三七总皂苷后处理减轻兔失血性休克复苏期心肌损伤

目的 探讨三七总皂苷（PNS）后处理对兔失血性休克复苏期心肌损伤的影响和机制。

方法 选择雄性新西兰兔30只，11周龄，体质量2.5～3.5 kg。随机分为五组：假手术组（S组）、失血性休克复苏组（H组）、PNS后处理组（P组）、18-β甘草酸（18-AGA）+PNS后处理组（AP组）、18-AGA组（A组），每组6只。S组行气管插管，右侧颈总动脉和右侧股静脉置管，不做放血处理。H组、P组、AP组和A组行气管插管后，制备失血性休克复苏模型。P组于造模成功后45 min给予PNS 100 mg/kg，AP组于造模前腹腔注射18-AGA 75 mg/kg，于造模成功后45 min给予PNS 100 mg/kg，A组造模前腹腔注射18-AGA 75 mg/kg。于复苏1 h时取兔心肌组织，采用Western blot法检测线粒体Cx43含量，采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，通过透射电镜观察心肌线粒体超微结构，进行线粒体超微结构评分。

结果 与S组比较，H组、AP组、A组心肌线粒体Cx43相对含量明显降低（P＜0.05），H组、P组、AP组、A组心肌细胞凋亡率明显升高，线粒体超微结构评分明显升高（P＜0.05）。与H组比较，P组心肌线粒体Cx43相对含量明显升高，心肌细胞凋亡率明显降低（P＜0.05），AP组、A组心肌线粒体Cx43相对含量明显降低（P＜0.05），P组和AP组粒体超微结构评分明显降低（P＜0.05）。与P组比较，AP组、A组心肌线粒体Cx43相对含量明显降低，心肌细胞凋亡率明显升高，线粒体超微结构评分明显升高（P＜0.05）。S组心肌线粒体膜完整光滑，H组线粒体嵴断裂不清，线粒体完整性丧失，P组线粒体稍肿胀但结构相对完整，AP组线粒体肿胀明显，A组线粒体嵴断裂，线粒体完整性丧失。

结论 三七总皂苷后处理可通过上调线粒体Cx43表达减轻兔失血性休克复苏期心肌损伤。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤心肌组织c-fos、Bcl-2表达的影响及意义

目的：研究肝缺血再灌注损伤时c-fos、Bcl-2在心肌组织中的表达与心肌细胞凋亡的关系及葛根素对其影响的可能机制。方法：建立肝缺血再灌注损伤动物模型,选健康雄性SD大鼠32只,每组8只,随机分为对照组、缺血再灌注组（I/R组）、葛根素预处理组（PUE组）和生理盐水预处理组（N组）。应用免疫组织化学方法分别测定各组大鼠心肌组织c-fos、Bcl-2的表达,应用原位细胞凋亡法测定心肌细胞凋亡情况,应用常规HE染色观察各组肝脏及心肌组织形态改变。结果：c-fos、Bcl-2表达及心肌细胞凋亡指数I/R组较对照组明显增加（P〈0.01）;PUE组c-fos表达与I/R组比较明显降低（P〈0.01）,Bcl-2表达及心肌细胞凋亡指数与对照组及I/R组相比,差异均有统计学意义（P〈0.01）;N组与PUE组各指标比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。心肌组织HE染色切片观察显示I：/R组心肌细胞部分横纹不清楚,有炎性细胞浸润,间质出血,心肌嗜酸性增强及肌纤维肿胀,心肌水肿;PUE组心肌组织水肿明显减轻。肝组织HE染色切片观察显示I,/R组炎性细胞在肝组织中大量散在分布,肝细胞明显肿胀,有的呈空泡状变性,肝脏结构紊乱;PUE组上述改变明显改善。结论：肝缺血再灌注损伤可引起心肌组织的损伤及心肌细胞凋亡。葛根素可能通过抑制c-fos蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达起到抑制肝缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡作用。     

心磷脂与缺血/再灌注损伤

心磷脂（CL）是维持线粒体能量代谢所必需的一种磷脂，参与了众多重要生理过程。此文对CL的结构、合成和转化；在维持线粒体正常功能中的作用；缺血／再灌注（I／R）损伤中的改变以及和线粒体功能的关系等作了逐一阐述，说明CL与I／R损伤导致的细胞死亡关系密切，CL量或性质的改变在细胞凋亡中处于中心地位。     

肝脏缺血/再灌注后线粒体损伤与促凋亡蛋白的释放

肝脏缺血／再灌注（I／R）损伤是临床上较为常见的组织器官损伤之一，细胞凋亡在肝脏I／R损伤中起到了重要作用。近年来的研究发现，I／R导致线粒体通透性改变，由此引起线粒体膜电位的降低和促凋亡蛋白的释放等一系列变化，在细胞凋亡中发挥关键作用。     

沉默信息调节蛋白1在心肌缺血/再灌注中的保护作用

背景 沉默信息调节蛋白1 (silent information regulator protein 1,Sirt1)是尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)依赖的第3类组蛋白/非组蛋白去乙酰酶,参与细胞内多种生物功能的调节.Sirt1不仅在抗衰老中发挥重要作用,同样在心肌缺血/再灌注( ischemia/reperfusion,I/R)时保护受损细胞.目的 对Sirt1在心肌I/R中的保护机制以及几种激活Sirt1活性的方法进行综述. 内容 Sirt1能使活性氧清除剂产生增加、抗心肌细胞凋亡、促进细胞内自噬、减轻炎症反应、促进胞内正常线粒体合成等而减轻I/R的心肌细胞损伤.通过多种方法提高I/R时Sirt1的活性,是减轻损伤的重要措施. 趋向 随着Sin1在心肌I/R中的作用机制不断被揭示,其将成为缓解心肌I/R损伤的重要靶点.     

吸入麻醉药抑制心肌细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是心肌缺血／再灌注损伤的机制之一。缺血再灌注引起的中性粒细胞聚积、活性氧产生过多及细胞、线粒体内钙超载等因素通过影响基因转录和(或)翻译,破坏凋亡诱导基因和凋亡抑制基因间的动态平衡,引起细胞凋亡。吸入麻醉药可作用于这一过程的不同环节,抑制心肌细胞凋亡。     

线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道在未成熟心肌缺血预处理中的作用

目的探讨线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）在未成熟心肌预处理保护中的作用,为未成熟心肌的保护提供依据。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,将24只新生（出生14～21d）日本长耳大白兔按随机数字表法分为4组：缺血／再灌注组（I／R组）,心脏缺血预处理组（E1组）,mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate（5-HD）＋心脏缺血预处理（E2组）,mitoKATP通道开放剂Diazoxide（Diaz）预处理组（E3组）;检测心脏功能恢复率、心肌含水量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷（ATP）含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性（Ca^2＋-ATPase）、心肌线粒体合成ATP的能力;电子显微镜观察心肌超微结构。结果E1组、E3组心功能恢复优于I／R组和E2组,心肌含水量低于I／R组和E2组（P〈0．05）;E1组、E3组三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca^2＋-ATPase活性、心肌线粒体合成ATP的能力均优于I／R组和E2组（P〈0．05）,丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量低于I／R组、E2组（P〈0．05）;E1组、E3组心肌超微结构损伤较I／R组和E2组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过mitoKATP通道的开放起作用。     

吸入麻醉药抑制心肌细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是心肌缺血／再灌注损伤的机制之一。缺血再灌注引起的中性粒细胞聚积、活性氧产生过多及细胞、线粒体内钙超载等因素通过影响基因转录和(或)翻译，破坏凋亡诱导基因和凋亡抑制基因间的动态平衡，引起细胞凋亡。吸入麻醉药可作用于这一过程的不同环节，抑制心肌细胞凋亡。     

线粒体通透件转换孔在缺血/再灌注损伤中的作用

背景 线粒体作为“能量工厂”提供细胞生长及代谢所需的三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）,同时也是细胞存活与否的重要信号管理者.线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore,mPTP）是横跨线粒体内外膜之间的允许相对分子质量1.5 kD以下的分子自由通过的孔道.在脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤中,线粒体是研究的焦点,而mPTP作为线粒体的门户更是影响着线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,△ψm）、线粒体Ca2＋超载及促细胞死亡物质释放等一系列过程. 目的 对mPTP在I/R损伤中可能的作用机制及治疗方法进行综述. 内容 整理和阐述了mPTP的结构、mPTP与I/R损伤的机制和预防与治疗I/R损伤的可能方法. 趋向 随着mPTP在I/R损伤中的作用机制不断被揭示,其将成为治疗I/R损伤的重要靶点.     

吗啡后处理抗心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡中的作用及机制

目的探讨吗啡后处理抑制心肌缺血／再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的作用以及对信号通路P13K／AKT的影响。方法采用麻醉开胸大鼠在体心脏缺血模型。SD大鼠56只随机分成4组,每组14只：S组（假手术,只穿线,不结扎）,I／R组（单纯缺血再灌注）,M组（吗啡后处理＋缺血再灌注,再灌注前3min和再灌注后2min内静脉注入吗啡1．25mg／kg）,W＋M组（wortmannin＋吗啡后处理＋缺血再灌注,左冠状动脉前降支结扎前20min静脉注入15ug／kgwortmannin,特异性的P13K阻断剂）。除S组外,所有大鼠心脏都经历45min缺血和120min再灌注。再灌注120min时,各组随机取9只大鼠,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡。其余5只大鼠采用Western Blot法测定心肌组织总AKT和磷酸化AKT的表达水平。结果再灌注120min,可在I／R组缺血区心肌检测到大量凋亡心肌细胞183=1．14％,吗啡后处理显著降低心肌细胞凋亡指数（10．83=1．24％,P〈0．01）;吗啡后处理使磷酸化AKT的蛋白表达明显增加。特异性的P13K阻断剂,wortmannin完全消除了吗啡后处理抑制缺血／再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的作用,及抑制磷酸化AKT蛋白表达的增加。结论大鼠在体心脏缺血模型,吗啡后处理可通过P13K／AKT信号通路,抑制心肌缺血／再灌注损伤心肌细胞凋亡。     

肾缺血预处理对肾小管上皮细胞内钙超载的影响

目的：通过观察肾缺血预处理（IPC）和缺血再灌注（I/R）过程中血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）含量的变化,进一步探讨肾IPC的保护机制。方法：将雄性SD大鼠88只随机分为11组,摘除右肾,分离并夹闭左肾动脉制备肾I/R和缺血预处理后缺血再灌注（IPC-I/R）动物模型。Ⅰa～Ⅴa（I/R）组为缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Ⅰb～Ⅴb（IPC-I/R）组为缺血预处理后缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Sham组为假手术组。比色法测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、SOD、MDA含量,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞内[Ca^2＋]i水平,TUNEL原位标记法观察细胞凋亡情况。结果：除0h组外,IPC-I/R与I/R各组比较肾功能损害、细胞凋亡均明显减轻,SOD升高,MDA降低,[Ca^2＋]i水平下降;两种模型中均以再灌注24h组损伤最严重,Scr、BUN、MDA和[Ca^2＋]i水平最高,SOD水平最低,细胞凋亡最多;再灌注24h前损伤呈加重趋势,24h后逐渐减轻;组间比较,[Ca^2＋]i与血清SOD水平呈负相关,与MDA呈正相关。结论：肾IPC可以减轻I/R过程中膜脂质过氧化损伤和细胞内钙超载,从而减轻肾脏形态及功能损伤;膜脂质过氧化和细胞内钙超载相互作用,共同发挥对肾I/R损伤的保护作用。     

豹皮樟总黄酮通过增强小鼠睾丸Leydig细胞缝隙连接功能减轻奥沙利铂的细胞毒作用

目的:探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对体外培养的小鼠睾丸Leydig细胞系(TM3)缝隙连接(GJ)功能的作用,以及TFLC是否减轻化疗药奥沙利铂(OHP)的细胞毒作用。方法:荧光示踪法测定体外培养的TM3细胞之间荧光传递,反映GJ的功能;Western印迹法检测TFLC对连接蛋白43(Cx43)表达的影响;细胞免疫荧光法观察TFLC对TM3细胞胞膜Cx43蛋白表达的影响;MTT法检测OHP的细胞毒作用,以及TFLC对OHP细胞毒的影响。结果:在TM3细胞中GJ的功能随着TFLC浓度的增加而增强;Western印迹和免疫荧光实验结果显示TFLC可显著增强TM3细胞中Cx43蛋白和膜Cx43蛋白的表达;MTT结果表明,高密度接种细胞(生长融合,有GJ形成),20μg/ml TFLC增强细胞GJ功能,且减轻OHP的细胞毒作用[细胞存活率(89.5±1.8)%高于单用ONP组(80.0±1.5)%,(P0.05)];低密度接种细胞(生长未融合,无GJ形成),TFLC对OHP的细胞毒作用没有影响(P0.05)。结论:TFLC增强睾丸正常细胞TM3中Cx43的表达,并增强细胞间的GJ功能;TFLC减轻OHP在TM3细胞的毒性作用,并可能与增强GJ功能有关。     

肠缺血／再灌注损伤与防治措施

背景肠缺血／再灌（ischemia／reperfusion,I／R）损伤是外科实践中常见的组织器官损伤之一,在严重感染、创伤、休克、心肺功能不全等疾病的病理生理演变过程中起重要作用。目的就肠I／R损伤产生机制以及防治措施的研究进展进行综述,为今后临床工作提供指导。内容针对肠I／R损伤机制（氧自由基、能量缺乏、细胞内Ca^2＋超载、炎症反应、细胞异常凋亡）及其防御措施的研究进展展开论述。趋向肠I／R损伤是综合性原因引起,采取综合性防治措施可防治肠I／R损伤。     

丙泊酚在正颌外科控制性降压中的脑保护作用机理

目的:通过大鼠实验,研究丙泊酚在大鼠脑缺血再灌注损伤时对线粒体通透性转换孔活性的影响程度,及其抑制神经细胞凋亡坏死的作用机制。以探讨其在正颌外科控制性降压中的脑保护作用机理。方法:选取健康雄性大鼠30只,体重250～300g,采用"双侧颈总动脉阻断法"建立前脑缺血再灌注模型,左侧侧脑室于假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R)组注射生理盐水1ml/kg,丙泊酚干预组(P组)射注丙泊酚1mg/kg,24h后断头提取海马组织线粒体,加入CaCl2于37℃下形成钙超载后孵育5min。电镜观察其微观组织形态学改变,采用紫外分光光度计法来观察线粒体通透性转换孔开放程度。结果:电镜下C组线粒体结构完整,排列密集;I/R组可见线粒体明显肿胀、嵴断裂、膜破裂;P组可见线粒体部分肿胀,嵴部分断裂,但损伤程度轻于I/R组。与C组相比较,I/R组和P组线粒体吸光度值明显下降(P<0.05);与I/R相比,P吸光度值下降幅度减小(P<0.05)。丙泊酚组细胞肿胀坏死明显减轻,凋亡细胞及坏死细胞明显减少。结论:丙泊酚能够改善大鼠前脑缺血再灌注后线粒体形态,其机制可能与其抑制线粒体通透性转换孔(MPTP)开放有关,从而改善线粒体功能,抑制神经细胞凋亡坏死,减轻脑缺血再灌注损伤。这说明丙泊酚在正颌外科控制性降压中使用时对大脑有良好的保护作用,可以大幅度提高手术安全效果,具有重要的临床指导意义。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤脑组织c-fos和Bcl-2表达的影响

目的：观察肝缺血再灌注损伤时c-fos、Bcl-2与脑细胞凋亡的关系及葛根素对其影响的可能机制。方法：建立肝缺血再灌注损伤动物模型。选健康雄性SD大鼠56只,随机分为对照组、缺血30min组（I组）、缺血30min即刻再灌注组（I/R组）、缺血30min再灌注1h组（I/R1h）、缺血30min再灌注2h组（I/R2h）、30min再灌注4h组（I/R4h）及葛根素预处理组（PUE＋I/R4h组）,每组8只。观缺血察各组肝、脑HE染色;应用免疫组织化学方法测定各组大鼠脑组织c-fos、Bcl-2的表达;应用原位细胞凋亡法测定脑细胞凋亡。结果：I/R2h组、I/R4h组肝组织中散在分布大量炎症细胞,肝细胞明显肿胀,有的呈空泡状变性,肝脏结构紊乱;PUE＋I/R4h组上述改变明显改善。I/R2h、I/R4h组脑组织水肿明显,PUE＋I/R4h组明显改善。与对照组比较,其余各组脑组织c-fos表达均增高﹙P〈0.01）,I/R4h组水平最高,PUE＋I/R4h组较I/R1h组、I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。与对照组比较,其余各组脑组织Bcl-2表达增高（P〈0.01）,I/R4h组与I/R2h组差异无统计学意义﹙P〉0.05）,PUE＋I/R4h组较对照组、组表达增多（P〈0.01）,较I/R1h组、I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。I组、I/R组细胞I凋亡指数较对照组明显增加（P〈0.01）,随着再灌注时间的延长细胞凋亡指数逐渐增加。PUE＋I/R4h组较I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。结论：肝缺血再灌注损伤可引起脑组织的损伤及脑细胞凋亡。随着再灌注时间的延长,脑组织中c-fos表达增高,脑细胞凋亡与c-fos的表达有关。Bcl-2在缺血期发挥了抑凋亡的作用,随着再灌注时间的延长,其作用减弱,脑细胞凋亡指数增加。葛根素可能通过抑制c-fos的表达、增加Bcl-2的表达发挥减轻肝缺血再灌注损伤所致脑细胞凋亡的作用。     

雌激素对大鼠肝缺血再灌注损伤中SOD和MDA及细胞凋亡的影响

目的：探讨雌激素对大鼠切除肝缺血再灌注损伤的肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及细胞凋亡的影响。方法：制作肝切除缺血再灌注损伤动物模型,雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组（Sham组）,肝切除缺血再灌注组（I/R组）和肝切除缺血再灌注＋雌激素组（I/R＋E2组）。分别在缺血再灌注后1、3、6 h于光学显微镜下观察肝组织病理学改变,检测血清ALT的水平、肝组织MDA的含量及SOD的活性,并应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：I/R＋E2组在各时相点血清ALT、肝组织MDA和SOD及肝细胞凋亡率的变化幅度明显低于I/R组。在光学显微镜下观察I,/R组肝小叶结构紊乱,肝窦淤血,肝细胞水肿变性,肝细胞片状坏死。Sham组和I/R＋E2组上述改变明显减轻。结论：雌激素对肝切除缺血再灌注损伤有显著保护作用,其作用机制可能与雌激素减少氧自由基产生、减轻脂质过氧化反应及抑制细胞凋亡有关。     

不稳定逼尿肌中Cx43的表达及其对细胞间通讯的影响

目的研究Cx43在不稳定逼尿肌细胞中的表达及其对不稳定逼尿肌细胞间缝隙连接通讯的影响,探讨Cx43与逼尿肌不稳定（DI）的关系。方法采用Western blot法检测正常及不稳定逼尿肌细胞中Cx43蛋白表达。构建Cx43反义真核表达载体,脂质体介导转染体外培养不稳定逼尿肌细胞（转染组）,空载体做对照转染（空载组）。利用划痕标记荧光染料示踪（SLDT）技术观察Cx43表达降低后不稳定逼尿肌细胞间缝隙连接通讯改变。结果不稳定逼尿肌细胞中Cx43表达显著增高（P〈0．01）,转染反义Cx43组不稳定逼尿肌细胞间缝隙连接通讯较空载组明显减弱（P〈0．05）。结论抑制Cx43表达可明显降低不稳定逼尿肌细胞间缝隙连接通讯功能,Cx43表达增高可能是不稳定逼尿肌发生的重要原因。