广西SARS来源的流行病学研究

目的研究SARS来源,掌握其发生原因、发展和分布规律,为制定预防控制对策和措施提供科学依据。方法建立主动和被动监测系统监测SARS疫情,对SARS病例进行现场流行病学问卷调查,分析其分布规律和特征。采集病例、密切接触者、野生动物和人工饲养果子狸的血清、咽漱液、咽拭子等标本分别采用ELISA方法和荧光定量PCR检测IgG、IgM抗体和RNA,进行血清学和病原学研究,并结合流行病学、病原学和血清学结果探讨SARS的来源。结果于2002年12月17日到2003年5月上旬,出现两个流行高峰,共报告病人22例,发病率0.046/10万,病死率为13.64%。呈局部爆发和高度点状散发,具有高度家庭聚集性,大多分布在农村,以外出广东务工青壮年民工为主,男女性别比为1.75∶1。主要症状为发热、咳嗽,伴有畏寒、咽痛、胸闷、气促、胸痛、全身乏力、恶心、呕吐和腹泻等其它的症状。91%的病人胸片检查呈现单侧或双侧肺部片状阴影。病例血白细胞正常或减少,病人血清IgG和IgM阳性率分别为100%和81.8%,1例病人血浆中检出SARS病毒核酸。密切接触者IgG抗体阳性率为1.11%。野生动物山瑞鳖、眼镜蛇、蛤蚧和鹰血清SARS病毒抗体阳性。结论从流行病学、临床表现、血清学和病原学均证实SARS在广西流行,具有输入性、续发性和自然疫源性三个来源。病人为重要的传染源,野生动物可能是SARS的源头。     

湖南省不同人群SARS冠状病毒抗体血清流行病学研究

目的通过开展高暴露人群、本地健康人群及从SARS流行地区返湘的流动人群的SARS血清流行病学调查，了解他们感染SARS冠状病毒的状况，阐明我省SARS流行和波及的范围，为今后的科学防治提供依据。方法于2003年5—8月选择病例的家庭密切接触者、接诊SARS确诊病例的医务人员、各级疾病预防控制机构现场处置工作人员、果子狸等野生动物接触人员、5个县健康人群及SARS流行期间从流行地区返湘的流动人群为调查对象，采集调查对象的血清标本，用ELISA法检测SARS冠状病毒IgG抗体。结果共检测血清标本805份，SARS冠状病毒抗体阳性率为0．50％，其中以家庭密切接触者的阳性率最高，为8．70％，其次流动人群的阳性率为0．65％，其他人群的阳性率均为0。结论家庭密切接触者的SARS冠状病毒抗体阳性率显著高于其他人群，支持近距离飞沫传播和密切接触是SARS的主要传播途径；我省不同人群SARS冠状病毒抗体阳性率均低于广东的报道，且医务人员、疾控人员及健康人群的SARS冠状病毒抗体阳性率均为0，证实SARS在传人我省后，及时得到有效控制，未造成流行和波及其他人群；野生动物接触人员的SARS冠状病毒抗体阳性率为0，说明目前还没有证据显示我省野生动物携带SARS冠状病毒。     

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 ,有待进一步改进     

SARS病毒基因和特异性抗体检测效果评估

目的:评估严重急性呼吸综合征(SARS)病毒基因检测和特异性抗体检测效果.方法:采用巢式反转录PCR检测健康人、普通发热患者、不同时期SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上述几组血清标本中的特异性抗体IgG和IgM.结果:SARS患者住院6 d～57 d期间,采用巢式RT-PCR检测痰SARS病毒基因,56例患者中34例阳性,阳性率60.7 %;而采用间接ELISA检测血清抗SARS病毒抗体,56例患者中32例阳性,阳性率为57.1 %.两种方法均阳性的有15例,均阴性的有6例.2种病原学诊断方法检测20例正常人和15例发热非SARS患者,结果均为阴性.住院6 d～13 d组(92.3 %)巢式RT-PCR基因阳性率明显高于ELISA特异性抗体阳性率(7.7 %);住院>35 d组巢式RT-PCR基因阳性率(36.8 %)则明显低于ELISA特异性抗体阳性率(94.7 %)(P<0.01).结论:痰中SARS病毒基因检测可用于SARS的早期诊断,这对于提前确诊和治疗SARS患者,以及尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义.血清特异性抗体检测可用于流行病学调查,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义.     

SARS病毒基因和特异性抗体检测效果评估

目的 :评估严重急性呼吸综合征 (SARS)病毒基因检测和特异性抗体检测效果。方法 :采用巢式反转录PCR检测健康人、普通发热患者、不同时期 SARS患者痰标本中的 SARS病毒核酸即 RNA;采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)法检测上述几组血清标本中的特异性抗体 Ig G和 Ig M。结果 :SARS患者住院 6 d～ 5 7d期间 ,采用巢式 RT-PCR检测痰 SARS病毒基因 ,5 6例患者中 34例阳性 ,阳性率 6 0 .7% ;而采用间接 EL ISA检测血清抗 SARS病毒抗体 ,5 6例患者中 32例阳性 ,阳性率为 5 7.1%。两种方法均阳性的有 15例 ,均阴性的有 6例。2种病原学诊断方法检测2 0例正常人和 15例发热非 SARS患者 ,结果均为阴性。住院 6 d～ 13d组 (92 .3% )巢式 RT- PCR基因阳性率明显高于 EL ISA特异性抗体阳性率 (7.7% ) ;住院 >35 d组巢式 RT- PCR基因阳性率 (36 .8% )则明显低于 EL ISA特异性抗体阳性率 (94 .7% ) (P<0 .0 1)。结论 :痰中 SARS病毒基因检测可用于 SARS的早期诊断 ,这对于提前确诊和治疗SARS患者 ,以及尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查 ,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

广东省野生动物接触人群SARS冠状病毒感染危险因素分析

目的 探索广东省特定人群野生动物接触与SARS冠状病毒感染的关系。方法采用ELISA法和间接免疫荧光试验（IFA）联合检测野生动物接触人群血清SARS冠状病毒IgG抗体（SARS-IgG），以判断SARS冠状病毒感染情况；用非条件logistic回归分析野生动物接触与SARS冠状病毒感染之间的关系。结果单因素非条件logistic回归分析结果表明，接触山猪、黄掠、果子狸、蛇、穿山甲、巨蜥、猴和山鸡是SARS冠状病毒感染的可疑危险因素，OR值分别为5．81（P=0．000）、4．64（P=0.000）、3．31（P=0.000）、1．93（P=0.039）、12．98（P=0.029）、19．89（P=0.001）、11．05（P=0．001）和2．21（P=0．018）；与非野生动物从业人员相比，从事野生动物销售、果子狸饲养和在经营野生动物酒家从事野生动物相关职业是SARS冠状病毒感染的可疑危险因素，OR值分别为31.55（P=0.001）、14.32（P=0.018）和8.14（P=0．043）；多因素非条件logistic回归分析结果表明，接触山猪和果子狸是SARS冠状病毒感染的可疑危险因素，OR值分别为4．97（P=0.002）和2.95（P=0．022）；与非野生动物从业人群相比，从事野生动物销售是SARS冠状病毒感染的可疑危险因素，OR值为31．99（P=0．004）。结论从事野生动物销售可能增加SARS冠状病毒感染机会；山猪和果子狸是广东省SARS冠状病毒感染的可能来源。     

SARS病毒基因检测结果与患者病情、病程和体液免疫的关系研究

目的:研究严重急性呼吸综合征患者的病情、病程和特异性抗体产生对SARS病毒基因阳性检出率的影响.方法:采用巢式反转录PCR检测健康人,发烧非SARS患者,不同时期和不同病情SARS患者以及存不存在特异性抗体的SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA.结果:巢式RT-PCR检测SARS患者痰标本中的SARS病毒RNA的敏感度为60.0 %.6 d～10 d组阳性检出率最高,为100 %,高于11 d～25 d组,而11 d～25 d组的阳性检出率又高于＞25 d组(P＜0.01);病情轻组比病情重组的阳性检出率高(P＜0.05);抗体阴性组比抗体阳性组检出率高(P＜0.05).结论:SARS病毒基因检测阳性率在轻病情组比重病情组高,住院时间短组比住院时间长组高,血清特异性抗体阴性组比阳性组高.     

SARS的实验室诊断研究现状

研究表明SARS病毒是变异的冠状病毒(SARS CoV) ,其毒力远远强于其他已知的家族成员,病毒学诊断对SARS的确诊具有决定性意义[1] 。SARS CoV基因测序的完成为该病毒的扩增引物的设计提供了条件,也对SARS的诊断及药物研究具有重要意义。来源于患者的标本具有足够的基因信息,对它进行病毒纯培养,可获得大量SARS冠状病毒,用于PCR研究,产生丰富的病毒基因资料[2 ] 。SARS的实验室诊断主要有病毒的分离培养、抗体检测、PCR和基因芯片检测等方法[2 ,3] 。目前实验室诊断方法尚不完善,临床实用仍有距离,本文仅对SARS诊断比较成熟的…     

严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义分析

目的探讨严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义和价值。方法采用巢式反转录PCR和ELISA法分别检测健康人、普通发热患者、SARS密切接触医务人员及不同时期SARS患者痰标本中SARS病毒核酸和血清标本中特异性抗体IgG和IgM。结果SARS患者住院1～58d期间,采用巢式RT-PCR检测痰SARS病毒基因,52例患者中33例阳性,阳性率63.5%;而采用间接ELISA检测血清抗SARS病毒抗体,52例患者中30例阳性,阳性率为57.7%。2种方法均阳性的有15例,均阴性的有6例。2种病原学诊断方法检测20例正常人、15例发热非SARS患者和20例SARS密切接触医务人员,结果均为阴性。住院1～13d组(92.9%)巢式RT-PCR基因阳性率明显高于ELISA特异性抗体阳性率(7.1%);住院37～58d组巢式RT-PCR基因阳性率(47.4%)则明显低于ELISA特异性抗体阳性率(94.7%)(P<0.01)。结论痰中SARS病毒基因检测可用于SARS的早期诊断,这对于提前确诊和治疗SARS患者,尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

SARS病毒基因检测结果与患者病情、病程和体液免疫的关系研究

目的:研究严重急性呼吸综合征患者的病情、病程和特异性抗体产生对SARS病毒基因阳性检出率的影响。方法:采用巢式反转录PCR检测健康人,发烧非SARS患者,不同时期和不同病情SARS患者以及存不存在特异性抗体的SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA。结果:巢式RT—PCR检测SARS患者痰标本中的SARS病毒RNA的敏感度为60.0％。6 d～10 d组阳性检出率最高,为100％,高于11 d～25 d组,而11 d～25 d组的阳性检出率又高于>25 d组(P<0.01);病情轻组比病情重组的阳性检出率高(P<0.05);抗体阴性组比抗体阳性组检出率高(P<0.05)。结论:SARS病毒基因检测阳性率在轻病情组比重病情组高,住院时间短组比住院时间长组高,血清特异性抗体阴性组比阳性组高。     

不同动物SARS病毒携带状况的研究

目的通过对与人类生活密切相关的多种野生、驯化和圈养动物携带SARS样病毒状况的研究，比较与野生动物密切接触人群和健康人群SARS病毒感染率，研究探索SARS病毒的来源。方法于2003年5月起在广东等7个省自治区调查并采集动物咽漱液、鼻拭子和肛拭子样本，进行细胞培养、IFA、荧光RT—PCR检测；分析不同动物携带SARS样病毒状况。结果200只动物样本检出10只动物携带SARS样病毒，其中主要是果子狸(9只、阳性率为7．96％)。l740名人员血清的SARS IgG抗体总阳性率为5．06％，其中野生动物销售人员最高(45．45％)结论研究结果支持SARS病毒来源于动物(果子狸)的假设，并推测SARS病毒能从动物传播给人类。     

SARS病原体的检测及其在动物模型鉴定及疫苗评价中的应用

目的:通过RT-PCR及病毒分离等方法，鉴定SARS感染性动物模型是否成立，并对疫苗效果进行评估。方法:选用3周岁的健康SPF级恒河猴8只，分为SARS实验感染动物模型组及疫苗组(Sino 3 SARS灭活疫苗20030904批肌内注射，免疫2次)。经鼻吸入Sino 1 SARS毒株，病毒攻击后7d动物进行安乐死。自病毒攻击后的第一天起每日连续采集动物咽拭子标本，病毒攻击后的第二天、第五天、第七天采集血浆标本。将标本进行病毒分离及RT-PCR检测．结果：模型组动物病毒攻击后第一天至第七天咽拭子RT-PCR检测均为阳性。注射疫苗组动物仅在病毒攻击后第一天咽拭子RT-PCR检测呈阳性。模型组动物血浆RB-PCR检测呈现阳性，疫苗组动物血浆RT-PCR检测均为阴性。病毒分离结果显示仅在模型动物咽拭子标本中分离到病毒，未在疫苗组动物的咽拭子标本分离到病毒．血浆标本中均未分离到病毒．结论：RT-PCR及病毒分离可以及时有效地检测出病毒在体内的复制情况，可作为模型鉴定、疫苗评估及药物筛选的重要手段。     

野生动物肉类及其肉制品中的旋毛虫检疫

随着生态环境的改变，野生动物数量的增多，野生动物的旋毛虫感染率有逐渐增高的趋势。此外，野生动物的旋毛虫病亦有可能传播给户外散养的家猪。近年来国内外均已发生多起因食野生动物肉类引起的人体旋毛虫病爆发，给旋毛虫病的防治带来了新的问题。本概述了国内外野生动物旋毛虫病的流行情况及由野生动物肉类引起的人体旋毛虫病爆发，提出了加强野生动物肉类及其肉制品中旋毛虫检疫的重要性，介绍了野生动物旋毛虫检疫时的采样部位及其肉制品(如咸肉、火腿或香肠等)检疫时的注意事项。     

SARS相关抗肺自身抗体产生机制的初步研究

目的:检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中抗SARS病毒抗体与肺组织的反应性.方法:采用酶联免疫吸附法检测SARS患者恢复期血清中抗SARS病毒抗体,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法,吸附抗SARS病毒抗体中同肺组织反应的SARS相关抗体.结果:与肺组织共同孵育后,抗SARS病毒抗体被部分中和,中和率为13.6％～32.2％.结论:部分抗SARS病毒抗体可以与肺组织反应,SARS病毒抗原同肺组织抗原有部分同源性.机体对SARS病毒抗原和肺组织的交叉免疫性可能是SARS相关抗肺自身抗体产生的原因.     

SARS病毒S1蛋白N端片段在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定

目的:获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白N端部分,研究其与机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制.方法:将编码SARS病毒S1蛋白N端334个氨基酸残基的基因进行克隆,并在原核表达系统中表达,获得了纯化的重组蛋白.利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清,鉴定纯化的重组S1蛋白片段.结果:克隆表达的重组蛋白基因序列与公布的SARS病毒S1蛋白N端的基因序列相同,所表达的重组蛋白相对分子质量约为64 000.3份SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应,在相对分子质量64 000处形成特异性的反应条带,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应.结论:获得的重组蛋白与SARS病毒抗体呈现特异性的反应,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和制备SARS病毒的重组疫苗奠定基础.     

广州某动物市场从业人员SARS-CoV感染状况的调查分析

目的了解某动物市场从业人员SARS—CoV感染状况，初步探讨其影响因素。方法对广州市某动物市场环境卫生状况进行现场观察，并对市场从业人员进行血清学调查和问卷调查。结果调查共获得有效问卷293份，其中男性209例，女性84例。SARS—CoV抗体阳性率为27．3％，接触动物类别和SARS—CoV感染情况有关，各类人员的抗体阳性率由高到低排列依次为：主营野生畜类、市场管理部员工、主营家禽家畜类、主营野生蛇类和主营冷冻食品类。另外环境较差的第二、三通道从业人员SARS—CoV抗体阳性率也较高。结论初步发现经营动物的种类是SARS—CoV感染的重要影响因素，动物市场从业人员SARS—CoV感染与环境因素可能也有关系。     

HIV-1感染的小动物模型

[目的]对感染SARS-CoV的恒河猴进行病毒、血清学等指标检测及研究,确定模型动物成功感染,并为SARS发病机制,疫苗评价,药物筛选确定参考指标。[方法]SARSCo-V经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第1天开始到5、7、10、15、20、30和60天分别安乐死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和抗体测定。[结果]用巢式RT-PCR在感染后每天提取的咽拭子标本中检测SARS-CoV的RNA,以细胞培养冠状病毒为阳性对照,以正常恒河猴咽拭子为阴性对照,在8只动物病毒接种第5天开始可检测到大小为797bp的目的条带,阳性检出最长可持续到第15天。进一步用病毒分离实验对PCR结果进行确证,8只动物中的5只恒河猴接种5天的咽拭子标本中,经Vero细胞培养,细胞产生了典型细胞病变(CPE),提示SARS冠状病毒能感染恒河猴并有病毒的复制和排毒。IFA方法证实为SRAS-CoV抗原存在。SARS-CoV感染恒河猴后,可以检测出免疫反应。在SARS冠状病毒接种前和接种后第5、8、11、15、19、23、26、30、34、每隔4-7天以及安乐死时采血,制备血清测定抗体,8只恒河猴接种病毒前均血清中SARS冠状病毒特异性抗体IgG为阴性,10天后安乐处死的5只感染猴在11-15天开始,至安乐死时,均为阳性。IgG阳性的5只恒河猴均有一定的中和抗体产生,且对SARS病毒感染细胞有一定的保护性。感染SARS病毒猴后与正常猴比较,其细胞杀伤效应明显增强。感染SARS-CoV的恒河猴不仅出现与SARS患者类似的临床和病理学改变,也在一定时期内排毒,出现特异免疫反应,这些指标均可作为药物筛选、疫苗评价等方面的重要参数。     

严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体

目的：建立特异性的检测严重急性呼吸综合征(SARS)相关抗体的血清学方法。方法：制备SARS患者肺组织包被抗原，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SARS患者血清中特异性抗体。结果：SARS患者血清中存在SARS相关的抗人肺组织抗体，其阳性率达92．86％(26／28)，正常献血员为11．43％(12／105)，统计学分析表明，SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。结论：SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程；检测该抗体可能有助于SARS的早期诊断。     

树鼩感染人乙肝病毒动物模型研究中的非特异性反应

目的：观察树是否可成为感染人ＨＢＶ的动物模型。方法：应用免疫组化及原位杂交技术，对实验组及对照组树肝组织进行研究分析。结果：应用羊抗－ＨＢｓ多抗检测树肝组织中的ＨＢｓＡｇ时，出现假阳性反应，阳性物为非目的抗原，应用生物素标记的ＨＢＶＤＮＡ探针进行肝组织原位杂交时，出现非特异性的显色反应，结论：提示在动物模型实验中，应设立严格的对照实验和应用不同反应系统进行校对考核。     

Lessons from severe acute respiratory syndrome (SARS): implications for infection control

Severe acute respiratory syndrome (SARS), the first global epidemic in the 21st century, affected over 8500 people in approximately 30 countries . With a crude mortality of 9%, its cause was quickly identified as a novel coronavirus that jumped species from animals to man. The SARS coronavirus epidemic, which began in the Fall of 2002, was related to the exotic food industry in southern China, initially involving disproportionate numbers of animal handlers, chefs, and caterers. Subsequently, person-to-person transmission spawned the outbreak. What distinguished this illness clinically was the fact that approximately half of the victims were health care workers , infected while caring for recognized or unrecognized patients with SARS. There are many curiosities and uncertainties surrounding the epidemic of SARS with lessons that may be useful to the community of infectious diseases physicians, especially when looking ahead to the next epidemic. Herein we relate our perspectives on useful lessons derived from a review of the SARS epidemic.