活血化瘀注射液(HHI-Ⅰ)对TNF-α诱发大鼠肺微血管内皮细胞黏附分子mRNA表达的影响

[目的]从调节白细胞内皮细胞过度黏附角度研究活血化瘀中药的作用机制.[方法]体外培养肺微血管内皮细胞,RT-PCR方法观察活血化瘀注射液对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱发的体外培养大鼠肺微血管内皮细胞E-选择素、P-选择素、细胞间黏附分子ICAM-1 mRNA表达的影响.[结果]肺微血管内皮细胞与含TNF-α培养基共同孵育后,可显著增加内皮细胞E-选择素、P-选择素、ICAM-1 mRNA表达,在培养基中加入活血化瘀注射液含药血清后,则内皮细胞E-选择素、P-选择素、ICAM-1 mRNA过度表达被明显抑制.[结论]抑制内皮细胞E-选择素、P-选择素、ICAM-1 mRNA过度表达是活血化瘀重要的作用机制之一.     

活血化瘀注射液对急性重型胰腺炎大鼠肺内皮细胞粘附分子表达的影响

目的 研究急性重型胰腺炎（SAP）大鼠胰腺、肺内皮细胞粘附分子ICAM-1、P-选择素、E-选择素的动态变化,并观察活血化瘀注射液（HHI-I）的作用。方法 应用胆胰管内逆行注射牛磺酸钠的方法引起大鼠SAP。将实验动物随机分为假手术对照组、SAP模型组、SAP HHI-I组、SAP 复方丹参注射液组,利用免疫组织化学方法观察了SAP大鼠1,3,6,12,24h胰腺、=肺内皮细胞粘附分子ICAM-1、P-选择素、E-选择素的表达情况。结果 SAP后肺ICAM-1、P-选择素、E-选择素表达明显增多,HHI-I能够有效抑制粘附分子的过度表达。结论 粘附分子在SAP发展过程中起重要作用。HHI-I通过抑制粘附分子的过度表达,从而影响白细胞内皮细胞的相互作用。减少白细胞在组织募集,发挥其对胰外脏器的保护作用。     

山楂叶原花青素对肿瘤坏死因子-α诱导人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1和E-选择素过表达的影响

目的观察山楂叶原花青素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和E-选择素过表达的影响,探讨其抗炎作用的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测ICAM-1和E-选择素的表达。结果山楂叶原花青素浓度≤200 mg/L时,对细胞活力无明显影响;模型组人脐静脉内皮细胞ICAM-1和E-选择素表达较正常组显著升高,10、20、30、40、50 mg/L山楂叶原花青素浓度依赖地抑制ICAM-1和E-选择素的表达升高,其中40、50 mg/L组较模型组差异有统计学意义。结论山楂叶原花青素能够抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞ICAM-1和E-选择素的过表达,这可能与其抗炎作用相关。     

尿酸利仙含药血清对TNF-α诱导的人血管内皮细胞ICAM-1基因表达的影响

目的：观察不同浓度肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在不同时闻对人血管内皮细胞（Endothelial cell of vessels，ECV）中细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达的影响及中药尿酸利仙（含药血清）的干预作用。方法：①体外培养人血管内皮细胞，分别用不同浓度（12．5、25、50μg／mL）的TNF-α刺激，并用25μg／mL的TNF-α分别孵育细胞8、16、24、48h；②用25μg/mL的TNF-α孵育细胞16h，同时用含不同浓度（2．5％、5％、10％）尿酸利仙含药血清的培养液进行干预。用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术测定血管内皮细胞ICAM-1的mRNA表达。结果：①低、中、高浓度TNF-α刺激均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达，且体现了一定的浓度梯度关系，但刺激组间无显著性差异。②25μg／mL的TNF-α在8h、16h、24h和48h均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达，各干预组间无显著性差异。③低、中、高浓度的尿酸利仙含药血清干预均可显著降低ICAM-1 mRNA的表达（P≤0．01），并以中浓度尿酸利仙含药血清作用最为显著。结论：TNF-α能显著上调内皮细胞表面黏附分子ICAM-1的mRNA表达，而尿酸利仙含药血清抑制病理条件下ICAM-1基因水平的过量表达，可能是其减轻TNF-α诱导的人血管内皮细胞炎症损伤的机制之一。     

灯盏细辛总咖啡酸酯对TNF-α诱导脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:研究灯盏细辛中总咖啡酸酯(total Caffeoyl quinic acid ester,Caf)对离体培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell,BMEC)细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)基因与蛋白表达的影响,初步探讨Caf抗脑缺血炎症损伤的机制。方法:采用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)建立离体培养的大鼠BMEC炎症损伤模型,选用25μg/mL Caf处理内皮细胞,利用Real time RT-PCR方法检测实验各组ICAM-1mRNA表达,流式细胞仪测定实验各组ICAM-1蛋白荧光强度。结果:Caf可以下调TNF-α诱导的内皮细胞ICAM-1mRNA高表达,并抑制TNF-α诱导的内皮细胞膜ICAM-1蛋白高表达。结论:Caf可以降低由TNF-α诱导的内皮细胞过度表达ICAM-1,可能是其发挥抗脑缺血炎症损伤的部分机制。     

尿酸利仙含药血清对TNF-α诱导的人血管内皮细胞ICAM-1基因表达的影响

目的:观察不同浓度肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在不同时间对人血管内皮细胞(Endothelial cell ofvessels,ECV)中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达的影响及中药尿酸利仙(含药血清)的干预作用。方法:①体外培养人血管内皮细胞,分别用不同浓度(12.5、25、50μg/mL)的TNF-α刺激,并用25μg/mL的TNF-α分别孵育细胞8、16、24、48h;②用25μg/mL的TNF-α孵育细胞16h,同时用含不同浓度(2.5%、5%、10%)尿酸利仙含药血清的培养液进行干预。用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定血管内皮细胞ICAM-1的mRNA表达。结果:①低、中、高浓度TNF-α刺激均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达,且体现了一定的浓度梯度关系,但刺激组间无显著性差异。②25μg/mL的TNF-α在8h、16 h、24 h和48 h均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达,各干预组间无显著性差异。③低、中、高浓度的尿酸利仙含药血清干预均可显著降低ICAM-1 mRNA的表达(P≤0.01),并以中浓度尿酸利仙含药血清作用最为显著。结论:TNF-α能显著上调内皮细胞表面黏附分子ICAM-1的mRNA表达,而尿酸利仙含药血清抑制病理条件下ICAM-1基因水平的过量表达,可能是其减轻TNF-α诱导的人血管内皮细胞炎症损伤的机制之一。     

实验性大鼠肺血栓栓塞症中ICAM-1、P-选择素的变化及红花注射液对其的影响

目的动态观察红花注射液对大鼠肺血栓栓塞症（PTE）中血管内皮细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和P-选择素的影响.方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,用颈静脉注入自体血凝块制备动物模型.治疗组在模型建立后立即自鼠尾静脉注射红花注射液2 ml/kg,每天1次,共5天.各组大鼠分别于栓塞后1、3、24、72、120 h处死,行病理观察;采用免疫组化和原位杂交的方法检测肺血管内皮ICAM-1和P选择素蛋白及mRNA的表达水平.结果与正常组比较,模型组大鼠肺栓塞后病理可见肺动脉血栓形成,炎性反应明显;肺血管内皮ICAM-1蛋白及mRNA表达在栓塞后3 h开始增高（P＜0.01）,而P-选择素蛋白及mRNA表达在栓塞后1 h开始增高（P＜0.01）.治疗组大鼠病理损伤减轻,肺血管内皮ICAM-1和P-选择素水平均下降（P＜0.01）.结论红花注射液可减轻大鼠PTE时的肺损伤,这种作用可能是通过下调血管内皮上的黏附分子来实现的.     

新清开灵注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤微血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的:观察培养的大鼠脑缺血再灌注损伤微血管内皮细胞体外黏附分子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的变化,探讨新清开灵注射液阻抑脑缺血炎症反应的作用途径。方法:采用分离脑微血管段并消化的方法体外培养大鼠脑微血管内皮细胞,氧糖剥夺法(Kreb液,95%N2 5%CO2)模拟缺血再灌注损伤,分别采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法半定量检测黏附分子ICAM-1、VCAM-1的蛋白mRNA表达和mRNA转录水平。结果:与正常组比较,模型组ICAM-1、VCAM-1的蛋白和mRNA表达均明显增高(P<0.05);与模型组比较,清开灵组显著降低其蛋白表达和VCAM-1 mRNA转录水平(P<0.05);新清开灵注射液对ICAM-1和VCAM-1的蛋白和mRNA表达都有明显的抑制作用(P<0.05)。结论:新清开灵注射液通过干预黏附分子表达而阻抑脑缺血损伤炎症反应。     

脑缺血-再灌注相关细胞因子表达的TNF-α损伤机制及清开灵的作用

目的：探讨缺血-再灌注大鼠相关细胞因子的TNF-α损伤机制以及清开灵的作用特征。方法：健康雄性Wistar大鼠,利用双侧颈总动脉夹闭的方法复制大鼠前脑缺血-再灌注模型,分别给予清开灵注射液、TNF-α抗体及该抗体与清开灵共用。选择再灌注24h和72h两个时间点,检测血清TNF-α、血清可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、血清P-选择素（Pselectin）含量以及脑组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达量。结果：清开灵具有降低升高的血清TNF-α含量的趋势,而TNF-α抗体的作用随时间延长而增强;清开灵和TNF-α抗体均能够有效地降低外周血sICAM-1水平、脑组织ICAM-1含量和血清P-selectin含量,阻断TNF-α后更明显,而且使清开灵的作用更为显著。结论：脑缺血-再灌注导致的损伤与微血管内外炎性细胞因子的毒性损害有密切关系,并与黏附分子导致血中白细胞与内皮细胞的黏附有关。     

解毒活血通络中药复方含药血清对人脐静脉内皮细胞LOX-1、TNF-α、ICAM-1表达的影响

目的:研究解毒活血通络中药复方防治动脉粥样硬化的作用机制及其效应靶点。方法:选取新西兰大耳白兔18只,随机分为3组,分别以生理盐水和解毒活血通络中药复方、阿托伐他汀连续灌胃7d,心脏采血,分离血清;体外培养人脐静脉内皮细胞,用脂多糖(LPS)刺激后,用含药血清干预,收集细胞,用Real-time PCR方法和Western Blot方法分别检测凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)mRNA和蛋白表达、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达。结果:与空白对照组比较,用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起LOX-1 mRNA和蛋白、TNF-α、ICAM-1 mRNA的高表达(P<0.01),与模型组比较,用中药含药血清干预,显著抑制LOX-1mRNA和蛋白、TNF-α、ICAM-1 mRNA的高表达(P<0.01,P<0.05)。结论:解毒活血通络中药复方对LPS刺激后的人脐静脉内皮细胞具有保护作用,其机制与解毒活血通络中药复方对LOX-1、TNF-α和ICAM-1表达有抑制作用,减少单核细胞与血管内皮细胞黏附有关。     

补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法观察补阳还五汤不同剂量对血瘀证大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和诱生型-氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。结果模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS高表达，补阳还五汤能减少造模动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOs的表达，而且随着药物剂量的减少，各分子表达呈递增趋势，具有明显的量效关系。结论补阳还五汤能显著降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子高表达，且量效关系明显。     

温脉通对高脂血清诱导的单核细胞与血管内皮细胞黏附的影响

目的研究温脉通及其拆方对高脂血清诱导的单核细胞与血管内皮细胞黏附及黏附分子表达的影响,以探讨温脉通治疗早期动脉硬化闭塞症（ASO）的机制。方法常规制备温脉通全方、温经益气拆方、活血通脉拆方含药血清和高脂血清,采用虎红染色法检测药物血清对高脂诱导的人脐静脉内皮细胞（Hu—VEC）和单核细胞株（THP-1）黏附的作用;用细胞ELISA法检测HUVEC表面细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、P-选择素（P-selectin）的表达。结果温脉通能抑制高脂诱导的HUVEC与THP一1的黏附,并下调HUVEC表面ICAM-1、VCAM-1、P-selectin的表达;两拆方组对不同的黏附分子有下调作用。结论下调血管内皮细胞黏附分子的表达,减少单核细胞与内皮细胞的黏附,从而抑制单核细胞迁移至血管内膜形成泡沫细胞,抑制动脉粥样硬化（AS）的形成,可能是温脉通治疗ASO的机制之一。     

丹酚酸A对缺氧/复氧损伤条件下脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

[目的]通过对观察丹酚酸A对缺氧/复氧(H/R)损伤条件下脑微血管内皮细胞细胞间黏附因子-1(CAM-1)表达的影响,探讨丹酚酸A对缺血再灌注急性期脑保护作用机制.[方法]培养BMEC,丹酚酸A预处理20 h后制作(H/R)/模型,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测BMEC细胞间黏附因子-1 ICAM-1 mRNA的表达.以尼莫地平作为阳性对照药.[结果]模型组与空白对照组相比ICAM-1 mRNA表达明显升高(P<0.01).丹酚酸A组ICAM-1 mRNA表达低于模型组(P<0.05).[结论]丹酚酸A可降低H/R损伤条件下BMEC ICAM-1 mRNA表达的影响,提示阻抑粒细胞黏附作用是其脑保护作用机制之一.     

化瘀解毒汤对脓毒血症APACHEⅡ评分、ISTH DIC评分及外周血树突状细胞表面物质表达水平的影响

目的探讨化瘀解毒汤对脓毒血症患者APACHEⅡ评分、ISTH DIC评分及外周血树突状细胞表面物质表达水平的影响。方法将66例脓毒症患者随机分为对照组和化瘀解毒组,每组33例。对照组给予抗感染、补充血容量、积极治疗原发疾病、吸氧等综合治疗,化瘀解毒组在上述基础上加用化瘀解毒汤治疗,每日1剂,持续治疗2周。检测血清炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、降钙素原(PCT)]水平变化,应用急性生理与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、DIC评分评估脓毒症患者病情严重程度,应用流式细胞仪分析树突状细胞相关表面分子CD80、CD83、CD86表达情况,比较临床疗效。结果与治疗前比较,两组血清IL-6、TNF-α、PCT水平均降低(P<0.01),APACHEⅡ评分、ISTH DIC评分均降低(P<0.01),CD80、CD86水平均降低(P<0.01),CD83水平无差异(P>0.05);与对照组比较,化瘀解毒组血清IL-6、TNF-α、PCT水平均较低(P<0.01),APACHEⅡ评分、ISTH DIC评分均较低(P<0.01),CD80、CD86水平均较低(P<0.01),总有效率较高(P<0.01)。结论化瘀解毒汤辅助治疗脓毒血症疗效显著,可有效降低APACHEⅡ评分、ISTH DIC评分,可能与调节外周血树突状细胞表面物质表达有关。     

鲜姜有效部位对单核细胞趋化蛋白和黏附分子表达的影响

目的：研究鲜姜有效部位对离体培养的血管内皮细胞与单核细胞的黏附力及对单核细胞趋化蛋白和黏附分子表达的影响,探讨其保护血管内皮细胞的作用机制。方法：采用过氧化氢建立离体培养的血管内皮细胞(ECV-304)氧化应激损伤模型,取健康大鼠每日灌服不同剂量的鲜姜有效部位(200,400,800 mg·k^g-1)或阳性对照药洛伐他汀(40 mg·kg^-1),取含药血清作为受试药物,用孟加拉玫红染色法测定单核细胞与内皮细胞的黏附力；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)以及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的mRNA表达水平；酶联免疫吸附法(ELISA)测定MCP-1蛋白表达水平。结果：鲜姜有效部位能够显著降低内皮细胞与单核细胞的黏附力,并减低受损的血管内皮细胞表达ICAM-1,VCAM-1及MCP-1。结论：鲜姜有效部位可以降低由氧化损伤所引起的ECV-304细胞过度表达ICAM-1,VCAM-1及MCP-1,阻止单核细胞向内皮细胞黏附,从而保护血管内皮细胞免受损伤。     

CML-1 inhibits TNF-alpha-induced NF-kappaB activation and adhesion molecule expression in endothelial cells through inhibition of IkBalpha kinase

CML-1 is a purified extract from a mixture of 13 oriental herbs (Achyranthis Radix, Angelicae Gigantis Radix, Cinnamomi Cortex Spissus, Eucommiae Cortex, Glycyrrhizae Radix, Hoelen, Lycii Fructus, Paeoniae Radix, Rehmanniae Radix Preparata and Atractylodis Rhizoma, Zingiberis Rhizoma, Zizyphi Semen, Acori Graminei Rhizoma) that have been widely used for the treatment of inflammatory diseases in Asia. Since our previous study has been shown to have the anti-inflammatory activity of CML-1 in vivo and the upregulation of adhesion molecules in response to numerous inducing factors is associated with inflammation, this study examined the effect of CML-1 on the expression of adhesion molecules induced by TNF-alpha in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Preincubation of HUVECs for 20h with CML-1 (1-100mug/ml) dose-dependently inhibited TNF-alpha (10ng/ml)-induced adhesion of THP-1 monocytic cells, as well as mRNA and protein expression of E-selectin, vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1). CML-1 was also shown to inhibit NK-kB activation induced by TNF-alpha. Furthermore, CML-1 inhibited TNF-alpha-induced IkB kinase activation, subsequent degradation of IkBalpha, and nuclear translocation of NK-kB. Evidence presented in this report demonstrated that CML-1 inhibited the adhesive capacity of HUVEC and the TNF-alpha-mediated induction of E-selectin, ICAM-1 and VCAM-1 in HUVEC by inhibiting the IkB/NF-kB signaling pathway at the level of IkB kinase, which may explain the ability of CML-1 to suppress inflammation and modulate the immune response.     

Effect of yishen huayu fang on kidney tissue E-cadherin expression in unilateral ureter ligation in rats

[OBJECTIVE]:To observe E-calcium sticky protein (E-cadherin) expression in kidney tissues in a rat model of unilateral ureter ligation and the effect of Yishen Huayu Fang (formula oftonifying the kidney and dissolving accumulated blood stasis) on the expression.[METHODS]:A total of 150 clean grade male rats were randomly divided into a control group,model group,low-dose Yishen Huayu Fang group (low-dose group),high-dose Yishen Huayu Fang group (high-dose group),and Lotensin group.A renal fibrosis model was established with unilateral ureteral obstruction (UUO).Pathological changes of rat renal tissue were observed with light microscopy on days 3,7,14,21,and 28 after UUO.Changes in kidney tissue E-cadherin expression were observed with immunohistochemistry.[RESULTS]:Three days after modeling,kidney edema appeared followed by gradual inflammatory cell infiltration,and part of the small tubules disappeared while the renal cortex thinned.Meanwhile,the E-cadherin expression level dropped,which was negatively correlated with the obstruction time.After intervention,E-cadherin expression was increased in all treatment groups (P＜0.01 or P＜0.05),while there were no significant differences between the high-dose and Lotensin groups.[CONCLUSION]:Yishen Huayu Fang delays the renal fibrosis process by promoting E-cadherin expression in renal tissues and reducing extracellular matrix deposition.     

中医药治疗银屑病的相关分子机制研究进展

银屑病是常见的难治性皮肤科疾病,对患者身心健康带来极大的影响。中医药治疗银屑病具有疗效好,副作用低的作用特点。文章就近年来中医药临床治疗银屑病所涉及的分子作用机制进行总结,分别从中医药对银屑病患者表皮细胞作用的分子机制、对免疫系统的细胞及分子作用的影响、对血循环及血流变的影响、对黏附分子、金属蛋白酶及其他分子表达的影响等方面进行综述。     

Canscora decussata (Roxb.) Schult (Gentianaceae) inhibits LPS-induced expression of ICAM-1 and E-selectin on endothelial cells and carageenan-induced paw-edema in rats

Inflammation is characterized pathologically by an increased supply of blood to the affected area, vasodilation, and infiltration of phagocytic, monocytic, and polymorphonuclear cells into the site of inflammation. The infiltration of leukocytes is in part regulated by the increased expression of cell adhesion molecules viz. ICAM-1 and E-selectin on endothelial cells. We investigated the effect of ethanolic extract prepared from plant Canscora decussata on expression of ICAM-1 and E-selectin on endothelial cells. Our results demonstrated that treatment of human endothelial cells with the extract down-regulated the LPS-induced expression of ICAM-1 and E-selectin. To study further the anti-inflammatory activity of the extract, we evaluated its effect in a rat model of carageenan-induced paw-edema. Our results showed that the extract was able to reduce the edema formation in a dose-dependent manner. These results, therefore, indicate that Canscora decussata extract could be useful towards developing effective anti-inflammatory agent(s) in the future.     

复圣散对血管内皮细胞活性及其与中性粒细胞粘附率的影响

探讨中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附特性的影响因素，以及中药复圣散的干预作用。方法；以培养人脐静脉内皮细胞作为靶细胞，观察在高脂，高糖，肿瘤坏死因子及缺氧再氧化条件下，对培养的ＶＥＣ活性以及ＰＭＮ与ＶＥＣ相互粘附的影响。结果：高脂，高糖，ＴＮＦ－α和缺氧再氧化等均可抑制ＶＥＣ活性，并显著增强ＰＭＮ与ＶＥＣ的相互粘附作用，其粘附率正常对照组为１００％，高脂组则为１６７．７％，缺氧再氧化组为１５１．４％