重组人促红细胞生成素对大鼠创伤性脑损伤细胞凋亡的影响

目的研究重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠创伤性脑损伤的创伤灶周围神经细胞凋亡的影响。探讨rhEPO对大鼠创伤性脑损伤的保护作用。方法采用改进的Feeney氏法制作脑创伤模型，而后实验组立即腹腔注射5000u／kg rhEPO，对照组和假手术组注射生理盐水。于伤后12h、48h、120h处死动物，制作脑切片后行HE染色、TUNEL染色。结果rhEPO干预组与对照组、假手术组比较，各时间点rhEPO治疗组创伤灶周围TUNEL阳性细胞数比对照组显著减少，差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论rhEPO可以抑制神经细胞凋亡，对大鼠创伤性脑损伤具有保护作用。     

rhEPO预处理对胎鼠宫内缺血缺氧性脑损伤的保护作用及Caspase-3表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对胎鼠宫内缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响。 方法 将44只孕19 d SD大鼠分为rhEPO治疗组(Treat组)、生理盐水缺血对照组(I/R组)和假手术对照组(Sham组)。Treat组于缺血缺氧前30 min经尾静脉注入rhEPO (5000 U/kg),I/R组于缺血缺氧前30 min注入1 mL生理盐水。各组分别于缺血再灌注后30 min、3 h、6 h、24 h和48 h取胎鼠脑组织。假手术对照组经尾静脉注入1 mL生理盐水后只进行开关腹手术,于术后24 h取胎鼠脑组织。采用免疫组化方法检测活化的Caspase-3蛋白的表达,并通过末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记(Tunel)法观察脑神经元凋亡情况。 结果 I/R组与Treat组缺血再灌注24 h和48 h海马区均观察到凋亡的脑神经细胞存在,且凋亡神经元的数量随再灌注时间的延长而增加。Treat组与I/R组比较,Tunel阳性细胞数减少,在再灌注48 h时,差异有统计学意义(P<0.01)。I/R组Caspase-3蛋白表达阳性强度随再灌注时间的延长逐渐增加,在再灌注48 h时最高。与I/R组相比较,Treat组Caspase-3蛋白表达减弱, Caspase-3表达的面积积分光密度值减小,除24 h外其余各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论 rhEPO预处理可抑制胎鼠宫内缺血缺氧后脑组织中Caspase-3蛋白的表达以及神经细胞的凋亡,对缺血缺氧性脑损伤具有一定的保护作用。     

外源性重组人促红细胞生成素在宫内缺血缺氧环境中对胎盘屏障通透性的实验研究

目的 探讨重组人促红细胞生成素(recombine human erythropoietin, rhEPO)在宫内缺血缺氧时能否通过胎盘屏障及血脑屏障.方法 孕19 d(孕晚期)SD大鼠,分为3组:缺血缺氧组(I/R)、假手术组(Sham)和rhEPO治疗组(Treat).钳夹双侧子宫血管制备I/R模型,经尾静脉分别注射生理盐水及125I标记的rhEPO(5000 U/kg),术后30 min、3 h、6 h和24 h后取胎盘、羊水及胎鼠脑、心、肝、肺和肾,检测和比较各组织125I-rhEPO的放射比活性.结果 I/R组仅能测得少量的放射活性[(1.26±0.28) pg/g].假手术组和rhEPO治疗组胎盘、羊水及胎鼠各组织的125I-rhEPO含量在再灌注30 min、3 h和6 h呈逐渐升高趋势,再灌注6 h与再灌注30 min比较差异有统计学意义(P<0.01).组织之间进行相互比较,胎盘125I-rhEPO含量最多,胎盘与其它组织相比,再灌注30 min、3 h、6 h和24 h各时点差异均有统计学意义(P<0.05).rhEPO治疗组与假手术组各时点相比,rhEPO治疗组胎鼠脑组织内的125I-rhEPO含量从再灌注3 h开始更多,在再灌注6 h时达到峰值(P<0.05).结论 在宫内缺血缺氧时,胎盘屏障及胎鼠的血脑屏障对外源性rhEPO的通透性增加.     

促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后Bcl-2及VEGF表达的影响

目的 探讨外源性促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后的神经保护作用.方法 新生7日龄Wistar大鼠90只随机分为3组:假手术组、HIBD组和EPO治疗组,每组30只.假手术组仅给予颈正中切口游离左侧颈总动脉后缝合切口,不进行缺氧缺血.HIBD组游离并结扎左侧颈总动脉后置于含8%O2的低氧环境中2 h制备而成.EPO治疗组,在建立HIBD模型后,即刻一次性给予人基因重组促红细胞生成素(rhEPO)5 000 U/kg腹腔注射,用HE及免疫组化方法 观察术后及给药后不同时间点(6,12,24,48,72 h)Bcl-2、VEGF的表达.结果 假手术组Bcl-2、VEGF表达弱,HIBD组两者的表达都增加,在同一时间点EPO治疗组与假手术组、HIBD组比较,EPO治疗组两者表达均明显增加(P<0.01).结论 外源性促红细胞生成素可上调新生大鼠HIBD后脑组织Bcl-2、VEGF表达,可能是对脑缺氧缺血保护作用的途径之一.     

重组人促红细胞生成素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探索不同剂量及给药时间的重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）的保护作用。方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组（S组）、缺血对照组（IR组）、EPO-1组（再灌注时给药1 000、2 000和3 000 U/kg）和EPO-2组（再灌注前给药1 000、2 000和3 000 U/kg）。阻断左侧肾蒂45 min后切除右侧肾脏,建立IRI模型。检测血液中血肌酐（Scr）、血浆尿素氮（BUN）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、IL-6和Caspase-3水平,观察肾脏的病理学改变,采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 EPO组血清Scr、BUN和肾组织MDA、Caspase-3、IL-6水平明显低于IR组（P<0.05）;EPO组肾组织SOD水平明显高于IR组（P<0.05）,并在组织损伤上较IR组轻;TUNEL染色观察到EPO组阳性细胞数明显少于IR组（P<0.05）。再灌注前给药优于再灌注时给药（P<0.05）。结论 rhEPO对肾脏IRI有较好的保护作用,该作用可能通过抗氧自由基、减轻炎症反应、减少肾小管上皮细胞凋亡的协同机制来实现。保护作用与药物剂量呈正相关,再灌前给药优于再灌注时给药。     

重组人促红细胞生成素对压力作用下混合培养视网膜神经细胞凋亡及BCL-2表达的影响

目的 观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对压力作用所致鼠混合培养视网膜神经细胞凋亡的保护作用及可能的机制.方法 将体外混合培养3 d的原代大鼠视网膜神经细胞随机分为对照组、单纯压力组和预处理压力组,预处理压力组分别加入0.15、0.30、0.50 U/ml rhEPO作用24 h后,单纯压力组和预处理压力组均在60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下培养24 h,然后TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化和RT-PCR法检测BCL-2蛋白质及mRNA的表达.结果 单纯压力组细胞凋亡指数(AI)显著高于对照组(P<0.01);与单纯压力组比较,各不同浓度rhEPO预处理压力组的AI明显降低,同时BCL-2 mRNA及蛋白的表达均显著增加,差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01),且呈rhEPO浓度依赖性.结论 rhEPO预处理可通过上调细胞凋亡抑制因子BCL-2的表达,从而抑制压力诱导的视网膜神经细胞的凋亡.     

促红细胞生成素对缺氧缺血新生鼠脑组织一氧化氮水平及细胞凋亡的影响

目的探讨体外注射重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,RhEPO）对新生鼠缺氧缺血后脑组织一氧化氮（nitric oxide,NO）水平及脑细胞凋亡的影响。方法 7日龄Wistar大鼠101只,随机分成3组,假手术组（n=25）、对照组（生理盐水组）（n=38）、实验组（RhEPO组）（n=38）。对照组与实验组建立HBID模型,模型制备后即刻实验组腹腔注射RhEPO 4000 U/kg,对照组注射同体积生理盐水,假手术组不结扎颈总动脉,不缺氧。各组于处置后不同时间段处死取脑组织,制作脑组织匀浆,测定NO水平。同时于术后24hTunel染色,观察海马区神经细胞凋亡情况。结果对照组与假手术组比较NO2h显著升高（P〈0.05）,12-96h差异有显著性意义（P〈0.01）。实验组与对照组比较,NO明显降低,24-96h差异有显著性意义（P〈0.01）。Tunel染色对照组海马区凋亡细胞数明显高于实验组。结论 RhEPO抑制新生鼠缺氧缺血脑组织NO过量产生及神经细胞凋亡,对HIBD起保护作用。     

重组人促红细胞生成素对血透患者肝炎发生率的影响

本组报告重组人促红细胞生成素 (ｒＨｕＥ ＰＯ)治疗对长期维持性血透病人丙型肝炎发生率的影响 ,结果如下。1　临床资料1 1　 1 995年 6月～ 1 999年 1 2月我院行长期维持性血液透析前无肝炎病史的患者 46例。男 35例 ,女 1 1例。平均年龄 48± 1 6岁。透析时间 3 8± 1 3年。每周透析 1 0～ 1 5小时。血透机型号 :Ｇａｍｂｏ 95 0 ,Ｂａｘｔｅｒ 5 5 0透析器 :亚太铜仿膜、醋酸纤维膜。透析器为 1次性或复用 2～ 4次。透析管路及穿刺针多次复用。透析液 :碳酸盐。严格透析室消毒与管理。1 2　 46例患者随机分为 (1 )ｒＨｕＥＰＯ治疗组…     

重组人促红细胞生成素对慢性肾衰病人营养状况的影响

目的 :探讨重组人促红细胞生成素对慢性肾衰病人营养状况的影响。方法 :测定用药与未用药患者血中的视黄醇结合蛋白、前白蛋白和转铁蛋白浓度。结果 :慢性肾衰患者血中三种蛋白浓度明显低于正常 ,用药明显高于未用药患者 ,血中三种蛋白浓度与血红蛋白呈正相关关系。结论 :重组人促红细胞生成素可改善病人的营养状况。     

重组人促红细胞生成素应用于中重度烧伤后贫血的初探

目的：初步探讨重组人促红细胞生成素（recombinate human erythropoietin,rhEPO）在中重度烧伤后贫血的临床应用.方法：将本科2001年1月至2004年12月的82例中重度烧伤病人,随机分成试验组（应用rhEPO组）52例和空白对照组30例,分别检测外周血红细胞压积Hct、血红蛋白浓度Hb、红细胞计数RBC、未成熟网织红细胞指数IRF,红细胞C3b受体花环率RBC-C3bRR,T淋巴细胞亚群;并观察其不良反应.结果：对比使用rhEPO前后及空白对照组,试验组病人的各项检测指标的改变具有统计学意义,贫血状况和免疫功能均得到不同程度改善,同时不良反应少.结论：rhEPO对于中重度烧伤后贫血的防治及机体免疫功能的改善具有临床价值.     

骨髓基质细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的研究骨髓基质细胞（BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤（SCI）后神经细胞凋亡的影响,探讨骨髓基质细胞移植治疗脊髓损伤的机制。方法取大鼠股骨和胫骨骨髓培养BMSCs并传代。参照Taoka＇s方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型。脊髓损伤后30min,进行BMSCs或DMEM培养液损伤周围局部四点注射。在术后3、7和14d,应用TUNEL方法检测脊髓损伤周围神经细胞凋亡情况。结果脊髓损伤后,损伤区周围组织内TUNEL阳性细胞数量明显增加,阳性细胞分布于脊髓灰质和白质内,但以白质内神经细胞为主。与DMEM组大鼠相比,移植术后3、7和14d,BMSCs移植显著减少脊髓损伤周围区凋亡的神经细胞数目（P〈0．05）。结论脊髓损伤后,BMSCs移植能够抑制神经细胞凋亡。     

促红细胞生成素对心肌缺血再灌注后诱导型一氧化氮合酶蛋白的影响

目的:探讨促红细胞生成素对大鼠心肌缺血再灌注后诱导型一氧化氮合酶蛋白的影响及其对心肌保护作用与机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注120min的方法,建立大鼠模型缺血再灌注损伤模型,将30只大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组、治疗组(EPO 5000IU/kg)3组,每组10只,测定再灌注末血清和心肌组织磷酸肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化,应用免疫组织化学方法检测iNOS蛋白的表达,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡的变化。结果:与正常对照组相比,缺血再灌注组细胞上清液中LDH、MDA含量明显升高(P<0.01),SOD活力则显著降低(P<0.01),缺血组再灌注组凋亡率均升高明显(P<0.01)。治疗组的LDH、MDA显著低于对照组和缺血再灌注组(P<0.01),SOD则高于对照组和缺血再灌注组(P<0.01),缺血再灌注后细胞凋亡率与对照组相比均明显升高(P<0.01),治疗组再灌组的凋亡率与对照组相比均显著下降(P<0.01)。对照组有少量iNOS表达,缺血再灌注组iNOS表达升高(P<0.01)而EPO治疗组表达减少(P<0.01),与缺血再灌注组相比差异有显著性意义(P<0.01)。结论:EPO抑制iNOS蛋白的表达以减少心肌细胞凋亡,减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,从而对心肌有保护作用。     

重组人促红细胞生成素对感染性休克大鼠脑组织的保护作用

目的 研究重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对感染性休克(septic shock,SS)大鼠脑组织的保护作用.方法 将健康雄性Vistar大鼠36只按随机数字表法分为正常对照组(n=12)、感染性休克组(n=12)、rhEPO治疗组(n=12),每组再分成2个时间点(6、12 h),各时间点6只.感染性休克组和rhEPO治疗组以尾静脉注射内毒素(LPS)5 mg·kg-1制备感染性休克模型,rhEPO治疗组在出现休克症状时立刻腹腔注射rhEPO 5 000 U·kg-1;正常对照组大鼠给予等量生理盐水.术后各组各时间点大鼠分批腹腔麻醉后行眼球摘除术采血及断头取脑组织:取血清行NSE检测、脑组织匀浆行NO检测;提取右半侧脑组织海马区进行病理切片,行HE染色和TUNEL染色检查.结果 与正常对照组比较,感染性休克组脑海马CA1区神经元损伤明显,可见大量TUNEL阳性细胞,NO、NSE含量显著升高(均P＜0.01);rhEPO治疗组TUNEL阳性细胞和NO、NSE含量较感染性休克组明显降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 rhEPO可减轻感染性休克时脑组织损伤及海马区神经元细胞的凋亡,其机制可能与抑制NO的过量生成有关.     

重组人促红细胞生成素对成年大鼠高氧肺损伤Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rHuEPO）对成年大鼠高氧肺损伤Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只。对照组吸入空气,设为0 h组;其余5组置入动物实验氧舱吸入100%浓度氧气,分为24 h组、48 h组、72 h组、96 h组和rHuEPO干预组。rHuEPO干预组吸氧时间为96 h,并每日予以rHuEPO1000 U/kg腹腔内注射。颈动脉采血行动脉血气分析,计算氧合指数,测定左肺湿干重比值（W/D）及支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1β水平,免疫组化及Western blot方法检测肺组织Bax和Bcl-2蛋白表达,并观察肺组织病理学改变。结果随高氧暴露时间延长,大鼠氧合指数逐渐下降,96 h达到最低值;左肺W/D值逐渐增加,96 h达到高峰;BALF中TNF-α、IL-1β水平逐渐增高,48 h达到高峰,此后开始下降;肺组织中Bax蛋白表达逐渐增多,Bcl-2蛋白表达逐渐减少。rHuEPO干预组与96 h组比较,氧合指数增加,左肺W/D值下降,BALF中TNF-α、IL-1β水平下降,Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加。结论 rHuEPO能够下调肺组织Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制肺泡上皮细胞凋亡,从而一定程度上减轻高氧所致成年大鼠急性肺损伤。     

异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用

 目的 探讨不同浓度异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的影响。 方法 7 d龄新生SD大鼠125只随机分为5组(n=25):假手术组（Ⅰ组）、脑缺血缺氧组（Ⅱ组）、1%异氟醚后处理组（Ⅲ组）、1.5%异氟醚后处理组（Ⅳ组）和2%异氟醚后处理组（Ⅴ组）。除Ⅰ组外,其余各组均行左颈总动脉结扎和8%低氧2 h处理,制成新生大鼠缺血缺氧性脑损伤模型。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑损伤后即刻分别吸入1%、1.5%和2%异氟醚30 min。于脑损伤后7 d测各新生鼠的左右大脑半球质量,并行脑组织损伤病理检测。 结果 与Ⅰ组相比,其余4组的左/右大脑半球质量比及丘脑腹后内侧核和后扣带回皮层左/右侧神经元密度的比值降低(P<0.05);与Ⅱ组相比,Ⅳ和Ⅴ组左/右大脑半球质量比及丘脑腹后内侧核和后扣带回皮层左/右侧神经元密度比降低的程度减轻(P<0.05)。 结论 1.5%和2%异氟醚后处理能够减轻新生大鼠缺血缺氧性脑损伤程度。     

不同针刺介入时间对宫内窘迫缺氧缺血性脑损伤大鼠大脑皮质凋亡细胞、巢蛋白的影响

[目的]探讨不同针刺介入时间对国产期全脑缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生模型大鼠大脑皮质凋亡细胞、巢蛋白(Nesfin)表达的影响.[方法]于SD雌性大鼠妊娠21 d时,颈椎脱臼法处死,用止血钳夹闭双侧子宫角血管5min,剖宫产取出的幼鼠经行为学及脑组织切片确认为缺氧缺血性脑损伤后,随机分为模型组、针刺组.模型组不针刺;针刺1组、针刺2组、针刺3组、针刺4组分别于出生后第3、5、7、14天开始针刺,连续7d;正常组自然分娩,不造模不针刺;假手术组为孕鼠被处死后,不钳夹子宫动脉而剖宫取出幼鼠.各组大鼠均于出生后21 d断头取脑组织,检测大脑皮质中凋亡细胞及Nesfin的表达.[结果](1)各针刺组凋亡细胞的表达均有减少;针刺1组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);(2)各针刺组的Nestin表达均有所增加,针刺1组、针刺2组、针刺3组与模型组比较差异有统计学意义(均P＜0.01).[结论]针刺抗缺氧缺血作用可能是通过减少大脑神经细胞凋亡、增加脑组织中Nestin的表达来实现,出生后第5天开始针刺作用较好.     

补阳还五汤对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)的治疗作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、损伤对照组、补阳还五汤组,各10只。采用Allen’s打击法建立急性脊髓损伤模型,空白组和损伤对照组造模后予蒸馏水1m L灌胃,补阳还五汤组造模后予补阳还五汤1m L灌胃,均1天1次,连续3天。各组分别于术后1、7、14天观察其行为学BBB评分,14天通过免疫组化的方法观察脊髓损伤部位神经细胞凋亡(caspase-3p20、Bcl-2与Bax)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果 1行为学观察评分:术后7、14天补阳还五汤组与损伤对照组下肢功能均有恢复(P0.05),且补阳还五汤组较损伤对照组恢复更明显[(9.05±0.95)分比(5.75±1.97)分,(12.6±1.55)分比(8.80±3.34)分,P0.05]。2免疫组化检测:补阳还五汤组caspsase-3p20阳性细胞数表达较损伤对照组少[(16.70±2.21)个比(20.30±4.13)个,P0.05];补阳还五汤组Bcl-2阳性细胞的表达较损伤对照组增加[(10.57±0.97)个比(6.42±3.20)个,P0.05];补阳还五汤组Bax阳性细胞的表达较损伤对照组少[(18.29±2.21)个比(21.14±2.41)个,P0.05];补阳还五汤组VEGF阳性细胞的表达较损伤对照组多[(11.75±1.03)个比(9.50±1.30)个,P0.05]。结论补阳还五汤可提高脊髓损伤部位VEGF的表达,使细胞凋亡明显减少,促进骨髓功能的恢复。     

川芎嗪对大鼠视网膜缺血后细胞凋亡的影响

目的：观察中药制剂川芎嗪对SD大鼠多膜缺血后细胞凋亡的影响。方法：采用前房灌注生理盐水的方法做成视网膜缺血模型,治疗组每天腹腔注射川芎嗪1次（500mg/kg),Tunel法检测各组视网膜凋亡细胞,结果：缺血组凋亡细胞明显高于川芎嗪治疗组,同一时间段各组之间的相比差异均有显著性。结论：川芎嗪可减少缺血后视网膜细胞的凋亡,具有明显的保护作用。     

重组人促红细胞生成素对糖尿病大鼠随意皮瓣的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素对糖尿病大鼠超长随意皮瓣存活的影响.方法 36只SD大鼠.随机选取12只为对照组(A组),其余24只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型后随机平均分为两组(B组、C组),再次构建大鼠背部任意瓣(3cm×10cm)模型,成模后B组术后腹腔注射重组人促红细胞生成素(rhEPO)(5000 U/kg),A组、C组腹腔注射等量生理盐水.术后第10天取皮瓣检测成活面积、组织学观察、VEGF表达情况,ELISA检测血清中SDF-1α及MMP-9含量.结果 皮瓣面积C组(33.34±2.01)％明显低于A(50.17 +2.29)％组与B(48.3±2.43)％组(P＜0.01),A、B组间比较无统计学差异(P＞0.05);组织学观察B组皮瓣的组织水肿、炎症细胞浸润情况明显比C组减轻;新生血管计数B组17.5±3.29/平方毫米明显高于A组22.08±3.84/mm2,A、B组均明显高于C组11.33±2.42/mm2(p＜0.01).VEGF表达量A组4528.16±551.26、B组3671.67±482.04明显高于C组2571.08±535.45(P＜0.01),A组与B组无差异(P＞0.05).血清中SDF-1α、MMP-9的含量A组、B组均明显高于C组(P＜0.01).结论 促红细胞生成素可能通过增加SDF-1α、MMP-9、VEGF表达等途径促进皮瓣生血管增生,减轻炎症反应,从而提高糖尿病大鼠随意型皮瓣的存活.