用生物传感器测定重组人α2a—干扰素单克隆抗体的亲和？…

测定抗重组人α２ａ－干扰素单克隆抗体的抗原识别表位其亲和常数。方法：借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果：抗体的亲和常数介于１０＾－５－１０＾－７之间,５株抗体识别干扰素分析上４种不同的抗原表位。结论：生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具,适合于抗原抗体结合与解离的动力学分析及预测表位的构像关系。     

用生物传感器测定重组人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位

目的 测定重组人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数.方法 借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析.结果 10株TNF-α单抗的亲和常数介于105～107 M-1之间,其中所测的5株抗体识别肿瘤坏死因子上3种不同的抗原表位.结论 生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具,适合于抗原抗体结合与解离的动力学分析及预测表位的构象关系.     

用生物传感器测定重组人α2a-干扰素单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位

目的 :测定抗重组人α2a 干扰素单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 :借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 :抗体的亲和常数介于 10 -5～ 10 -7之间 ,5株抗体识别干扰素分子上 4种不同的抗原表位。结论 :生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具 ,适合于抗原抗体结合与解离的动力学分析及预测表位的构像关系     

干扰素和肿瘤坏死因子调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法，研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＮＦ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白（Ｔｇ）的调节作用。结果显示：在１０＾－３～１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内，ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌；ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应，但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用，低浓度时（１０＾     

肿瘤坏死因子对正常和甲亢甲状腺细胞功能调控的对比观察

采用细胞单层培养方法，以ｃＡＭＰ为观察指标，研究肿瘤坏死因子对正常和甲亢甲状腺细胞功能调控的特征。结果显示：（１）１０＾－３和１０＾－１Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ－α对其状态下正常甲状腺细胞生成ｃＡＭＰ的值无显著影响，当其浓度为１０和１０＾３Ｕ／ｍｌ时，ｃＡＭＰ释放明显增加。ＴＮＦ－α在１０＾－３－１０Ｕ／ｍｌ的剂量范围内，对甲亢甲状腺细胞基础ｃＡＭＰ的生成无明显影响，但１０＾３Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ－α则显著促     

干扰素和肿瘤坏死因子和调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法,研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白的调节作用。结果显示：在１０＾－３－１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内,ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌;ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应,但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用,氏深度时（１０＾－３－１     

抗重组人肿瘤坏死因子－α单克隆抗体的研制及其初步应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术获得１０株抗重组人肿瘤坏死因子－α（ｒＨｕＴＮＦ－α）ＭｃＡｂ。７株ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，２株为ＩｇＧ２ａ，１株为ＩｇＧ２ａ。１０株ＭｃＡｂ与淋巴毒素（ＬＴ或ｒＨｕＴＮＦ－β）、ｒＨｕＩＬ－６和载体菌菌体蛋白均无交叉反应。其中７株ＭｃＡｂ具有中和活性，７株ＭｃＡｂ能识到天然的ＴＮＦ－α。Ｇ１１和Ｅ６ＭｃＡｂ应用ＡＢＣ法免疫组化染色肝病患者组织细胞片得到明确的阳性结果。用２株识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了一步夹心ＥＬＩＳＡ法，检测ＴＮＦ－α的敏感性可达到１００ｐｇ／ｍｌ左右。     

抗原表位定向选择的人源抗TNF-αFab的鉴定

目的对通过抗原表位定向选择技术（ＥＧＳ）所筛选到的２株人源化ＴＮＦ－α抗体Ｆａｂ段进行分析鉴定。方法测定可变区基因的序列,用亲本鼠单抗Ｚ８进行竞争ＥＬＩＳＡ,用Ｌ９２９细胞检测其体外中和ＴＮＦ－α的活性,并用硫氰酸铵洗脱法比较与亲本鼠单抗的亲和力。结果基因测序表明２株抗体ＶＨ相同,属人ＶＨⅠ亚群;Ｖκ分别属人ＶκⅠ、ＶκⅢ亚群;竞争抑制实验表明所获人源抗体片段与亲本鼠源抗体是针对ＴＮＦ－α的同一抗原表位;体外中和实验证明此抗体片段能中和ＴＮＦ－α对Ｌ９２９细胞的毒性;该抗体片段的亲和力略低于原鼠单抗Ｚ８。结论用ＥＧＳ方法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠单克隆抗体Ｚ８的特性     

人疱疹病毒6型导单细胞产生IL—10

目的 探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染的免疫发病机理。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测白细胞介素＾－１０（ＩＬ－１０）等细胞因子的产生。结果 ＨＨＶ－６诱导单核细胞表达和产生ＩＬ－１０，细胞因子ｍＲＮＡ动力学研究发现ＴＮＦ－α（肿瘤坏死因子）、ＩＬ－１β及ＩＬ－６随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱     

TNF-α与支气管哮喘

肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）是哮喘发病过程中的重要因素,　具有广泛的生物学活性。本文就哮喘时ＴＮＦ－α与某些细胞、因子的相互作用关系以及ＴＮＦ－α在哮喘发生发展过程中的病理生理作用进行综述。     

肿瘤坏死因子—α抑制离体大鼠黄体细胞孕酮生成

用大鼠黄体细胞长期培养和放射免疫分析法观察肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对雌激素、孕激素分泌和ｃＡＭＰ生成的影响。结果表明，ＴＮＦ－α显著抑制基础孕酮分泌和ｃＡＭＰ生成，其抑制作用随作用时间的延长而增加。ＴＮＦ－α对雌二醇的生成无显著影响。＾３Ｈ－亮氨酸和＾３Ｈ胸腺密啶核苷掺入实验证实ＴＮＦ－α对黄体细胞孕酮生成的抑制作用并非毒性作用。     

TNF—α诱导分泌型IL—1和膜型IL—1生成的实验研究

本实验应用丙酸杆菌和内毒素引起的肝坏死模型研究了肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），分泌型白细胞介素１（ｓＩＬ－１）和膜型白细胞介素１（ｍＩＬ－１）在肝坏死形成中的相互作用。其结果：①枯否细胞培养上清液中的ＴＮＦα、ｓＩＬ－１和枯否细胞的ｍＩＬ－１活性较对照组明显增高。ＴＮＦα首先增高，随之为ｍＩＬ－１，最后为ｓＩＬ－１。②ＴＮＦα可以诱导ｓＩＬ－１和ｍＩＬ－１生成。③未发现ＩＬ－１诱导ＴＮＦα生成的作用     

用抗原表位定向选择方法人源化抗TNF-α抗体Fab段

目的用抗原表位定向选择（ｅｐｉｔｏｐｅｇｕｉｄｅｄｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）方法，将鼠源性抗ＴＮＦ－α单抗Ｆａｂ段改造成完全人源性Ｆａｂ。方法首先用鼠单抗Ｆｄ段基因与人的κ链基因库相互配对，构建成人－鼠杂合噬菌体抗体库，筛选可与ＴＮＦ－α结合的克隆，所获得的人κ链基因再与人Ｆｄ基因库组合，建立人源噬菌体抗体库，再进行筛选；类似地以鼠κ链基因和人Ｆｄ库组合构建杂合抗体库，筛选人Ｆｄ基因，再和筛到的人κ链配对，选择与ＴＮＦ－α特异结合的克隆。结果以鼠抗体Ｆｄ段定向选择人κ链获得能与ＴＮＦ－α特异结合的杂合抗体Ｆａｂ片段，再以这些人κ链定向选择人Ｆｄ段获得能与ＴＮＦ－α结合的完全人源性的Ｆａｂ，但这些Ｆａｂ除与ＴＮＦ－α反应外，与一些无关蛋白有交叉反应。以鼠单抗κ链定向选择人Ｆｄ段获得能与ＴＮＦ－α特异结合的杂合Ｆａｂ，其中一个克隆显示很强的结合活性，以该克隆的Ｆｄ与筛到的人κ链配对，得到了能与ＴＮＦ－α特异结合的人源性Ｆａｂ片段。结论抗原表位定向选择方法提供了一种有效的鼠单抗人源化路线     

肿瘤坏死因子

肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）是重要的免疫调节因子之一。它和淋巴毒素在染色体定位（人６号染色体短臂）、基因碱基序列、氨基酸组成、生物学活性和受体方面有相似性，因此肿瘤坏死因子称为ＴＮＦ－α，淋巴毒素名为ＴＮＦ－β，属于同一分子家族。ＴＮＦ可由多种...     

人疱疹病毒6型诱导单核细胞产生IL-10

目的探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染的免疫发病机理。方法用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）等细胞因子的产生。结果ＨＨＶ－６诱导单核细胞表达和产生ＩＬ－１０，细胞因子ｍＲＮＡ动力学研究发现ＴＮＦ－α（肿瘤坏死因子）、ＩＬ－１β及ＩＬ－６随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０，ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达和因子产生明显增加，表明ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０在转录水平能抑制单核细胞因子产生。结论ＩＬ－１０具有抑制Ｉ类辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ１）反应、下调单核巨噬细胞功能等多种生物作用，推测ＨＨＶ－６诱导产生的内源性ＩＬ－１０与该病毒长期潜伏感染及其参予的免疫功能紊乱有关。     

肿瘤坏死因子对晶状体上皮细胞的粘附移行作用

目的：探讨肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ α,ＴＮＦ－０６３３）对晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附移行作用。以及在此过程中整合素分子的表达情况。方法：借助细胞粘附实验和移行实验研究ＴＮＦ－α对体外培养的牛晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附和移行,以及整合素抗体封闭后对细胞的影响。ＴＮＦ－α对细胞表面整合素的表达调节经免疫荧光染色后由流式细胞仪检测。结果：ＴＮＦ－α可以明显促进晶状体上皮细胞在Ⅳ型胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白上的粘附移行。抗体封闭实验表明整合素β１、α２、α５亚基参与细胞的粘附,在细胞移行中发挥主要作用的是α亚基而非β亚基,流式细胞仪检测表明ＴＮＦ－α可上调晶状体上皮细胞中整合素的表达。结论：胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白是晶状体囊的主要成分。肿瘤坏死因子α促进晶状体上     

hTNF-α单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆和序列及分子结构分析

从两株具有高亲和力及中和活性的抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）的单抗杂交瘤细胞株１Ｃ３、３Ｆ６中分别提取总ＲＮＡ，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆了抗体的ＶＬ、ＶＨ基因。核苷酸序列分析表明，所克隆基因均为抗体的ＶＬ、ＶＨ基因，并分别属于Ｋａｐｐａ链Ⅳ亚组和重链Ⅲ（Ｄ）亚组。此外，两抗体可变区分子模型及与ｈＴＮＦ－α的结合模型的建立及分析，为进一步的基因工程抗体研究及抗原－抗体相互作用机理的研究奠定了基础。     

白藜芦醇甙对内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生TNFα和NAG的影响

收集小鼠腹腔巨噬细胞，调整细胞浓度为５×１０￣５／ｍｌ，加入２４孔培养板每孔１ｍｌ，内毒素刺激前后不同时间加入白藜芦醇甙培养，检测上清中肿瘤坏死因子，溶酶体酶（Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶ＮＡＧ）的变化，结果说明：白藜芦醇甙可减少上清中ＴＮＦ＿α和ＮＡＧ的量，通过此可减少内毒素刺激产生的由ＴＮＦ＿α和ＮＡＧ介导的组织损伤。     

TNF-α的合成分泌机制不同于一般的分泌型蛋白

目的 拟借助微粒体膜和体外转录翻译系统来研究分泌型ＴＮＦα（Ｓ－ＴＮＦ－α）的产生机制及Ｓ－ＴＮＦ－α和跨模型ＴＮＦα（ＴＭ－ＴＮＦ－α）的关系。方法 首先将分子量为１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ（不含编码ＴＮＦ信号肽的基因）、２６×１０＾３ＴＭ－ＴＮＦ（含信号肽基因）和１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ突变体（Ｓ－ＴＮＦｍ,用ＩＬ－２信号肽密子转换ＴＮＦ信号肽序列）的全长ｃＤＮＡ片段分别亚克隆于含Ｔ７启动子的ｐ     

脑脊液肿瘤坏死因子测定在中枢神经系统白血病的临床意义

目的：探讨脑脊液α肿瘤坏死因子在中枢神经系统白血病的临床意义。方法：用放射免疫法了４０例急性白血病患者ＣＳＦ－ＴＮＦ－α的含量。结果；ＣＮＳＬ虱ＣＳＦ－ＴＮＦ－α含量全部升高，与对照组及无ＣＮＳＬ组比较有极显著性差异。１０例ＣＮＳＬ虱治疗后８例缓解的ＣＳＦ－ＴＮＦ－α含量明显下降；１例虽缓解但下降不明显，半月后复发。