人肝癌及肝硬变中IGF－2及HBxAg表达的对比研究

对６０例肝细胞癌、癌旁肝组织和４７例肝硬变石蜡切片进行ＩＧＦ－２和ＨＢｘＡｇ免疫组化染色。结果表明，在ＨＢｘＡｇ阳性的肝癌和肝硬变中ＩＧＦ－２阳性率分别为１００％（３２／３２例）和９４．６％（３５／３７例），而ＨＢｘＡｇ阴性组分别为８２．１％（２３／２８例）和６０％（６／１０例）。ＩＧＦ－２在肝癌中的阳性强度明显高于癌旁肝和肝硬变。ＩＧＦ－２的分布形态有：（１）胞浆包涵体样、（２）全胞浆、（３）核内分布三种。癌旁肝及肝硬变中可见小多角细胞（ＳＰＬＣ）呈ＩＧＦ－２和ＨＢｘＡｇ阳性。对ＩＧＦ－２在肝癌、癌旁肝和肝硬变中表达的意义及其与ＨＢｘＡｇ的关系以及ＳＰＬＣ的性质进行了讨论。     

树实验肝癌发生过程中IGF-Ⅱ、HBxAg、p21和p53蛋白的表达

目的：探讨ＨＢＶ与ＡＦＢ１协同致肝癌作用机制。方法：用免疫组化观察５３只树鼠句肝及肝癌组织ＩＧＦ－Ⅱ、ＨＢｘＡｇ、ｐ２１及ｐ５３蛋白表达。结果：接受ＨＢＶ和ＡＦＢ１的树鼠句肝癌诱发率和ＩＧＦ－Ⅱ、ＨＢｘＡｇ、ｐ２１检出率分别为５２．９％、８２．４％、５２．９％及２９．４％；只感染ＨＢＶ的分别为１１．１％、２２．２％、１１．１％和１１．１％；仅摄入ＡＦＢ１的分别为１５．８％、２６．３％及１５．８％（ｐ２１）；空白对照无肝癌及上述基因蛋白表达。带瘤肝ＩＧＦ－Ⅱ、ＨＢｘＡｇ及ｐ２１检出率均显著高于无瘤者，而表达这３种基因蛋白的动物肝癌发生率也均明显高于阴性者。突变的ｐ５３蛋白表达仅见于７例（５８．３％）中低分化的肝癌。结论：ＨＢＶ与ＡＦＢ１共同激发这些基因的异常表达可能是其协同致肝癌机制之一。ＩＧＦ－Ⅱ过表达可能作为癌变早期信号应引起重视     

肝硬变内HBV DNA及其五种抗原的表达及意义

取２２５例人肝硬变活检组织石蜡切片，检测了ＨＢＶＤＮＡ及其５种抗原。分别用免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＢｘＡｇ、ｐｒｅ－Ｓ＿１和ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原；用ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ；用原位杂交方法检测ＨＢＶＤＮＡ；用免疫组化、原位杂交双标记方法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ或ＨＢｃＡｇ。结果显示，阳性检出率ＨＢｓＡｇ为７０．０％（１２８／１８３例），ｐｒｅ－Ｓ＿１抗原为６４．４％（８５／１３２例）、ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原为６１．４％（８１／１３２例），ＨＢｘＡｇ为７５．３％（１１３／１５０例），ＨＢｃＡｇ为２２．４％（３９／１７４例），ＨＢＶＤＮＡ为６２．４％（５８／９３例）。双标阳性检出率ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ为３７．３％（１９／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｘ－Ａｇ为８６．３％（４４／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｃＡｇ为３９．２％（２０／５１例）。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶ５种抗原阳性病例中８０％以上均伴有肝细胞不典型增生。这一结果表明，在我国肝硬变的发生发展与ＨＢＶ慢性感染有密切的关系。     

c－erbB－2蛋白和表皮生长因子受体在肝脏病变中的表达

对１８４例乙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）及２９例正常肝组织的标本作了ＡＢＣ法染色，观察其ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达情况。３６％（４８／１３４）的慢性肝炎、肝硬变和ＨＣＣ组织中有ＥＧＦＲ表达，主要定位于血窦内皮。良、恶性病变肝组织之间在ＥＧＦＲ表达强度上无显著差别，提示ＥＧＦＲ可能与慢性肝脏病变中血窦内皮的增生有关。在正常肝，仅少数标本（５／２９）中见到ｃ－ｅｒｂＢ－２微弱表达；在ＨＢＶ相关的慢性肝脏病变，所有标本中均检测到ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白，主要定位于肝小多角细胞（ＳＰＬＣ）、小细胞性不典型增生（ＳＣＤ）及小管状化生（ＤＭ）的肝细胞；ＨＣＣ细胞中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性较弱。这提示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的活化与人ＨＣＣ发生有关。其作用机制可能是促进ＳＰＬＣ向ＳＣＤ的转化及促进ＳＣＤ的进展。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ＨＢｘＡｇ表达的密切关联提示这种原癌基因的活化可能也与ＨＢＶＸ基因有关。     

树Qu实验肝癌发生过程中IGF—Ⅲ,HBxAg,p21和p …

目的：探讨ＨＢＶ与ＡＦＢ１协同致肝癌作用机制，方法；用免疫组化观察５３只树Ｑｕ肝及肝癌组织ＩＧＦ－Ⅱ，ＨＢｘＡｇｐ２１及ｐ５３蛋白表达，结果接受ＨＢＶ和ＡＦＢ１的树Ｑｕ肝癌诱发率和ＩＧＦ－Ⅱ，ＨＢｘＡｇ，ｐ２１检出率分别为５２．９％，８２．４％，５２．９％及２９．４％只感染ＨＢＶ的分别为１１．１％２２．２％，１１．１％和１１．１％，仅摄入ＡＦＢ１的分别为１５．８％，２６．３％及１５．８％，（ｐ２１     

应用聚合酶链反应技术检测肝组织中的HBV－DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对４２例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行检测，并与乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的免疫组织化学及血清学检测进行比较，ＨＢＶ－ＰＣＲ阳性率为７３．８％，高于组织及血清ＨＢｓＡｇ阳性率（分别为５９．５％和５０．０％）。３例病理形态呈肝炎改变，而血清ＨＢｓＡｇ（─）的肝组织中有２例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示ＰＣＲ的高度敏感性和准确性。８３．３％的门脉性肝硬变和８７．５％的肝细胞癌组织中ＨＢＶ－ＰＣＲ呈阳性，进一步证实了上述两病与ＨＢＶ的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者ＨＢＶ感染率较高，ＨＢＶ－ＤＮＡ及组织ＨＢｓＡｇ阳性比例各为６／９和４／８。     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

广西地区肝癌中c—myc和N—ras癌基因的原位表达？…

目的：分析了广西地区地癌中ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达与乙型肝病毒（ＨＢＶ）感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法：应用原位ｃＤＮＡ－ＲＮＡ杂交方法和免疫组化方法检测３１例广西地区肝癌和相应癌旁组织中ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ、Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ。结果：肝癌及癌旁均有较高的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达。检出率都在８５％以上，其在不同发化程度肝癌中的表达差异无显著性意义     

广西地区肝癌中c-myc和N-ras癌基因的原位表达与HBV感染的研究

目的：分析广西地区肝癌中ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法：应用原位ｃＤＮＡ－ＲＮＡ杂交方法和免疫组化方法检测３１例广西地区肝癌和相应癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ、Ｎ－ｒａｓｍＲＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ。结果：肝癌及癌旁均有较高的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因的表达。检出率都在８５％以上，其在不同分化程度肝癌中的表达差异无显著性意义：ＨＢｓＡｇ和ＨＢｘＡｇ的检出率分别为８７．０９％和７９．３１％。癌基因的表达与ＨＢｓＡｇ，ＨＢｘＡｇ的检出呈平行的状态。结论：ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ在广西地区肝癌的形成和保持恶性表型中有协同作用。ＨＢｘＡｇ可能有激活ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ癌基因的作用     

人工细胞抗高血压因子对人脐静脉VSMC胞浆及核内Ca^2＋水平的影响

采实验用Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ染色在激光扫描共聚焦显微镜下观察了红细胞抗高血压因子（ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ ｆａｃｔｏｒ,ＡＨＦ）对人脐静脉ＶＳＭＣ胞浆（〗Ｃａ＾２＋〖）及核内（〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）游离钙离了瓣影响。结果表明：ＡＨＦ（１０＾－４ｇ／ｍＬ）明显抑制Ｂａｙ ｋ８６４４（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）ＫＣｌ（６０ｍｍｏｌ／Ｌ）,ＡｎｇⅡ（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）及ＩＰ３（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）     

间隙连接Cx32 mRNA、Cx43 mRNA及其蛋白产物在肝细胞肝癌中的表达

目的：探讨间隙连接基因Ｃｘ３２ｍＲＮＡ、Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物在肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）发生的重要意义。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法、原位杂交和流式细胞仪分析技术，研究６１例ＨＣＣ、１４例正常肝组织以及肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１、正常肝细胞系ＱＺＧ中，Ｃｘ３２ｍＲＮＡ、Ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达规律。结果：Ｃｘ３２蛋白在ＨＣＣⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为５５．６％、４２．１％、１８．２％和９２．９％；Ｃｘ３２蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为１．９％、１．７％和９９．０％。Ｃｘ４３蛋白在ＨＣＣⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和正常肝组织中的阳性率分别为４４．４％、２６．３％、１２．１％和７８．６％。Ｃｘ４３蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为７．３％、２．３％和９９．１％。Ｃｘ３２、Ｃｘ４３在ＨＣＣ各级和正常肝组织中差异有显著性（Ｐ＜０．０１），在肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ－７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ中阳性细胞计数率差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。原位杂交显示，Ｃｘ３２ｍＲＮＡ在ＨＣＣⅠ、     

中效价乙型肝炎免疫球蛋白与乙型肝炎疫苗合用阻断母婴传播的效果

用ＲＰＨＡ及ＥＩＡ法筛ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性孕妇，其新生儿分两组，以６０ＩＵ／ｍｌ１针免疫球蛋白（ＨＢＩｇ）加３针１０μｇ乙型肝炎疫苗为实验组，于出生２４小时内分别在左右上臂三角肌内接种１支ＨＢＩｇ和１支乙肝疫苗，１、６个月时各接种１支１０μｇ乙肝疫苗，用同剂量、同批号、同方法接种乙型肝炎疫苗３针为对照组。均于出生后１、６、９个月采静脉血进行血清学检测。结果显示，免后６、９个月对照组和实验组的ＨＢｓＡｇ阳转率分别为７．５％、５．３％。保护率为９０．４％和９３．２％，达到３０μｇ疫苗加２００ＩＵ／ｍｌＨＢＩｇ免疫局６个月的保护率（７６．５％～９２．２％）。两组ＨＢｓＡｇ阳转率、保护率、Ｓ／Ｎ值ＧＭＴ的差异非常显著，ｘ２＝７．５２，Ｐ＜０．０１。表明中效价ＨＢＩｇ与乙肝疫苗共同应用，对主动免疫应答无抑制现象。     

广西肝癌高低发区p53基因突变热点的对比研究

目的：研究广西不同地区肝细胞癌（ＨＣＣ）ｐ５３基因２４９密码子（ｃｄ２４９）的突变热点与黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）污染及ＨＢＶ感染的关系。方法：用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测６２例石蜡包埋ＨＣＣ组织中上述基因突变，免疫组化染色Ｓ－Ｐ法检测癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ表达。结果：广西ＨＣＣ高发区及低发区病例ｐ５３基因ｃｄ２４９的突变频率分别为６９．２％及２０％（Ｐ＜０．０１）。癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ的阳性率为８１％及１００％（Ｐ＞０．０５）。ｐ５３基因突变热点与ＡＦＢ１严重污染及ＨＣＣ高发有密切关系，而与ＨＢＶ感染无关。结论：ｐ５３基因突变热点的出现具有分子流行病学意义。ｐ５３热点高频率出现表明了当地ＡＦＢ１的严重污染及ＨＣＣ发生的主要地区性因素。     

c—erbB—2蛋白和HBsAg在肝细胞癌与癌旁组织中的表达及相互关系

ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和ＨＢｓＡｇ在肝细胞癌与癌旁组织中的表达及相互关系程瑞雪冯德云沈明颜亚辉一、材料与方法取我校附属湘雅医院外科手术肝癌（ＨＣＣ）标本４０例，均附有癌旁组织；尸检正常肝组织１０例。所有标本经１０％福马林固定，石蜡包埋，５μｍ厚连续切片...     

c—erbB—2蛋白和表皮生长因子受体在肝脏病变中的表达

对１８４例乙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌及２９例正常肝组织的标本作了ＡＢＣ法染色，观察基ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和表皮生长因子受体的表达情况。３６％（４８／１３４）的慢性肝炎、肝硬变和ＨＣＣ组织中有ＥＧＦＲ表达，主要定位于血窦内皮。良、恶性病变肝组织之间在ＥＧＦＲ表达强度上无显著差别。提示ＥＧＦＲ可能与慢性肝脏闰变中血窦内皮的增生有关。     

c─erbB─2、ras p21及p53在大肠癌表达的免疫组化研究

对４８例大肠癌连续切片进行ｃ─ｅｒｂＢ─２、ｒａｓｐ２１及ｐ５３３种癌相关基因产物的免疫组化ＡＢＣ法及ＡＰＡＡＰ－ＩＧＳＳ双重标记研究，结果表明：（１）癌相关基因ｃ─ｅｒｂＢ─２、ｒａｓｐ２１和ｐ５３阳性表达率在癌组织分别为５０．２％（２５／４８）、４３．８％（２１／４８）和５４．２％（２６／４８）；癌旁粘膜分别为２５％（１２／４８）、１８．８（９／４８）和２０．８％（１０／４８）；而在＂正常＂结肠粘膜则分别为１２．５％（６／４８）、６．３％（３／４８）和０．（２）有２种以上癌相关基因产物同时表达者在癌组织中有２６例（５４．２％）．在癌旁粘膜有５例（１０．５％），而在正常粘膜则未见有２种癌相关基因同时表达，（３）癌组织中ｃ─ｅｒｂＢ─２＋ｐ２１、ｃ─ｅｒｂＢ─２＋ｐ５３、ｐ２１＋ｐ５３及ｃ─ｅｒｂＢ─２＋ｐ２１＋ｐ５３同时表达者分别为２．１％、１２．５％、１６．７％及２２．９％，（４）ＡＰＡＡＰ－ＩＧＳＳ双重免疫标记结果表明，单一癌细胞可同时表达２种癌基因产物。上述结果提示：ｃ─ｅｒｂＢ─２、ｒａｓｐ２１及ｐ５３可能与大肠病的发生有关，三者在大肠病的发生中可能起协同作用。     

抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５５０００，６７０００）为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，经ＥＬＩＳＡ间接法筛选出２株（２Ｄ５，１Ｂ７）分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体（Ｈ－ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。对２Ｄ５株初步鉴定表明，其抗体类型为ＩｇＧ１；培养上清中抗体浓度为２０～３０μｇ／ｍｌ；特异性免疫荧光反应证明２Ｄ５株Ｈ－ＭｃＡｂ是ＨＦＲＳＶ特异性；中和效价为１∶１６０；体外连续传代６个月仍稳定分泌抗体。     

肝细胞癌组织中转化生长因子α表达及其与乙型肝炎病毒感染的 …

目的 研究肝细胞（ＨＣＣ）中转化生长因子α（ＴＧＦα）的表达及其与ＨＢＶ感染的关系。方法 应用原位杂交及免疫组化ＳＰ法对５３例ＨＣＣ及１４例正常肝组织吕ＴＧＦαｍＲＮＡ、ＴＧＦα蛋白、ＨＢＶ ＤＮＡ进行检测。结果 ５３例ＨＣＣ组织中ＴＧＦαｍＲＮＡ、ＴＧＦα蛋白的阳性率分别为３０．２％（１６例）、７３．６％（３９例）,显著高于无表达的正常对照组（Ｐ〈０．０５）。癌旁不典型增生肝细胞组ＴＧＦαｍＲＮ     

脐血β2—MG与新生儿ABO溶血病关系的探讨

为了探讨新生儿脐血β２－ＭＧ与新生儿ＡＢＯ溶血病（称ＡＢＯＨＤＮ）的关系，应用放射免疫法对８０例新生儿脐血β２－ＭＧ进行测定，同时测定脐血胆红素浓度，结果表明，脐血β２－ＭＧ越高，ＡＢＯＨＤＮ发生率越高，脐血β２－ＭＧ含量与ＡＢＯＨＤＮ的发生呈正相关（Ｐ＜０．０５），经统计学分析，以脐血β２－ＭＧ≥２５０μｇ／ｍｌ为指标，敏感性及特异性分别为６９７％、７９４％。以脐血胆红素≥４０μｍｏｌ／Ｌ为指标，敏感性及特异性分别为６０８％、７０６％，前者敏感性及特异性均大于后者。提示测定脐血β２－ＭＧ可以早期预测ＡＢＯＨＤＮ的发生。