敲低IKKε抑制人胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的体外研究

目的 探究敲低IKKε表达对人胶质瘤细胞系U251生物学特征的影响. 方法 采用脂质体介导的IKKε小干扰RNA(IKKε siRNA)转染U251细胞,同时设转染无义序列组和对照组,RT-PCR鉴定转染后IKKε mRNA的表达;MTT法检测转染后细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞周期分布的改变;Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化;Western blotting法检测核增殖抗原(PCNA)、细胞周期素D1 (Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)和NF-κB P65的表达. 结果 与对照组和无义序列组比较,转染IKKε siRNA组细胞IKKε mRNA的表达和细胞增殖率降低,G0/G1期细胞比例增高,穿膜细胞数明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blotting检测结果显示IKKε siRNA组细胞PCNA、MMP9、Cyclin D1的表达较对照组和无义序列组明显下调,而且NF-κB组分P65从胞浆向胞核的转座减少. 结论 IKKε在胶质瘤细胞增殖和侵袭过程中发挥重要作用,有望成为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点.     

人脑胶质瘤遗传学研究的进展

胶质瘤遗传学研究已从细胞水平发展到分子水平,从体外细胞系到人实体瘤直接制片分析,较客观地反映人体内染色体的真实情况,有可能弥补病理学上出现的形态学与生物学特征不尽一致的不足,为胶质瘤的病因,诊断治疗,予后等方面的研究开拓新的途径.     

人脑胶质瘤中CD133的表达及其意义

目的 探讨CD133 mRNA在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病理分级的相关性.方法 用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)对43例胶质瘤患者、16例正常脑组织标本(均为急性颅脑损伤患者行内减压术切除的脑组织)进行CD133 mRNA检测.结果 (1)43例胶质瘤组织中CD133 mRNA表达全部呈阳性,而16例正常脑组织标本中仅有1例CD133 mRNA表达呈弱阳性.病例组和正常对照组CD133 mRNA的阳性率分别为100%和6.25%.病例组和对照组CD133 mRNA表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).(2)在病例组中,参照1993年WHO分级标准分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级组,计算分组的标本CD133 mRNA与β-actin mRNA灰度比值.Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅱ级.(3)相关性分析:CD133 mRNA表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.987,P＜0.001).结论 检测胶质瘤组织中CD133 mRNA的表达可用于胶质瘤患者的诊断及恶性程度和预后的判断.     

影响人脑胶质瘤的预后因素

目的研究影响人脑胶质瘤预后的因素,为临床治疗提供理论依据。方法收集自2000年1月至2000年6月在南方医科珠江医院神经外科手术治疗的89例原发性星形细胞肿瘤病人的资料。生存分析单因素使用KaplanMeier法计算生存率并采用对数秩(Logrank)检验;多因素分析使用Cox比例风险模型,采用逐步回归分析。结果单因素分析结果显示年龄、术前机能状况(KPS)评分、术前癫痫、组织学分级、术后放疗等因素与患者预后有关(P<0.01);多因素分析示患者的年龄、术前KPS评分、组织学分级均为独立的预后因素,而术前癫痫、术后放疗则未显示出与预后有关。性别、肿瘤部位、肿瘤范围、手术治疗方式等因素两种分析均未发现与预后有关。结论患者年龄、术前KPS评分、组织学分级对预后影响较大;而术前癫痫史、术后放疗对判断预后价值有限;患者的性别、肿瘤部位和范围、手术治疗方式与预后无关。     

人脑胶质瘤组织BIRC2表达变化及临床意义

目的 探讨人脑胶质瘤组织含杆状病毒IAP重复蛋白2（BIRC2）表达变化及临床意义。方法 从GEO数据库获取人脑胶质瘤的基因表达芯片进行差异表达基因分析,并借助TCGA数据库对筛选出的BIRC2基因在人脑胶质瘤中的表达及预后进行分析,同时通过GSEA分析BIRC2在人脑胶质瘤中的作用机制进行预测。结果 从GEO数据库筛选GSE66354芯片中筛选出BIRC2为上调表达基因。TCGA数据库分析结果表明,BIRC2在多形性胶质母细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织（P<0.05）,预后分析表明BIRC2高表达胶质瘤病人预后更差（P<0.05）,GSEA分析显示BIRC2的作用主要发生在蛋白质翻译启动等过程。结论 本文结果提示BIRC2可能与人脑胶质瘤的发生、发展有关,检测BIRC2基因可用于评估人脑胶质瘤病人预后。     

人脑胶质瘤细胞放射敏感性的实验研究

目的 观察不同人脑胶质瘤细胞的放射敏感性,测定种植系数(PE)和存活分数(SF)等参数并且根据L-Q模型绘制剂量存活曲线,为脑胶质瘤的综合治疗提供重要的参考资料。方法实验采用体外传代培养的11种人脑胶质瘤细胞株,即T98G、SF295、Skmg-1、Skmg-4、MGR-1、MGR-2、MGR-3、UWR-7、SF767、SHG-44和uw28。应用集落形成技术和L-Q模型确定放射敏感性参数及绘制剂量存活曲线。结果11种人脑胶质瘤细胞株的放射敏感性存在较大差异,PE从1.61％到40.89％;SF_2的范围从0.32到0.59,平均为0.44±0.10;SF_8从0.00到3.71×10~(-2),平均为0.42×10~(-2)±1.1×10~(-2)。结论 人脑胶质瘤细胞具有不同的内在放射敏感性。     

血管内皮生长因子与人脑胶质瘤

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)即血管通透因子(vascular permeability factor,VPF),是新发现的血管生成促进因子,具有信号肽的结构,可以通过旁分泌机制作用于邻近的血管内皮细胞,刺激内皮细胞分裂增殖,促进新生血管的生成,并增加血管的通透性。国外研究显示VEGF可能是肿瘤血管生成的主要促进因子。本文就VEGF与人脑胶质瘤的关系进行综述。     

人脑胶质瘤金属硫蛋白表达及其意义

目的 为研究金属硫蛋白(MT)在人脑各级胶质瘤中表达及生物学意义。方法 利用免疫组化方法检测46例胶质瘤手术标本中金属硫蛋白及Ki-67的表达水平,比较MT的表达与胶质瘤级别、患者预后的关系及其与Ki-67相关性。结果 随着胶质瘤级别的增高,MT和Ki-67的表达率逐渐升高。MT在脑胶质瘤中的表达率分别为Ⅰ级33.3％,Ⅱ级42.9％,Ⅲ级66.7％,Ⅳ级81.8％,低恶性度组(Ⅰ～Ⅱ)与高恶性度组(Ⅲ～Ⅳ)胶质瘤中MT的表达有显著性差异(P<0.05)。胶质瘤中的MT LI与Ki-67 LI呈正相关性(r=0.832.)。结论 MT在胶质瘤的生长中扮演重要角色,其在胶质瘤中的不同表达对判断胶质瘤的病理分级、患者预后及显示胶质瘤的恶性演进具有一定的意义。     

人脑胶质瘤中GOLPH3的表达及意义

目的 研究GOLPH3在胶质瘤组织中的表达及其临床意义.方法 选取山东大学齐鲁医院和聊城市脑科医院神经外科自2008年7月至2009年12月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤标本76例,其中Ⅰ级13例,Ⅱ27级例,Ⅲ级25例,胶质母细胞瘤11例.另取9例因脑创伤行内减压术患者的正常脑组织标本作为对照.应用RT-PCR、Western blotting分别检测各标本中GOLPH3 mRNA和GOLPH3蛋白的表达.结果 RT-PCR与Western blotting检测结果显示正常脑组织中GOLPH3 mRNA和GOLPH3蛋白不表达,不同级别胶质瘤组织GOLPH3 mRNA、GOLPH3蛋白的阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05),而其表达值差异有统计学意义(P＜0.05),且随着肿瘤病理级别的增高,胶质瘤组织中GOLPH3mRNA、GOLPH3蛋白表达值增高,差异有统计学意义(P＜0.05).相关性检验显示GOLPH3蛋白的表达值与肿瘤的病理分级呈正相关(rs=0.961,P=0.000).结论 GOLPH3在不同级别的胶质瘤组织中均有表达,其表达值与肿瘤的病理分级呈正相关,可能是胶质瘤发生发展的重要机制之一.     

人脑胶质瘤中垂体瘤转化基因的表达及其意义

目的 探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在胶质瘤的诊断及恶性程度和预后判断中的临床意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)对65例胶质瘤患者进行PTTG mRNA和PTTG蛋白检测.结果 (1)65例胶质瘤组织中PTTG蛋白和PTTG mRNA表达全部呈阳性.(2)计算分组的标本PTTG mRNA和与β-actin mRNA灰度比值:Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差别有统计学意义(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间PTTG mRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差别有统计学意义(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间PTTG mRNA表达均高于Ⅱ级.计算分组的标本PTTG蛋白和与β-actin吸光度比值:四组之间任意两两比较,差别均有统计学意义(P<0.01).(3)相关性分析:PTTG蛋白和PTTG mRNA表达水平与胶质瘤病理分级均呈正相关性(P<0.001).结论 (1)PTFG的mRNA和蛋白的表达与胶质瘤病理分级呈正相关.检测FTTG的mRNA和(或)蛋白的表达,可以作为胶质瘤诊断、判断预后的一个可靠指标.(2)检测PTTG的mRNA的表达,从分子病理方面将可以弥补传统病理的局限性,在脑肿瘤的诊断、治疗和预后评估中将发挥重大的作用.     

人脑胶质瘤中ING4和CTGF的表达及其意义

目的 探讨人脑胶质瘤中生长抑制因子4(ING4)及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA的表达及其意义.方法 采用荧光实时定量聚合酶链式反应法检测ING4和CTGF mRNA在30例脑胶质瘤组织和5例正常脑组织中的表达水平,统计分析表达水平和肿瘤级别之间的关系以及二者表达水平的相天性.结果 ING4 mRNA在Ⅰ～Ⅱ级...     

TEM8在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨肿瘤内皮标记物8（TEM8）在人脑胶质瘤组织中的表达特点及其意义。方法 采用免疫组化法检测84例脑胶质瘤及15例颅脑损伤减压手术切除的正常脑组织标本TEM8的表达,并分析TEM8表达与胶质瘤临床病理特征及预后的关系。结果 胶质瘤TEM8高表达率（47.6%,40/84）明显高于正常脑组织（6.7%,1/15;P<0.01）。高级别胶质瘤TEM8高表达率（64.4%,29/45）显著高于低级别胶质瘤（28.2%,11/39;P<0.01）。TEM8表达与胶质瘤患者性别,年龄,肿瘤部位和大小无关（P>0.05）。TEM8高表达胶质瘤患者中位生存期（24.5个月）明显长于TEM8低表达胶质瘤患者中位生存期（36.0个月;P<0.05）。结论 胶质瘤组织TEM8呈高表达,并且与胶质瘤级别和预后显著相关。     

ARK5和MMP-2在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨腺苷酸活化蛋白激酶5(ARK5)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人脑胶质瘤中的表达,并探讨两者的相关性及其临床意义.方法 收集具有明确病理分级的67例新鲜人脑胶质瘤标本(实验组,A组),其中低级别级胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)28例(A1组,n=28),高级别胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)39例(A2,n=39),并收集32例脑外伤行内减压去除的脑组织标本作为对照组(B,n=32).分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blot测定标本中ARK5和MMP-2的mRNA及蛋白表达水平,研究ARK5和MMP-2在胶质瘤中的表达水平及与病理分级的关系.结果 (1)胶质瘤组ARK5和MMP-2 mRNA及蛋白表达水平较对照组显著上调(P＜0.05).(2)A2组ARK5和MMP-2 mRNA及蛋白表达水平较A1组显著上调(P＜0.05).(3)MMP-2在胶质瘤中的表达与ARK5呈显著正相关(r=0.782,P＜0.01).结论 ARK5和MMP-2在人脑胶质瘤中呈高表达,且它们的表达与胶质瘤的病理分级相关,可能与人脑胶质瘤的增殖及侵袭有关.     

Notch-1mRNA在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨Notch信号通路在人脑胶质瘤发展中的作用。方法收集脑胶质瘤组织标本60例,其中Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤35例及Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤25例,并取22例瘤旁正常脑组织标本作为对照。采用半定量RT-PCR方法检测这些标本中Notch-l mRNA的表达。结果Notch-1 mRNA在人脑胶质瘤中的表达显著高于正常脑组织（P〈0.01）,且在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组中的表达显著高于Ⅰ-Ⅱ级组（P〈0.01）。相关性研究发现,Notch-1 mRNA的表达与人脑胶质瘤病理分级呈正相关（r=0.706,P〈0.01）。结论Notch-1mRNA在人正常脑组织和脑胶质瘤中均有表达,但其在脑胶质瘤中的表达与脑胶质瘤的病理分级呈正相关。     

尿激酶型纤溶酶原激活物受体在人脑胶质瘤中的表达及意义

一、资料与方法1.尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)在胶质瘤组织中的表达:星形胶质细胞瘤患者共58例,Ⅰ级14例,Ⅱ级15例,Ⅲ级15例,Ⅳ级14例。男30例,女28例,平均年龄(43.2±18.1)岁。病理切片行免疫组化染色(SABC法),计算阳性细胞率(PI)。     

脾酪氨酸激酶在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨人脑胶质瘤中脾酪氨酸激酶(Syk)的表达及其临床意义。方法用免疫组化技术检测60例脑胶质瘤及10例正常脑组织中的Syk蛋白的表达水平,并分析其意义。结果 Syk蛋白在胶质瘤和正常脑组织中表达阳性率分别为28.3%(17/60)和100%(10/10);两者相比较,有明显差异(P0.01)。结论 Syk在脑胶质瘤中表达减低或缺失可能与胶质瘤的发生有关。     

GRP在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨胃泌素释放肽(GRP)在人脑胶质瘤中的表达情况及其意义。方法运用免疫组化法检测70例不同病理级别人脑胶质瘤标本和5例正常人脑组织中GRP的表达水平。结果 GRP在正常人脑组织中均未见表达,而在人脑胶质瘤组织中高表达。胶质瘤GRP表达的阳性率[67.1%(47/70)]明显高于正常脑组织(P<0.05);而且,高级别脑胶质瘤GRP表达阳性率(87.2%,34/39)明显高于低级别脑胶质瘤(41.9%,13/31;P<0.05)。结论 GRP高表达可能对人脑胶质瘤细胞的发生、发展具有促进作用。     

EphA2在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨EphA2在人脑胶质瘤组织中的表达水平及其意义。方法：采用反转录PCR和免疫组化法检测EphA2 mRNA和蛋白在126例人脑胶质瘤组织中的表达水平;采用ki67免疫组化染色检测肿瘤组织的增殖水平;采用TUNEL染色检测肿瘤组织的凋亡水平;利用统计学方法分析EphA2表达与肿瘤病理分级、增殖和凋亡之间的相互关系。结果：126例肿瘤标本中,51.6%表达EphA2 mRNA,46.8%表达EphA2蛋白。随着肿瘤分级的升高,EphA2 mRNA和蛋白的阳性表达率显著升高。此外,肿瘤细胞增殖水平与EphA2蛋白表达呈正相关,而其凋亡水平与EphA2蛋白表达呈负相关。结论：EphA2表达水平在人脑胶质瘤组织中显著升高,EphA2表达可能影响胶质瘤细胞的增殖和凋亡。     

脑胶质瘤组织SNAT1蛋白表达及其意义

目的探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(human sodium coupled neutral amino acid transporter 1,SNAT1)在胶质瘤组织中的表达及其与临床病理参数,预后的关系。方法用免疫组织化学法,蛋白质印迹法观察89例胶质瘤患者的胶质瘤组织和瘤周组织中的SNAT1的表达与分布,其中低级别胶质瘤55例(WHOⅠ-Ⅱ),高级别胶质瘤(WHOⅢ-Ⅳ)34例,采用两独立样本t检验分析蛋白质印迹中SNAT1的表达,采用单因素χ~2检验分析SNAT1的表达与临床病理参数间的关系,采用Kaplan-Meier法观察SNAT1的不同表达对患者预后的影响,并建立Cox回归模型。结果胶质瘤组织中SNAT1的表达明显高于瘤周组织(t=-9.803,P=0.001),高病理级别组织中SNAT1的表达明显高于低病理级别胶质瘤组织(t=-6.682,P=0.003);SNAT1的表达与胶质瘤直径,病理级别有关(χ~2=4.963,8.527,P0.05);Cox回归模型显示肿瘤病理级别,SNAT1蛋白不同表达为影响胶质瘤患者预后的独立危险因素。结论 SNAT1蛋白的表达与胶质瘤病理级别及患者预后密切相关,有望成为判断胶质瘤生物学特征及评价患者预后的分子新靶点。