剂量组高(P＜0.05).惊厥剂量组NR2A和NR2B表达有先增加再降低然后恢复至正常水平的趋势,而NR1亚单位改变不明显.结论:戊四唑引起惊厥的机制可能与戊四唑首先影响NR2亚单位蛋白的表达,以调节NMDA受体的功能有关.     

2型糖尿病大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道α、β1亚基蛋白及mRNA表达水平变化

目的  探讨2型糖尿病（T2DM）大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（BKCa）α、β1亚基蛋白及mRNA表达水平变化,从分子水平阐明T2DM大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞膜BKCa通道活性改变的具体机制,为T2DM的综合治疗提供新靶点;为特异性针对此环节的药物研发提供实验依据。方法  SD大鼠高糖高脂饮食1个月后腹腔注射链脲菌素STZ（25 mg/kg）建立T2DM大鼠模型。免疫印记法和实时定量聚合酶链式反应测定肠系膜动脉BKCa通道α和β1亚基的蛋白和mRNA表达水平。结果  ①免疫印迹结果显示：模型组在第8周和第12周肠系膜动脉大电导钙激活钾通道（BKCa）α蛋白相对表达量分别为（1.093±0.251）和（0.921±0.153）,与对照组比较差异无统计学意义（P >0.05）;β1蛋白相对表达量分别为（0.334±0.200）和（0.193±0.310）,与对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）。②实时定量聚合酶链式反应结果显示,模型组在第8周和第12周肠系膜动脉BKCa α亚基mRNA的表达分别为（1.15±0.03）和（0.92±0.04）,与对照组比较差异无统计学意义（P >0.05）;β1亚基mRNA的表达分别为（0.47±0.10）和（0.37±0.12）,与对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）。结论  T2DM大鼠肠系膜动脉BKCa β1亚基蛋白和mRNA表达在8周及12周明显降低。