小盾纤恙螨自然双重感染汉坦病毒和恙虫病东方体及叮刺传播的研究

目的 了解汉坦病毒(HV)和恙虫病东方体(OT)可否在小盾纤恙螨体内双重自然感染及通过叮刺传播的状况.方法 在肾综合征出血热(HFRS)和恙虫病混合流行区,将采集的3459只鼠体恙螨和用小黑板诱集的3265只游离恙螨,按1、5、10只螨数分组,每组叮刺6只小白鼠.15 d后取小白鼠肺和脾脏制成悬液,经脑内途径接种小白鼠传6代,每代均采用间接免疫荧光法(IFAT)和Giemsa法检测HV和OT病原体;取不同恙螨数的螨制成无菌悬液接种Vero-E6细胞传代,分离检测HV和OT病原体.采用PCR法检测HV-RNA和OT-DNA.结果 经传代后HV和OT双重感染鼠的检测情况为,HV单纯阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只,OT单纯阳性鼠体螨10只组在第6代检测到1只,HV、OT双重阳性鼠体螨1只组在第5、6代均检测到1只,HV、OT双重阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只.1、5、10只游离螨组叮刺小白鼠后,在第6代各检测到1只.Veto-E6细胞在第4代时,HV、OT双重阳性的鼠体螨5、10只螨组.各有1份检测到HV和OT双重阳性的感染细胞.传至第6代时,HV、OT双重阳性的鼠体螨1只螨组和游离螨1、5、10只螨组均检测到HV和OT双重阳性的感染细胞.经PCR检测到HV-RNA、OT-DNA.结论 小盾纤恙螨体内可自然双重感染HV和OT病原体,并可经叮刺传播.     

小盾纤恙螨在肾综合征出血热传播媒介中作用的研究

小盾纤恙螨被国内外学者认为是野鼠型肾综合征出血热(HFRS)的可疑传播媒介,陕西省又是野鼠型HFRS疫源地之一,为此我们连续多年开展了小盾纤恙螨在HFRS传播中作用的专题研究[1-4].     

恙螨与肾综合征出血热传病关系的调查研究

目的 :探索恙螨与HFRS的传病关系。方法 :观察鼠窝中恙螨的分布及季节消长、在鼠和人体的吸血能力 ,对HFRSV进行PCR分析 ,感染HFRS病毒情况。结果 :恙螨是黑线姬鼠(HFRS的主要宿主 )鼠窝中的优势螨种 ,其季节消长与发病相关 ,可通过鼠和人的正常皮肤叮刺吸血 ,有HFRS的自然感染 ,能通过叮刺在鼠间传播和在螨体内经卵传递HFRSV ,且与鼠、螨和人所分离HFRSV的抗原性一致。结论 :该螨可作为野鼠型HFRS鼠间的传播媒介 ,并可能兼有储存宿主作用     

小盾纤恙螨自然感染肾综合征出血热病毒和恙虫病立克次体的调查

[目的 ]为有效控制肾综合征出血热 (HFRS)和恙虫病提供科学依据。 [方法 ]采用布笼法捕活鼠 ,收集鼠体外恙螨 ,分别用Vero E6细胞和小鼠接种分离HFRS病毒 (HFRSV)与恙虫病立克次体 (R t)。 [结果 ] 1995年 5月至 1996年 4月 ,捕活鼠 42 1只 ,鼠体外收集恙螨 1176 2只。其中小盾纤恙螨出现在 9～ 12月 ,高峰为 11月 ,是当地 10～ 11月鼠体外绝对优势螨种。分别从小盾纤恙螨分离到 5株HFRSV和 10株R t。 [结论 ]小盾纤恙螨分别存在HFRSV和R t的自然感染 ,具备HFRS和恙虫病传播媒介的先决条件。     

小盾纤恙螨自然感染肾综合征出血热病毒和恙虫病立克次体的调查

目的：为有效控制肾综合征出血热（HFRS）和恙虫病提供科学依据。方法：采用龙笼法捕活鼠，收集鼠体外恙螨，分别用Vero-E6细胞和小鼠接种分离HFRS病毒（HFRSV）与恙虫病立克次体（R.t).结果：1995年5月至1996年4月，捕活鼠421只，鼠体外收集恙螨11762只，其中小盾纤恙螨出现在9－12月，高峰为11月，是当地10－11月鼠体外绝对优势螨种，分别从小盾纤恙螨分离到5株HFRSV和10株R.t.结论：小盾纤恙螨分别存在HFRSV和R.t的自然感染，具备HFRS和恙虫病传染媒介的先决条件。     

江苏省东海县2010-2011年发热伴血小板减少综合征媒介及宿主动物监测研究

目的 调查了解发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)的宿主动物和传染源在动物及媒介中的分布情况,为该传染病的防治工作提供科学依据.方法 采用鼠笼法在发病区野外及居民区捕鼠,计算捕获率并进行鼠种分类,取其心、肝、脾、肺、肾、脑脏器;无菌采集当地的牛、羊、猪、鸡、犬等动物血,并采集螨、蜱、蚊等节肢动物;采用荧光定量RT-PCR检测鼠体脏器及螨、蜱、蚊体内SFTSV核酸;采用双抗原夹心ELISA法检测动物血清中SFTSV总抗体.结果 东海县鼠类主要有黑线姬鼠、大仓鼠、小仓鼠、臭鼩鼱、褐家鼠、小家鼠6种;野鼠捕获率较高为13.47％,主要鼠种为黑线姬鼠;家鼠捕获率相对较低为6.98％,主要鼠种为小家鼠、褐家鼠;各种鼠均有不同程度感染SFTSV,野鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑脏器感染SFTSV构成比肝脏最高为26.32％(5/19)＞心、肺的21.05％(4/19)＞肾、脾、脑的10.53％(2/19);室内鼠仅有心、脑脏器检出SFTSV核酸阳性,且为单一脏器感染;牛、鸡SFTSV的总感染率分别为4.55％和1.54％;节肢动物中的小盾纤恙螨及毒棘厉螨也携带SFTSV,而蜱和蚊未检出SFTSV核酸.结论 鼠类、牛、鸡及节肢动物中的小盾纤恙螨及毒棘厉螨可能是该地SFTSV的宿主动物或传播媒介.     

螨媒传播汉坦病毒的实验研究

目的 研究革螨、恙螨在肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome，HPRS)传播中的媒介作用。方法 采集自然界鼠窝革螨及饲养繁殖的子代革螨和鼠体恙螨幼虫以及从小黑板采集游离恙螨幼虫及饲养孵化的若虫；进行螨细胞培养分别观察螨细胞传播汉坦病毒(Hataan virus，HV)的效能。结果 发现螨细胞培养第15d和第20d可从螨细胞内检测到HV；其中HV检出数和荧光强度在革螨子4代、子3代和恙螨若虫均多于和强于子1代、子2代及恙螨幼虫。经原位RT-PCR检测，HV-RNA在革螨子3代、子4代和恙螨若虫细胞内的阳性颗粒较革螨子1代、2代和恙螨幼虫多且密集。结论 革螨、恙螨对HV的传播有一定的媒介作用，在维持HV的自然循环中起重要作用。     

小盾纤恙螨经卵传递病原体研究

目的　探索快速取得大量小盾纤恙螨未食子代幼虫的方法 ,以适应研究恙螨经卵传递病原体的需要。方法　将小黑板放置在肾综合征出血热 (HFRS)及恙虫病疫区草地上 ,10min后取回计算螨数并鉴定螨种。该法可收集到大量小盾纤恙螨未食子代幼虫。 2 0～ 3 0只幼虫为 1批叮刺 1只小白鼠乳鼠以分离汉坦病毒 (HV)或叮刺 1只小白鼠以分离恙虫病东方体 (Ot)。结果　 2 4批恙螨幼虫叮刺乳鼠 ,分离到 5株HV ;6只小白鼠被恙螨幼虫叮刺 ,分离到 2株Ot。试验中所用幼虫未曾叮刺过 ,但鼠被这些幼虫叮刺后能感染上HV和Ot ,表明这些螨所带病原体系由母代螨经卵传递而来。结论　小黑板可采集到疫区草地上大量小盾纤恙螨未食幼虫 ,为研究恙螨经卵传递病原体提供了一种快速、简便、经济的方法。研究结果证明小盾纤恙螨可经卵传递HV和Ot,可作为HFRS和恙虫病的传播媒介。     

从鼠、螨(革螨、恙螨)和人中分离HV的基因分型研究

目的 了解鼠、螨（革螨、恙螨）、人间HV基因型是否一致。方法 对从同一疫区鼠、螨、人中分离的HV进行毒力测定;单克隆抗体检测和多聚酶链反应（PCR）进行基因分型。结果 从同一疫区鼠、螨、人中所分离的HV毒力和单克隆抗体检测均有I型（HV型）反应特征。进一步用PCR扩增鉴定,表明从鼠、螨、人中所分离的HV其基因型一致。结论 从同一疫区鼠、螨（革螨、恙螨）、人中所分离的HV其基因型一致,并构成三相互传播关系,对维持HFRS疫源地和HV的衍生起了重要作用。     

从革螨和恙螨中检测到发热伴血小板减少综合征病毒核酸

目的调查革螨、恙螨携带发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)情况。方法收集黑线姬鼠和山羊体表革螨和恙螨,按属种分类,用荧光定量PCR和常规RTPCR法检测革螨和恙螨体内是否携带SFTSV基因组核酸。结果黑线姬鼠体表收集的5组小盾纤恙螨SFTSV基因组核酸均为阳性,黑线姬鼠体表收集的3组毒棘厉螨和山羊体表收集的1组毒棘厉螨SFTSV基因组核酸均为阳性。基因测序结果显示,与SFTSVJS4株NP基因比对,其同源性在99%～100%。结论小盾纤恙螨和毒棘厉螨均可携带SFTSV,具有传播SFTS的可能。     

辽宁省东部山区姬鼠型出血热疫源地宿主动物和恙螨调查研究

为查清我省东部山区清原县肾综合征出血热（HFRS）自然疫源地宿主动物和恙螨分布情况，于1986年3月至1987年2月进行了现场调查。结果：（1）捕鼠199只，隶属7属8种，其中黑线姬鼠占54．27％，为优势种，而且带螨率较高（75．0％），鼠密度在6、8和10～11月先后出现3个高峰，以8月份最高；（2）收集恙螨1791只，其中日本新恙螨占50．98％，为优势种，季节高峰在10月。结论：日本新恙螨在该疫源地HFRS传播中可能起重要作用，这为进一步开展病毒学研究提供了线索。     

恙螨体内出血热病毒检测增殖及其定位

目的 用分子生物学方法研究小盾纤恙螨的媒介意义。方法 聚合酶锭反应和原位分子杂交法。结果 从恙螨体内检测到肾综合征出血热病毒ＲＮＡ;取恙螨幼虫、若虫定期做肾综合征出血热病毒ＴＣＩＤ５０／ｍｌ滴定,证明恙螨体内肾综合征了血热病毒可传播并有增殖现象;用原位分子杂交技术在恙螨的卵巢细胞、支肠细胞等组织 检测到肾综合征出血热病毒ＲＮＡ。结论 研究结果为恙螨的媒介意义提供了具有分子水平的直接证据。对肾综合征     

革螨、恙螨与HFRS传病关系的调查研究

为探索革螨,恙螨与ＨＦＲＳ的传病关系,我所对革螨、恙螨与ＨＦＲＳ的关系进行了一系列调查研究。结果证明,革螨、恙螨是黑线姬鼠（ＨＦＲＳ的主要宿上）鼠窝中的优势螨种,ＨＦＲＳＶ的自然感染,能通过叮刺在鼠间传播和在螨体内经卵巢表明这两种螨可作为野鼠型ＨＦＲＳ鼠间的传播媒介,并可能兼有储存宿主的作用。     

云南省16个县(市)黄胸鼠体表恙螨种类调查

目的了解云南省黄胸鼠（Rattus flavipectus）体表恙螨的寄生、种类组成、优势种及其空间分布型.方法选取云南省16个县（市）作为调查点,在现场用鼠笼加食饵诱捕黄胸鼠,收集耳壳及耳窝全部恙螨,用Hoyer＇s液封片后在显微镜下分类、鉴定.恙螨种群的空间分布格局用分布型指数中的聚块指数（m＊/m）测定.结果在所调查的16个县（市）中,从13个县（市）捕获黄胸鼠725只,共采集恙螨2 710只,经鉴定隶属3亚科10属42种.印度囊棒恙螨（Ascoschoengastia indica）、微板无前恙螨（Walchia micropelta）、李氏囊棒恙螨（A.leechi）、蒙大微恙螨（Microtrombicula munda）为优势螨种,其带螨率和螨指数较高,依次分别为6.8%、5.5%、3.9%、4.3%和1.65、0.64、0 43、0 42.结论黄胸鼠体表恙螨种类复杂,数量丰富,呈聚集型分布.     

云南省2001-2015年东亚屋顶鼠体表螨类生态学分析

  目的  探讨东亚屋顶鼠体表螨类感染状况、分布规律以及革螨和恙螨两大类群之间的相互关系。  方法  采用描述流行病学方法对云南省2001-2015年19个县(市)积累调查资料进行描述分析。  结果  从19个县(市)所捕获的308只东亚屋顶鼠体表采集到螨类5 252只,鉴定为6科3亚科29属151种,恙螨个体数(3 836只)和种类数(117种)明显多于革螨个体数(1 416只)和种类数(34种)。总感染率P_M=85.06%,总平均多度M_A=17.05螨/鼠,总感染度M_I=20.05螨/鼠。纳氏厉螨(C_r=11.21%)、小板纤恙螨(C_r=11.88%)和攸氏无前恙螨(C_r=10.72%)为优势螨种,其分布型指标(C_A、I、K)大于聚集分布型判定界值,呈聚集分布。雌鼠总感染率(P_M=45.45%)高于雄鼠(P_M=39.61%; χ2=7.506, P=0.008)。成年鼠总感染率(P_M=72.40%)和总平均多度(M_A=19.08螨/鼠)均高于未成年鼠(P_M=12.66%; M_A=8.33螨/鼠; P < 0.001)。山区景观螨类总感染率(P_M=74.35%)和总平均多度(M_A=15.38螨/鼠)高于坝区(P_M=10.71%; M_A=1.68螨/鼠; P < 0.001)。革螨与恙螨两大螨类之间呈现一定的负协调关系(V=0.44, P < 0.001)。根据Chao1公式,估测出螨类总物种数177种,与实际所鉴定出的151种相差26种。  结论  东亚屋顶鼠体表螨类种类丰富,感染普遍,3种优势螨种均呈聚集分布型。革螨和恙螨之间呈负协调关系。山区雌性成年鼠感染较高。     

驻山东省部队营区恙螨宿主及体表恙螨种类调查

目的 摸清驻山东省部队营区及其周围恙螨宿主及其体表恙螨的种类、优势种群,为预防恙虫病提供科学依据.方法 选取驻山东省部队营区及周围作为调查点,收集啮齿动物耳壳和耳窝全部恙螨,用Hoyer＆#39;s液封片后在显微镜下观察并进行分类鉴定.结果 于1990-2010年在驻山东省17个地（市）区的部队营区共捕获啮齿动物937只,经鉴定分为2目,其中啮齿目有3科5属9种,食虫目仅1种;褐家鼠（55.60％）为优势种,黑线姬鼠的带恙螨指数（15.90）最高,带螨虫种类（9种）最多.收集并检出恙螨8917只,经鉴定隶属7属16种,脆弱瓦甲恙螨分布于所调查各营区且为优势螨种（37.24％）,纤恙螨属共检测出7种恙螨,占全部恙螨种类的43.75％.结论 驻山东省部队营区及其周围恙螨宿主种类较多,做好灭鼠工作是预防恙虫病的重要措施.