细胞周期蛋白与急性白血病预后的关系研究

背景与目的:细胞的增殖和分化是通过细胞周期转运来实现的,当肿瘤细胞异常增殖时,作为细胞运转正调因子的细胞周期蛋白(cyclins)就有可能表达异常。目前已有较多资料证实cyclins在实体肿瘤中呈高表达。本研究探讨cyclins与急性白血病预后的关系。方法:实验组分为急性白血病完全缓解组(12例)、急性白血病初发未治组(16例)、难治性白血病组(40例);正常对照组为良性血液病患者(15例)。用RT-PCR法检测cyclinA、cyclinD、cyclinE。结果:正常对照组15例的cyclins表达均为阴性,在正常对照组和实验组中,cyclinA的表达没有显著性差异(P>0.05),而cyclinD和cyclinE在实验组的表达均明显高于正常对照组(P<0.01)。在急性白血病完全缓解组,cyclinD和cyclinE的表达无显著性差异(P>0.05);而在难治性白血病中,cyclinD的表达显著高于cyclinE,且cyclinD在难治性白血病组的表达明显高于初发性的病例(P<0.05)。将所有cyclins表达阳性的病例分为表达单一cyclin和表达2个以上cyclins两组,并分别计算两者的阳性率,发现两者的阳性率在急性白血病完全缓解组和难治性白血病组间无显著性差异(P>0.05)。结论:CyclinD可以作为急性白血病的预后指标,不能用cyclins基因类型表达的多寡来判断预后。     

儿童急性白血病生存素和细胞周期素B1基因的表达

目的：探讨生存素、细胞周期素B1的表达与儿童急性白血病（AL）的关系。方法：采用RT—PCR法对初治或复发AL患儿42例和完全缓解AL（ALCR）患儿13例及非恶性疾病患儿15例骨髓单个核细胞进行基因生存素、细胞周期素B1表达的检测。结果：初治和复发AL组生存素mRNA表达水平分别为0．472和0．810；细胞周期素B1mRNA为0．609和0．739，均高于ALCR组和对照组（均为0）（P〈0．01）；复发AL组生存素mRNA表达水平高于初治组，差异有统计学意义（P=0．025）。生存素基因的表达与白细胞总数及临床分型有关，而与性别、年龄、免疫分型无明显相关性；细胞周期素B1表达与性别、年龄、免疫分型、白细胞总数及临床分型无明显相关关系。儿童AL中生存素与细胞周期素B1的表达呈正相关。生存素mRNA表达水平高者缓解率低。结论：儿童AL中存在生存素、细胞周期素B1异常表达，两者表达存在相关性。生存素是AL复发的高危因素；AL生存素高表达者可以降低AL的化疗敏感性，生存素水平对AL有判断疗效和预后的价值。     

LRP16基因在子宫内膜癌组织中表达及其临床意义

目的 探讨LRP16 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测子宫内膜癌组织及正常增生期子宫内膜组织中LRP16 mRNA的表达水平.结果 LRP16 mRNA阳性表达率与组织学分级、手术-病理分期及子宫肌层浸润深度均有关(P＜0.05).结论 LRP16 mRNA...     

WT1基因在急性白血病中的表达及其临床意义

 【摘要】　目的　探讨急性白血病（AL）患者体内WT1基因的表达情况及其临床意义。方法　采用荧光定量聚合酶链反应对急性髓系、淋巴细胞白血病66例患者WT1基因进行检测,并比较髓系各亚型之间的基因表达量差异,观察基因表达水平与病程及预后之间的相关性,同时分析造血干细胞移植患者的病程与WT1基因表达之间的关系。结果　66例患者中,87.5 %（14／16）的急性淋巴细胞白血病及76.0 %（38／50）的急性髓系白血病患者WT1基因表达阳性;髓系各亚型中,M3的表达水平低于其他各亚型（与M1、M2、M4、M5相比,P值分别为0.040、0.007、0.006、0.010）。WT1基因的表达水平与疾病状态密切相关,完全缓解组表达水平明显低于未缓解组（P＝0.018）及复发组（P＝0.003）,其滴度的再次升高可提前1.5个月预测复发。WT1基因与造血干细胞移植患者的预后相关,WT1基因转阴的患者较持续表达及一度下降后再次上升的患者预后好。结论　WT1基因在AL患者中的表达可代表微小残留病灶,急性髓系白血病各亚型中M3表达水平相对较低,WT1表达水平与临床病程及预后密切相关。     

急性白血病患者细胞周期蛋白B1基因表达与耐药的关系

目的:研究急性白血病(AL)患者细胞周期蛋白B1基因的表达与耐药的关系。方法:应用半定量逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测了13例耐药急性白血病患者和14例非耐药急性白血病患者外周血细胞周期蛋白B1基因的表达水平,并应用荧光定量RTPCR对所有患者外周血mdr1基因的表达进行了检测。结果:耐药组细胞周期蛋白B1基因表达水平显著高于非耐药组(P<0.05,t=2.549),细胞周期蛋白B1与mdr1mRNA的表达呈正相关(r=0.404,P<0.05,t=2.208)。结论:细胞周期蛋白B1基因可以作为判断AL患者耐药的指标,对判断AL的预后具有一定的价值,细胞周期蛋白B1的表达与由mdr1介导的耐药相关。     

膀胱移行细胞癌中KAI1基因mRNA的表达及其临床意义

目的　探讨膀胱移行细胞癌中KAI1基因mRNA的表达及其与肿瘤病理分级、临床分期及淋巴转移等的关系。方法　以β-actin为内参照,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测KAI1mRNA在膀胱移行细胞癌及癌旁正常组织中的表达。结果　癌旁正常组织中均有KAI1mRNA表达,水平为1. 35±0. 38,癌组织为0. 76±0. 25,部分癌组织表达缺失,前者表达水平显著高于后者(P< 0. 01)。且随着肿瘤病理分级、临床分期的增高及淋巴结转移的出现,KAI1mRNA表达水平逐渐降低,各组间差异具有显著性意义(P< 0.01)。结论　KAI1基因表达降低与膀胱移行细胞癌分化、浸润及淋巴转移有关,有可能成为评判肿瘤恶性程度、转移潜能及预后的新指标。     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:60例初治或复发AL中有44例患者高表达WT1基因,阳性率73.3%。在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)阳性率分别为70.8%和83.3%,两组无显著性差异。随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势,CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高。结论:用NestRT-PCR测定WT1基因的表达可用作检测白血病微小残留病(MRD)的一项指标。     

急性白血病肺耐药相关蛋白基因的表达及其临床意义

为探讨急性白血病（ＡＬ）患者肺耐药相关蛋白（ＬＲＰ）基因表达与化疗疗效及预后的关系，应用半定量的反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测了３８例ＡＬ患者及１５例正常对照者ＬＲＰ基因的表达，将ＬＲＰ／β２Ｍ≥０．３定为ＬＲＰ＋，结果发现初治组ＬＲＰ的阳性率为４４．４％，ＬＲＰ＋与ＬＲＰ－患者的完全缓解（ＣＲ）率分别为３７．５％和９０．０％（Ｐ＜０．０５），复发及难治组ＬＲＰ基因表达的阳性率及表达水平最高，与正常对照组、长期生存组及初治组相比均有统计学差异。提示：ＬＲＰ基因表达与临床耐药密切相关，动态观察可早期预测复发     

黏蛋白1基因在白血病中的表达及其临床意义

 目的　探讨各种类型白血病中黏蛋白1（MUC1）基因的表达及其在临床诊断、预后及治疗上的意义。方法　运用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对白血病患者42例和非血液恶性疾病患者或正常人24例的骨髓中MUC1基因的表达进行检测。结果　急性白血病MUC1基因的表达率（43.3 %）显著高于对照组（8.3 %）（P＜0.01）,慢性白血病MUC1基因的表达率（54.5 %）亦高于对照组（8.3 %）（P＜0.05）。急性白血病MUC1基因表达阳性者完全缓解率（16.7 %）低于阴性表达者的完全缓解率（75.0 %）,差异有统计学意义（P＜0.05）。血液学完全缓解（CR）患者10例中检测出MUC1基因表达5例。结论　MUC1基因作为一种肿瘤标志物,在各种类型、亚型白血病患者中高表达,可辅助白血病的诊断,MUC1基因表达的RT-PCR分析法监测白血病微小残留病,较常规血细胞形态学具有更高的敏感性,可为白血病预后的观测指标。     

急性白血病患者WT1基因表达水平及其临床意义

目的：探讨WT1基因与急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）患者预后的关系及其用于微小残留病（MRD）监测的可能性。方法收集58例初发AML、32例初发ALL、40例AML-完全缓解（CR）、28例ALL-CR患者及31例同期三系增生活跃患者（对照组）骨髓单个核细胞,利用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测WT1基因的表达,建立WT1基因在各组间的表达阈值,以WT1拷贝数／ABL拷贝数×100%表示WT1基因的相对表达量。结果初发AML患者与对照组间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义[20.880%（3.550%～48.500%）比0.026%（0～0.240%）,Z＝-7.74,P＜0.0001]。AML-CR患者[0.102%（0～5.380%）]与初发AML患者间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义（Z＝-8.34,P＜0.0001）。此外,WT1基因表达高于阈值（20.880%）的AML患者第1个疗程CR率为60.7%（17／28）,而表达低的患者为76.7%（23／30）。AML患者复发时WT1表达升高。与对照组相比,初发ALL患者WT1基因中位相对表达量[0.350%（0.021%～10.780%）]升高（Z＝-2.58,P＜0.05）,但与ALL-CR患者[0.038%（0～2.800%）]相比,WT1基因中位相对表达量差异无统计学意义（P＝0.065）。结论 WT1基因在AML中的表达相对较高,其可能成为AML患者预后评估及MRD监测的有效指标,但并不适用于ALL患者。     

细胞周期素G1和G2在人食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

探讨细胞周期素G1和G2（Cyclin G1,G2）在人类食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法：收集2007年2月至2008年5月间蚌埠医学院第一附属医院病理科食管鳞状细胞癌存档蜡块60例,正常食管黏膜组织20例,所收集病例均有完整临床和病理资料。采用免疫组织化学Elivision染色方法检测上述组织中细胞周期素G1和G2的表达情况。结果：细胞周期素G1在食管鳞状细胞癌组织中表达的阳性率（61.7%）显著高于正常食管黏膜的阳性率25.0%（P<0.05）,细胞周期素G2在食管鳞状细胞癌组织中表达阳性率（66.7%）显著低于正常食管黏膜的阳性率（90.0%）（P<0.05）,两者的表达情况均与肿瘤组织的分化程度及有无淋巴结转移有相关性（P<0.05）;食管鳞状细胞癌组织中细胞周期素G1和G2的表达呈显著负相关（P<0.05）。结论：随着食管鳞癌中Cyclin G1表达的增高,Cyclin G2的表达却下降,提示Cyclin G1和Cyclin G2相互之间存在负相调节作用,两者在食管鳞状细胞癌的发生、发展中具有重要作用。     

SSX2基因在急性白血病中表达的临床意义

目的：研究滑膜肉瘤X断裂点基因2（SSX2）在急性白血病中的表达及临床意义。方法：逆转录聚合酶链反应检测72例急性白血病（AL）中SSX2的表达,包括23例急性淋巴细胞白血病（ALL）及急性髓细胞白血病（AML）。结果：在72例AL患者中有38例SSX2表达阳性（52.78%）,在ALL中SSX2表达阳性率为56.52%,而在AML中SSX2表达阳性率为51.02%,两者之间没有显著性差别（P〈0.05）。在非M3型AML患者中SSX2表达阳性的完全缓解率（CR）为60.87%,而在SSX2表达阴性的完全缓解率为89.47%。在随访的16例SSX2表达阳性患者观察治疗后的SSX2表达阳性率,完全缓解后SSX2表达可以转为阴性,SSX2表达持续阳性的患者会较早复发。如果患者没有完全缓解,则SSX2表达不会转为阴性。结论：在AML及ALL患者中SSX2表达没有差别（P〉0.05）,SSX2阳性表达非M3型AML患者中CR率较低,SSX2可以作为AML患者较差的预后指标。     

Cyclin G1和PCNA在子宫肌瘤中的表达及临床意义

目的：探讨CyclinG1和PCNA在子宫肌瘤发生中的作用及其临床意义。方法：应用RT—PCR和免疫组化SP法检测45例子宫肌瘤组织及其邻近正常子宫肌组织CyclinG1和PCNA的表达情况.结果：CyclinG1和PCNA在子宫肌瘤组织中的表达明显高于正常子宫肌组织，差异具有显著性意义（P〈0．05）子宫肌瘤组织中CyclinG1和PCNA的表达呈正相关，正常子宫肌组织中CyclinG1和PCNA的表达无明显相关性.结论：CyclinG1表达异常可能通过PCNA影响子宫肌瘤细胞的增殖活性，CyclinG1和PCNA的表达上调与子宫肌瘤的发生发展密切相关，     

c-kit在急性白血病中的表达及其临床意义

目的 :研究c kit受体 (c kitR ,CD1 1 7)在急性白血病 (AL)中的表达。重点了解c kitR表达对急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)的诊断价值及其与ANLL的临床和生物学特征的关系。方法 :采用流式细胞术 (FCM)分别检测并比较 2 4例急性淋巴细胞白血病 (ALL)和 47例ANLL初诊患者骨髓单个核细胞 (MNC)跨膜c kitR表达的阳性率及阳性水平 ,并设立 1 0例正常人骨髓标本作为阴性对照组。结果 :ALL患者的c kitR表达的阳性率及阳性水平与正常人相比无显著性差异 (P >0 .0 5)。ANLL患者的c kitR表达率及阳性水平则均显著高于正常人和ALL患者(P均 <0 .0 1 )。c kitR阳性率以M1 、M2 最高 ,M4最低。ANLL患者c kitR表达与外周血白细胞计数、肝脾肿大无关(P >0 .0 5) ,但与染色体核型异常及LDH水平增高有关 (P均 <0 .0 5)。结论 :ANLL患者的c kitR阳性表达率及阳性水平均显著高于正常人和ALL患者 ,提示c kitR可作为AL患者MIC分型诊断的髓系免疫表型依据 ,可用以协助ANLL的诊断以及ANLL与ALL的鉴别诊断     

口腔鳞癌组织中HSP70基因mRNA的表达及其意义

目的检测HSP70基因的信使RNA在不同分化口腔鳞癌中的表达,以探讨其在口腔鳞状细胞癌组织中表达的意义。方法用半定量RT-PCR方法检测30例口腔鳞状细胞癌和20例正常口腔黏膜中HSP70基因mRNA的表达,并分析HSP70基因mRNA表达量与临床病理特征的关系。结果 HSP70基因mRNA在高、中、低分化口腔鳞状细胞癌及正常组织中的灰度平均值为1.07±0.04,1.21±0.05,1.36±0.03;正常口腔黏膜上皮HSP70 mRNA的灰度平均值为0.95±0.15,表达低于口腔鳞状细胞癌组织,两者之间的差异具有显著性,高中低分化的口腔鳞状细胞癌两两比较,均有统计学差异。结论 HSP70基因表达与口腔鳞状细胞癌发生发展呈正相关关系,这对诊断口腔鳞状细胞癌有重要意义。但是HSP70的mRNA低表达则不能完全当作是口腔鳞状细胞癌中的早期事件。     

胃癌组织NGX6和Cyclin D1表达及其生物学意义的探讨

目的:探讨胃癌组织中NGX6和Cyclin D1的表达及其生物学意义.方法:采用免疫组化SP法检测89例胃癌组织和53例正常胃黏膜组织中NGX6和Cyclin D1蛋白的表达情况.结果:NGX6蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为51.69％,胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织的83.02％,P＜0.05;而Cyclin D1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为74.16％,胃癌组织中阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织的0,P＜0.05;免疫组织化学结果显示,胃癌组织中NGX6和Cyclin D1蛋白的阳性表达呈负相关,两者均与胃癌的临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05),而与组织学分级无关.结论:NGX6和Cyclin D1蛋白表达异常可能共同参与了胃癌的发生、发展、侵袭和转移;联合检测2种蛋白对于评价胃癌的恶性程度、判断其转移潜能和预后可能具有重要的临床意义.     

小鼠胃癌Cyclin G1和其它相关基因表达及凋亡研究

目的:探讨胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因的表达水平、细胞周期变化和凋亡情况.方法:建立胃癌模型;免疫组化法检测小鼠胃癌中Cyclin G1、Cyclin D、p21、p16、p53、bcl-2等基因蛋白表达,RT-PCR技术检测Cyclin G1mRNA的表达;流式细胞术检测小鼠胃癌细胞的凋亡率和细胞周期.结果:阳性组的CvclinG1、Cyclin D表达明显高于正常组和化疗组(P＜0.05),p16则相反;各组p21、bcl-2的表达无明显差异;阳性组p53的表达为阴性,而化疗组与正常组表达无明显差异(P＞0.05);阳性组中Cvclin G1mRNA的表达水平明显高于正常组和化疗组(P＜0.05);化疗组和阳性组的细胞凋亡率均较正常组增高(P＜0.05),且化疗组的凋亡率比阳性组明显增高(P＜0.01).结论:CyclinG1、Cyclin D高表达、p16低表达可能与胃癌的发生、发展有关.     

凋亡抑制蛋白XIAP在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白XIAP（X-linked inhibitor of apoptosis protein）在急性白血病患者中的表达及其临床意义。方法:酶联免疫吸附法检测64例急性白血病患者血清XIAP水平。结果:初发急性白血病患者血清XIAP水平明显高于正常对照组及完全缓解组(P＜0.05),未缓解和复发患者XIAP水平与初诊患者无明显差异(P＞0.05)。结论:XIAP水平的变化有助于急性白血病病情及疗效的判断,可作为急性白血病疗效观察的一个新指标。     

白血病中IL－2受体基因的表达及其意义

 利用聚合酶链反应(PCR)方法检测116例各种白血病细胞IL-2受体基因的表达情况。该基因在T-ALL、CLL、C-ALL和ANLL都有相当高的表达率，分别为100%、100%、71.43%和65%。该方法较APPAP和免疫荧光法发现更高的阳性率，提示其敏感性及准确性更高。本文结果显示了大部分的白血病细胞都表达了IL-2受体基因，推测IL-2受体可能是白血病细胞所具有的一种普遍特性，而IL-2则可能在白血病细胞的增殖中起一定的作用。故提出临床上应重新评价LAK细胞和IL-2在白血病中的治疗价值。