表没食子儿茶素没食子酸酯对心脑血管缺血再灌注损伤保护作用机制的研究进展

表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)是绿茶的主要成分之一。研究表明,EGCG具有抗氧化、预防癌症、抗炎、抗菌等作用。近年来,心脑血管疾病已成为当今世界影响人类健康最显著的疾病,而目前仅有少数神经保护药物能够用于治疗缺血性中风。很多基础研究证实,EGCG对于心脑血管缺血再灌注损伤具有独特的疗效,主要体现在调节氧化应激、抗细胞凋亡、抗炎、激活腺苷受体、降低血脑屏障的通透性及降低基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达等方面。针对EGCG对心脑血管缺血再灌注损伤保护作用机制进行综述,以期能为有效治疗心脑血管缺血性疾病药物的开发提供参考。     

螺内酯对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响。方法:选择30只健康SD大鼠,采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型,随机分为三组:假手术组(n=10)、缺血再灌注(MI/RI)组(n=10)和药物组(n=10)。光镜及电镜观察标本病理形态改变,检测各组再灌注3h后心肌局部凋亡相关因子bcl-2、fas的表达,比较各组间差异。结果:与假手术组比较,MI/RI组中Fas含量升高(P>0.01),Bcl-2含量明显减少(P>0.05);药物组较MI/RI组Fas含量明显降低(P>0.05),Bcl-2含量明显增加(P>0.05)。结论:螺内酯减轻MI/RI中心肌细胞凋亡程度。     

缺血再灌注对肾细胞氧化损伤与细胞凋亡的影响

目的观察缺血再灌注对肾细胞氧化损伤和细胞凋亡的影响,探讨二者在再灌注肾损伤发生机制中的作用。方法30只Wistar大鼠,分组建立急性缺血再灌注肾损伤模型,应用流式细胞术检测肾细胞凋亡率,同时测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果缺血再灌注1h、2h、24h肾细胞凋亡率分别为9.58%、9.79%和11.23%,与对照组(1.51%)相比差异显著(P<0.05);各实验组SOD活力水平降低,与对照组相比差异显著(P<0.05、P<0.01),MDA生成高于对照组(P<0.05),GSH-Px在再灌注早期活力减弱,明显低于对照组(P<0.01),晚期活力基本恢复;肾细胞凋亡率与SOD活力呈负相关,与MDA生成水平正相关。结论缺血再灌注可造成肾组织氧化损伤和细胞凋亡率增高,二者协同作用参与再灌注肾病理损伤机制并可能是肾功能障碍的重要原因。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对早期压疮大鼠模型缺血再灌注损伤的保护作用及NLRP3炎症小体相关机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对早期压疮的保护作用及初步机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和EGCG 10、20、40mg/kg剂量组,灌胃给予相应药物,连续7d后,用自制装置对大鼠进行早期压疮造模。造模完成后观察各组大鼠受压局部组织情况,并眼眶采血,组织取材,酶联免疫吸附法测定血清中IL-1β、LDH、CK的含量;HE染色观察各组大鼠组织病变,判断压疮病理变化严重程度;蛋白质印迹法测定大鼠受压组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白的表达水平。结果:造模成功率为100%;实验组大鼠均存在皮肤层次欠清晰,皮下结缔组织和肌肉组织有炎性反应,病理变化严重程度随EGCG剂量的增加而减轻,大鼠血清中IL-1β、LDH、CK含量随EGCG剂量的增加明显降低。EGCG各剂量组大鼠受压组织中NLRP3、IL-1β、caspase-1蛋白表达显著降低,呈一定的剂量依赖性。结论:EGCG预处理可通过抑制炎症而减轻早期压疮缺血再灌注损伤,其作用机制可能主要与抑制NLRP3炎症小体的表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡作用的研究

目的 了解表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的影响.方法 建立BEL-7404/ADR细胞裸鼠移植瘤模型,分为control组、ADM组、EGCG组、ADM联合低剂量EGCG组(AE low组)、ADM联合中剂量EGCG组(AE mid组)和ADM联合高剂量EGCG组(AE high组),给药20 d,处死裸鼠去瘤块.用免疫组织化学法(TUNEL法)检测瘤组织内原位细胞凋亡和流式细胞仪(FACS)检测肿瘤组织细胞周期.结果 ADM与低、中、高剂量的EGCG合用,其细胞凋亡率分别为16.7％,20.3％和25.9％,高于单用ADM组的9.3％(P＜0.01),使肿瘤细胞增殖阻滞在S/G2期.结论 EGCG可协同增强ADM促肝癌MDR细胞BEL-7404/ADR的凋亡,使肿瘤细胞增殖周期阻滞在S/G2期.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌细胞株抑制作用的体外研究

目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株(LoVo细胞、SW480细胞、HT29细胞、HCT-8细胞)增殖的抑制作用及对细胞凋亡和细胞周期的影响,研究其对结肠癌的抑癌机制。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG(10,20,35μg/ml)对其进行干预,MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株增殖的抑制作用;用流式细胞仪检测EGCG对结肠癌细胞株凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株的抑制作用均具有浓度依赖性,且HT29细胞株尚具有时间依赖性。流式细胞仪检测EGCG能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关。EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞细胞周期阻滞在G0/G1期,阻碍其向S期转换,将HCT-8细胞阻滞在G2/M期,阻碍其向M期转换,将HT29细胞阻滞在S期,阻碍其向G2期转换,抑制结肠癌细胞株的增殖。结论EGCG对体外培养的结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制与增强细胞凋亡和影响细胞周期有关,具体作用机制有待进一步研究。     

灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的探讨灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响。方法 48只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组、硝苯地平组、灯盏花素组。肾脏缺血60min再灌注24h,检测大鼠血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,免疫组化方法检测肾组织Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠血清BUN和Cr浓度增高(P0.05),肾细胞凋亡指数升高,Bax蛋白表达明显上调(P0.05),Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax比值明显下降(P0.05)。与缺血再灌注组比较,灯盏花素组血清BUN和Cr水平降低(P0.05),肾细胞凋亡指数降低,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax升高(P0.05)。结论灯盏花素可以抑制大鼠肾脏缺血再灌注细胞凋亡,其机制可能与改变Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。     

中医药抗缺血再灌注损伤细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡(apoptosis)又称细胞程序性死亡，是一种不同于细胞坏死的死亡方式，它是指在一定的生理或病理条件下，细胞遵循自身的程序，自己结束其生命的过程，最后细胞脱落离体或裂解为若干凋亡小体(apoptotic bodies)而被其他细胞吞噬。现代医学研究认为缺血再灌注损伤是大多数急性缺血性疾病的主要病理生理过程，而细胞凋亡则是器官、组织缺血再灌注损伤过程中细胞死亡的重要机制之一，因此干预细胞凋亡，从而防治缺血再灌注损伤已经引起国内外广泛关注。近年来的研究表明，许多中医药有抗细胞凋亡的作用。笔者就中医药抗缺血再灌注损伤细胞凋亡的研究作一综述。     

黄芪水煎剂对肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪水煎剂(AE)对肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管细胞凋亡的影响及机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IR)及IR+不同剂量(0.5、1.0、2.0g/kg)AE预处理组(每组8只),夹闭双侧肾动脉45min再灌注6h后采用原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管细胞凋亡,荧光试剂盒检测肾组织Caspase 3活性;实时定量PCR法检测Bcl-2、Bax mRAN表达。结果:与Sham组相比,IR组凋亡细胞数、Caspase 3活性及Bax mRNA表达均显著升高,而Bcl-2 mRNA表达明显降低(P0.05);AE预处理组凋亡细胞数、Caspase 3活性及Bax mRNA表达均明显减少,而Bcl-2mRAN表达明显升高(P0.05)。结论:AE能显著抑制IR大鼠肾小管细胞凋亡,机制可能与其调节Bcl-2、Bax表达有关。     

灯盏花素对缺血再灌注大鼠心肌超微结构及细胞凋亡的影响

目的 :研究灯盏花素(breviscapine)对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。 方法 :40只SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注组(IR组),灯盏花素组。灯盏花素组大鼠于术前1周分别ip不同剂量的灯盏花素(25,50 mg·kg^-1.d^-1),另2组给等量生理盐水。以左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血模型,松开结扎线造成再灌注。采用Annexinv-PI双染,流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况;电镜观察各组大鼠心肌超微结构的变化。 结果 :灯盏花素可明显降低缺血再灌注大鼠心肌细胞的凋亡率(P<0.05,P<0.01),且较IR组心肌细胞超微结构损伤程度减轻。 结论 :灯盏花素对缺血再灌注心肌细胞具有保护作用,其机制可能是通过抑制心肌细胞凋亡实现的。     

还原型谷胱甘肽对肝缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的探讨还原型谷胱甘肽对家兔肝缺血再灌注损伤肝细胞凋亡的影响及其机制。方法将90只健康家兔随机分为对照组、肝缺血再灌注组和还原型谷胱甘肽保护组,制备肝缺血再灌注损伤模型。免疫组化法检测Bcl-2和Bax表达,原位细胞凋亡法检测肝细胞凋亡。结果与正常肝组织比,肝缺血再灌注损伤时,Bcl-2蛋白表达减少,Bax表达增高,细胞凋亡指数增加。使用还原型谷胱甘肽后,上述指标的异常变化均明显减轻,其有显著性差异(P均0.05)。结论还原型谷胱甘肽通过上调Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,从而抑制肝细胞凋亡。     

葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠缺血/再灌注模型,并给予葛根素药物干预,观察各组心肌细胞凋亡的情况,以了解细胞凋亡及葛根素在再灌注损伤中所起的作用。结果:假手术组及单纯缺血组凋亡细胞无明显增多,而缺血/再灌注组凋亡细胞明显增多(P<0.01);在再灌注前给予葛根素治疗可减少因再灌注引起的细胞凋亡(P<0.05)。结论:缺血/再灌注后可见心肌细胞凋亡发生,再灌注可加速细胞凋亡的发生;葛根素可抑制心肌细胞凋亡。     

血府逐瘀汤对大鼠缺血再灌注心肌损伤及心肌细胞凋亡的干预作用

目的：观察血府逐瘀汤对缺血再灌注致大鼠心肌损伤与细胞凋亡的干预作用。方法：采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法，复制家兔心肌缺血再灌注的动物模型，观察心肌的病变程度；DNA电泳及原位末端标记法检测心肌细胞凋亡。结果：血府逐瘀汤治疗组的梗死面积小于再灌注组；DNA电泳发现再灌注组呈凋亡的典型表现，血府逐瘀汤治疗组梯形条带中DNA含量较心肌缺血再灌注组明显减少TUNEL染色发现再灌注组有大量的阳性标记，且积聚成团，血府逐瘀汤治疗组较再灌注组明显减少。结论：缺血再灌注可诱导心肌细胞凋亡，血府远瘀汤可抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡发生。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠急性心肌缺血作用研究

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对垂体后叶素(Pit)所致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法:采用大鼠舌下静脉注射Pit复制急性心肌缺血模型,观察EGCG(40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg)对Ⅱ导联心电图(ECG)ST段、急性缺血性心律失常、血清心肌酶学及心肌脂质过氧化的影响。结果:EGCG(40 mg/kg、20 mg/kg)能降低Pit所致的急性心肌缺血大鼠ECGST段的抬高,对抗急性缺血性心律失常,减少心肌细胞磷酸肌酸激酶和乳酸脱氢酶的释放,提高心肌组织中超氧化物歧化酶活性,降低心肌组织丙二醛含量。结论:EGCG对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,其机制可能与清除自由基,抑制脂质过氧化反应有关。     

蜕皮甾酮对大鼠心肌再灌注损伤的影响

目的 :探讨蜕皮甾酮是否对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。方法 :采用大鼠冠状动脉结扎致心肌缺血再灌注损伤模型 ,预防性给予蜕皮甾酮 (0.5,5,50mg·kg^-1,iv) ,测定血清中肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛 (MDA)含量、左心室收缩性、心肌梗死范围。结果 :预防性给予较低浓度 (0.5～5mg·kg^-1)蜕皮甾酮能明显降低血清CPK ,LDH的活性与MDA含量 ,其作用具有量效关系 ,以 5mg·kg^-1作用最佳 ,该剂量还能改善心肌收缩性 ,减少心肌梗死面积。结论 :蜕皮甾酮对心肌再灌注损伤有保护作用 ,这可能与其抗氧化有关。     

牛磺酸对降低大鼠脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的作用

牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）对脑缺血再灌注神经元损伤具有保护作用，其机制尚不清楚。近年，研究提示细胞凋亡是脑缺血损伤的重要形式。本实验通过建立全脑缺血模型，观察Ｔａｕ保护性治疗后细胞凋亡的变化，证明了Ｔａｕ能够降低脑缺血中细胞凋亡的发生，为在脑缺...     

番茄红素对离体豚鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响

目的:探讨番茄红素对豚鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响。方法:将30只豚鼠离体心脏随机分为5组:正常组、缺血/再灌注组(Model)、番茄红素低剂量组(2.5 mg·L-1)、番茄红素中剂量组(5 mg·L-1)、番茄红素高剂量组(10 mg·L-1),模型组全心缺血40 min之后,K-H液继续灌注60 min,治疗组的灌流液中加入不同质量浓度的番茄红素。观察的指标有:心率、冠脉流量、梗死面积、灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:各组在再灌注后各项指标均发生变化,在再灌注60 min时,模型组与正常组比较心率下降(125±9),(169±16)次/min(P<0.01);灌流量下降(3.48±0.43),(5.53±0.30)mL·min-1(P<0.01);梗死面积显著增加(19.57±2.34),(1.57±0.29)%(P<0.01);LDH漏出量增加(206.67±11.85),(120.96±13.56)U·L-1(P<0.01);SOD活性下降(99.14±8.24),(153.22±8.93)U·mg-1(P<0.01),MDA含量增加(6.17±0.73),(3.80±0.41)μmol·g-1(P<0.01)。与模型组比较,番茄红素各组心率和冠脉流量增加,梗死面积减少,LDH漏出量减少,心肌组织中MDA含量降低,SOD活性增加,各剂量组之间呈剂量依赖性。结论:番茄红素对豚鼠离体心脏缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激相关。     

桃红四物液对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响研究

目的:观察桃红四物液对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响。方法:2月龄雄性SD大鼠50只,按随机数字表法分为5组:正常组、缺血再灌注组(IR组)、桃红四物液低剂量组(TD-IR组)、桃红四物液中剂量组(TZ-IR组)和桃红四物液高剂量组(TG-IR组),每组10只。复制肢体缺血再灌注损伤模型,采用HE染色法观察骨骼肌细胞形态学变化,DAPI法检测细胞凋亡。结果:(1)除正常组外,各组均出现不同程度肌纤维肿胀、排列不规则、肌纤维间隙增宽等情况,较之IR、TG-IR两组,TD-IR、TZ-IR两组损伤较轻,TG-IR组损伤程度最重。(2)IR、TG-IR、TD-IR和TZ-IR 4组骨骼肌细胞凋亡率降较正常组升高(P0.05),与IR、TG-IR两组比较,TD-IR、TZ-IR两组细胞凋亡率降低(P0.05),且TZ-IR组最低、TG-IR组最高。结论:一定剂量的桃红四物液能减轻肢体缺血-再灌注损伤,降低损伤骨骼肌细胞的凋亡率,对骨骼肌有一定的保护作用,本实验中中剂量桃红四物液效果最佳,高剂量的桃红四物液反可加重肢体缺血再灌注损伤,因此在临床上应严格控制好用药剂量。     

卡维地洛对大鼠急性缺血再灌注损伤的心肌保护作用研究

 目的研究卡维地洛对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法将大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(IRI)组、卡维地洛(CVD)组。结扎左冠状动脉前降支致缺血30min后复灌4h,制作心肌缺血再灌注损伤模型。于再灌4h末测定左室收缩压(LVP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP=LVP-LVEDP)、左室最大收缩及舒张速度(±dp/dt);测定血液中肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量以及心肌梗死范围。结果与假手术组相比,IRI组LVP,LVDP,±dp/dt及SOD降低,LVEDP,CK,LDH及MDA均升高,伴梗死范围扩大(P<0.01);与IRI比较,CVD组LVP,LVDP,±dp/dt及SOD升高,LVEDP,CK,LDH及MDA均降低,伴梗死范围缩小(P<0.01)。结论卡维地洛具有防止心肌再灌注损伤的作用,该作用与其β受体阻断和抗氧化有关。