环磷酰胺注射剂在静脉输液中稳定性观察

目的:分析环磷酰胺注射剂在静脉输液中的稳定性。方法:临床常用剂量的注射用环磷酰胺与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液配伍,高效液相色谱法测定环磷酰胺的含量,观察配伍液外观、pH。结果:注射用环磷酰胺与与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液配伍0~6小时内外观、含量均无明显改变。结论:注射用环磷酰胺室温下稳定性良好。     

清开灵与地塞米松磷酸钠注射液的配伍稳定性考察

目的 考察清开灵注射液、清开灵合地塞米松磷酸钠注射液在0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液中配伍的稳定性.方法 观察清开灵注射液、清开灵合地塞米松磷酸钠注射液溶于0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液配伍后于室温放置8 h内的外观、pH及不溶性微粒的变化.结果 地塞米松磷酸钠不影响清开灵的稳定性,与4种溶液配伍后的pH值均在6.4～7.0,配伍液外观无明显变化,按<中国药典>的要求检测不溶性微粒的限值,均符合规定.结论 清开灵注射液、清开灵合地塞米松磷酸钠注射液适以0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液作溶媒配伍于8 h内使用.     

中药注射剂灯盏花素与几种常用溶媒配伍后稳定性考察

目的：探讨中药注射剂灯盏花素与几种常用溶媒配伍的稳定性,进一步为临床用药的安全性提供试验依据。方法：分析中药注射剂灯盏花素与各溶媒（5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液、果糖注射液）配伍后不同时间点配伍配伍溶液外观、pH值、不溶性微粒直径及其吸收度的变化。结果：0.9%氯化钠注射液在各个时间点的pH值均处于较高水平,且随时间推移,各时间点pH值变化较为平稳;果糖注射液从0 h的3.96,持续上升至8 h的4.28;其他配伍溶液pH值也呈逐渐下降趋势,但中间略有反复;0h所有配伍溶液均无变化,而1 h后果糖注射液呈现极淡微黄色,虽无气泡沉淀生成,但能见极细小微粒,并于2h后溶液呈乳黄色,出现颗粒沉淀,4 h后由极淡乳黄色变化为乳白色,且十分浑浊,乳黄色颗粒沉淀物增多,沉积于瓶底;8 h后有大量乳黄色颗粒状沉淀物在瓶底沉淀;10%葡萄糖注射液从0h一直呈淡黄色,无颗粒,但8 h时开始出现轻微浑浊;试验期间,5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液3种配伍溶液在整个过程中液体澄明,均呈极淡微黄色,且无沉淀、气泡生成;在1、2...     

洋葱中蒜氨酸酶的提取分离及酶活力测定

目的优选洋葱中蒜氨酸酶的提取工艺,并测定酶活力。方法首先建立了三波长分光光度法测定蒜氨酸酶活力,然后以新疆洋葱为原料,采用硫酸铵盐析法、PEG8000沉淀法和PEG6000沉淀法分别对蒜氨酸酶进行提取分离,同时还考察了蒜氨酸酶底物-蒜氨酸的提取方法。结果 三波长分光光度法的检测波长为λ1=426 nm、λ2=446 nm、λ3=506nm;回归方程ΔA=0.912 63C+0.006 98,相关系数r=0.999 8;方法回收率为99.2%～108.4%,RSD为2.41%。硫酸铵盐析法、PEG8000沉淀法和PEG6000沉淀法沉淀蒜氨酸酶的最佳饱和度分别是45%,20%,20%;最佳料液比1∶1,最佳打浆时间2 min,而蒜氨酸酶的最佳提取方法是20%PEG8000沉淀法;底物蒜氨酸的最佳提取方法是微波灭酶法。结论 研究结果为今后蒜氨酸酶提取工艺的进一步优化提供了指导。     

甘草酸二铵磷脂复合物注射液与4种常用输液配伍的稳定性考察

目的：在25℃、4℃条件下考察甘草酸二铵磷脂复合物注射液与4种常用输液配伍的稳定性。方法：采用高效液相色谱法测定甘草酸二铵磷脂复合物注射液在4种常用输液中24h内的含量变化,同时观察外观,测定pH变化。结果：甘草酸二铵磷脂复合物注射液与5%葡萄糖氯化钠注射液配伍中出现浑浊,与5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍中,外观、pH值、含量无显著变化。结论：试验结果表明甘草酸二铵磷脂复合物注射液不宜与5%葡萄糖氯化钠注射液配伍使用,与其他3种常用输液配伍稳定。     

痰热清注射液的稳定性研究及其与氨基糖苷类药物的配伍观察

目的:考察痰热清注射液的稳定性及其与氨基糖苷类的配伍。方法:利用光阻法测定痰热清注射液在5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液中的不溶性微粒。采用高效液相色谱法测定痰热清注射液分别与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍放置8 h内,配伍液中黄芩苷含量的变化,并比较配伍前、后pH的变化。模拟临床条件观察庆大霉素、异帕米星、依替米星与痰热清配伍后的情况。结果:痰热清注射液与上述5种输液配伍后,微粒数均有所增加。其中与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后pH和黄芩苷含量无显著性变化。痰热清注射液与氨基糖苷类配伍后均有可见物生成。结论:痰热清注射液在临床输液中应注意不溶性微粒。痰热清与氨基糖苷类存在配伍禁忌。     

聚丙烯输液瓶中抗氧剂的提取迁移及含量测定

目的:考察聚丙烯输液瓶中抗氧剂1010、抗氧剂168的提取与迁移。方法:采用五种提取介质(pH=3.5提取液,pH=8.0提取液,注射用水提取液,0.9%氯化钠注射液提取液及15%乙醇提取液)对聚丙烯输液瓶提取,将注入三种注射液(葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、氯化钠注射液)的聚丙烯输液瓶进行加速试验,采用高效液相色谱法测定五种提取介质与三种注射液中抗氧剂的含量。结果:五种提取介质和三种注射液中均未检出抗氧剂1010、抗氧剂168。提取迁移试验抗氧剂1010平均回收率均高于90%,RSD%均小于1.0;抗氧剂168平均回收率均高于86%,RSD%均小于3.0。结论:该种聚丙烯瓶稳定性良好,可以作为大输液的药品包装容器。     

冠心宁注射液配伍稳定性研究

目的:考察冠心宁注射液的配伍稳定性。方法:根据用法用量,分别将冠心宁与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后,考察室温放置不同时间后,其性状、pH值、渗透压摩尔浓度、吸光度、不溶性微粒及含量的变化。结果:冠心宁注射液与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后12h内质量稳定。结论:冠心宁注射液可与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍。     

氟尿嘧啶与5种常用输液配伍的稳定性

 目的:考察在不同温度（25℃，37℃）条件下，氟尿嘧啶注射液在5种不同输液中的稳定性。方法:将氟尿嘧啶注射液加入5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液、葡萄糖氯化钠注射液、复方氯化钠注射液，放置不同温度（25℃，37）条件下，用紫外分光光度法测定配伍后不同时间混合液中氟尿嘧啶的含量，同时观察外观性状，测定pH值。结果:不同温度（25℃，37℃）条件下，氟尿嘧啶注射液与5种常用输液的配伍液在12 h内性状、pH值和氟尿嘧啶的含量无明显变化。结论:氟尿嘧啶注射液可与上述5种常用输液配伍静脉滴注。     

大蒜蒜酶的提取纯化及其酶学性质

大蒜为百合科多年生草本植物,可药食两用,一直受到青睐。大蒜主要具有抗感染、防治心脑血管疾病、抗肿瘤等功效。目前公认大蒜的功效成分是蒜酶(alliinase,EC4.4.1.4)催化裂解蒜氨酸(alliin)产生的大蒜辣素(al-licin)、阿藿烯(ajoene)等系列含硫有机化合物。主要从大蒜的功效成分、蒜酶的提取纯化、蒜酶的酶学性质及展望等方面综述了蒜酶的研究进展。表明大蒜制剂以其独特的显著功效,必将为人类的健康做出巨大贡献。     

大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达

目的从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因,构建蒜氨酸酶真核表达载体,并在毕赤酵母系统中表达,进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性。方法利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因,通过pPIczαC载体构建pPIczαC-蒜氨酸酶真核表达质粒,电转化法导入毕赤酵母X-33,筛选阳性克隆,经甲醇诱导后取表达上清进行SDS-PAGE和Western blotting分析。利用丙酮酸法检测重组蒜氨酸酶和提取的天然蒜氨酸酶的活性,Lowry法测2种蒜氨酸酶蛋白质量,通过比活力比较2种酶活性大小。结果从大蒜内克隆出蒜氨酸酶基因,大小为1 500 bp,重组蒜氨酸酶相对分子质量约为5.5×104,存在于毕赤酵母表达上清液中。重组蒜氨酸酶比活力为(82.09±3.89)U/mg,天然蒜氨酸酶比活力为(176.49±5.06)U/mg。结论蒜氨酸酶基因可以在毕赤酵母表达系统中获得表达,重组蒜氨酸酶具有酶活性,但是其活性低于提取的天然蒜氨酸酶。     

大孔树脂与ZTC联用纯化白子草总黄酮的研究

目的:考察大孔吸附树脂与ZTC天然澄清剂联用对白子草黄酮提取液的纯化效果,确定理想的纯化工艺。方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,以总黄酮保留率和转移率为指标,考察大孔树脂型号、上样液和药液浓度、上样和清洗及洗脱流速、药材树脂(干)比、树脂柱径高比、清洗液pH等影响因素。结果:优化后纯化条件为大孔树脂型号HPD600,上样液和清洗液pH 6,药液浓度0.25 g.mL-1,上柱吸附流速2 BV.h-1,药材树脂(干)比4∶1,树脂柱径高比1∶10,清洗和洗脱流速5 BV.h-1,清洗液和洗脱液用量分别为5,9 BV,洗脱溶剂70%乙醇。在该纯化条件下,总黄酮纯度由粗提物的2.47%提高到24.2%。结论:大孔吸树脂与Ⅱ-ZTC1+1天然澄清剂联用既可提高产品内在质量,又能缩短生产周期、减少有机溶剂的使用、降低成本,值得推广。     

尖吻蝮蛇毒抗血小板聚集活性蛋白的纯化和性质研究

目的 分离纯化尖吻蝮蛇毒中抗血小板聚集活性蛋白agacutegrin,并研究其生化性质.方法依次用Uno Q、UnoS离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到单一组分agacutegrin,用比浊法和MTT法检测其体外抗血小板聚集和抗肿瘤细胞生长活性.用电泳和Edman降解法测定了agacutegrin相对分子质量和N端氨基酸序列.结果和结论Agacutegrin为碱性蛋白,pI为8.04,SDS-PAGE方法测得其相对分子质量为26.59 kDa.Agacutegrin体外具有抗ADP和胶原诱导的血小板聚集活性,IC50分别为153.1 nmol·L-1和214.4 nmol·L-1.此外,agacutegrin还具有较广泛的体外抑制肿瘤细胞生长活性,ID50为18～35 μg·mL-1.Agacutegrin与蛇毒中的C-型凝集素类似蛋白家族成员N端序列高度同源,表明它可能为1个新的C-型凝集素类似蛋白.     

大孔吸附树脂纯化野菊花多糖工艺

目的:研究大孔吸附树脂对野菊花多糖中所含色素和蛋白质的脱除性能.方法:比较LSA-700B,LSA-21,D101,XDA-8,AB-8,XDA-76种不同型号大孔吸附树脂对野菊花多糖的纯化效果;以脱色率、蛋白质去除率和多糖保留率作为考察指标,探讨温度、多糖质量浓度、pH、转速、流速5个因素对其纯化性能的影响.结果:LSA-21树脂对野菊花多糖的纯化效果较为理想;最佳工艺为温度40℃,多糖质量浓度7 g·L-1,pH 5,转速180 r·min-1,流速3 BV·h-1,径高比1∶8.在此条件下脱色率80.90％,蛋白质去除率52.84％,多糖保留率82.59％.结论:LSA-21大孔吸附树脂对野菊花多糖可以获得较高的纯化效率和多糖保留率.     

血管内皮生长因子受体-2抑制剂高通量筛选模型的建立和应用

 目的 利用均相时间分辨荧光(HTRF)技术建立血管内皮生长因子受体-2抑制剂高通量药物筛选模型,从化合物样品库中寻找小分子抑制剂。方法 使用20 μL检测体系,384低容量白板,采用均相时间分辨荧光技术对反应体系中的酶活性进行荧光检测,进而评价待测样品的抑制活性。模型建立的体系优化包括如下实验步骤：酶浓度及反应时间优化,ATP和底物米氏常数测定,质控实验包括反应体系信噪比实验、抑制剂SU5416的IC₅₀测定,Z′因子的测定。在建立稳定模型检测体系之后,对本中心化合物库提供的10 560个样品进行活性筛选,并对部分活性化合物进行IC₅₀的测定。结果 在血管内皮生长因子受体-2活性体系优化实验中求得血管内皮生长因子受体-2激酶最适反应酶浓度为0.10 ng·μL^-1,最适反应时间为15 min,ATP K_m=0.75 μmol·L^-1,底物K_m=94.90 nmol·L^-1,信噪比底物：SA=2∶1,Z′值为0.85,阳性药IC₅₀=1.03 μmol·L^-1。通过部分初筛活性样品进行复筛研究,得到3个活性化合物S2-14,S2-16、S2-38 IC₅₀分别为1.01×10^-4,6.04×10^-5,7.23×10^-6 mol·L^-1。结论 利用均相时间分辨荧光技术成功建立了血管内皮生长因子受体-2激酶高通量筛选模型,并进行了一定量的定向筛选研究,发现了若干先导化合物。本实验体系方法可靠,结果稳定,可作为抗血管新生天然产物筛选体系进行应用推广。     

HPLC测定大鼠肝微粒体中谷胱甘肽硫转移酶活性及体外动力学研究

 目的 建立一种测定1-氯-2,4-二硝基苯（CDNB）高效液相色谱分析方法,并以1-氯-2,4-二硝基苯为探针测定大鼠肝微粒体中谷胱甘肽硫转移酶（GST）活性并进行体外动力学分析。方法 色谱条件：Welch Materials Ultimate^TM XB C₁₈反相柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相：乙腈-水（7∶3),流速0.8 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长238 nm。实验方法：1-氯-2,4-二硝基苯与大鼠肝微粒体在37 ℃温孵7 min后,冰乙腈终止反应。反应液离心取上清液过滤后进行HPLC分析,通过Sigma Plot 软件作图求算V_max、K_m及代谢清除率（CL_int）值。结果 1-氯-2,4-二硝基苯的R_t=6.0 min,峰形良好,且无内源性干扰。最低检测限为1.0 μmol·L^-1,线性范围：2.5～100.0 μmol·L^-1。日内、日间精密度均小于10%。5 d内于室温及-20 ℃下较稳定。方法回收率为99.38%～108%。动力学分析表明,不同浓度1-氯-2,4-二硝基苯在0.02 mg·mL^-1蛋白浓度下孵育7 min,测得动力学参数：V_max为85.45 nmol·min^-1·（mg protein）^-1;K_m为15.09 μmol·L^-1; CL_lint为5.66 mL·min^-1·（mg protein）^-1。结论 该方法稳定可靠,灵敏度高,能准确快速测定谷胱甘肽硫转移酶活性,可用于其体外动力学研究。     

甘草黄酮分离纯化工艺

目的:筛选具有酪氨酸酶抑制作用的甘草黄酮分离、纯化工艺.方法:以甘草总黄酮含量及酪氨酸酶抑制率为指标,对甘草黄酮分离纯化工艺进行优化,同时考察不同分离条件对其酪氨酸酶抑制活性的影响.结果:甘草黄酮的最佳分离纯化工艺为30 ～ 60目聚酰胺,上样液pH 6,料液比(甘草黄酮粗提物-聚酰胺)32.48:1,上样液质量浓度3.215 g·L-1,洗脱剂乙醇体积分数70％,洗脱流速3 mL·min-1·g-1,洗脱剂用量1 BV.结论:采用该优选工艺成本低,收率高,安全,操作简便,适合工业化大生产.     

大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究

目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著。大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G0/G1期。结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致。     

香菇多糖分离最佳工艺及最佳原料探讨

对香菇多糖提取、纯化条件进行优化研究。结果表明：香菇多糖撮最佳工艺条件为：ｐＨ７．０,９６℃浸提４ｈ,料水比为１：２０,醇析浓度为７０％,蛋白质去除时样品－氯仿＋正丁醇（Ｖ：Ｖ）为１：１,氯仿－正丁醇（Ｖ／Ｖ）为１：０．２５,萃取时间为３０ｍｉｎ效果最好,不同类型的香菇原料的撮结构表明：椴栽板香菇、花菇和板菇,其香菇多糖含量相送葬不大,从经济角度和工艺的简易性考虑,分离制备香菇多糖应以袋栽板菇为最     

大蒜渣ACEI活性肽的制备及其稳定性研究

目的以蒜渣为原料,对制备ACEI(血管紧张素转化酶抑制剂)活性肽的工艺及酶解产物的稳定性进行研究。方法以水解液的抑制活性为试验指标,从9种蛋白酶中筛选出4种较佳蛋白酶单独或联合水解蒜渣。结果蛋白酶1单独水解效果较好。通过单因素和正交试验得出最佳水解条件:加酶量(E/S)6%、底物浓度8%、pH 7、50℃、3 h,在上述条件下酶解产物对ACE的抑制率为88.81%。考察了大蒜渣ACEI活性肽的热稳定性、耐酸碱性和抗肠道酶降解能力,结果表明,该活性肽具有良好的耐高温性能;在酸性条件下活性下降较快,当pH≥8.3时活性稳定;在模拟的胃肠道环境中具有良好的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶裂解的能力。结论大蒜渣ACEI活性肽经口服或者静脉注射后很可能具有良好的降血压效果。