当归补血汤的不同配比对黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素含量的影响

目的:观察当归补血汤中当归与黄芪的不同配比对黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素含量的影响。方法:将当归补血汤进行5种当归与黄芪的不同配比(1∶1、1∶2、1∶5、1∶7、1∶10),通过高效液相色谱法对黄芪甲苷、阿魏酸以及芒柄花素分别进行线性关系、精密度、重复性及回收率检测。结果:对照样品线性关系良好,精密度、重复性及回收率均满足标准;随着黄芪配比上升,黄芪甲苷、阿魏酸、芒柄花素含量上升,至1∶5(当归∶黄芪)时达最高值,后逐渐降低。结论:当当归补血汤内当归与黄芪配比为1∶5时,黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素的含量最高,可保证配方药效充分发挥,需引起临床重视。     

当归的炮制对当归补血汤中活性成分的影响

当归补血汤为金元四大家之一的李东垣所创,至今已有近800年的历史,由当归与黄芪两味中药按照质量比1∶5组成,具有补气生血的功效。主治血虚发热或妇女经期、产后血虚发热头痛之症。原方中当归要用酒制(酒洗)才可入药。然而现代研究中,不论是当归补血汤方剂还是由此衍生的成药,如当归补血丸、当归补血胶囊、当归补血口服液中,当归都没有要求炮制使用。当归所含阿魏酸、藁本内酯、当归多糖,黄芪中所含黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、黄芪多糖为当归补血汤中补血的有效成分[1,2]。为探讨酒制当归对该方剂的影响,本实验对当归炮制前后当归补血…     

超滤膜分离纯化当归补血汤的研究

目的:探讨应用超滤膜技术分离纯化当归补血汤的工艺,并且考察当归分别和黄芪、红芪配伍后对其主要有效成分的影响。方法:采用不同截留分子量的膜,对工艺参数进行正交设计,以当归补血汤中的主要活性成分阿魏酸和芒柄花素为指标,考察不同膜及工艺参数对膜分离效果的影响。结果:截留相对分子质量为100KD的膜具有较好的膜分离效果,选择压力0.04MPa、料液温度40℃、进料体积流量12L/min的操作参数工作效率更高。当归∶黄芪(1∶5)配伍主要有效成分阿魏酸和芒柄花素的含量低于当归∶红芪(1∶5)配伍中阿魏酸和芒柄花素的含量。结论:利用膜分离工艺制备的当归补血汤,能更好的分离纯化其有效成分,提高有效成分的含量。当归与红芪配伍要好于当归与黄芪配伍。     

当归补血汤化学成分、药理作用、临床应用的研究进展及质量标志物的预测分析

当归补血汤为经典的气血双补名方,主治老疲内伤、气弱血虚、阳浮外越。现代药理学研究表明其具有促进造血、调节免疫、保护心脑血管等作用,临床多用于治疗多种原因所致之贫血等血液系统疾病、心脑血管系统疾病及肿瘤等。该方由黄芪一两、当归二钱组成,芪归用量为5∶1,是现代复方研究补气生血的代表方剂。该文在对当归补血汤的化学成分、药理作用及临床应用研究近况进行综述的基础上,结合中药质量标志物"五原则"——传递与溯源、特有性、有效性、可测性及复方配伍环境对当归补血汤的质量标志物(Q-marker)进行预测分析。结果提示毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷、黄芪甲苷、阿魏酸、藁本内酯可作为当归补血汤的Q-marker,为后续建立完整的当归补血汤质量体系提供参考。     

不同配伍比例当归补血汤化学成分及促血管新生作用比较

目的研究不同配伍比例对当归补血汤化学成分和促血管新生作用的影响。方法采用高效液相色谱法测定不同配伍比例当归补血汤中的主要化学成分阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量;采用转基因斑马鱼模型比较不同配伍比例当归补血汤的促血管新生作用。结果随着黄芪含量的增加,不同配伍比例煎液指标成分综合得分有上升趋势,且在黄芪与当归之比为8∶2与5∶1时综合得分最高。对于斑马鱼血管损伤模型,血管恢复率排名前3位的配比分别是黄芪与当归之比为5∶1、6∶1和2∶1。结论从化学成分及促血管新生疗效综合分析,黄芪与当归经典配伍比例(5∶1)好于其他比例。     

黄芪和当归的主要活性成分配伍促进衰老造血干细胞增殖作用的研究

目的探讨黄芪和当归的主要活性成分黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷和阿魏酸配伍对衰老造血干细胞(HSCs)增殖的影响,并从细胞周期调控研究其作用机制。方法以三丁基过氧化氢(T-BHP)构建小鼠HSCs衰老模型,研究不同质量浓度5种活性成分对HSCs衰老和增殖的影响,寻找可促进细胞增殖的主要活性成分。在此基础上,采用正交试验研究5种活性成分配伍对HSCs衰老和增殖的影响,寻找5种活性成分促进细胞增殖的合理配伍。最后,采用HSCs衰老模型,制备黄芪-当归1∶1配伍含药血浆,设立对照组、模型组、空白血浆组、阿魏酸组、黄芪甲苷组、芒柄花素组、毛蕊异黄酮组、毛蕊异黄酮苷组、活性成分配伍组、黄芪-当归1∶1含药血浆组,药物作用于衰老细胞,以SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法测定HSCs衰老率,CCK-8法测定细胞增殖率,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting法检测Cyclin D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素均可显著促进衰老HSCs增殖和降低细胞衰老率,而毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷单独应用对HSCs增殖和细胞衰老率无显著影响。正交试验发现,以阿魏酸、芒柄花素和黄芪甲苷为基础因子,毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷为次要因子进行配伍的5种活性成分组合促细胞增殖和降低细胞衰老率的作用最强。阿魏酸、黄芪甲苷、芒柄花素、活性成分配伍、含药血浆均可降低细胞衰老率,使G0/G1期细胞减少,G2/M+S期细胞增加,并使Cyclin D1和CDK4蛋白表达增强。以上效应以活性成分配伍组和含药血浆组最强。结论黄芪和当归的主要活性成分阿魏酸、黄芪甲苷和芒柄花素对衰老HSCs具有促增殖和改善衰老作用,而毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷单用时并无明显的作用。当5种活性成分配伍后对衰老HSCs的促增殖作用最强,并可改善HSCs衰老,促进衰老HSCs由静止期向增殖期转换。黄芪和当归的主要活性成分及其配伍促HSCs增殖和抗HSCs衰老的作用可能与调节细胞周期相关蛋白表达及促进细胞周期转换有关。     

黄芪薄层鉴别方法的改进

目的:改进黄芪的薄层鉴别方法。方法:以黄芪甲苷、芒柄花素、芒柄花苷和黄芪对照药材为对照,对黄芪药材进行了薄层鉴别条件的研究,改进了原标准的供试品前处理方法和展开系统。结果:薄层色谱斑点清晰,黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷的分离度好,Rf值适当。结论:所建立的黄芪薄层鉴别方法可以同时鉴别黄芪中的黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷,操作简单、耐用性佳,可替代原标准用于黄芪的鉴别。     

不同剂量配伍对黄芪-当归中5种化学成分的影响

目的:采用UPLC-MS研究黄芪-当归不同剂量配伍药液及小肠吸收液中5种化学成分(阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷)的含量变化,为二者的临床配伍用药提供参考。方法:利用水提法制备黄芪-当归不同剂量配伍的药液,运用大鼠外翻肠囊法进行药物吸收试验制备药物的小肠吸收液,通过UPLC-MS测定药液和小肠吸收液中5种成分的含量,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.4 m L·min-1,进样量1μL,毛细管电压4 k V。结果:黄芪-当归以10∶1和5∶1配伍时,5种成分的溶出量大多与理论值相近;当黄芪-当归以1∶1和1∶5配伍时,5种成分的溶出大多高于理论值。黄芪-当归10∶1和5∶1配伍时,相应质量浓度小肠吸收液中毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷和阿魏酸吸收率大多数高于单用黄芪和单用当归;黄芪-当归1∶1和1∶5配伍时,相应质量浓度小肠吸收液中5种成分的吸收率大多数高于单用黄芪和单用当归。结论:黄芪-当归以1∶1和1∶5配伍时可促进药物中大多数成分的溶出,且黄芪和当归不同剂量配伍时可不同程度地促进大多数成分的吸收。     

正交试验设计优化当归补血丸中阿魏酸和藁本内酯的提取工艺

目的 采用正交试验设计优化当归补血丸中有效成分的超声提取工艺,为当归补血丸质量标准的建立提供依据.方法 以当归中有效成分阿魏酸和藁本内酯含量均值为考察指标,以提取时间、溶剂用量及提取次数为因素,采用L9(34)正交表设计试验,确定最佳提取工艺.采用HPLC法建立同时测定阿魏酸和藁本内酯含量的方法学,辅助正交试验设计.结果 根据正交试验结果确定阿魏酸和藁本内酯最优的提取工艺为:1.0 g当归补血丸采用30 ml甲醇提取60 min,提取次数为2次.结论 确定了当归补血丸中阿魏酸和藁本内酯的提取工艺,方法简便、提取率高,所建立的HPLC法精确度高、重现性好,可用于当归补血丸中有效成分的分析.     

指纹图谱结合化学计量法研究广陈皮对黄芪-葛根药对化学成分的影响

目的比较广陈皮对黄芪-葛根药对化学成分的影响,从化学角度探讨广陈皮配伍黄芪-葛根药对的协同增效作用。方法制备6种配比的黄芪-葛根-广陈皮药液,建立广陈皮与黄芪-葛根药对不同配比水煎液指纹图谱,对特征峰面积进行主成分分析,确定变量投影重要度(VIP)>1的差异变量(特征峰),并采用高效液相色谱(HPLC)法对其进行含量测定。结果黄芪-葛根药对(30∶10)与黄芪、葛根、广陈皮(30∶10∶5)配比的OPLS-DA分析结果显示,VIP>1的差异变量由大到小排序:芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮、3-OH葛根素、染料木苷、葛根素,其中芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮在两组药液中有明显差异(P<0.01,VIP>1.2)。含量测定结果显示,随着广陈皮的比例增加,芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮含量呈现先增加后减少的趋势,其中以黄芪、葛根、广陈皮比例为30∶10∶5时含量最高。黄芪、葛根、广陈皮(30∶10∶5)配比和黄芪-葛根药对(30∶10)的药液中芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮含量比分别为1.55∶1、1.39∶1、1.53∶1。结论广陈皮配伍黄芪-葛根药对有协同增效作用,黄芪、葛根、广陈皮的最佳配比为30∶10∶5。     

一测多评法测定黄芪中4种异黄酮的含量

目的:克服中药多组分含量测定时对照品缺乏的问题,建立黄芪中4个主要异黄酮类化合物的一测多评含量测定方法。方法:以芒柄花素为内参物,建立芒柄花素与毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮的相对校正因子,并用该校正因子进行毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮的含量计算(计算值),实现一测多评;同时采用外标法测定药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量(实测值),并比较计算值与实测值的差异。结果:34批黄芪药材及饮片中4种异黄酮的含量计算值与实测值间无显著差异。结论:以外标法测定芒柄花素,利用相对校正因子实现对毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮含量测定进行质量评价是准确的、可行的。     

基于特征图谱及化学模式识别的当归补血汤质量评价研究

目的：建立当归补血汤超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的特征图谱,综合评价其质量。方法：采用Waters Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量2μL;使用电离子喷雾源(ESI),负离子模式扫描。并以指纹图谱相似度评价软件结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对11批当归补血汤进行评价。结果：通过对照品比对及软件预测,从当归补血汤中鉴别出24种成分。图谱标定出41个共有峰,指认出6个色谱峰,分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、芒柄花素。HCA、PCA和PLS-DA3种方法均将11批样品分为3类,对黄芪统货、选货和精品饮片进行了明显区分,说明当归补血汤的特征图谱与原药材的质量和等级具有强相关性。结论：构建的高分辨质谱的特征图谱结合化学模式识别方法快速高效全面,适用于当归补血汤整体质量的评价,同时也为中药复方质量标准建立与全程质量控制提供了重要支...     

经典名方当归补血汤物质基准的质量标准研究

目的：建立经典名方当归补血汤的质量标准。方法：应用薄层色谱鉴别方法,以对照药材、阿魏酸、藁本内酯以及黄芪甲苷为对照,建立当归补血汤物质基准的定性鉴别方法。采用高效液相色谱法测定当归补血汤中阿魏酸以及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,采用NewmateTM C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%甲酸为流动相进行洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长分别为316 nm和260 nm。结果：薄层色谱鉴别方法专属性良好,斑点清晰。阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷分别在进样量为10～200μg、5～50μg范围内线性关系良好,相关系数均>0.999;平均加样回收率分别为100.64%和92.62%,相对标准偏差(RSD)均<3%。15批样品中阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量分别在0.068%～0.109%和0.057%～0.092%范围内。结论：建立的方法准确可靠,可作为当归补血汤的质量控制标准。     

中心组合设计-响应面法优化复方当归补血汤提取工艺

目的优化复方当归补血汤的提取工艺。方法在单因素试验、析因设计、最速上升试验的基础上,以浸膏得率及阿魏酸、芍药苷、藁本内酯提取率的权重和为响应值,采用中心组合设计-响应面法优化复方当归补血汤的提取工艺。结果最佳条件为超声提取60 min,提取溶剂为36%乙醇,料液比为1∶94。结论该方法提取效率较高,操作简便,预测性良好。     

当归补血汤有效组分抗动脉粥样硬化配伍比例的基础研究

目的对目前已知的当归补血汤抗动脉粥样硬化的主要有效组分进行合理最佳配伍规律,通过体内药效学实验,探讨当归补血汤早期阻断动脉粥样硬化病变发展进程的有效组分最佳配伍规律。方法将110只新西兰兔随机分为11组,每组10只,即空白对照组,模型组,阳性药对照组,黄芪总皂苷与当归挥发油剂量组4组(用药比例分别为1∶1、2∶1、3∶1、5∶1)、黄芪甲苷与阿魏酸剂量组4组(用药比例分别为1∶1、2∶1、3∶1、5∶1)。以高脂饮食+免疫损伤方法复制新西兰兔动脉粥样硬化模型。监测兔的血清血脂四项,电镜下观察主动脉弓切片HE染色。结果新西兰兔动脉粥样硬化模型复制成功。与空白对照组比较,模型组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显增多,差异有统计学意义(P0.05),主动脉弓切片HE染色后电镜下观察有明显损坏。与模型组比较,各用药组血清TC、TG、LDL-C或HDL-C明显减少(P0.05),主动脉弓切片HE染色电镜下观察有明显的修复。其中,黄芪和当归有效组分配伍比为3∶1和5∶1的效果最佳。结论黄芪总皂苷与当归挥发油、黄芪甲苷与阿魏酸可以改善模型新西兰兔的血脂,保护心血管,具有抗动脉粥样硬化的功效。但是,低剂量药效不如中、高剂量的药效,分析可能是低剂量配比的用药进入血液中的含量过少,从而在后续的研究中,可以作为用药配比的参考。     

HPLC-DAD-ELSD法测定补阳还五汤中8个活性成分含量

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定补阳还五汤中羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷8个活性成分含量的方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 以乙腈-0.1%甲酸为流动相, 梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 柱温30 ℃, 检测波长230 nm(芍药苷)、254 nm(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素)、322 nm(阿魏酸)和403 nm(羟基红花黄色素A), 蒸发光散射检测器漂移管温度60 ℃, 载气流速1.6 L/min。结果羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷分离度良好, 线性关系符合要求(r=0.994 0～0.999 9), 平均回收率为97.8%～101.4%, RSD为1.28%～3.70%。结论该方法简便、稳定、重复性良好, 可用于补阳还五汤的质量控制。     

当归补血汤相状态的研究

目的:研究当归补血汤提取液的相状态。方法:通过HPLC检测阿魏酸、HPLC-ELSD检测黄芪甲苷、紫外分光光度法检测总多糖、双缩脲法检测蛋白质,并以激光衍射法检测粒径和粒径分布,结合光学现象,描述当归补血汤的相状态。结果:可以测得当归补血汤中阿魏酸、黄芪甲苷、总多糖和蛋白质的含量,提取液中分散相质点的粒径主要分布于50～100 nm和1 000 nm以上,并可以观察到明显的丁达尔现象。结论:当归补血汤含有以均相状态存在的真溶液和非均相状态存在的胶体溶液、混悬液或乳浊液,为混合分散体系。     

当归补血汤主要活性成分与其理化参数的关系研究

目的:研究当归补血汤主要活性成分与其理化参数的关系,探索利用理化参数来表征中药汤剂质量的可行性。方法:以当归补血汤中的主要活性成分阿魏酸和黄芪甲苷为溶质,分别配成不同成分种类、浓度和比例的水溶液,测定其在25℃时的表面张力、pH和电导率等理化参数,并进行多项式回归分析。结果:随着阿魏酸浓度增大,阿魏酸水溶液的pH降低、电导率增大;随着黄芪甲苷浓度增大,黄芪甲苷水溶液的表面张力降低;在阿魏酸与黄芪甲苷配伍的溶液中,影响pH和电导率的主导成分是阿魏酸,影响表面张力的主导成分是黄芪甲苷。结论:黄芪甲苷与当归补血汤主要活性成分体系的表面张力相关性显著,与pH和电导率基本不相关,而阿魏酸与pH和电导率相关性显著,与表面张力基本不相关,且各自的抗干扰力强,基本不会随着另外一种物质的加入而发生变化,初步表明可以用上述特征参数来表征体系的质量。     

硫磺熏蒸对黄芪中黄酮类和皂苷类成分的影响

目的测定硫磺熏前后黄芪中黄酮类和皂苷类成分的变化,确定硫磺熏对黄芪药材质量的影响,为评价熏硫加工对黄芪质量的影响提供依据。方法对收集的黄芪进行熏硫加工,采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷4种皂苷成分。结果硫磺熏过的黄芪药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷含量降低,毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷I、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷的含量变化不明显。结论黄芪熏硫加工后,黄酮苷成分有所降低,其余成分变化不明显。     

基于混料设计的经典名方当归补血汤喷雾干燥工艺研究

目的 采用混料设计的方法,对当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)水提液进行喷雾干燥工艺研究,重点考察阿魏酸、藁本内酯等热不稳定性成分的保留率,优化喷雾干燥工艺。方法 以DBD喷干粉得率、吸湿性、流动性及指标性成分藁本内酯的含量为评价指标,对辅料进行筛选,同时基于混料设计对筛选辅料配比进行优化;在此基础上以喷干粉得率、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、藁本内酯含量及保留率,为指标进一步优化喷雾干燥工艺参数。结果 筛选辅料为羟丙基-β-环糊精、微粉硅胶和微晶纤维素,分别建立喷干粉得率、吸湿率、休止角与筛选辅料配比的回归方程,并优选辅料配比为干膏-羟丙基-β-环糊精-微粉硅胶-微晶纤维素0.500∶0.226∶0.222∶0.052;优选DBD喷干工艺参数为进风温度170℃,空气流速37 m³/h,雾化压力0.061 MPa,此条件下喷干粉得率为58.92%,阿魏酸保留率为50.26%,毛蕊异黄酮葡萄糖苷保留率为54.98%,藁本内酯保留率为27.74%。结论 优选的辅料及其配比能较好提高喷雾干燥产率,改善喷干粉性质,优选的工艺条件较好保留阿魏...