不同浓度一氧化氮对5种细菌生长的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)对细菌的体外抑菌作用。方法:表皮葡萄球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌5种病菌,在温度37℃,湿度45%~60%条件下,分别暴露于室内空气及10×10-6g/L、25×10-6g/L、40×10-6g/L NO中24 h。结果:10×10-6g/L、25×10-6g/L、40×10-6g/L NO抑制白色念珠菌生长,对金黄色葡萄球菌无抑制;25×10-6g/L、40×10-6g/L NO对表皮葡萄球菌、大肠杆菌有抑菌作用;绿脓杆菌在40×10-6g/L NO中被抑制。结论:①NO对细菌具有选择性抑制作用。②不同细菌对NO敏感性不同,NO对部分细菌抑菌作用呈浓度依赖性。     

亚抑菌浓度隐丹参酮对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响

目的:探讨亚抑菌浓度隐丹参酮对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响。方法:以万古霉素为药物对照,微量稀释法测定隐丹参酮与万古霉素对表皮葡萄球菌的MIC值;半定量粘附实验、XTT、扫描电镜和RT-PCR分别检测1/2MIC浓度的隐丹参酮与万古霉素作用下表皮葡萄球菌生物膜基质量、膜内菌代谢活性、微观形态结构和atl E基因表达情况的变化。结果:隐丹参酮与万古霉素对表皮葡萄球菌的MIC值分别为2μg/m L与4μg/m L;1μg/m L的隐丹参酮与2μg/m L的万古霉素均能抑制表皮葡萄球菌生物膜基质量、膜内菌代谢活性和atl E基因表达,且1μg/m L的隐丹参酮抑制作用明显强于2μg/m L的万古霉素,差异有统计学意义(P0.05);SEM观察1μg/m L的隐丹参酮作用下表皮葡萄球菌已不能形成生物膜结构,而2μg/m L的万古霉素作用下依然能够形成生物膜结构。结论:亚抑菌浓度下的隐丹参酮能抑制表皮葡萄球菌生物膜形成,且抑制作用强于亚抑菌浓度万古霉素。     

皮寒药不同提取液体外抗菌作用研究

目的:研究皮寒药全草水提液、乙醇提取液的体外抗菌作用.方法:采用纸片扩展法和2倍递增稀释浓度法检测皮寒药提取液的最低抑菌浓度( MIC)及测定其对5种菌种的抑菌率.结果:皮寒药水提液、乙醇提取液对表皮葡萄球菌的生长有明显的抑制作用,MIC均为25μg/mL;皮寒药乙醇提取液( 100μg/mL)对金色葡萄球菌有一定的抑制作用,其抑制率88.57％;皮寒药水提液(12.5μg/mL)和乙醇提取液(12.5μg/mL)对表皮葡萄球菌的抑菌率分别为80.39％、32.68％.结论:皮寒药水提液和乙醇提取液对表皮葡萄球菌有明显抑菌作用,且水提液比乙醇提取液的抑制作用强;乙醇提取液对金色葡萄球菌表现出抑菌作用,但药物浓度较大.皮寒药水提液和乙醇提取液在实验药物浓度下对绿脓杆菌、大肠杆菌及沙门氏菌无明显抑制作用.     

烧烫灵软膏体外抑菌研究

研究烧烫灵软膏的体外抑菌作用。结果表明 :烧烫灵软膏对金黄色葡萄球菌 (ATCC2 5 92 5 )、表皮葡萄球菌(2 6 0 6 9)、大肠杆菌 (ATCC 2 5 92 2 )的最小抑菌浓度 (MIC)分别为 2 5 g/ L、12 .5 g/ L及 2 5 g/ L。提示其对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大肠杆菌有明显的抑菌作用。对绿脓杆菌无抑菌作用     

双组分信号转导系统saeRS对表皮葡萄球菌生存能力的影响

目的 研究不同浓度的葡萄糖对表皮葡萄球菌野生株、saeRS基因删除突变株及回复株生存能力的影响及机制.方法 在BM培养基中添加不同浓度(7.0 mmol/L、14 mmol/L、28 mmol/L、56 mmol/L)的葡萄糖,分析3种表皮葡萄球菌的生存能力、生物膜形成能力、培养基的酸度及抵抗抗生素生存的能力.结果 与表皮葡萄球菌野生株相比,葡萄糖能明显促进saeRS删除突变株的生存能力和生物膜形成能力,但能够明显降低其对抗生素(比如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素)的抵抗能力;saeRS删除突变株和回复株在14 mmol/L浓度时生存能力最强,在28 mmol/L浓度时生物膜形成能力最强,而葡萄糖浓度对于野生株的生存能力及生物膜形成能力无显著影响.在添加14 mmol/L葡萄糖时,saeRS删除突变株培养基(pH=8.07)的酸度比野生株(pH=7.0)明显降低.结论 SaeRS可能通过介导葡萄糖的利用影响了表皮葡萄球菌的生存能力;双组分信号转导系统saeRS影响抗生素如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素对表皮葡萄球菌的杀菌作用.     

超声下白凤菜总黄酮的优化提取及其体外抑菌活性研究

目的优化白凤菜总黄酮的提取工艺,并研究白凤菜总黄酮的体外抑菌活性。方法以70%乙醇溶液浸提,再用200 W超声波辅助,通过L9(33)正交试验研究白凤菜总黄酮的最佳提取工艺。采用纸片琼脂扩散法和二倍稀释法观察白凤菜总黄酮对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌和铜绿假单胞菌的抑制作用。结果总黄酮提取的最佳工艺条件为:预浸泡时间12h、超声温度70℃、超声时间30min。此工艺下白凤菜干粉总黄酮的含量为30.952mg/g。白凤菜总黄酮对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌、铜绿假单胞菌均有一定抑菌作用;对表皮葡萄球菌和肺炎克雷白杆菌的最低抑菌浓度均为0.84mg/ml,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度均为0.42mg/ml。结论白凤菜总黄酮含量高,且具有广谱的抗菌作用,值得进一步研究。     

桉叶油及其β-环糊精包合物的体外抗菌作用研究

目的:研究柠檬桉树叶挥发油及其β-环糊精包合物的体外抗菌作用。方法:以致病性金葡萄球菌和大肠杆菌为受试菌,采用试管法体外测定桉叶油及其包合物对大肠杆菌和金葡萄球菌的半数抑菌浓度(MIC50)。结果:柠檬桉叶油对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的半数抑菌浓度分别为0.0069mL/mL和0.0074mL/mL,桉叶油包合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的半数抑菌浓度分别为0.380g/mL和0.423g/mL。结论:柠檬桉树叶油及其包合物对金葡萄球菌、大肠杆菌均有较强的抑制作用。     

谷氨酰胺下调大鼠肝细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的 利用原代培养的大鼠肝细胞,观察谷氨酰胺(Gln)在体外对白细胞介素-1β(IL-1β)刺激下一氧化氮合酶(iNOS)过度表达的影响.方法 原位胶原酶灌注法获取原代大鼠肝细胞,分别用生理盐水、IL-1β(1 nmol/L)以及IL-1β(1 nmol/L)联合不同浓度的Gln(2、5、10 mmol/L)刺激24 h,留取细胞和堵养液,采用生化法测定培养液一氧化氮(NO)的水平,采用实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测肝细胞内iNOS信使RNA和蛋白质水平,采用电泳迁移率转变试验检测肝细胞核内核因子κB(NF-κB)的活性.结果 IL-1β刺激后培养液NO的平均浓度为72.7 μmol/L明显高于生理盐水组41.7 μmol/L,肝细胞iNOS蛋白和mRNA水平分别增加了35%和90%,同时给予Gln能够抑制iNOS的过度活化减少NO的产生,并且这种抑制作用随着Gln浓度的增加而增强;IL-1β刺激后肝细胞核内NF-κB的结合活性增强约50%,Gln对NF-κB的活化没有抑制作用,在5、10 mmol/L浓度时反而对NF-κB有进一步的激活.结论 谷氨酰胺能够下调肝细胞在炎症应激诱导下iNOS基因的过度表达,减少NO的产生,这一作用不是通过NF-κB信号通路实现的.     

槲皮素治疗慢性光化性皮炎的体外研究

目的:研究槲皮素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生物膜的抑制作用及其对人表皮细胞株HaCaT的增殖影响,探讨槲皮素用于治疗慢性皮肤炎症的潜在可能。方法:常规培养大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌株及HaCaT细胞系,结晶紫染色法检测不同浓度槲皮素处理后24h大肠杆菌及金黄色葡萄球菌生物膜生长水平,公式计算其抑制率;MTT法检测不同浓度槲皮素处理后0,24,48,72h后细胞增殖水平,公式计算其抑制率。结果:槲皮素对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抑制率均随浓度增大而升高,在400μg/ml和800μg/ml浓度时抑菌效果明显增强,可在24h内达到78%-89%;200,400,800μg/ml浓度的槲皮素对HaCaT细胞生长增殖均无明显抑制作用。结论:适当浓度的槲皮素可明显抑制大肠杆菌及金黄色葡萄球菌生物膜生长,且对HaCaT细胞增殖无明显抑制作用,有望成为光敏性皮肤疾病替代或联合用药的有效药物。     

拟炎症高NO大鼠原代培养肝细胞的信号转导途径研究

目的 :通过对信号分子 NO在原代培养大鼠肝细胞所经由的信号转导途径研究 ,探索炎症急性期肝细胞高 NO的生物学意义 ,及药物可能作用的新靶点。方法 :采用 NO供体硝普钠 (SNP)模拟肝脏急性炎症期高 NO环境 ,Griess法测定 NO的特异氧化终产物 NO2 - / NO3- 。测定肝细胞中 c GMP的浓度和肝细胞培养液中 GSNO的浓度 ,由此分别了解在原代培养大鼠肝细胞模型 ,NO经由 c GMP通路信号转导 ,还是经由非 c GMP通路信号转导的途径。结果 :1.5 4 3mmol/ L SNP释放 NO达峰值分别为 ,以 2 5 mmol/ L GSH为 NO释放通路 ,30 min时为 (0 .6 3± 0 .0 6 ) mmol/ L ;以 2 5 mmol/ L L - Cys为活性巯基通路 ,2 5 min时为 (0 .98± 0 .11) mmol/ L。 SNP与原代培养大鼠肝细胞共孵育过程中 ,随着孵育时间的延长及 SNP浓度的增高 ,细胞内 c GMP含量与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;培养液中 GSNO浓度也有增高。与对照组比均有显著差异 (P<0 .0 5 )。结论 :NO供体 SNP在含有巯基(GSH和 Cys)的肝细胞培养液中可持续释放 NO,通过 c GMP依赖性通路和 c GMP非依赖性通路—— GSNO通路进行信号转导 ,影响下游生物学效应靶点     

感染性休克患儿一氧化氮,循环内皮细胞,脂质过氧化物的变化及意义

检测了１２例感染性休克患儿外周血中ＮＯ＾－２／ＮＯ＾３，循环内皮细胞及丙二醛，同时检测３０例健康儿童作为对照。结果；感染性休克患儿ＮＯ＾－２／ＮＯ＾－３，ＣＥＣ及ＭＤＡ均极显著高于正常组，且ＮＯ＾２／ＮＯ＾－３的增高与ＣＥＣ，ＭＤＡ的改变有显著相关性。     

能量注射液辅助治疗抑郁性精神障碍的临床研究

目的：观察能量注射液对抑郁性精神障碍早期的辅助治疗作用及其不良反应，并对其机理进行了探讨。方法：将符合CCMD-2-R中抑郁性神经症或抑郁症诊断标准的住院病人83例，随机分为治疗组54例和对照组29例，经过1周的清洗期，然后在服用氯米帕明的同时，治疗组给予生理盐水500mL，内加能量注射液2—4支，静脉滴注，每日1次；对照组给予生理盐水500mL，静脉滴注，每日1次。疗程均3周。在用药前及3周末抽取静脉血查血清一氧化氮浓度。用HAMD量表于治疗前及后2、3周末各评定一次，用HAMD量表减分率和TESS量表分判定疗效和不良反应。结果：治疗组和对照组的疗效分别为70．4％和51．7％(P＜0．05)，两组治疗后量表评分较治疗前(除对照组的“睡眠障碍”因子外)均明显减低(P均＜0．05—0．01)，两组间差值比较(除外“日夜变化”和“迟缓”)均有显著性差异(P均＜0．05—0．01)。两组治疗后血清NO浓度较治疗前均明显升高(P均＜0．01)，两组间差值比较均有显著性差异(P均＜0．05)。治疗期间未发现严重不良反应。结论：能量注射液对抑郁性精神障碍早期有辅助治疗作用，其机理可能与血清NO浓度升高有关。     

哺乳动物的一氧化氮及一氧化氮合酶

一氧化氮作为一种重要的生物信使分子，过程中发挥重要的作用，并参与哺乳动物的神经调节、物一氧化氮及其合酶的性质、分布和作用。在动物血流调节、信号传导、免疫防御等多种生理及病理呼吸、消化、运动、免疫及学习行为。本文综述了哺乳动     

甲状腺功能亢进症患者体内一氧化氮合酶表达及一氧化氮生成的测定

目的 :通过对甲状腺功能亢进症患者血清中一氧化氮合酶 ( NOS)与一氧化氮 ( NO)含量的测定 ,分析一氧化氮在甲亢时的生成情况及意义。方法 :分别检测甲亢患者、甲亢治愈者及正常对照组血清中 NOS、NO的含量 ,并进行统计学分析。结果 :在甲亢组 NOS的表达及 NO的生成显著高于甲亢治愈组和正常对照组 ;甲亢治愈组和正常对照组之间无显著差异。结论 :甲亢患者 NOS表达增加、NO生成增高 ,可能与甲亢患者多系统功能紊乱有关     

首乌丹参滴丸对实验性动脉粥样硬化家兔ET／NO及NOS的影响

[目的]探讨首乌丹参滴丸(SWDS)对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔血内皮素(ET)、血浆一氧化氮(NO)水平和一氧化氮合酶(NOS)的影响,并探讨其对动脉粥样硬化的治疗作用。[方法]取50只健康雄性日本大耳白家兔,随机取10只作为正常对照组,喂普通饲料,其余40只给予高脂饮食,喂养4周后,再随机分为4组,每组10只:模型组继续喂高脂饲料:小剂量治疗组喂以高脂饲料和首乌丹参滴丸生药,每只1.25g(/kg·d),大剂量治疗组每只5g(/kg·d):阳性药物对照组,喂以高脂饲料和辛伐他汀,每只2.35mg(/kg·d)。4周后,测定血脂、血清NO和血浆ET水平及血管壁组织NOS的含量。[结果]小剂量、大剂量治疗组及阳性药物对照组的血浆内皮素-1(ET-1)水平明显较模型组低(P<0.05),血清NO水平及血管壁NOS的表达呈相反变化(P<0.05)。[结论]首乌丹参滴丸可降低血脂和血浆ET-1水平,提高血清NO及动脉壁组织NOS的表达,具有抗动脉粥样硬化作用。     

肺结核病人一氧化氮合成酶活性与临床表现的关系研究

目的肺结核病人免疫细胞中一氧化氮合成酶（NOS）活性与临床表现及预后的关系。方法对74例肺结核病人和36例正常人的外周单核细胞的NOS活性进行分析。结果肺结核病人的NOS活性（54．8±22．gnmol／106个细胞）显著高于正常人（31．5±9．8nmol／106个细胞）。在结核病人中，弥漫性病变病人的NOS活性稍高于局限性病变病人，但二者之间的差异无显著性意义（P＞0．05）。病人的NOS活性与治疗效果有关，NOS活性越高，治疗效果越好。结论单核细胞中的NOS所产生的一氧化氮能有效的杀灭体内的结核杆菌，单核细胞中的NOS有助于结核病的恢复。     

一氧化氮合酶在结肠癌中的表达及其相关功能的初步分析

目的：分析3种一氧化氮合酶（ NOS）亚型在结肠癌中的表达差异,探讨神经元型一氧化氮合酶（ nNOS）对结肠癌细胞增殖和迁移功能的影响。方法利用流式细胞术、Western blot、免疫荧光、组化等技术,对6株结肠癌细胞（SW480,SW620,RKO,LOVO,HT29,M5）和10例组织样本中NOS的表达进行分析。而后分别以NOS抑制剂干预NOS的功能活性,分析NOS对结肠癌细胞功能的影响。结果3种NOS在结肠癌细胞和结肠癌组织中均有表达,以胞浆表达为主,部分核表达。流式细胞术和Western blot 定量显示nNOS在所有样本中表达最强（分别为239±4.7～693.3±38.0和0.263±0.05～0.696±0.098）,诱导型一氧化氮合酶（iNOS）居中（分别为42.7±13.6～236±34.0和0.079±0.04～0.291±0.006）,内皮型一氧化氮合酶（eNOS）微弱或不表达（分别为13±7.4～68±13.6和0.019±0.004～0.123±0.004）。增殖和迁移功能实验显示,同时抑制3种NOS亚型或选择性抑制nNOS,可显著下调结肠癌细胞株的增殖和迁移功能（与对照组比较,抑制增殖迁移能力中位百分数为42.5％,P＜0.05）,而选择性抑制iNOS效果微弱（仅抑制9.7％中位百分数的增殖迁移能力,P＞0.05）。结论nNOS对结肠癌增殖和迁移起着重要作用,针对nNOS表达干预治疗可能成为将来结肠癌临床治疗的手段之一。     

螺内酯对自发性高血压大鼠血管外膜诱导型一氧化氮合酶活性的影响

目的 观察醛固酮受体拮抗剂螺内酯干预自发性高血压大鼠(SHR)对血管外膜诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响,探讨醛固酮在血管损伤性疾病中的作用及机制.方法 10周龄雄性SHR大鼠20只,分成2组:螺内酯组(10只,20 mg·kg~(-1)·d~(-1)螺内酯灌胃)和对照SHR组(10只,等量自来水灌胃),10周龄雄性WKY大鼠10只作为正常对照组(等量自来水灌胃),共干预6周.各组均于干预前后每周测1次尾动脉收缩压.6周后处死,取主动脉,测定血管外膜L-精氨酸(L-Arg)摄取、iNOS活性(~3H-瓜氨酸生成法)及NOx含量(Griess 法测定).结果 对照SHR组血管外膜iNOS活性[(12.55±2.27)pmol·mg~(-1)·min~(-1)]、[~3H]-L-Arg摄取[(0.88±0.19)nmol·mg~(-1)·min~(-1)]及NOx含最[(2.07±0.39)μmol/L]较对照WKY组[分别为(5.96±1.87)pmol·mg~(-1)·min~(-1),(0.51±0.15)nmol·mg~(-1)·min~(-1)(1.55±0.32)μmol/L,均P<0.01]显著增高,与对照SHR组比较,螺内酯组血管外膜iNOS活性[(8.32±1.84)pmol·mg~(-1)·min~(-1)]、[~3H]-L-Arg摄取[(0.61±0.15)nmol·mg~(-1)·min~(-1)]和NOx含量[(1.64±0.27)μmol/L]显著下降(均P<0.01).结论 螺内酯能够抑制SHR血管外膜L-Arg-iNOS-NO系统.醛固酮参与血管外膜L-Arg-iNOS-NO通路的激活,这种激活除了通过参与血压升高间接发挥作用外,可能还具有直接作用.     

线粒体一氧化氮合酶及其生物学作用

近来,越来越多的证据表明存在线粒体一氧化氮合酶(mitochondrial nitric oxide synthase,mtNOS),它与线粒体内膜的基质面结合,通过钙敏感性途径产生一氧化氮(nitric oxide,NO).生理状态下,mtNOS催化产生的NO通过与细胞色素C氧化酶可逆性竞争来调节线粒体的氧耗和跨膜电位.NO与线粒体呼吸链产生的超氧阴离子反应,生成过氧亚硝酸,后者不可逆性调节线粒体内的敏感靶点,诱导氧化和(或)硝化应激.此外,也发现NO参与了细胞的程序化死亡.本文主要综述了目前关于mtNOS在线粒体功能调节中作用的认识.