用非同位素PCR－SSCP方法检测石蜡包埋乳腺癌p53基因点突变

应用一非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测常规石蜡包埋乳腺癌组织中ｐ５３基因点突变。结果显示６０例乳腺癌中，１４例有异常电泳带，表明这些病例相应ＤＮＡ片段中发生了点突变，其中４例位于第５～６外显子，３例位于第７外显子，７例位于第８外显子。免疫组化法检测突变型ｐ５３蛋白的表达，１３例为阳性，其中１１例ＳＳＣＰ检测到异常电泳带，另２例突变可能发生在所检测的基因片段以外。而５例ＳＳＣＰ分析发现基因突变者，免疫染色却为阴性，主要可能由于石蜡包埋组织中ｐ５３抗原性减弱或消失所致，因此，ＳＳＣＰ法检测ｐ５３基因点突变更为准确、可靠，而且可初步将突变定位在基因某一片段。本研究结果表明非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法，特别适用于对大量标本基因点突变的筛选；ｐ５３基因点突变与突变型ｐ５３蛋白免疫染色阳性呈相关关系，但并不完全吻合。     

免疫组化和PCR—SSCP检测p53基因异常的一致性探讨

目的：探讨免疫组化检测ｐ５３蛋白表达和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变的一致性。方法：单克隆抗体ＤＯ－７检测８５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的ｐ５３蛋白表达，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测其中３１例腺癌的ｐ５３基因突变。结果：８５例ＮＳＣＬＣ中ｐ５３蛋白表达阳性率为６８％（５８／８５），３１例腺癌中ｐ５３蛋白表达阳性率为６１％（１９／３１），１４例（４６％）出现ｐ５３基因５～８外显子突变，ｐ５３蛋白免疫组化和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变无显著相关（χ２＝０．１，Ｐ＝０．７６），其一致率为５２％。结论：ｐ５３蛋白表达并不能很好地反映ｐ５３基因突变。     

应用PCR—SSCP—EB染色法检测卵巢上皮性肿瘤P16基因突变

Ｐ１６基因是一种新发现的肿瘤抑癌基因,已有人类许多肿瘤中检测出Ｐ１６基因突变。我们应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ染色技术,从石蜡包理上卵巢上皮性肿瘤组织切片中检测中６基因第二外显子结果显示Ｐ１６基因突变率为５３．５７％,表明Ｐ１６基因与卵巢上皮性肿瘤发生密切相关。     

PCR—SSP快速检测胰腺癌Ki—ras基因点突变

为判定有Ｋｉ－ｒａｓ基因突变及突变方式，我们采用针对Ｋｉ－ｒａｓ基因点突变方式 顺序特异性引物，对冰冻胰腺癌组织进行聚合酶链反应。产物借助常规电泳即可判定有无Ｋｉ－ｒａｓ基因突变及突变方式，无需酶切，杂交，放射性及非放射性显影。     

P53基因与肺癌

P53基因是一种抗癌基因,它具有抑制肿瘤细胞生长的活性。它的失活与多种肿瘤的发生有关。本文介绍了P53基因与肺癌发生的关系,并对P53基因在肺癌的临床诊断及治疗的应用前景进行了综述。     

PCR／SSCP技术在检测HLA基因点突变中的应用

聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）是根据核苷酸序列不同的单链ＤＮＡ，可形成不同构象，从而在不含变性剂的聚丙烯酰胺凝胶中泳动速度不同的原理，分离鉴定等长ＤＮＡ单链的方法，本文应用ＰＣＲ／ＳＳＣＰ方法检测了６０例无亲属关系个体白细胞抗原Ⅱ类基因（ＨＬＡ－ＤＱＡ１）５－上游调控区的等位基因多态性，并以ＰＣＲ直接测序证明每种ＳＳＣＰ带型都与不同位置单个碱基取代相关联。     

应用PCR—SSCP法检测LDL受体基因多态性

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）从人白细胞ＤＮＡ中扩增到一条长为１７２碱基的ＬＤＬ受体基因外显子２ＤＮＡ片段，对３０个ＰＣＲ扩增产物进行了单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ），其中２个图谱出现异常，序列证实是由ＬＤＬ受体基因外显子２第１４位碱基因Ｔ置换由Ｃ，形成多态性，建立的这种方法可以快速，简便地分析了ＬＤＬ受体因外显子２的多态性。     

不同肺腺癌细胞系N—ras,P53基因突变核酸测序分析

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）和ｄｓＤＮＡｃｙｃｌｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｓｙｓｔｅｍ技术对倍外培养的人肺腺癌细胞系ＬＴＥＰ－ａ２和ｈＬ中Ｎ－ｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因外显子５、７进行核酸序列测定分析。结果表明Ｎ－ｒａｓ突变热点第１２、１３、６１密码子未见异常Ｐ５３抑癌基因第１５４密码子均发现ＧＧＣ－ＧＴＣ突变。经光盘检索（美国Ｓｉｌｖｅｒｐｌａｔｔｅｒ公     

用非同位素PCR－SSCP法检测平滑肌肉瘤p53基因点突变

用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测平滑肌肉瘤ｐ５３基因点突变赵坡，杨光华，毛新，李甘地我们采用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析方法，对５５例平滑肌肉瘤进行检测，旨在探讨ｐ５３基因点突变在其发生机理上的作用。一、材料与方法５５例平滑肌肉瘤均取自１９８７～１９...     

大肠腺癌P53基因cDNA突变与突型P53基因蛋白表达的

探讨大肠腺癌突变型Ｐ５３基因蛋白表达与Ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变间的相互关系和意义。方法对１００例新鲜大肠腺癌组织采用ＰＡｂ２４０单克隆抗体免疫组织化学染色检测突变型Ｐ５３基因蛋白表达、ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变，并比较它们间相互关系。     

PCR-单链构象多态性分析对p53基因点突变检测的研究进展

单链构象多态性(SSCP)对分析基因的突变是一种有效的手段,并具有其独特的优点。PCR与SSCP结合后检测灵敏度更高,而在许多类型的肿瘤都存在有p53抑癌基因的突变,文章综述了PCR-SSCP分析技术检测p53基因突变的进展。     

parkin基因的一个新的点突变

目的：研究parkin基因外显子2-10点突变与散发性早发帕金森病发病的关系。方法：应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction ，PCR）、琼脂糖电泳、单链构象多态性（single strand conformation polymorphism，SSCP）、DNA测序及限制性核酸内切酶酶切方法，检测了60例散发性早发帕金森病患者以及120名正常人外周血白细胞DNA的parkin基因外显子2-10点突变。结果：发现1例患者的parkin基因外显子2存在纯合突变（G237→C），限制性内切酶酶切证实，其它外显子未见突变，120名正常对照也未见突变。结论：parkin基因外显子存在点突变，可能与部分散发性早发帕金森病发病有关。