血水草中血根碱和白屈菜红碱的分离制备研究

目的:从血水草中分离血根碱和白屈菜红碱。方法:用干燥的血水草粉末选用浸泡、超声、微波或渗漉提取,用大孔吸附树脂分离。比较不同提取方法,不同萃取剂、洗脱剂等因素对提取的影响。结果:浸渍提取和微波提取效率较高,但是渗漉提取所得的提取物中生物碱的含量较高,血根碱含量为:80.10±3.68 mg/g,白屈菜红碱含量为:44.31±0.28 mg/g。盐酸提取率明显高于其它酸。依次用20%、60%、90%的甲醇水溶液、100%的乙醇溶液洗脱分离效果最好。结论:渗漉提取是分离血水草中血根碱和白屈菜红碱的一种有效方法。     

血消化液琼脂淋球菌选择培养基的实验研究

为了经济、简便、准确地分离淋球菌 ,研制了一种血消化液选择培养基。方法 :用该培养基、普通巧克力培养基和英国Oxoid公司生产的T -M三种培养基同时分离培养 6 6份经涂片初步诊断为急性淋病的病人标本。结果 :血消化液和T -M二种选择培养基分离淋球菌阳性率均为 95 .6 % ,符合率为 10 0 % ,明显高于普通巧克力培养基 (6 3.6 % ) ,差异有显著性 (χ2 =19.0 4 ,P <0 .0 1)。结论 :血消化液选择培养基分离淋球菌具有经济、简便、分离率高等优点 ,是一种较理想的培养基。     

密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞方法的优化

目的:对密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞的方法进行优化,以提高该方法分离骨髓单个核细胞的收率。方法:骨髓血40份,100 ml/份,分为常规组和优化组,每组20份。常规组骨髓与NS 1∶1混合稀释后,直接通过Ficoll分离液分离单个核细胞;优化组通过先将骨髓血洗涤一次,加入等量NS充分吹打混匀,200目筛网过滤,保持细胞悬液和Ficoll分离液1∶1的体积比进行分离操作。对每份分离得到的骨髓单个核细胞通过白细胞稀释液稀释后计数,计算单个核细胞的回收率。结果:常规组,分离后的白膜层有12份界面不清晰,同时均混有少量的红细胞。优化组,分离后的白膜层有3份界面不清晰,仅有极少的红细胞混入。两种方法收集的骨髓单个核细胞数比较,优化组多于常规组(P﹤0.01)。结论:通过对密度梯度离心法的步骤进行优化,可提高骨髓单个核细胞的分离效果。     

血链球菌血链素的分离纯化及其化学组成的测定

目的:分离纯化血链球菌血链素,并对其组成成分进行检测。方法:通过羟基磷灰石(HA)柱层析、SephadexG-150凝胶柱层析、中空纤维柱超滤脱盐、浓缩,分离并纯化血链素,SDS-PAGE检测其纯度及亚基分子量并检测其分子量,同时以紫外线吸收法及苯酚-硫酸法检测血链素蛋白及糖含量。结果:血链素分子量为180kDa,亚基分子量为110kDa和70kDa,其中蛋白含量为87.51%,糖含量为12.49%。结论:纯化的血链素是一种由两个亚基组成的糖蛋白。     

水压分离在腹膜外剖宫产术中的应用

<正> 腹膜外剖宫产术已有百余年的历史。该手术关键的一步是分离膀胱较难,容易损伤膀胱。笔者采用了“水压分离”的方法行膀胱侧入法进行手术操作。此法克服了分离膀胱难的缺点,且具有对膀胱刺激小、渗血少、损伤小、节约时间、组织层次显露清楚等优点。现将具体操作方法及体会介绍如下。     

双管路血泵进行膜式-重血浆置换的治疗体会

目的探讨采用双管路血泵进行一重血浆置换(PE)治疗的有效性和安全性.方法采用一只血泵进行血液体外循环,另一只Nipro MP-300血泵同时安装两副血路管,其中一副连接到血浆分离器的分浆出口,控制血浆的分离速度,另一副连接到血液回路的静脉壶与置换液袋,控制血浆的补充速度,两副血路管由同一台血泵同步控制,进行1～2小时PE治疗.结果8例患者进行PE治疗22例次,治愈6例,死亡2例(死于原发病);双管路血泵进行PE治疗分离血浆的速度和补充血浆的速度相差极少,低血压的发生率低;可以同步进行较快速度的分离血浆和补充血浆,治疗时间缩短,抗凝剂的用量减少.结论采用双管路血泵进行PE治疗不依赖价格昂贵全自动血浆置换机,设备价格便宜,操作简单,治疗的有效性和安全性较高.     

浅谈妇产科术后并发腹部血肿患者的临床治疗与预防

妇产科手术操作中常遇到炎症粘连松解后分离的创面缓慢渗血,或因止血不彻底造成术后血肿形成.我院2000年1月至2007年10月出现多例患者在妇产科手术后并发腹部血肿.现将我院的诊断治疗情况和结果报道如下:     

吸刮式"冷分离"法在腹腔镜胆囊切除术中的应用体会

目的 探讨吸刮式“冷分离”法在腹腔镜胆囊切除术（laparoscopic cholecystectomy,M）中的操作方法及应用体会。方法 传统LC手术中基本采用易造成热损伤的电凝钩行“热分离法”,或采用易造成局部渗血较多、视野不清的分离钳行“冷分离法”。本组采用吸引冲吸器进行“吸刮式的冷分离法”进行操作和解剖Calot三角,尤其在渗血较多或视野不清晰时,既能最大程度地避免热损伤的发生,又可使术野基本看不到渗血。结果 在52例不同类型的LC术中（包括择期的胆囊结石、胆囊息肉手术及急性炎症期水肿胆囊及局部坏疽性胆囊手术）,应用此方法进行解剖操作,取得了良好效果,全部治愈。结论 吸刮式冷分离法具有操作简便快捷,使所需分离管道最大程度地做到“骨骼化”,避免了热损伤及其他损伤的发生;对于急性炎症水肿期胆囊的术中分离更具术野清晰、简便实用及安全可靠等优点,值得推广。     

获取母血中纯化胎儿有核红细胞行产前基因分析

目的探讨获取母血中纯化胎儿细胞的有效方法.方法对60名孕龄7～40周、年龄21～30岁的孕妇外周血进行不连续密度梯度离心,将分离后的细胞进行制片,显微镜下行显微操作分离胎儿有核红细胞,进行Y染色体特异性DYZ1 基因的聚合酶链反应(PCR).结果 (1)早孕期母血中胎儿NRBC检出率为20%,中孕期母血中胎儿NRBC检出率为71.4%,晚孕期母血中胎儿NRBC检出率为6.65%,三者之间有显著性差异(P<0.05);(2)用显微操作技术获得的胎儿细胞数量已满足PCR扩增所需的模板量,对胎儿性别进行预测,男胎符合率为11/13(84.6%),性别符合率为26/28(92.9%).结论不连续密度梯度离心合并显微操作技术对于无创性早期产前基因诊断意义重大.     

孕妇外周血胎儿细胞在无创性产前诊断中的应用

传统的产前诊断为了获取胎儿遗传信息 ,常需羊膜腔穿刺、绒毛活检、胎儿脐静脉穿刺及胎儿组织活检等 ,这些侵入性操作对胎儿及孕妇均有一定的创伤。随着遗传医学、分子生物学技术的发展 ,产前诊断在无创伤性方面得到了迅猛发展 ,近年来研究的焦点集中在富集分离母血中胎儿细胞上。本文就此研究进展作一综述。1　适用于产前诊断的胎儿细胞　　随着胎儿细胞分离技术的日趋成熟以及聚合酶链反应 ( PCR)技术的发展 ,近年来大量的研究证实了母血中确实存在胎儿细胞。如马旭[1] 对 1 1 7例孕妇血中胎儿细胞分别进行了免疫学鉴定、多参数流式细胞…     

双管路血泵进行膜式一重血浆置换的治疗体会

目的探讨采用双管路血泵进行一重血浆置换(PE)治疗的有效性和安全性。方法采用一只血泵进行血液体外循环，另一只Nipro MP-300血泵同时安装两副血路管，其中一副连接到血浆分离器的分浆出口，控制血浆的分离速度，另一副连接到血液回路的静脉壶与置换液袋，控制血浆的补充速度，两副血路管由同一台血泵同步控制，进行1～2小时PE治疗。结果8例患者进行PE治疗22例次，治愈6例，死亡2例(死于原发病)；双管路血泵进行PE治疗分离血浆的速度和补充血浆的速度相差极少，低血压的发生率低；可以同步进行较快速度的分离血浆和补充血浆，治疗时间缩短，抗凝剂的用量减少。结论采用双管路血泵进行PE治疗不依赖价格昂贵全自动血浆置换机，设备价格便宜，操作简单，治疗的有效性和安全性较高。     

微量血免疫荧光抗体试验对出血热诊断的研究

我们从158例流行性出血热患者的毛细血管采微量血,制作滤纸血片,做出血热间接免疫荧光抗体试验(IFA),获得理想结果。现总结介绍于下: 材料与方法一、标本来源:系济宁市传染病医院、金乡县医院临床诊断为出血热的住院患者,在毛细血管采微量血制作滤纸血片的同时,采集静脉血分离血清,以做出血热IFA定性及定量对比。     

血培养病原菌的分布以及耐药性分析

目的 探究血培养病原菌的分布以及耐药性。 方法 选取我院临床血培养合格标本进行血培养及药敏鉴定,并分析其细菌菌谱及耐药性。 结果 分离率前三位的病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌,其分离率分别为37.6%、18.8%、11.2%;葡萄球菌属病原菌对青霉素耐药性较高,凝固酶阴性葡萄球菌对复方新诺明及苯唑西林耐药性高于金黄色葡萄球菌,后者对利福平耐药性高;大肠埃希菌对亚胺培南等抗生素耐药性较低。 结论 血培养病原菌种类复杂,应重点关注感染情况,规范诊疗操作,避免感染发生,保证疗效。     

逆行分离颞肌在颅骨修补术中的应用

目的:探讨逆行分离颞肌在颅骨修补术的应用。方法:对30例经逆行分离颞肌在颅骨修补术中防止颞肌过薄,切除肌纤维过多,保护颞深动脉及面神经颞支。在颞骨骨膜下,减张缝合的硬脑膜上逆行分离颞肌,保持颞肌适当张力等方法保护颞肌。结果:患者无颞肌萎缩、颞前区塌陷症状,双侧颞肌对称,咬合功能正常。结论:颞肌萎缩原因与颞肌肌纤维损伤、颞肌血供障碍、支配颞肌运动的神经损伤以及颞肌复位时没有维持适度的肌张力有关,针对以上原因在术中进行适当操作,可完全避免术后颞肌萎缩的发生。     

用磁捕法快速分离HCV—mRNA

目的；寻找一种操作简便，快速、敏感性高，重复性好且特异性强的RNA分离纯化方法，方法：磁捕法是用亲和素包被的珠交联带有生物素标记的丙型肝炎病毒（HCV）寡核苷酸探针，与血清HCV－mRNA（以异硫氰酸胍作裂解液）特异性结合，经洗涤分离纯化HCV－mRNA模板，作逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR），用于检测HCV患者血清，并用蛋白酶K消化法作对照。结果：磁捕法检测抗－HCV阳性肝病患者血清50例，HCV－RNA阳性34例（68％），对34例阳性标本，用蛋白酶K消化法提取HCV－mRNA检测HCV，结果HCVRNA阳性仅28例。结论：磁捕法分离HCV－mRNA具有操作简便，快速、重复性好等优点。     

BacT/Alert240全自动血培养系统血培养6950例结果分析

目的:评价全自动血培养系统(BacT/Alert240)的临床应用情况。方法:回顾性分析了用BacT/Alert240全自动血培养系统检测6950份血标本,对检出阳性的时间、细菌种类和阳性率进行了评估分析。结果:6950份血标本中分离出28属,56种,共1098株病原微生物,阳性率为15.8%,其中革兰阳性细菌占65.8%,革兰阴性细菌占27.7%,真菌占6.5%。最快阳性检出时间为2h,24h内检出的阳性数占63.2%,48h检出的阳性数占84.7%,72h检出的阳性数占95.8%。假阳性率为1.1%,假阴性率为0.2%。结论:应用BacT/Alert240全自动血培养系统提高了血培养的阳性率,缩短了阳性检出时间,检出细菌种类多,尤其是营养条件高的苛养菌阳性率增加,而且操作简便,结果快速、准确。     

获取母血中纯化胎儿有核红细胞行产前基因分析

目的　探讨获取母血中纯化胎儿细胞的有效方法。方法　对 6 0名孕龄 7～ 40周、年龄 2 1～ 30岁的孕妇外周血进行不连续密度梯度离心 ,将分离后的细胞进行制片 ,显微镜下行显微操作分离胎儿有核红细胞 ,进行 Y染色体特异性DYZ1基因的聚合酶链反应 (PCR)。结果　 (1)早孕期母血中胎儿 NRBC检出率为 2 0 % ,中孕期母血中胎儿 NRBC检出率为 71.4% ,晚孕期母血中胎儿 NRBC检出率为 6 .6 5 % ,三者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;(2 )用显微操作技术获得的胎儿细胞数量已满足 PCR扩增所需的模板量 ,对胎儿性别进行预测 ,男胎符合率为 11/ 13(84.6 % ) ,性别符合率为 2 6 / 2 8(92 .9% )。结论　不连续密度梯度离心合并显微操作技术对于无创性早期产前基因诊断意义重大。     

人绒毛膜促性腺激素血尿联合检测的意义及注意事项

目的:本文旨在研究血尿标本人绒毛膜促性腺激素(hCG)联合检测对妇科相关疾病的诊断的意义,以及尿h CG试验中将标本2倍稀释后检测的意义的研究。方法:我实验室收集了206份患者,联合检测血尿hCG测定,其中血hCG按需要做动态每3日监测,尿hCG做原浓度和2倍稀释浓度的联合检测,以观察结果。结果:血hCG应每3天监测一次,尿hCG操作时应原倍和2倍稀释同时操作,这种操作的结果更好的为临床诊疗做出依据。结论:血hCG动态指标的监测对正常妊娠与异位妊娠及流产及某些滋养细胞疾病的诊断有诊断意义。尿hCG操作时同时做原倍和2倍稀释样本意义更大。     

改良血琼脂的评价与应用

目的 :评价改进配方后的血琼脂平皿细菌分离效果 ,将之应用于临床标本的检测 ,提高苛养菌的检出 ,借以提高总体阳性率。方法 :对 2 9株已知分别来自不同科属的细菌进行GI值的测定和比较 ;采用羊血琼脂和改良血琼脂对2 0 0 0份临床标本 (大便标本除外 )进行测试 ,统计和比较苛养菌的分离率差异及细菌在这两种培养基上的菌落特征一致率。结果 :2 9株已知菌在改良血琼脂培养基上的GI值明显高于传统羊血琼脂培养基 (t =6.72 ,P <0 .0 0 1)。对 2 0 0 0份标本苛养菌的分离率 ,改良血琼脂明显高于羊血琼脂 ( χ2 =394,P <0 .0 5 ) ;细菌菌落特征一致率 96 7%。结论 :改良血琼脂培养基的分离率高且不改变菌落特征。使用该培养基可有效提高分离率 ,大大减少苛养菌的漏检     

联苯胺染色联合显微操作法获取孕妇外周血中有核红细胞

目的:建立一种简单、快速、经济的孕妇外周血中有核红细胞(Nucleated red blood cell,NRBC)的识别和获取方法,为无创性产前基因诊断创造条件.方法:单密度梯度离心法富集,联苯胺染色识别母血中NRBC,显微操作获取.结果:28例样本中每例发现NRBC 4～13个/5ml,共获298个.结论:联苯胺染色后母血中NRBC易于识别,熟练的显微操作能迅速获取单个NRBC,为应用单个胎儿NRBC进行产前基因诊断打下前期基础.