低强度脉冲超声波对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响

背景:研究发现低强度脉冲超声波对骨折愈合具有明显的促进作用,但其机制尚不明确.目的:观察低强度脉冲超声波对体外分离培养的兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响.设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2008-06/2009-01在解放军第四军医大学西京医院完成.材料:4周龄新西兰白兔2只,体质量0 8～1.0 kg,用于骨髓基质细胞的分离、培养.方法:将骨髓基质细胞以2×104个/孔的密度接种于6孔培养板中,采用辐射强度为30 mW/cm2的脉冲超声波作用于体外培养的兔骨髓基质细胞,根据低强度脉冲超声波每天作用时间分为4组:5 min/d组,10 min/d组,20 min/d组和空白对照组(无超声波处理).主要观察指标:原代及传代细胞形态变化;四甲基偶氮唑盐法检测低强度脉冲超声波作用1,3,7 d各组细胞吸光度的变化;作用3,7 d后各组骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性的变化;作用7 d各组骨髓基质细胞分泌骨钙素水平的变化.结果:①原代骨髓基质细胞7 d后融合成片,多数细胞呈梭形或多角形;第3代细胞经低强度脉冲超声波处理后,各组细胞形态较空白对照组无明显变化.②四甲基偶氮唑盐检测,各组细胞吸光度值均随时间延长而增加;且各实验组不同时间点吸光度值均明显高于空白对照组(P<0.05).③与空白对照组相比,20 min/d组低强度脉冲超声波作用3,7 d后,单位质量骨髓基质细胞总蛋白碱性磷酸酶活性均显著升高(P<0.05),其他2组与空白对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05).④与空白对照组相比,20 min/d组低强度脉冲超声波作用7 d时,骨髓基质细胞分泌骨钙素显著增加(P<0.05),而其他2组骨钙素的分泌量与空白对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论:低强度脉冲超声波能够显著促进兔骨髓基质细胞的增殖,其诱导分化作用与作用时间有关.     

低强度脉冲超声波对大鼠脂肪干细胞增殖及成骨分化的影响

目的 探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)对体外分离培养的大鼠脂肪源干细胞(ADSCs)增殖及成骨分化的影响.方法 取4周龄Sprague-Dawley大鼠腹股沟处脂肪组织,分离出脂肪干细胞并体外培养,经免疫磁珠分选、流式细胞仪鉴定ADSCs表面标志后,取第3代ADSCs,经LIPUS作用不同时间后,采用流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞增殖指数,采用CCK-8法比较细胞增殖活性.取第3代ADSCs,设置阴性对照组、LIPUS组、成骨诱导组及LIPUS联合成骨诱导组,于LIPUS作用7 d、14 d时测定各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;于LIPUS作用21 d时采用Von kossa染色比较各组细胞成骨分化能力.结果 第3代ADSCs高表达CD29、CD44,低表达CD34,符合ADSCs表面标志物特征;LIPUS组细胞增殖指数较对照组明显提高,细胞增殖加快.与阴性对照组比较,LIPUS组于实验进行7 d、14 d后ALP活性明显升高;LIPUS作用能促进ADSCs致矿化结节形成,但其矿化结节数量不及LIPUS联合成骨诱导组.结论 LIPUS能加速ADSCs增殖,促进ADSCs向成骨细胞分化.

Abstract：

Objective To investigate the biological effects of low intensity pulsed ultrasound (LIPUS) on the proliferation and osteogenic differentiation of adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) in vitro.Methods Primary ADSCs were harvested from the inguinal fat pads of 4-week-old female Sprague-Dawley rats,cultured in vitro and purified by magnetic-activated cell sorting.Surface ADSC markers were identified by flow cytometry.LIPUS at 100 mW/cm2 was used to stimulate the cultured cells.Flow cytometry was performed for cell cycle analysis.Cellular proliferation was evaluated via CCK8 chromatometry,and a proliferation index was calculated.ADSCs were assigned to 4 groups:a negative control group,a LIPUS group,an osteoinduction group and a LIPUS plus osteoinduction group,and treated accordingly.Alkaline phosphatase (ALP) activity was determined at the 7th and 14th day in each group,and calcium nodes were marked by Von Kossa staining.The levels of osteogenic differentiation in the different groups were evaluated.Results The ADSCs of passage 3 expressed CD 34low,and CD29high CD44high,which was consistent with the characteristics of ADSC surface markers.Proliferation was upregulated significantly in the LIPUS group compared with the negative control group.ALP activity was also elevated significantly and it resulted in mine-ralization.The highest mineralization rate was observed in the LIPUS plus osteoinduction group.Conclusions LIPUS not only can stimulate the proliferation of rat ADSCs,it also promotes their osteogenic differentiation.     

低强度脉冲超声波对细胞增殖及生物合成的影响

低强度脉冲超声波具有独特的生物学效应,在体外细胞及体内实验中研究发现能够调节细胞的增殖、促进胶原及非胶原蛋白的合成、影响细胞因子的分泌和诱导细胞分化作用,其在临床治疗活动中已经在骨折,放射性骨坏死的治疗中取得一定成效。本文综述了近年来在低强度脉冲超声波生物学效应研究的新进展。     

低强度脉冲超声对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

目的探讨低强度脉冲超声波（LIPUS）对体外分离培养的人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响，为其临床应用提供实验依据。 方法采用频率为1 MHz、声强为0.1 W/cm2的LIPUS处理体外培养的人皮肤成纤维细胞，根据处理时间分为超声处理0 min组（假处理组）、超声处理5 min组（5 min组）、超声处理10 min组（10 min组）及超声处理20 min组（20 min组）。超声处理结束24 h后用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组细胞增殖情况，采用H3-胸腺嘧啶核苷及H3-脯氨酸掺入试验分别检测超声作用对细胞DNA合成及胶原蛋白合成的影响，应用流式细胞仪检测超声作用对细胞周期的影响。 结果⑴频率为1 MHz、声强为0.1 W/cm2的LIPUS处理成纤维细胞5 min后，吸光度值增加，细胞H3-胸腺嘧啶核苷及H3-脯氨酸掺入量也明显增加，与假处理组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；作用10 min后，掺入量达最高，与假处理组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；作用时间增加至20 min，掺入量反而下降，与假处理组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。⑵LIPUS作用5 min或10 min可使细胞周期改变，S期细胞数增多，G2/M期细胞数减少。 结论LIPUS作用一定时间能够促进人皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成。     

冲击波对成肌细胞增殖分化的影响

目的:探讨体外冲击波对成肌细胞增殖分化的影响,为进一步开展冲击波在体内骨骼肌损伤中的作用研究奠定基础,为临床应用冲击波治疗提供理论依据。方法:将原代分离培养好的成肌细胞,利用冲击波进行刺激,将实验对象分为空白组、实验组(冲击波刺激)、阳性对照组(成肌诱导剂)。形态学检测肌管形成情况;MTT法检测成肌细胞增殖;流式细胞仪检测成肌细胞凋亡;Western Blot检测肌调节标志物Pax7、MyoD、Myf5、Myf6和Myogenin蛋白;免疫荧光检测Desmin、Pax7、MyoD的表达。结果:(1)结果显示成肌细胞的活力对冲击波刺激呈现剂量依赖性,能流密度高于0.16 mJ/mm²时细胞的存活率降低,凋亡率高于空白组(P<0.05),能流密度为0.08 mJ/mm²时,冲击次数为500时细胞最高活力。(2)免疫荧光结果显示冲击波可促进MyoD蛋白表达升高,降低Pax7的表达。(3)Western Blot结果显示冲击波可促进MyoD、Myf5、Myogenin、Myf6蛋白表达水平显著增高(P<0.05),Pax7蛋白表达随着时间...     

低强度脉冲超声波对骨折愈合的影响

背景:随着人们寻求促进骨折愈合方法的同时,低强度脉冲超声波以其费用低廉、无创伤、无感染、治疗方便、无不良反应等优点逐步受到人们的关注与重视.目的:通过查阅大量相关资料并进行分析总结,从作用机制、动物实验和临床应用入手,对低强度脉冲超声波影响骨折愈合的研究现状进行综述,以期为促进骨折愈合提供新的思路和理论依据.方法:检索Pubmed数据库(http://www.ncbi.nlm.gov/Pubmed)(1989/2009)、维普数据库(www.cqvip.com) (1981/2009)和万方数据库(www.wanfangdata.com.cn) (1981/2009)的相关文章.英文检索词为"LIPUS,fracture",中文检索词为"低强度脉冲超声波,骨折".纳入与低强度脉冲超声波或超声波治疗骨折密切相关,同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章;排除重复性文献.文献类型包括综述、动物试验和临床试验等.计算机初检得到60篇文献,根据入选标准保留35篇文献做进一步分析.结果与结论:低强度脉冲超声波治疗骨折具有费用低廉、安全、环保、无创性、无感染、操作简便、适用范围广和并发症少等优点,动物实验和临床应用等证实低强度脉冲超声波是一种有效的促进骨折愈合的方法,目前公认的是要应用低频率、低强度.低强度脉冲超声波治疗骨折,不仅涉及物理学,而且涉及医学等多个学科,由于对超声波方面研究进展,以及机体的复杂性及伦理方面问题,其作用机制以及脉冲超声波参数值及各参数间该如何组合还有待进一步探索.     

低强度脉冲超声波对骨折愈合的影响

背景：随着人们寻求促进骨折愈合方法的同时,低强度脉冲超声波以其费用低廉、无创伤、无感染、治疗方便、无不良反应等优点逐步受到人们的关注与重视。目的：通过查阅大量相关资料并进行分析总结,从作用机制、动物实验和临床应用入手,对低强度脉冲超声波影响骨折愈合的研究现状进行综述,以期为促进骨折愈合提供新的思路和理论依据。方法：检索Pubmed数据库（http：//www.ncbi.nlm.gov/Pubmed）（1989/2009）、维普数据库（www.cqvip.com）（1981/2009）和万方数据库（www.wanfangdata.com.cn）（1981/2009）的相关文章。英文检索词为＂LIPUS,fracture＂,中文检索词为＂低强度脉冲超声波,骨折＂。纳入与低强度脉冲超声波或超声波治疗骨折密切相关,同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章;排除重复性文献。文献类型包括综述、动物试验和临床试验等。计算机初检得到60篇文献,根据入选标准保留35篇文献做进一步分析。结果与结论：低强度脉冲超声波治疗骨折具有费用低廉、安全、环保、无创性、无感染、操作简便、适用范围广和并发症少等优点,动物实验和临床应用等证实低强度脉冲超声波是一种有效的促进骨折愈合的方法,目前公认的是要应用低频率、低强度。低强度脉冲超声波治疗骨折,不仅涉及物理学,而且涉及医学等多个学科,由于对超声波方面研究进展,以及机体的复杂性及伦理方面问题,其作用机制以及脉冲超声波参数值及各参数间该如何组合还有待进一步探索。     

低强度脉冲超声促进C2C12成肌细胞分化的作用机制研究

目的观察不同功率密度低强度脉冲超声(LIPUS)对骨骼肌C2C12成肌细胞脂联素(Adiponectin)及其受体的影响,探讨LIPUS促进C2C12成肌细胞分化的潜在机制。方法将体外培养的C2C12成肌细胞根据有无超声干预或超声干预的功率密度随机分为对照组、U_0.1组、U_0.3组和U_0.5组,对照组接受假LIPUS干预,U_0.1组、U_0.3组、U_0.5组分别接受功率密度为0.1 W/cm²、0.3 W/cm²、0.5 W/cm²的LIPUS干预。干预5 d后,分别采用CCK-8法检测细胞活力,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测脂联素、脂联素受体1(AdipoR1)和T-钙黏蛋白(T-Cadherin)mRNA水平,采用Western blot法检测脂联素、AdipoR1、T-Cadherin、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、活化型-磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)、肌细胞生成蛋白(MYOG)和胚胎肌球蛋白重链(eMHC)的蛋白水平,并对4组细胞肌管的分化能力进行免疫荧光化学检测。结果LIPUS干预5 d后,U_0.1、U_0.3和U_0.5组细胞相对活力明显高于对照组(P<0.01)。U_0.3组和U_0.5组脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin mRNA水平均显著上调,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。U_0.3组和U_0.5组脂联素、AdipoR1、T-Cadherin蛋白和AMPK磷酸化水平与对照组比较,均显著增加(P<0.05),且U_0.1组和U_0.5组均显著低于U_0.3组,差异均有统计学意义(P<0.01)。U_0.3组和U_0.5组C2C12成肌细胞分化指标eMHC、MYOG蛋白水平和C2C12成肌细胞融合指数与对照组比较,均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS可促进C2C12成肌细胞的分化,并以0.3 W/cm²、5 min/d、1 MHz,占空比为20%的LIPUS干预作用最明显,其调控机制可能与C2C12成肌细胞脂联素、受体AdipoR1和T-Cadherin的表达上调和下游AMPK磷酸化水平活化有关。     

聚焦式低强度脉冲超声波在膝骨关节炎治疗中的应用研究进展

聚焦式低强度脉冲超声波（focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS）作为一种无创的物理治疗方法,广泛应用于骨科、神经外科、泌尿外科和康复医学科等临床专科。越来越多的研究发现FLIPUS可以通过促进组织再生、缓解疼痛与抑制炎症等机制来治疗膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）,改善KOA的常见临床症状,如关节疼痛或僵硬、关节活动受限和步行功能下降,且能在一定程度上提高患者的生活质量。该文主要就FLIPUS治疗KOA的作用和生物物理机制以及相关临床研究作一综述,旨在为开展这方面研究的临床工作者提供参考。     

低强度脉冲超声波对围绝经期大鼠卵巢功能的影响

目的 探讨低强度脉冲超声波对SD围绝经期大鼠卵巢功能的影响. 方法 选择自然老化的SD围绝经期大鼠40只,随机分为假照组和超声波组.假照组不予以治疗.超声波组采用声强0.8W/cm2,频率1.02 MHz的超声波对大鼠右侧卵巢进行辐照,根据辐照时间不同,分为10 min组、20 min组和30 min组,依次予以每天10、20、30 min辐照,共10d.于辐照10 d后取材,采用化学发光法测定血清E2,计算卵巢系数,HE染色观察各级卵泡发育情况和卵泡总数变化. 结果 与假照组相比,10 min组、20 min组和30 min组的E2水平升高,30 min组的窦状卵泡数及卵泡总数增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).10 min组、20 min组和30 min组的卵巢系数与假照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),低强度超声辐照对卵巢质量没有影响. 结论 低强度脉冲超声具有促进SD围绝经期大鼠卵泡发育的作用.     

低强度脉冲超声波刺激对人骨髓基质细胞和骨膜细胞生物学效应的影响

目的研究低强度脉冲超声波（LIPUS）对体外分离培养的人骨髓基质细胞、骨膜细胞生物学效应的影响，探讨其促进骨折愈合的相关机制。方法采用辐射强度为30mW／cm^2的脉冲超声波分别作用于体外培养的人骨髓基质细胞、骨膜细胞（上述细胞根据LIPUS每天作用时间再分为5min／d组，10min／d组及20min／d组），并于不同时问点检测其对细胞生长、分化等主要相关指标的影响。结果各LIPUS实验组骨髓基质细胞、骨膜细胞DNA合成量与空白对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；骨膜细胞经LIPUS作用后，其ALP活性、骨钙素分泌水平及钙结节形成均显著增强（P〈0．05），而骨髓基质细胞经LIPUS作用后．其细胞分化标志物均无明显改变（P〉0．05）。结论LIPUS能够促进人骨膜细胞向成骨细胞分化，这可能是其促进骨折愈合的相关生物学机制之一。     

低强度脉冲超声波对软骨细胞中金属蛋白酶-13与Ⅱ型胶原的影响

目的:研究低强度脉冲超声波(LIPUS)对体外培养软骨细胞中金属蛋白酶-13(MMP-13)与Ⅱ型胶原的影响。方法:选用6只1月龄的新西兰大白兔膝关节软骨进行体外培养,传至第二代,分为对照组与4个LIPUS辐射组,LI-PUS强度分别是20mW/cm2、30mW/cm2、40mW/cm2、50mW/cm2。每天辐射20min,连续10d,每天细胞计数;分别在第5天及第10天收集细胞,采用Western-blot技术、qRT-PCR技术检测软骨细胞中MMP-13、Ⅱ型胶原的含量,并分析两者之间的相关性。结果:①与对照组相比,各LIPUS辐射组软骨细胞数均明显增高(P<0.05),其中40mW/cm2组软骨细胞数最高,与其他各辐射组比较有显著性差异(P<0.05);②细胞培养5d和10d后,MMP-13含量均较第0天明显升高(P<0.05)。但各辐射组MMP-13含量均较其对照组显著降低(P<0.05);其中40mW/cm2组MMP-13含量最低(P<0.05);③细胞培养5d和10d后,Ⅱ型胶原表达量均较第0天明显降低(P<0.05)。但各辐射组Ⅱ型胶原表达量均较其对照组显著升高(P<0.05)。其中40mW/cm2组Ⅱ型胶原表达量最高(P<0.05);④MMP-13与Ⅱ型胶原含量呈负相关(r=-0.757,P<0.05)。结论:不同强度的LIPUS体外辐射可促进软骨细胞增殖,抑制MMP-13的表达,延缓II型胶原的降解。     

低强度脉冲超声波促进骨折愈合的研究进展

1950年研究者在干骨研究中发现骨在承受应力时其凹凸两侧可产生电位。骨的压电性质首先发表在日本的文献中，而最初在西方国家没有引起广泛影响。但在矫形学中压电性质的基本原理可以解释骨折位置的力学环境对骨折修复结构的影响。每年有数百万人在日常活动、运动中以及由于骨质疏松而骨折，骨折后骨痂形成而自然愈合。约5％～10％的患者因愈合过程受损而导致延迟愈合或骨不连而需进一步手术治疗。     

低强度超声波对大鼠皮肤胶原蛋白表达的影响

目的 研究低强度超声波对SD大鼠皮肤胶原蛋白表达的影响,探讨低强度超声波治疗皮肤老化的机制.方法 选择15只SD大鼠,采用声强1.0 W/cm2,频率43 kHz超声波对SD大鼠背部进行辐照,采用RT-PCR和免疫组化方法 观察治疗后第1,7,14,30 d治疗和未治疗组皮肤组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白mRNA及胶原蛋白的表达.结果 治疗后14 d,Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白mRNA及胶原蛋白表达增加;治疗后30 d,Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白mRNA及胶原蛋白表达仍增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 低强度超声波辐射大鼠皮肤能诱导皮肤胶原蛋白含量的增加,促进皮肤恢复弹性.     

低强度脉冲超声波对Beagle犬下颌第三前磨牙慢性牙周炎组织学效应的探讨

目的 探讨低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)处理慢性牙周炎组织的生物学效应.方法 4只雄性Beagle犬构建下颌第三前磨牙慢性牙周炎模型,自体左右随机对照,不同强度LIPUS[超声功率(ISATA)30、60 mW/cm2]连续3个月隔天处理实验组20 min,每隔15d测量牙龈表面温度,测量LIPUS处理前后牙槽骨骨密度并获取实验区域骨组织切片,经HE、Masson染色评估LIPUS处理下牙周炎组织改建效应.结果 LIPUS处理前后牙龈表面温度变化小于1℃.骨密度变化实验组＞对照组(P＜0.05);实验组ISATA 30 mW/cm2组＜ISATA 60 mW/cm2组,无统计学差异(P＞0.05).不同参数LIPUS实验组较对照组均表现为牙槽骨组织成骨细胞活跃、类骨质形成增加.结论 单纯LIPUS处理有减轻牙周炎症状的可能,对慢性牙周炎具有潜在的修复效应.     

低强度脉冲超声对人脐带干细胞体外增殖和成软骨分化的影响

目的:研究低强度脉冲超声(LIPUS)对体外培养人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)增殖和成软骨分化的影响。方法:将P_4代h UCMSCs随机分为对照组(C组)L30组(30m W/cm~2)、L_(50)组(50m W/cm~2)、L_(80)组(80m W/cm~2),对照组予超声假照处理,各LIPUS刺激组分别刺激5、10、20min/d。LIPUS刺激后观察细胞生长情况,连续刺激1—5天后采用CCK-8检测细胞增殖活性;连续刺激并成软骨诱导培养2周后分别采用ELISA法检测软骨特异性胞外糖胺多糖(GAG)和Ⅱ型胶原蛋白(Col2)的浓度,以及细胞阿利新蓝染色和Col2、DAPI荧光染色观察上述两种软骨特异性蛋白的分布水平。结果:①LIPUS刺激5d后观察刺激5min/d时L50组细胞集落更为密集,细胞增殖活性组内比较高于L30组和L80组(P0.05),组间比较高于对照组(P0.05),刺激10min/d、20min/d时各实验组随着刺激强度增加细胞增殖受到抑制,以L80组抑制增殖效果最显著(P0.05)。②LIPUS刺激并成软骨诱导5min/d时L30组细胞更为扁平宽大且阿利新蓝染色面积及Col2荧光强度较L50组、L80组及对照组更大,进一步分析胞外分泌GAG和Col2蛋白的含量为实验组高于对照组,以L30最为显著(P0.05),刺激10min/d、20min/d时各实验组之间以及与对照组组间无显著性差异。结论:①适宜参数的LIPUS刺激促进细胞增殖,以(50m W/cm~2、5min/d)最为显著,但随着刺激强度增大和刺激时间的延长,细胞的增殖能力下降;②在细胞诱导因子的协同作用下,在不影响细胞增殖率的情况下适宜参数(30m W/cm~2、5min/d)的低强度脉冲超声可促进人脐带间充质干细胞成软骨分化。     

低氧对成人成肌细胞增殖的影响

背景:人成肌细胞可再生不同组织的细胞来用于组织工程方面的研究,其体外培养时增殖能力有限,因此,进行促进人成肌细胞体外增殖的研究很重要. 目的:通过间歇性低氧处理,观察成年大鼠原代培养的成肌细胞的增殖能力的变化.设计:对比观察,重复测晕设计.时间及地点:实验于2007-08/2008-06在辽宁医学院附属第一医院外科实验室完成.对象:3例男性成人正常颞肌标本取自于开颅手术患者,年龄分别为23岁,29岁和36岁.患者均知情并同意.方法:取成人正常颢肌组织,分离培养成肌细胞并鉴定,将培养至第3代的成肌细胞分为常氧对照组、体积分数为0.1 O2组、0.03 O2组及无氧组.各组细胞采用4孔板培养4 d后进行记数.主要观察指标:不同培养条件下细胞的生长状态和特点;以自动生化分析仪测定培养液中氧含量,以乳酸分析仪测定细胞培养液中的乳酸浓度;以流式细胞仪测定各组细胞的增殖指数.结果:随着环境氧浓度的下降,细胞培养液中的氧含量也逐渐下降(P<0.05),而乳酸浓度逐渐升高(P<0.05),当环境氧浓度为0时,乳酸浓度大于2.0 mmol/L.低氧组成肌细胞数日比常氧组明显增加,尤以体积分数为0.1的02组更为明显,其成肌细胞数目约为常氧组的2.5倍(P<0.05),体积分数为0.03的O2组在低氧1 d和2d时增殖指数低于常氧组,低氧4d时,增殖指数增加;而体积分数为0.1的O2组增殖指数一直高于常氧组(P<0.05).结论:轻中度低氧有利于成人成肌细胞的体外增殖,提示低氧作为体外的一种可控制因素,可调节成肌细胞的增殖,对于其基础及临床研究具有一定的意义.     

低强度脉冲超声波对SD大鼠前软骨干细胞增殖及细胞外基质mRNA表达的影响

背景：研究证明低强度脉冲超声波不仅可以促进骨折愈合,而且还对软骨细胞增殖和细胞外基质分泌具有一定的调节作用。目的：进一步验证低强度脉冲超声波对大鼠前软骨干细胞增殖及细胞外基质分泌的影响。方法：分离新生大鼠乳鼠的前软骨干细胞,鉴定后第3代细胞培养,分为空白对照组、5,12,20min/d组4组。以低强度脉冲超声波刺激后继续培养细胞24h。分别于刺激后第1,3,5天用CCK-8法检测细胞增殖。另以低强度脉冲超声波刺激后间隔30min提取总RNA,用RT-PCR法检测Ⅱ型胶原、Aggrecan、转化生长因子β1及Sox9基因的表达。结果与结论：低强度脉冲超声波对大鼠前软骨干细胞的增殖有促进作用,与对照组相比第1天时20min/d组增殖明显（P〈0.05）。大鼠前软骨干细胞Ⅱ型胶原、Aggrecan、转化生长因子β1及Sox9基因mRAN的表达均有明显增加,刺激天数越多mRAN的表达量越多,以20min/d组增高最为明显。提示低强度脉冲超声波可以促进SD大鼠前软骨干细胞的增殖能力,并可以促进细胞外基质mRAN的表达,这一效应可能是通过转化生长因子β1及Sox9基因所介导的。     

低强度脉冲超声对人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖和碱性磷酸酶(alkali phosphatase,ALP)活性的影响.方法 不同参数(按辐照强度IsATA 30、60、90 mW/cm2,时间10、20、30 min/d分组)LIPUS辐照干预hPDLCs培养,四甲基偶氮唑盐比色法检测hPDLCs增殖率,流式细胞仪检测细胞增殖周期,酶化学法测定ALP活性.结果 LIPUS辐照时间20 min/d、强度90 mW/cm2时可促进hPDLCs增殖;辐照后hPDLCs增殖指数较对照组显著提高.各组ALP活性较对照组均有不同程度提高;不同辐照强度组间及不同辐照时间组间的ALP活性差异显著(Fi=226.391,P＜0.05,Ft=145.572,P＜0.05);不同辐照强度和辐照时间的交互作用也有统计学意义(F=448.540,P＜0.05);其中90 rmW/cm2、20 min/d组促进作用最强.结论 LIPUS具有促进hPDLCs增殖及成骨分化作用,90 mW/cm2、20min/d为促进hPDLCs增殖和成骨分化的适宜参数.     

低强度脉冲超声波对Beagle犬Ⅱ度根分叉病变的辅助效应

背景:低强度脉冲超声波主要用于促进骨折愈合及提高新生骨组织密度,尚未见其对Ⅱ度根分叉病变组织学修复效应的报道。目的:观察低强度脉冲超声波对Ⅱ度根分叉病变的组织学修复效应。方法:5只Beagle犬各取2颗下颌第4前磨牙颊侧作为实验区,建立Ⅱ度根分叉病变模型,分别分为超声组和对照组并在颊侧缺损龈方根面制备切迹作为参照点,高糖饲养8周。超声组行根面平整术,术后1周行低强度脉冲超声波(90mW/cm21.5MHz,200μs,1kHz)处理20min/d,对照组行根面平整术和假处理。6周后取实验区域组织制备脱钙切片,苏木精伊红染色、Masson染色行根分叉区域组织测量分析。结果与结论:超声组根分叉区新生牙槽骨沿根面生长,根分叉区可见牙龈上皮;对照组根分叉区以结缔组织生长为主,可见大量牙龈上皮和少量新生骨组织。超声组新生牙槽骨胶原呈"红-蓝"相间,以红染为主;对照组呈现蓝染,即超声组的新生牙槽骨胶原较对照组成熟。超声组牙槽骨、牙骨质、牙周膜新生量均大于对照组(P<0.05)。提示90mW/cm2低强度脉冲超声波可促进根分叉病变新生牙槽骨胶原成熟和改建。