肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌上calponin和TGFβ1的变化

各种病因所致的肺动脉高压(pulmonary artery hyperten-sion,PAH)是临床的常见病症,它是慢性阻塞性肺疾患(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)发展成肺心病的中心环节[1]。PAH的发病机制相当复杂,但COPD所致的PAH主要是由于肺血管阻力增加所引起[2]。血管内皮细胞通过合成、代谢、分泌多种因子,调控血管平滑肌的舒缩和增殖。调宁蛋白(calponin)为一种平滑肌特有的调控蛋白,它的功能包括抑制平滑肌收缩、参与细胞信号转导和维持细胞骨架等[3]。转化生长因子β1(TGFβ1)是调控细胞增殖、分化的重要因子,能促进血管平滑肌细…     

血栓调节蛋白在肺动脉高压大鼠中的表达

目的 观察血栓调节蛋白(TM)在肺动脉高压模型大鼠表达的变化,以探讨其在肺血管重塑中的作用。方法 利用野百合碱(MCT)诱导大鼠肺高压动物模型,右心导管法测定大鼠肺动脉压力,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测不同时间点大鼠血浆TM水平,采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中TM mRNA表达水平。结果实验第14天肺动脉压力开始升高,第21天明显升高,以第28天为最高。模型组大鼠血浆TM浓度在第7天时有升高,第14天时明显升高,与对照组有显著差异;第21天开始下降,第28天下降显著,与对照组相比有显著差异。模型组大鼠肺组织中TM mRNA水平在第7天时即开始表达减少,第14天时表达明显减少,以28天时表达最低。结论 血栓调节蛋白在肺动脉高压时表达减少,可能在肺动脉高压发病机制中发挥重要作用,提示肺动脉高压时需要适当抗凝治疗。     

硫化氢供体对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉胶原含量及代谢的影响

目的探讨硫化氢供体硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉胶原含量及代谢的影响。方法32只♂SD大鼠随机分为分流组(n=8)、分流+NaHS组(n=8)、假手术组(n=8)和假手术+NaHS组(n=8)。对分流组和分流+NaHS组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型。分流11wk后,以右心导管法测定大鼠肺动脉收缩压(systolic pulmonary arteryp ressure,SPAP)、以敏感硫电极法测定肺组织硫化氢(hydro-gen sulfide,H2S)含量、以免疫组织化学法测定肺动脉胶原Ⅰ和胶原Ⅲ、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)及其抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1)的表达。结果分流11wk后,大鼠SPAP明显增高(P<0.05);肺组织H2S含量明显降低(P<0.05);应用NaHS干预11wk后,分流+NaHS组大鼠H2S含量明显升高,而SPAP明显降低(P<0.05);分流+NaHS组大鼠胶原Ⅰ和胶原Ⅲ蛋白表达比分流组明显降低(P<0.05);分流+NaHS组大鼠MMP-13、TIMP-1的蛋白表达及MMP-13/TIMP-1比值比分流组明显升高(P<0.05)。结论NaHS可能通过增加肺动脉壁胶原成分的降解、减少胶原含量,从而在高肺血流性肺动脉高压形成中发挥调节作用。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉NO和肺组织eNOS蛋白表达的变化

为观察内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）体系在大鼠慢性低氧性肺动脉高压发生发展中的代谢变化,将50只Wistar雄性成年大鼠随机分为常氧组（N组）、低氧7天组（H7 d组）、低氧14天组（H14 d组）、低氧21天组（H21 d组）和低氧28天组（H28 d组）,每组10只。通过建立慢性低氧性肺动脉高压模型,观察各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压（mCAP）、右心室肥大指数、肺动脉血NO含量,以及肺组织中eNOS蛋白的变化。结果表明,H14 d、H21 d及H28 d组mPAP较N组明显增加（P〈0.01）;H28 d组和H21 d组RV/（LV＋S）明显高于N组（P〈0.05）;肺动脉血中NO水平,在H14 d组、H21 d组和H28 d组较N组明显增加（P〈0.01）;H21 d组和H28 d组肺组织eNOS蛋白含量明显高于N组（P〈0.01）。结论：慢性低氧性肺动脉高压的发病与NO生物合成障碍有关。慢性缺氧时,eNOS表达水平呈上调趋势,然而与其相应的NO含量却降低,其可能的机制为eNOS/NO体系功能障碍,其中eNOS质的缺陷是内源性NO代谢障碍及NO生成不足的主要原因。     

低氧性肺动脉高压大鼠血清IGF-1的变化

目的　探讨慢性低氧大鼠血清中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)浓度、肺小动脉壁IGF 1多肽表达的变化及其与低氧性肺动脉高压 (HPH)之间的关系。方法　用放射免疫分析法检测大鼠血清中IGF 1浓度 ;用免疫组织化学染色法观察肺小动脉壁IGF 1多肽的表达 ;用图像分析技术观察肺小动脉的形态改变和IGF 1多肽的表达强度。结果　低氧性肺动脉高压大鼠管壁增厚 ,管腔狭窄 ,反映管壁增厚的两个指标MT %和MA %均显著高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;灰度扫描示低氧大鼠肺小动脉壁的阳性程度显著大于正常对照组 (P <0 0 1)。低氧大鼠血清IGF 1水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;大鼠血清IGF 1水平与平均肺动脉压 (mPAP)呈显著正相关 (r =0 745 ,P =0 0 0 2 )。结论　在低氧性肺血管重建的发生机制中 ,IGF 1不仅以自分泌和旁分泌的方式刺激血管平滑肌细胞增生肥厚 ,而且还存在内分泌机制。     

Losartan对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的影响

目的：观察Ｌｏｓａｒｔａｎ对慢性动脉高压大鼠肺动脉、颈动脉压及右心室肥厚的影响。方法：将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只随机分３组,每组８只,正常组置于常氧状态下饲养,对照组及治疗组坟间隙缺氧法缺氧,治疗组每日用管饲法喂Ｌｏｓａｒｔａｎ５ｍｇ／只,结果：氧４周后,对照组平均肺动脉压及相中心室较正常显著升高,治疗组ｍＰＡＰ及相对右心室重量较姐显著下降,而３组大鼠颈内动脉血压均无明显变化。结果：Ｌｏｓａｒｔ     

Bosentan预防大鼠低氧性肺动脉高压形成的作用

目的研究Bosentan预防低氧诱导的肺动脉高压发生的药效作用,探讨内皮素-1(ET-1)在慢性高原病发病中的作用。方法30只Wistar大鼠随机均分为常氧对照组、低氧对照组和Bosentan组,将低氧对照组和Bosentan组放入模拟海拔为5.5 km的低氧、低压环境中。常氧对照组和低氧对照组ig 0.9%生理盐水,Bosentan组ig 100 mg.ml-1Bosentan水剂,每天2次。饲养15 d后,测量大鼠平均肺动脉高压(PAP)、左右心室比重[RV/(LV S)]比值。结果Bosentan组大鼠血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct),ET-1与低氧对照组相比无差异,而PAP、RV/(LV S)均显著低于低氧对照组(P<0.01)。结论Bosentan可显著预防低氧性肺动脉压的升高,缓解低氧对心肌细胞和血管平滑肌细胞的损伤,但不能抑制红细胞的过度增生。     

中介素在低氧性肺动脉高压大鼠中的变化和意义

目的 观察比较中介素在低氧性肺动脉高压大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液含量的变化.方法 雄性Wistar大鼠被随机分为4组,对照组、低氧1周组、2周组、3周组.利用放免分析法测定大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液的含量.结果 低氧组大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中介素含量明显高于对照组.同时支气管肺泡灌洗液和血浆的变化趋势一致.结论 中介素血浆和支气管肺泡灌洗液含量增高,提示机体可能对缺氧性肺动脉高压起到一定的缓冲和保护作用.     

法舒地尔对低氧性肺动脉高压大鼠内皮素-1和一氧化氮表达的影响

[摘要]目的：探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠内皮素-1（ET-1）和一氧化氮（NO）表达的影响。方法：将24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和法舒地尔干预组各8只。对照组常氧下饲养,每天与模型组同一时间腹腔注射等量生理盐水;模型组每天低氧前腹腔注射生理盐水2 mL/kg;法舒地尔干预组每天低氧前腹腔注射法舒地尔15 mg/kg,用生理盐水稀释成2 mL/kg给药。模型组和法舒地尔干预组采用常压间断低氧法建立大鼠HPH模型,低氧浓度为10%±0.5%,每天低氧8 h,每周低氧6 d,共21 d。测定各组大鼠平均肺动脉压力（mPAP）、右心室肥厚指数（RVHI）;应用放射免疫法和硝酸还原酶法分别测定血浆ET-1和NO水平;光镜下观察大鼠肺血管形态结构。结果：模型组的mPAP、RVHI、ET-1均高于法舒地尔干预组和对照组,而NO水平低于法舒地尔干预组和对照组（P均<0.01）。模型组大鼠的mPAP、RVHI与血浆ET-1水平呈正相关,与血浆NO水平呈负相关;血浆ET-1与NO呈负相关（P均<0.01）。模型组大鼠肺小动脉管壁普遍增厚,管腔明显狭窄,法舒地尔干预组肺小动脉管壁增厚程度及管腔狭窄程度显著减轻。结论：法舒地尔能显著降低HPH大鼠血浆ET-l水平和上调NO水平,阻抑肺动脉高压的发展。     

依帕司他对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的 通过观察依帕司他（epalrestat,EPS）对野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导的肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension,PAH）大鼠肺血管重构的保护作用,探讨其作用是否与其抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）和醛糖还原酶（aldose reductase,AR）的表达有关。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组、MCT组、EPS 50 mg·kg^-1组及EPS 100 mg·kg^-1组,每组12只。MCT（60 mg·kg^-1）皮下注射诱导PAH大鼠模型。连续灌胃给药4周后,由右颈外静脉将直径为0.5 mm的Cournand心导管缓慢推进到右心室和肺动脉,用MedLab多导生理记录仪分别记录右心室收缩压（right ventricular systolic pressure,RVSP）和平均肺动脉压（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）。HE染色观察肺动脉病理学变化,Masson染色观察肺动脉胶原沉积的变化。免疫组化法检测肺动脉AR的蛋白表达。qPCR和（或）Western blot检测肺动脉增殖细胞核抗原（PCNA）、I型胶原蛋白（collagen I）、AR和TGF-β1的表达。结果 EPS连续给药4周后能明显降低PAH大鼠RVSP及mPAP,减轻肺血管重构,降低肺动脉PCNA、collagen I表达。同时,EPS还能明显抑制肺动脉AR和TGF-β1的表达。结论 EPS对MCT诱导的PAH大鼠肺血管重构具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1介导AR的表达有关。     

内源性硫化氢在大鼠肺血栓栓塞模型中的表达

目的:研究内源性硫化氢(H2S)在大鼠肺栓塞模型中的表达。方法:①实验分组:将健康Wistar大鼠32只,随机分为对照组(C组),模型组(M组)。②模型制备:采用颈静脉插管注入血栓的方法制备大鼠急性肺栓塞模型。③评价:通过对大鼠肺组织形态学,病理学观察,评价模型成功与否。④观察指标:取动脉血做血气分析,行病理分析,分光光度计法测定血浆中硫化氢含量,及肺组织中硫化氢合酶的活性。结果:肺栓塞后病理可见肺动脉血栓形成,炎性反应明显,血氧分压(PaO2)及血二氧化碳分压(PaCO2)在栓塞后lh均明显下降(P<0.01),血中H2S水平、肺组织中CSE活性在栓塞后下降(P<0.01)。结论:经过观察,采用颈静脉插管注入血栓的方法成功的制备了大鼠急性肺栓塞模型。内源性CSE/H2S体系参与了大鼠肺血栓栓塞症的病理生理过程。     

缬沙坦干预对缺氧性肺动脉高压大鼠大电导钙激活钾通道的影响

目的：观察缬沙坦对缺氧性肺动脉高压（PAH）大鼠肺动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（large-conductance calcium-activated potassiumchannel,BKCa,MaxiK）的影响。方法：选取二级健康7周龄雄性SD大鼠30只,随机分为A组：对照组,B组：PAH模型组,C组：缬沙坦干预组。测定3组大鼠肺动脉平均压（PAMP）,利用膜片钳全细胞模式记录肠系膜动脉平滑肌细胞膜电容、钾电流以及用四乙胺阻断BKCa后的电流,以计算BKCa电流值及其电流密度值,免疫组织化学染色观察BKCa蛋白的表达。结果：B组PAMP明显高于A组（P〈0.01）,而膜电容、BKCa电流和电流密度及BKCa蛋白表达平均积分吸光度（iOD）值均明显低于A组（P〈0.05）。与B组相比较,给予缬沙坦干预后,C组的PAMP显著下降（P〈0.01）,BKCa电流和电流密度均有不同程度增加（P〈0.05）,而BKCa蛋白表达iOD值则无明显变化。结论：缬沙坦可有效降低缺氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉压力,其机制可能是通过增加肺动脉平滑肌细胞BKCa的活性实现的。     

Hydrogen sulfide and the metabolic syndrome

The metabolic syndrome is a group of abnormalities including obesity, high blood pressure, hyperinsulinemia, high blood glucose levels and hyperlipidemia that together greatly increase the risk of developing cardiovascular disease and Type 2 diabetes. Hydrogen sulfide (H₂S) is a vasodilatory gasotransmitter mediator in the cardiovascular system, proposed as an endothelium-derived relaxing factor. A lack of H₂S and its synthesizing enzyme, cystathionine γ-lyase, in the vasculature causes hypertension, whereas an increase in the pancreas reduces insulin secretion. Thus, research is making inroads to determine whether H₂S is involved in the pathogenesis of the metabolic syndrome. Several laboratories are synthesizing and testing clinically used drugs that release H₂S. Some of these compounds are being tested for effectiveness in the metabolic syndrome.     

木犀草素对实验性肺纤维化大鼠组织中TGF-β1mRNA表达的影响

目的研究木犀草素对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β(TGFβ1)mRNA的表达的影响。方法大鼠气管内灌注博来霉素致大鼠肺纤维化病变,同时ig给予40mg·kg-1的木犀草素连续14d,观察肺重量指数和羟脯氨酸含量的变化;用RTPCR测定肺组织中TGFβ1mRNA表达水平。结果木犀草素可降低重量指数和羟脯氨酸含量,延缓肺纤维化进程,并抑制TGFβ1mRNA的表达。结论木犀草素抗肺纤维化作用与其抑制肺组织中TGFβ1mRNA表达有关。     

硫化氢对正常及自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞PCNA和p-ERK蛋白表达的影响

目的研究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对正常大鼠及自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cell,ASMC)增殖的影响。方法分别将正常大鼠及SHR主动脉平滑肌细胞分为实验组和对照组,实验组中分别加入浓度为(10-5~10-3)mol.L-1H2S供体的硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)或浓度为(2~10)mmol.L-1胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂的炔丙基甘氨酸(DL-propargy lglycine,PPG),对照组加入等体积的生理盐水,分别以蛋白质印迹法观察6、12、18和24h时间点的平滑肌细胞中细胞增殖核抗原(PCNA)和磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达情况。结果NaHS对正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达无影响。PPG显著促进正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。NaHS显著抑制SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。PPG显著促进SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。结论内源性H2S下调可促进正常大鼠及SHR的ASMC增殖,而外源性补充H2S可抑制SHR的ASMC异常增殖,ERK信号途径可能介导H2S抑制ASMC增殖的分子机制。     

一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉转移生长因子表达的影响

目的探讨一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中转移生长因子（TGF）表达的影响。方法将大鼠随机分为3组：常氧组（n=20）、低氧组（n=20）和低氧＋血红素加氧酶组（低氧＋HO组）（n=20）。以光学显微镜观测3组大鼠肺中型动脉及小型动脉的相对中膜厚度（RMT）。应用TGF的单克隆抗体经免疫组织化学技术对3组大鼠肺动脉TGF进行定位及半定量分析。结果低氧组大鼠中型肺动脉及小型肺动脉RMT均高于常氧组和低氧＋HO组（P〈0．01）。3组大鼠各级肺动脉内皮细胞中均有TGF的表达．低氧组高于常氧组和低氧＋HO组（P〈0．01）。中型肺动脉内皮细胞中TGF的表达与相应中型肺动脉RMT之间呈正相关（r为0．7835,P〈0．01）;小型肺动脉内皮细胞中TGF的表达与相应的小型肺动脉RMT之间呈正相关（r为0．8125,P〈0．01）。结论一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中TGF表达有抑制作用。     

硫化氢对自发性高血压大鼠胸主动脉舒张反应的影响

目的 探讨内源性及外源性硫化氢(H_2S)对自发性高血压大鼠(SHR)离体胸主动脉舒张反应的影响。方法 4wb WKY大鼠24只,随机分为WKY对照组(n=8)、WKY+H_2S组(n=8)及WKY+PPG组(n=8)。同样周龄SHR大鼠24只,随机分为高血压对照组(n=8)、高血压+H_2S组(n=8)及高血压+PPG组(n=8),高血压对照组及WKY对照组大鼠每日腹腔注射生理盐水,WKY+H_2S组及高血压+H_2S组每日腹腔注射硫氢化钠(NaHS),WKY+PPG组及高血压+PPG组每日腹腔注射PPG,5 wk后处死,取胸主动脉,观察其对乙酰胆碱(ACh)、硝普钠(SNP)及NaHS的舒张反应。结果 WKY+PPG组及高血压对照组、高血压+PPG组对ACh及SNP的舒张率较WKY组降低(P<0.05),而高血压+H_2S组较高血压对照组升高(P<0.05),与WKY对照组相似;各组大鼠血管环对SNP的舒 张反应均高于ACh(P<0.05);WKY对照组及高血压对照组对不同浓度的NaHS呈现剂量依赖性舒张反应,对于同样浓度的NaHS,高血压对照组较WKY对照组的舒张率高。结论 H_2S可以独立及与一氧化氮协同发挥舒张血管效应,在自发性高血压血管舒张功能异常的形成机制中占据重要地位。