HCV基因型与HCV感染者ALT的关系

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＣＶ感染者血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的关系，本文应用ＨＣＶＮＳ５区逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７９例抗－ＨＣＶ阳性者进行ＨＣＶＲＮＡ检测，同时用限制性内功酶法对ＨＣＶ进行基因分型。检出ＨＣＶＲＮＡ阳性者６９例，其中ＨＣＶⅡ型３０例，Ⅲ型２７例，Ⅱ／Ⅲ混合型１２例，ＨＣＶ不同的基因型在ＡＬＴ正常组和异常组中的分布有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型主要分布于ＡＬＴ异常组中，Ⅲ型主要分布于ＡＬＴ正常组中。提示Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型很可能是导致ＡＬＴ异常的主要型别，应引起足够重视。     

HCV感染基因型病毒复制程度与肝病关系的研究

采用限制性内切酶Ｓａｕ３Ａｌ和ＨａｅⅢ对５４例ＲＴ－ＰＣＲ法ＨＣＶＲＮＡ阳性的５＇ＮＣ区扩增产物进行酶切分型；ＰＣＲ滴定法半定量分析ＨＣＶＲＮＡ含量。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶⅠ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ、Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅠ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４），ＨＣＶⅡ型感染阳性率在ＡＨ、ＣＡＨ、ＬＣ三组间无显著差异（     

不同方法对丙型肝炎病毒基因分型结果比较

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）血清学分型与基因分型结果的一致性,可靠性和实用性,对基因型明确的５７例患者血清用ＥＩＡ进行血清学分型,并与部分患者临床资料进行比较。结果显示：ＥＩＡ检出型特异性抗体３２例（５６．１％）,其中血清１型（发于基因型Ⅰ,Ⅱ型）１５例（４６．９％）,血清２型（相当于基因型Ⅲ,Ⅳ型）１０例（３１．２％）血清１,２型均阳性７例（２１．９％）,血清型与基因型符合率为７１．２％（２３／     

输血后丙型肝炎前瞻性调查

１９９０－１９９１年在河北省甲乙两县用前瞻性方法调查了输血后肝炎、甲县献血员在献血前筛查ＡＬＴ和ＨＢｓＡｇ，观察了６４名受血者；乙县献血员献血前不筛查任何指标，观察了９０名受血者。结果输血后肝炎发生率，甲县为２１．９％，乙县为４４．４％；输血后抗－ＨＣＶ阳转率分别为１８．８％和４５．６％；其中输血后丙型肝炎分别为１４．１％和４１．１％。ＡＬＴ首次异常距输血平均时间，甲县为５１．９±２０。９天，乙县为４８．２±１６．８天，抗－ＨＣＶ阳性受血者为３５．９±１７．９天。抗－ＨＣＶ阳转距输血平均时间，甲县４２．４±１５．９天，乙县３８．４±１１．８天。输入抗，ＨＣＶ阳性或阴性血的受血者，ＨＣＶ总感染率分别为８８．２％（４５／５１）和７．８％（８／１０３），其中输血后丙型肝炎发生率分别为７８．４％（４０／５１）和５．８％（６／１０３）。既往ＨＣＶ隐性感染者输血后丙型肝炎发生率为５２．４％（１１／２１）。     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

聚合酶链反应检测再生障碍性贫血清中乙型和丙型肝炎病毒

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了３７例非肝炎相关再生障碍性贫血（ＮＨＡＡ）和１８例肝炎相关再生障碍性贫血（ＡＨＨ）血清中的乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ ＤＮＡ）、丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ ＲＮＡ）。结果显示：ＮＨＡＡ的ＨＢＶ ＤＮＡ检出率为１３．５％（５／３７），ＨＡＡ为２２．２％（４／１８），两比较Ｐ＞０．０５。ＮＨＡＡ的ＨＣＶ ＲＮＡ检出率为２．７％（１／３７），ＨＡＡ为３８．９％（７／１８     

丙型肝炎病毒不同区抗原酶免疫试剂研究

目的　探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 不同区抗原的反应性,为建立抗ＨＣＶ 酶免疫测定（ＥＩＡ） 确认试剂提供依据。方法　利用基因工程技术,重组所表达的ＨＣＶ 不同区抗原片段（ ＨＣＶＣ、ＮＳ３ 、ＮＳ４ 、ＮＳ５） ,建立了ＨＣＶ 单片段抗原ＥＩＡ 检测方法,检测了７４７ 份四川地区献血员血清。对其中３７３ 份血清,用２ 个厂生产的经批检合格的抗ＨＣＶＥＩＡ 试剂进行检测比较,对个别结果不符的样品进一步进行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ ＰＣＲ） 分析。结果　献血员中抗ＨＣＶＣ 等４ 种抗体阳性检出率分别为４ ．６８ ％ （３５／７４７） 、５ ．２ ％ （３９／７４７） 、１ ．１ ％ （８／７４７） 、１ ．２ ％ （９／７４７） ,２ 家试剂阳性检出率均为４ ％（１５／３７３） 。结论　ＨＣＶ 不同区抗原片段的抗体检出率差异较大,ＮＳ３ 检出率最高,其次为Ｃ 区、ＮＳ５ 、ＮＳ４ 。说明抗ＨＣＶＥＩＡ 检测试剂以ＨＣＶ ＮＳ３ 区和Ｃ 区为主要抗原片段。     

输血后丙型肝炎患者不同功能区抗体的研究

为了了解丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同功能区抗体的诊断价值，利用体外表达的ＨＣＶＣ、Ｅ１、Ｅ２／ＮＳ１、ＮＳ３、ＮＳ５蛋白作为重组抗原，按ＥＬＩＳＡ方法检测了已确诊为输血后丙型肝炎患者的血清１１２份。结果，检出率最高的是抗ＨＣＶ－Ｃ（８１．３％），最低的是抗ＨＣＶ－Ｅ１（１０．７％），输血后１个月内检出率最高的也是抗ＨＣＶ－Ｃ（８０％）。表明Ｃ蛋白是进行ＨＣＶ诊断的最重要抗原。另外，动态观察１０例输血     

高效液相色谱法测定香草扁桃酸、高香草酸、肌酐含量

目的建立高效液相色谱法同时测定尿中的香草扁桃酸（ＶＭＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）和肌酐（Ｃｒ）含量的方法。方法以０．０２ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４缓冲液（ｐＨ５．７）为流动相；色谱柱采用ＹＷＧ－Ｃ１８柱；电化学和紫外检测器联合检测。尿样经适当稀释后直接进样测定，最后以ＶＭＡ和ＨＶＡ与Ｃｒ的比值表示含量。对１５例正常成人和１０例嗜铬细胞瘤患者进行了测定。结果方法的平均批内变异系数（ＣＶ）值ＶＭＡ／Ｃｒ为２．４％，ＨＶＡ／Ｃｒ为６．１％。正常成人的ＶＭＡ／Ｃｒ和ＨＶＡ／Ｃｒ分别为３．８４×１０－３±０．９１×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）和３．３１×１０－３±１．１３×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）；嗜铬细胞瘤患者的ＶＭＡ／Ｃｒ和ＨＶＡ／Ｃｒ分别为２８．７０×１０－３±２５．４６×１０－３和４．３８×１０－３±２．０８×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）。结论方法能满足临床诊断嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤的需要     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

荧光信号引物PCR定量测定血清HCV—RNA的实验室评价

目的对Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ荧光标记ＨＣＶ定量ＰＣＲ方法进行实验室考核。方法２８例抗ＨＣＶ（＋）、定性ＰＣＲ（＋）的血清标本，用于重复性测定；２０例健康人血清用于正常值测定；５例定性ＰＣＲ（＋）和５例定性ＰＣＲ（－）标本用于Ａｍｐｌｉｓｅｍｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法的比较。结果孔间变异系数（ＣＶ）为 ２０．６％，操作者间ＣＶ为 ４３．８％，批内 ＣＶ为 ６１．９％，批间ＣＶ为８５．１％。２０例健康人血清测定值均小于最小检测浓度，即１０２拷贝／ｍｌ。用Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法对５ 例定性ＰＣＲ（－）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ均为阴性；对５ Ｎ定性ＰＣＲ（＋）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ均为阳性，ＨＣＶ－ＲＮＡ的浓度为 ２． ５ × １０５拷贝 ／ｍｌ～ １． ７ ×１０６拷贝 ／ｍｌ， ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ方法有 ２例未能检出。结论 Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ ＨＣＶ定量 ＰＣＲ方法特异性和灵敏度均好，可用于临床疾病的研究和抗病毒药物疗效的评估。由于批内、批间变异系数较大，试验与操作均应严格规范。     

聚合酶链反应检测再生障碍性贫血血清中乙型和丙型肝炎病毒

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了３７例非肝炎相关再生障碍性贫血（ＮＨＡＡ）和１８例肝炎相关再生障碍性贫血（ＨＡＡ）血清中的乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）、丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）。结果显示：ＮＨＡＡ的ＨＢＶＤＮＡ检出率为１３．５％（５／３７），ＨＡＡ为２２．２％（４／１８），两者比较Ｐ＞０．０５。ＮＨＡＡ的ＨＣＶＲＮＡ检出率为２．７％（１／３７），ＨＡＡ为３８．９％（７／１８），两者比较Ｐ＜０．０１。丙型肝炎相关再生障碍性贫血的预后较差。提示：ＨＣＶ感染与ＨＡＡ关系密切。     

应用PCR—ASO方法对广东地区非缺失型Hb H病的检测

为筛查广东地区Ｈｂ Ｈ病的基因型，用两对引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）选择性扩增α２球蛋白基因外显子Ⅲ３１８ｂｐＤＮＡ片段和３２７ｂｐＤＮＡ片段，从７２例广东籍，经血液学确诊为Ｈｂ Ｈ病的ＤＮＡ标本中筛查出非缺失型Ｈｂ Ｈ病１０例，占Ｈｂ Ｈ病的１３．９％；缺失型Ｈｂ Ｈ病６２例，占Ｈｂ Ｈ病的８６．１％。非缺失型Ｈｂ Ｈ病α２珠蛋白基因外显子Ⅲ３１８ｂｐ ＰＣＲ产物，用两对寡核苷酸探针（Ｈｂ ＣＳ－     

HCV在肝病患者中的感染模式及其免疫状况研究

对４１６例病毒性肝炎患者进行了抗－ＨＣＶ及其它血清标志物检测，结果共发现５２例抗－ＨＣＶ阳性患者，其中单独抗－ＨＣＶ阳性占２３．０％，与ＨＢＶ感染占４０．４％，与ＨＢＶ、ＨＤＶ感染占９．６％。抗－ＨＣＶ在慢性活动型肝炎、肝硬化中的阳性率分别为３０．４％和２２．７％，明显高于急性肝炎和非甲非乙型肝炎中的阳性率（２．８％、１３．０％），提示ＨＣＶ在促使肝病慢性化及加重病情方面有重要作用。对抗－ＨＣＶ阳性患者外周血Ｔ淋巴细胞分型结果显示：各型丙肝息者ＣＤ＿３、ＣＤ＿４比例均下降，而ＣＤ＿８比例上升，表现为Ｔｈ细胞功能下降，Ｔｓ细胞功能增强，提示细胞免疫功能紊乱是丙肝患者高慢性化率的免疫学基础。     

肝癌患者血清乙型肝炎病毒标志物和抗丙型肝炎病毒抗体的检测及其相互关系

采用ＥＬＩＳＡ法检测１４０例肝癌患者血清ＨＢＶ－Ｍ和抗－ＨＣＶ，以５６例非肝病组做对照。抗－ＨＣＶ肝癌组阳性率３２．１％，对照组８．９％，两组差异有极显著性（ｐ＜０．００５）。ＨＢＶ－Ｍ在肝癌中ＨＢｓＡｇ阳性率为６９．３％，ＨＢｅＡｇ１９．２％，抗－ＨＢｅ６２．１％，抗－ＨＢｃｌｇＭ５５．４％，总阳性率９１．４％。抗－ＨＣＶ阳性率在ＨＢＶ－Ｍ阳性组和阴性组间差异无显著性。结果表明，ＨＢＶ和ＨＣＶ均与肝癌有关。但ＨＣＶ次于ＨＢＶ，可能是通过调节ＨＢＶＤＮＡ表达及整合而起促癌作用。     

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

基于选择性抑制法的原理，通过对聚阴离子和表面活性剂的筛选实验，以及试剂配方和实验条件优化实验，建立了直接测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的方法。本法的线性范围达３．９ｍｍｏｌ／Ｌ，批内ＣＶ为１．４５％～２．０２％；总ＣＶＯ １．７１％～３．１４％，和ＴＰＡ法比较：Ｙ＝０．９９２３Ｘ＋０．０５２，ｒ＝０．０９８３４，ｎ＝６６。加入ＨＤＬ组份的回收率为１００．１％，本法的特异性好，加入ＬＤＬ－Ｃ达     

正常人右胸头胸导联心电图特征

目的评价一种新的右胸导联心电图：头胸（ＨＣ）导联心电图的应用价值。方法对６４例正常人描记同时间、同部位的Ｗｉｌｓｏｎ导联（Ｖ３Ｒ～Ｖ７Ｒ）和ＨＣ导联（Ｈｖ３Ｒ～Ｈｖ７Ｒ）图形。结果两种导联方法心电图均无ＳＴ段抬高；ＨＶ５Ｒ～ＨＶ７Ｒ直立Ｐ波多于Ｖ５Ｒ～ｖ７Ｒ（Ｐ均（０．０５）；病理Ｑ波（Ｑ≥１／４Ｒ，ｔ＞０．０４秒）或Ｑｒ型波在Ｖ４Ｒ为６％，Ｖ５Ｒ为５６％，Ｖ６Ｒ为６２％，Ｖ７Ｒ为６５％，Ｔ波直立者仅１２％，然而ＨＣ导联均为Ｒ型或石型，Ｔ波直立者达８８％。Ｑ波出现率在Ｖ５Ｒ和ＨＶ５Ｒ、Ｖ６Ｒ和ＨＶ６Ｒ、Ｖ７Ｒ和ＨＶ７Ｒ间呈显著差异（Ｐ均＜０．００１），直立Ｔ波出现率在Ｖ３Ｒ～Ｖ７Ｒ和ＨＶ３Ｒ～ＨＶ７Ｒ间亦有明显差异（Ｐ波＜０．０１）。根据图形特征，ＨＣ导联右胸图形可分为３型：（１）ＨＶ３Ｒ～ＨＶ７Ｒ呈Ｒ型伴Ｔ波直立者占５５％；（２）ＨＶ３Ｒ～ＨＶ５Ｒ为ｒＳ型，ＨＶ６Ｒ和ＨＶ７ＲＲ型伴Ｔ彼直立者占３３％；（３）ＨＶ３Ｒ～ＨＶ７Ｒ均呈ｒＳ型伴Ｔ波平坦者占１２％。结论由于ＨＣ导联右胸心电图在健康人群中表现为正常的Ｐ－ＱＲＳ－Ｔ波群，故有益于右室疾病的诊断。     

HCV不同编码区抗体检测意义的临床研究

目的：研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同编码区抗体检测的临床意义。方法：采用ＨＣＶ核心区合成肽ＣＰ１０、ＣＰ９及非结构区基因重组抗原５－１－１,Ｃ１００检测了１５８例丙型肝炎病人相应抗体抗－ＣＰ１０、抗－ＣＰ９,抗－５－１－１及抗－Ｃ１００。同时检测ＨＣＶ ＲＮＡ、ＡＬＴ。另选３５例健康体检者作对照。结果 四种抗体于输血后４．５￣８周均可检出,于病后４￣８周依次达９２．６％、８８．９％、５９．３％及２     

微量全血ELISA检测抗－HCV

微量全血ＥＬＩＳＡ检测抗－ＨＣＶ周洪涛（宜城市人民医院，湖北宜城４４１４００）抗－ＨＣＶ试剂盒购自长征公司；自配ｐＨ７．４０．０２ｍｏｌ／ＬＰＢＳ内含１．０ｇ／ＬＥＤＴＡＮａ２加１％小牛血清作样品稀释液用。在１×１０ＨＣＶ抗原包被条孔内，每孔加样品稀...     

干扰素治疗丙型肝炎的临床及抗病毒效应研究

１５例急性、５２例慢性丙肝在干扰素治疗２４周后，血清ＡＬＴ复常率为８０％与７５％，ＨＣＶ ＲＮＡ阴转率为８０％与６９．２％，停药后追踪２４周，持续ＡＬＴ正常并ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转（称为完全反应、ＣＲ）者有５３．３％与４２．３％，均明显高于急、慢性对照组的疗效（治疗结束时ＡＬＴ复常率急性对照组为３６．４％，慢性对照组为０。ＨＣＶ－ＲＮＡ阴转为２／１１及３／２０，停药后全部对照组均无１例呈ＣＲ者），统计