结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究

目的 探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33／ING1在结直肠癌中的表达。方法 用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1 mRNA的表达水平，并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33／ING1蛋白的表达。结果 结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33／ING1蛋白阳性表达率分别为43．3％（26／60）、100％（60／60），两者比较差异有统计学意义（P＜0．01）。p33／ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57．6％（19／33）、25．9％（7／27），两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。在Dukes A、B期和Dukes C、D期患者癌组织中p33／ING1的阳性表达率分别为56．7％（17／30）、30．0％（9／30），两者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 ING1及p33／ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关，临床分期越差者表达水平越低。     

结直肠癌中抑癌基因ING1的表达及其意义

目的:探讨p33ING1在结直肠癌中的表达及意义。方法:应用免疫组化S-P法检测60例结直肠癌组织及相应正常黏膜组织中p33ING1的表达。结果:结直肠癌组织、相应正常黏膜组织中p33ING1蛋白的阳性表达率分别为43·3%(26/60)、100%(60/60)。p33ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组癌组织中的阳性表达率分别为57·6%(19/33)、25·9%(7/27)(P<0·05);在Dukes A、B期、Dukes C、D期病例中分别为56·7%(17/30)、30·0%(9/30)(P<0·05)。结论:p33ING1在结直肠癌组织中低表达,在结直肠癌的发生、发展中可能起重要作用。     

乳腺癌中血管内皮生长因子和抑癌基因p33ING1的表达及意义

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)和抑癌基因p33ING1蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测90例乳腺癌组织和癌周正常组织中VEGF和p33ING1的表达水平。结果VEGF在正常乳腺组织中表达率为44.4%,在乳腺癌组织中的表达率为91.1%,两者差异有统计学意义(P<0.01),p33ING1在正常乳腺组织中表达率为94.4%,在乳腺癌组织中的表达率为63.3%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。VEGF蛋白表达水平与乳腺癌TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.01),p33ING1蛋白表达水平与乳腺癌肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论VEGF与p33ING1的表达与乳腺癌发展有关,进行VEGF与p33ING1免疫组织化学法检测对判断乳腺癌生物学行为和预后具有参考价值。     

结直肠癌中p33ING1与VEGF蛋白的表达及其临床意义

目的探讨p33ING1与VEGF在结直肠癌组织中的表达,以及与结直肠癌侵袭、转移的关系。方法采用Western blot方法检测48例结直肠癌组织中的p33ING1与VEGF的表达。结果Western blot结果证实在结直肠癌组织中、癌旁组织、正常肠黏膜组织中p33ING1的相对表达量依次增加（P〈0.05）,而VEGF则依次降低（P〈0.05）。VEGF蛋白表达水平与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）,p33ING1蛋白表达水平与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论VEGF与p33ING1的表达与结直肠癌发展有关,进行VEGF与p33ING1的Western blot方法检测对判断结直肠癌生物学行为和预后具有参考价值。     

多发性结直肠癌中抑癌基因p53的表达与突变

目的探讨抑癌基因p53与多发性结直肠癌的关系。方法实验组为同时多发性结直肠癌19个癌灶和结直肠再发癌12个癌灶,对照组为散发性结直肠癌17个癌灶。分别采用免疫组织化学抗生物素蛋白生物素过氧化物酶复合物(ABC)方法和单链DNA构像多态性(PCRSSCP)方法对癌组织和癌旁正常组织进行p53蛋白以及p53基因第5、7、8外显子突变的检测,比较各组蛋白表达和基因突变的不同。结果在同时多发癌组、再发癌组以及对照组中p53蛋白阳性表达率分别为73.7%、75%、35.3%,3组比较差异有统计学意义(χ2=6.952,P<0.05);突变率3组分别为52.6%、41.7%、29.4%,差异均无统计学意义。癌旁正常组织均未检出突变;但蛋白表达在同时性三发性癌患者中为阳性。结论多发性结直肠癌中p53基因突变率和蛋白表达高于散发性结直肠癌。p53过度表达的结直肠癌患者要警惕多发癌的发生。     

生物钟基因hPer2在人结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 检测hPer2蛋白在人结直肠癌中的表达,探讨其临床意义.方法 取人结直肠癌及癌旁组织各38例,以免疫组织化学方法检测其中hPer2蛋白的表达,并分析其表达与l临床及病理常用指标的关系.结果 在结直肠癌及癌旁正常黏膜细胞中hPer2均有表达,阳性表达率分别为81.6%(31/38)及97.4%(37/38),两者间差异有统计学意义(P<0.05).以癌旁组织为参照,hPer2在癌组织中表达下调者占63.1%(24/38),表达上调者占5.3%(2/38),无明显区别者占31.6%(12/38),其差异有统计学意义(P<0.01).hPer2表达失调与结直肠癌患者年龄≤50岁、肿瘤组织学分级高、浸润深度深、有淋巴结转移、TNM分期晚相关(P<0.05).结论 hPer2在人结直肠癌中表达下调.hPer2表达的失调甚至缺失可能与结直肠癌的生长、浸润、转移相关.     

PLAC1在结直肠癌及其肝转移组织中的表达及临床意义

目的探讨胎盘特异性基因PLAC1的表达与结直肠癌及肝转移生物学行为及预后。方法应用免疫组织化学的方法分析PLAC1在62例结直肠癌、13例肝转移癌、28例癌旁10cm正常组织标本的表达情况。结果 PLAC1表达在癌旁10cm正常黏膜、结直肠癌组织、肝转移癌组织中的表达率分别为:0(0/28)、56.5%(35/62)和61.5%(8/13),结直肠癌和肝转移癌组织中的表达显著高于癌旁10cm正常黏膜,其差异有统计学意义(P<0.01);结直肠癌组织和肝转移组织比较,其差异无统计学意义;PLAC1在女性表达高于男性;PLAC1表达增高与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移等因素相关。结论 PLAC1异常表达可能在结直肠癌及其肝转移的发生发展中起着重要作用。     

NOD2和TRAF2在结直肠癌中的表达

目的:观察结直肠癌组织中核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)和肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)蛋白的表达,探讨自然免疫在结直肠癌的形成和转移中可能所起的作用。方法:选取结直肠癌患者31例,取癌组织(肠癌组)及其邻近的正常肠黏膜组织(对照组),免疫组化法检测其NOD2和TRAF2蛋白的表达。结果:肠癌组NOD2和TRAF2的阳性表达率(分别为61%和68%)显著高于对照组(分别为32%和35%),均P<0.05;且肠癌组的阳性表达水平(OD值分别为0.186±0.034和0.232±0.041)也显著高于对照组(OD值分别为0.151±0.023和0.148±0.035),均P<0.01。在20例伴有腹腔淋巴结转移的肠癌组中,TRAF2的阳性表达率(75%)显著高于不伴有腹腔淋巴结转移者(55%),P<0.05;而两组NOD2的阳性表达率分别为70%和45%,P>0.05。结论:NOD2和TRAF2在结直肠癌组织中表达增强,它们参与了结直肠癌的形成,TRAF2可能还与结直肠癌的转移有关,自然免疫在结直肠癌的形成中可能起着重要作用。     

生长抑制因子2和基质金属蛋白酶-13在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨生长抑制因子2（ING2）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在结直肠癌组织中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测60例结直肠癌组织及20例癌旁正常黏膜组织中ING2和MMP-13蛋白的表达.结果 ING2和MMP-13在结直肠癌组织中阳性表达率分别为 71.7％和78.3％,显著高于癌旁正常黏膜组织中的表达（χ2=13.611,P=0.000;χ2=20.138,P=0.000）.ING2、MMP-13的阳性表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Duke’s分期相关（P＜0.05 ）,浸润程度越深,两者的表达率越高;淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组;Duke’s分期C、D期显著高于A、B期.Spearman等级相关分析ING2与MMP-13阳性表达之间有显著正相关性（r=0.477,P＜0.05）.结论 联合检测ING2和MMP-13蛋白的表达可作为判断结直肠癌恶性程度和评估预后的参考指标.     

PLAC1/CP1蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测PLAC1/CP1(cancer-placenta 1)基因在结直肠癌肿瘤组织中的表达,探讨其与临床病理因素的关系.方法 免疫组化方法检测PLAC1/CP1基因在125例结直肠癌配对癌组织、癌旁组织芯片中的蛋白表达.统计学采用χ2检验.结果 PLAC1/CP1蛋白在125例结直肠癌组织中的表达率为57.6%(72/125).在原发腺癌中的表达率为56.7%(55/97),在低分化腺癌、中分化腺癌和高分化腺癌的表达分别为78.9%(15/19)、55.7%(34/61)、35.3%(6/17),差异有统计学意义(χ2=7.026,P=0.03);在TNMⅢ+Ⅳ期中的表达率为71.2%(37/52),明显高于Ⅰ+Ⅱ期的表达(40%,18/45)(χ2=9.537,P=0.002);在有淋巴结转移的原发灶中的表达率为69.6%(32/46)明显高于无淋巴结转移者的45.1%(23/51)(χ2=5.897,P=0.015);随淋巴结转移数目的增多,PLAC1/CP1在原发灶的表达显著增高(χ2=13.353,P=0.001).结论 PLAC1/CP1基因的蛋白表达与结直肠癌的组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关.     

结直肠中ING1甲基化的性别不一致性研究

目的:检测结直肠癌中是否存在ING1启动子甲基化,ING1甲基化和性别的关系。方法:用甲基化特异性PCR方法检测62例结直肠癌患者的肿瘤组织、相应的正常黏膜的ING1的甲基化状况。结果:ING1甲基化在62份肿瘤标本中有26例发生了甲基化(41.9%),而在相应的正常组织中只有4例(6.45%)。DukesC、D期患者癌组织的甲基化发生率55.6%明显高于DukesA、B期(23.1%)。在肿瘤组织中ING1甲基化表现出明显的性别和年龄差异(P<0.05)。结论:结直肠癌中ING1的甲基化不仅和肿瘤的分期有关,而且可由年龄与性别相关的因素调节,可能是结直肠癌发生过程中的早期事件。     

p33ING1b蛋白在胆囊癌中表达的研究

目的 探讨抑癌基因p33ING1b在胆囊癌组织中的表达情况并探讨其临床意义.方法 采用P免疫组化法测定p33ING1b蛋白在20例慢性胆囊炎及30例胆囊癌石蜡标本的阳性表达率及其与临床分级分期的相关性.结果 p33ING1b在胆囊癌中的表达率为53.33％ (16/30)明显低于胆囊炎的100％ (20/20),差异有...     

P33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨抑癌基因p33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其与突变型P53蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法,检测64例膀胱移行细胞癌组织标本中P33^ING1b、突变型P53蛋白的表达,并与15例正常膀胱黏膜组织进行对照研究。结果64例膀胱移行细胞癌组织中,P33^ING1b蛋白的阳性表达率为64.06%,而正常膀胱黏膜组织中P33^ING1b蛋白阳性表达率为93.33%。P33^ING1b蛋白的表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明P33^ING1b蛋白表达与P53蛋白表达正相关（P〈0.05）。结论P33^ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达下降,可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,p33ING1b与p53基因具有协同作用,同时检测P33^ING1b与P53的表达水平,将有助于膀胱移行细胞癌的诊断与治疗。     

核不均一性核糖核蛋白A1在大肠癌中的表达

目的检测大肠癌组织中核不均一性核糖核蛋白（hnRNPA1）及其基因的表达情况，探讨hnRNPA1与大肠癌临床各项指标的相关性。方法收集60例大肠癌患者手术切除标本，制备快速冰冻病理切片，免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化酶连接（SP）法检测hnRNPA1蛋白的表达；同时应用半定量聚合酶链反应（PCR）法检测组织hnRNPA1基因表达情况，分析基因表达量与临床指标的关系。结果免疫组织化学检测可见hnRNPA1蛋白着色主要位于细胞浆和细胞核；60例大肠癌标本中有35例阳性表达，表达率明显高于正常大肠黏膜组织（P〈0．05），与肿瘤的分化程度、临床Dukes分期和淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。逆转录（RT）-PCR可见hnRNPA1阳性标本占96．7％，平均比值显著高于正常大肠黏膜的平均比值，不同分化程度及不同临床分期的大肠癌中hnRNPA1基因的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论hnRNPA1在大肠癌中高表达。在晚期伴淋巴结转移的大肠癌中其蛋白和基因的表达明显高于早期大肠癌。表达强度随分化程度的降低而递增。     

P33ING1在肛管癌中的表达及与P53和细胞凋亡的关系

目的探讨P33ING1在肛管癌中的表达及与P53和细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测42例肛管癌标本中P33ING1和P53的表达,同时检测其细胞凋亡,并与肛管腺瘤和乳头状瘤及肛周炎性肿块对照组比较。结果在肛管癌、肛管腺瘤及乳头状瘤、肛周炎性肿块组织中P33ING1阳性表达率分别为40．5%、97．2%及97．5%；P53分别为50．O%、22．2%及27．5%；平均细胞凋亡指数则分别为(10．27±1．23)‰、(42．67±1．04)‰及(42．75±0．98)‰。肛管癌中P33ING1、P53阳性率及平均细胞凋亡指数与另外两组比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。在P53表达阳性的21例病例中有18例P33ING1表达阴性。结论P33ING1在肛管癌组织中低表达,对肛管癌的发生、发展可能起重要作用。P33ING1和P53互相协同,抑制细胞生长、促进调亡。     

结直肠癌组织中p27基因甲基化与其临床病理的关系

目的 检测结直肠癌组织中p27基因启动子区CpG岛甲基化水平及其表达,并结合其临床病理参数进行分析,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应分析技术检测106例结直肠癌组织及其正常结直肠黏膜组织、22例结肠腺瘤组织中p27基因启动子甲基化,用免疫组织化学SP方法检测其蛋白表达.结果 本组结直肠癌组织中p27甲基化阳性率为59.4%(63/106),结肠腺瘤组织中为18.2%(4/22),而正常结直肠黏膜组织中为3.8%(4/106),前组与后两组之间相比差异有统计学意义(P＜0.05).低分化组结直肠癌组织中p27甲基化阳性率明显高于高中分化组(48.0%比24.7%,P＜0.05);Dukes-A+B期组与C+D期组之间相比差异有统计学意义(20.0%比41.2%,P＜0.05);有无淋巴结转移两组之间的阳性率相比差异有统计学意义(41.5%比23.1%,P＜0.05);浸润深达浆膜层的结直肠癌组织中的甲基化阳性率与未达浆膜层组相比差异无统计学意义(32.5%比24.1%,P＞0.05).结论 结直肠癌组织中存在p27基因启动子甲基化.p27基因的高甲基化与结直肠癌分化程度、浸润深度、Dukes分期及有无淋巴结转移有关.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between p27 gene methylation and pathology of colorectal carcinoma. Methods p27 gene methylation promotor region and p27 protein expression were detected respectively by methylation specificity polymerase chain reaction and immunohistochemical staining SP in 106 cases of colorectal carcinoma and each adjacent normal mucous membrane tissue and 22 cases of colorectal adenoma tissue. Results The positive expression rate of p27 gene methylation was statistically different in colorectal carcinoma tissue compared with normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue (P＜0.05). Their positive expression rate were 59.4% (63/106), 18.2% (4/22) and 3.8%(4/106) respectively in colorectal carcinoma tissue,colorectal adenoma and normal mucous membrane tissue (P ＜ 0. 05). p27 gene methylation in poorly differentiated group was significantly higher than that in welldifferentiated group (48.0% vs. 24. 7%, P ＜0. 05), in Dukes-A + B stage group was significantly lower than that in Dukes C + D stage group(20. 0% vs. 41.2%, P ＜ 0. 05 ), and it was higher in lymph nodes metastases group than that in lymph nodes negative group(41.5% vs. 23. 1%, P ＜0. 05), that in positive serosa infiltration group was higher than negative serosa infiltration group(32. 5% vs. 24. 1%, P ＞ 0. 05 ).Conclusions Methylated p27 gene protein expression in colorectal carcinoma was significantly higher than normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue. The methylation rate of p27 gene in colorectal carcinoma was significantly associated with tumor differentiation, invasive depth, Dukes stage, lymph node metastasis.