新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性.方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达.结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性.Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右.结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求.     

半胱氨酰白三烯受体CysLT1 R和CysLT2 R以及GPR17在帕金森病模型小鼠脑内的表达分布

目的:探讨MPTP小鼠帕金森病(PD)模型脑内半胱氨酰白三烯受体CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达分布特征。方法:C57BL/6小鼠连续5 d皮下注射MPTP 25 mg/kg诱导PD模型,第10 d处死动物。应用免疫组化方法,观察CysLT1R、CysLT2R和GPR17在黑质表达的变化,并用免疫双标方法进行细胞定位。结果:正常小鼠黑质中有CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达,主要表达在TH阳性多巴胺能神经元以及小胶质细胞,CysLT2R还表达于星形胶质细胞;其中,在多巴胺能神经元中91%表达GPR17,77%表达CysLT1R,52%表达CysLT2R。与对照组比较,PD模型组小鼠黑质中TH阳性细胞数显著减少;同时CysLT1R、CysLT2R和GPR17阳性细胞数以及表达CysLT1R、CysLT2R和GPR17的多巴胺细胞数均显著减少。在正常小鼠纹状体中有CysLT1R、GPR17表达,主要表达于神经元;而CysLT2R表达很少,主要表达于星形胶质细胞。PD模型组小鼠纹状体中CysLT1R、GPR17阳性细胞数减少;但CysLT2R表达升高,主要表达于增生的星形胶质细胞。结论:CysLT1R、CysLT2R和GPR17可能参与MPTP所致的小鼠PD损伤过程。     

新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

目的：制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体（pAb）,并鉴定其免疫学特性。方法：以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Westernblot,检测GPR17的组织表达。结果：通过免疫家兔获得的抗GPR17pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1／16364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Westernblot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43kD左右。结论：制备的GPR17pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Westernblot检测GPR17的要求。     

半胱氨酰白三烯受体调节脑内炎症病变的研究展望

脑内炎症是脑缺血、退行性脑变性疾病等病变的主要特点之一,小胶质细胞是主要的炎症细胞,小胶质细胞激活对于慢性神经功能损伤有重要的影响。半胱氨酰白三烯受体(CysLT1和CysLT2受体以及GPR17)参与这些过程的调节,并且,不同亚型之间可能存在相互调节作用。随着这方面研究的深入,将为开发新型治疗药物奠定基础。     

半胱氨酰白三烯受体与脑损伤关系的研究进展

近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤.CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,介导星形胶质细胞损伤;新发现的GPR17也与脑缺血损伤有密切关系.加深CysLT受体在脑损伤及神经保护中作用的认识,将为CysLT受体作为药物靶点筛选和开发防治脑损伤的药物提供新的途径.     

鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化

目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01～1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blott...     

半胱氨酰白三烯受体在大鼠分泌性中耳炎黏膜中的表达

目的探讨半胱氨酰白三烯受体（CysLTR）-1、2在变应性分泌性中耳炎黏膜中表达及其变化。方法建立卵白蛋白激发变态反应中耳炎大鼠模型。实验动物分为阴性对照组Ⅰ、阴性对照组Ⅱ和实验组,采用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术分别检测半胱氨酰白三烯受体CysLTR1、CysLTR2 mRNA在中耳黏膜的表达变化。结果 CysLTR1、CysLTR2 mRNA在阴性对照组Ⅰ、Ⅱ的中耳黏膜表达很低,炎症情况下两型受体在实验组中耳黏膜的表达均显著增高,相对值分别为（0.42±0.05）和（0.28±0.06）,与阴性对照组Ⅰ、Ⅱ比较差别有统计学意义（P〈0.01）。结论 CysLTR1、CysLTR2均在中耳黏膜表达,变应性炎症时表达明显上调。     

毛细支气管炎与白三烯受体拮抗剂

毛细支气管炎是婴幼儿常见的下呼吸道感染性疾病,病毒感染是主要致病原因。毛细支气管炎的病理、生理变化与哮喘有许多相同之处,许多炎性介质参与其中,造成呼吸道高反应,诱发喘息。在这些炎性介质中,白三烯在毛细支气管炎呼吸道炎症的发生中起到重要作用,而白三烯受体拮抗剂在毛细支气管炎的治疗中取得较好疗效。现就白三烯受体拮抗剂的作用机制及其在毛细支气管炎中的临床研究进行综述,探讨毛细支气管炎的治疗及早期干预以及降低喘息复发率的有效方法。     

半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT_2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用.方法:以KLH偶联的CysLT_2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT_2受体的组织表达.结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT_2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT_2受体的特异性强,对CysLT_1受体和GPR17基本无交叉反应.Western blot结果显示,CysLT_2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右.免疫组化结果表明,CysLT_2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞.结论:制备的CysLT_2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求.     

白三烯受体拮抗剂对哮喘治疗作用的研究

哮喘是涉及到一系列炎性细胞和炎性介质的复杂过程 ,白三烯 (leukotriene)是重要的介质之一 ,它对于哮喘的发生、发展起着关键作用。近年的研究发现 ,白三烯在支气管哮喘的发病中起重要作用[1 ] ,体内外实验证实 ,白三烯所引起的病理改变与哮喘的病理改变极为相似 ,且在哮喘发作期、缓解期水平均高于正常人[1 ] ,因此阻断白三烯的合成或阻断白三烯与其受体的结合成为哮喘治疗的重要方向。1　白三烯的生成　 (见图 1 )图 1　白三烯的体内生成途径2　白三烯在支气管哮喘中的作用2 .1　白三烯在气道炎症中的作用　研究发现 ,吸入白三烯可致哮喘…     

半胱氨酰白三烯受体在几种表皮肿瘤及瘤样病变中的表达及意义

目的探讨半胱氨酰白三烯受体（cysteinyl leukotrienere ceptor,CysLTR）在不同表皮肿瘤中的表达意义。方法选择鳞状细胞癌、基底细胞癌、Bowen病、脂溢性角化病各15例,正常皮肤10例,应用免疫组织化学方法观察肿瘤细胞中半胱氨酰白三烯受体的表达。结果与正常皮肤相比,半胱氨酰白三烯受体在鳞状细胞癌、基底细胞癌中的表达上调（P〈0．05）,而在Bowen病及脂溢性角化病与正常皮肤近似（P〉0．05）。半胱氨酰白三烯两型受体在同一组织中的表达无显著性差异（P〉0．05）。结论半胱氨酰白三烯受体的高表达可能在表皮细胞的异常增殖中发挥一定的作用。     

咳嗽变异性哮喘患儿尿LTE4水平与白三烯受体拮抗剂治疗反应的相关性

目的 研究咳嗽变异性哮喘患儿尿LTE4水平对白三烯受体拮抗剂治疗效果及免疫状态变化的影响.方法 纳入符合标准的咳嗽变异性哮喘患儿136例,随机分为治疗组91例和对照组45例,在常规治疗基础上对照组采用激素吸入,治疗组采用白三烯受体拮抗剂治疗,治疗组根据尿LTE4水平分为L-LTE4组、M-LTE4组、H-LTE4组.比较治疗效果及实验室指标.结果 治疗组总有效率显著高于对照组（P＜0.05）,治疗后治疗组尿LTE4水平显著低于对照组（P＜0.05）.治疗组显效率和总有效率与不同白三烯水平组均呈正相关（P＜0.05）.H-LTE4组尿LTE4、外周血IgE、IL-17、TGF-β、IL-4、INF-γ水平和INF-γ/IL-4水平改变幅度最大（P＜0.05）.尿LTE4与IL-17、TGF-β、INF-γ/IL-4有相关性（P＜0.05）.结论 白三烯受体拮抗剂治疗咳嗽变异性哮喘患儿能有效降低尿LTE4水平,疗效受到尿LTE4水平影响,并与Th1、Th2、Th7细胞功能调控有关.     

白三烯类受体拮抗剂研究进展

白三烯类 (ＬＴｓ)是花生四烯酸 (ＡＡ)经 5 -脂氧酶 (5 -ＬＯ)代谢生成的一族脂类介质 ,广泛参与生物体的病理生理过程 ,如炎症、哮喘、脑缺血再灌损伤、创伤和休克等[1] 。早在 2 0世纪 30年代 ,Ｋｅｌｌａｗａｙ和Ｆｅｌｄｂｅｒｇ就发现一种物质能导致豚鼠气管平滑肌痉挛收     

变应性鼻炎中白三烯的作用

目的：总结半胱氨酰白三烯（cysLTs）在变应性鼻炎中的作用和应用白三烯受体拮抗剂的治疗原理。方法：查阅文献,总结论点。结果：实验研究表明白三烯与鼻黏膜的分泌、充血和炎症反应有关。结论：白三烯可调节变应性鼻炎的免疫和炎症反应过程。白三烯受体拮抗剂（LTRAs）是变应性鼻炎的有效治疗方法。     

哮喘患者对抗白三烯治疗反应性的临床研究

目的 观察不同临床表型的哮喘患者对白三烯受体拮抗剂治疗反应性的差异,探讨预测治疗反应性的指标.为哮喘的个体化治疗提供依据.方法 40例门诊哮喘患者,给予孟鲁司特10 mg 口服,每晚1次,疗程30d,分别于治疗前与治疗后记录哮喘症状(ACQ)评分,测定1 s呼气容积(FEV1%),采集9:00AM～3:00PM、3:OOPM～12:00PM、12: OOPM～9,00AM 3段不同时间的尿液标本,测定标本中半胱氨酰白三烯E4(LTE4)浓度.结果 抗白三烯治疗的敏感患者为10人(25%),不敏感者为11人(27.5%),中介者为19人(47.5%).敏感组尿白三烯浓度高于中介组和不敏感组,敏感组患者治疗后1个月的FEV1%、ACQ评分、尿白三烯水平均有改善,与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05).中介组和不敏感组治疗前后白三烯水平变化不明显.夜间哮喘、运动型哮喘与合并鼻炎哮喘对白三烯受体拮抗剂治疗反应较好,其中夜间哮喘对白三烯受体拮抗剂效果优于其他类型(P<0.05).夜间哮喘患者夜间白三烯浓度高于白天(P<0.05).结论 白三烯水平高的哮喘患者对白三烯受体拮抗剂反应好;不同类型的哮喘患者对白三烯拮抗剂的反应性不同.其中夜间哮喘反应最好;夜间哮喘患者的夜间白三烯浓度较白天高,呈现昼夜节律性,而非夜间哮喘患者则未显示此昼夜节律.     

白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的地位和前景

β2支气管扩张剂、茶碱及糖皮质激素在哮喘治疗中存在一定局限性和依从性,白三烯受体拮抗剂是一种新型、安全、有效的抗炎、平喘药物,具有良好治疗前景。     

半胱氨酰白三烯受体1参与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的调节

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的关系。方法:鱼藤酮及CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特处理PC12细胞后,以MTT方法检测PC12细胞活性变化;以Western blotting检测鱼藤酮处理前后,PC12细胞CysLT1受体的表达变化;不同浓度鱼藤酮处理24 h及3μmol/L鱼藤酮处理不同时间,以免疫细胞化学方法观察CysLT1受体分布变化。结果:鱼藤酮(0.3～30μmol/L)可诱导PC12细胞损伤,孟鲁司特(1、5μmol/L)可显著减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤。1～10μmol/L鱼藤酮作用PC12细胞24 h及3μmol/L鱼藤酮处理3 h和24 h,均可诱导CysLT1受体蛋白水平表达升高。鱼藤酮能浓度和时间依赖性引起CysLT1受体从细胞核移位到细胞浆。结论:CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤。     

半胱氨酰白三烯受体的研究进展

半胱氨酰白三烯(CysLTs)是一类重要的缩气管物质和炎性介质,包括白三烯C4、D4和E4.细胞膜上一种特异性G蛋白偶联受体介导CysLTs信号的转导,这种受体依据其是否能被抑制剂拮抗而分为两类:CysLT 1类受体(CysLT1)和CysLT 2类受体(CysLT2).CysLT1和CysLT2的基因克隆已经完成,这有利于我们致力于CysLT受体表达调节方面的研究以及探寻CysLTs在病理和生理情况下的新功能.     

白三烯在动脉粥样硬化形成及治疗中的作用

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是常见的心血管疾病,能引起严重的并发症,是导致病人死亡最常见的病因之一。炎症反应是动脉粥样硬化的发病机制之一,而白三烯(leukotrienes, LTs)是重要的炎症介质,在炎症信号通路中具有免疫调节和促炎作用。白三烯与动脉粥样硬化密切相关。白三烯的产生主要通过5-脂氧合酶和环氧合酶产生。白三烯B4(leukotrienes B4, LTB4)、半胱氨酸-白三烯(cysteinyl leukotrienes, CysLTs)等通过诱导中性粒细胞聚集,增强内皮细胞通透性,介导血管平滑肌细胞核钙信号转导,促进动脉粥样硬化的形成。一些与动脉粥样硬化有关的疾病,如阻塞性睡眠呼吸暂停的夜间间歇性低氧显著增加了白三烯B4的产生及5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)的表达;糖尿病患者基质金属蛋白酶明显增加,可促进5-脂氧合酶和白三烯B4表达。本文论述了白三烯及其代谢途径中相关物质、产生白三烯相关疾病与动脉粥样硬化的关系,提出了抑制白三烯受体、5-脂氧合酶途径和白三烯A4水解酶等新的治疗动脉粥样硬化的策略。     

半胱氨酰白三烯受体1参与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的调节

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的关系.方法:鱼藤酮及CysLT1受体拮抗剂孟鲁司特处理PC12细胞后,以MTT方法检测PC12细胞活性变化;以Western blotting检测鱼藤酮处理前后,PC12细胞CysLT1受体的表达变化;不同浓度鱼藤酮处理24 h及3μmol/L鱼藤酮处理不同时间,以免疫细胞化学方法观察CysLT1受体分布变化.结果:鱼藤酮(0.3 ～30 μmol/L)可诱导PC12细胞损伤,孟鲁司特(1、5μmol/L)可显著减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤.1～ 10 μnol/L鱼藤酮作用PC12细胞24 h及3μmol/L鱼藤酮处理3h和24 h,均可诱导CysLT1受体蛋白水平表达升高.鱼藤酮能浓度和时间依赖性引起CysLT1受体从细胞核移位到细胞浆.结论:CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤.