一个细胞色素P450氧化还原酶缺陷症家系的临床特征及遗传学病因研究

目的对1例特殊面容、性发育障碍、怀疑为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症的患儿及其同症姐姐进行临床和遗传学分析, 为患者的临床诊断提供依据。方法提取先证者及其父母、姐姐基因组DNA, 应用二代外显子目标区域捕获测序技术对先证者进行基因变异分析, 并对疑似致病性变异进行Sanger测序验证和家系分析。结果基因测序结果显示先证者和姐姐的POR基因存在c.1370G>A和c.517-19₅17-10delGGCCCCTGTGinsC复合杂合变异, 其中c.517-19₅17-10delGGCCCCTGTGinsC变异未见报道。患儿母亲携带POR基因c.517-19₅17-10delGGCCCCTGTGinsC杂合变异, 父亲携带POR基因c.1370G>A杂合变异, 因此两个变异分别遗传自父母。结论 POR基因变异分析结果明确了姐弟二人为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症。新发现的c.517-19₅17-10delGGCCCCTGTGinsC变异扩大了POR基因的变异谱。     

细胞色素P450氧化还原酶缺乏症的POR基因突变研究

目的 分析1例细胞色素P450氧化还原酶缺乏症患者的临床和基因突变特点,为明确患者的诊断提供依据。方法 收集甘肃省妇幼保健院1例因肾上腺皮质增生而就诊的患者的临床资料,并进行高通量测序,分析细胞色素氧化还原酶缺乏症POR基因突变与临床表型的相关性。结果 发现患者POR基因存在c.1820A>G(p.Y607C)和c.830+5G>A(splicing)复合杂合突变,其中c.830+5G>A(splicing)为国内外首次报道。结论 除了经典的PORD外,POR基因还有一些致病性较轻的突变。     

超声引导下的羊膜腔穿刺术和脐静脉穿刺术在产前诊断中的应用

目的 探讨介入超声技术在产前诊断中的应用效果。方法 对北京妇产医院2004年1月-2005年12月超声引导下的羊膜腔穿刺术和脐静脉穿刺术进行总结。结果 羊膜腔穿刺术一次穿刺成功率100％；脐静脉穿刺术：18^＋1-20w手术时间平均为8．1min，穿刺次数2．2，穿刺成功率89．3％；20^＋1-24w手术时间平均为2min，穿刺次数1．3，穿刺成功率97％；24^＋1-28w手术时间平均为1．3min，穿刺次数1．1，穿刺成功率100％；28^＋1-32w手术时间平均为1．6min，穿刺次数1．4，穿刺成功率98％；32^＋1-38w手术时间平均为5．7min，穿刺次数2．0，穿刺成功率90．3％。手术并发症：胎盘或脐带出血，羊膜腔穿刺术的发生率为1．7％，脐静脉穿刺术为12．2％；心动过缓的发生率，脐静脉穿刺术为6％，羊膜腔穿刺术为0；羊膜腔穿刺术仅1例孕妇发生流产，胎儿丢失率为0．11％，脐静脉穿刺术尚未发生胎儿丢失的病例。结论 高分辨实时超声技术使得羊膜腔穿刺术和脐静脉穿刺术变得更加安全，操作更加简单。     

羊膜腔穿刺与脐静脉穿刺的产前诊断指征分析

目的探讨羊膜腔穿刺及脐静脉穿在产前诊断中的应用指征差异。方法收集2010年5月至2012年5月共2052例羊膜腔穿刺和195例脐静脉穿刺进行胎儿染色体检查的产前诊断病历,分析其产前诊断指征及产前诊断结果。结果羊膜腔穿刺主要产前诊断指征为血清学筛查阳性,占75．O％;高龄孕妇,占16．0％;胎儿超声检查异常,占4．5％;其它原因占4．5％;检出率最高的指征为胎儿超声检查异常。羊膜腔穿刺共检出75例染色体异常胎儿,其中非整倍体为51例（68．0％）,染色体结构异常24例（32．0％）。脐静脉穿刺的主要指征为胎儿超声检查异常,占55．4％;血清学筛查阳性,占25．6％,高龄孕妇,占14．4％;;其他原因占4．6％;检出率最高的指征为胎儿超声检查异常。脐静脉穿刺共检出22例染色体异常胎儿,其中非整倍体为20例（90．9％）,染色体结构异常2例（9．1％）。结论羊膜腔穿刺的主要指征是血清学筛查高风险,脐静脉穿刺指征主要是胎儿超声异常。临床上应根据孕妇不同的适应症及孕周大小,选择最合适的产前诊断技术。     

B超引导下脐带及羊膜穿刺术产前诊断294例临床分析

目的：探讨妊娠中期在B超引导下羊膜及脐带穿刺技术在产前诊断中的应用及其手术的安全性。方法：1296例高危孕妇接受遗传优生咨询,294例进行了入侵性操作抽取脐血或羊水进行遗传学及生物化学检测。对其结果,母胎并发症进行分析。结果：阳性标本42份,淘汰病胎37例,羊膜穿刺112例均一次成功,脐带穿刺182例一次成功率98.2%。一针成功率85.3%,全部穿刺未发生严重母胎并发症,结论：正确把握适应症,妊娠中期在B超引导下羊膜穿6刺及脐带穿刺是一种安全有效的产前诊断方法。     

Triosephosphate isomerase deficiency: biochemical and molecular genetic analysis for prenatal diagnosis

Inherited deficiency of the glycolytic enzyme triosephosphate isomerase leads to a multisystem disorder characterized by progressive neuromuscular dysfunction, chronic nonspherocytic hemolytic anemia and increased susceptibility to severe infections. Most patients die within the first 6 years. We examined a family with severe triosephosphate isomerase deficiency. The 1-year-old index patient suffered from hemolytic anemia, neuromuscular impairment and pneumonias, with the necessity of intermittent mechanical ventilation. Triosephosphate isomerase activity in erythrocytes was reduced to about 20% of normal. Heat stability of the enzyme was strongly reduced; concentration of the physiological substrate, dihydroxyacetone phosphate was increased 20-fold due to the metabolic block. Direct sequencing of the triosephosphate isomerase gene revealed homozygosity for the formerly described GAGGA C -mutation changing 104 GluAsp. During a 2nd pregnancy we examined a cord blood sample obtained in the 19th gestational week. The biochemical data on enzyme activity, heat stability of the enzyme and concentration of dihydroxyacetone phosphate were in the normal range. The molecular genetic analysis confirmed the presence of the normal triosephosphate isomerase alleles. Pregnancy was continued, resulting in the delivery of an unaffected, healthy newborn.     

七个鸟氨酸氨甲酰基转移酶缺陷症家系基因变异分析及产前诊断

目的对7个鸟氨酸氨甲酰基转移酶缺陷症(ornithine transcarbamylase deficiency,OTCD)家系进行OTC基因变异检测,明确其致病原因并为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。方法应用靶向高通量测序(next-generation sequencing,NGS)技术对7例经串联质谱筛查或临床诊断可疑OTCD的患儿或其母亲进行遗传代谢病相关基因panel检测,发现可疑致病变异位点后,应用PCR扩增和Sanger测序进行变异验证分析。在患儿母亲再次妊娠时抽取绒毛或羊水细胞进行相应基因变异检测,用于产前诊断。结果7个家系中共检测到7种OTC基因变异,分别为c.583G>A(p.Glyl95Arg).c.6260 T(p.Ala209Val)、c.6740 T(p.Pro225Leu)、c.482A>G(p.Asnl61Ser)、IVS1-2A>G、c.116G>T(p.Gly39Val).c.898delT(p.300Phefs*22),其中IVSl-2A>G、c・116G>T(p.Gly39Val)和c.898delT(p.300Phefs*22)为未报道过的新变异。产前诊断家系中3例胎儿基因测序均发现携带OTC基因变异半合子,性别为男性,孕妇选择终止妊娠,胎儿流产组织基因变异分析结果与产前诊断一致;另1例胎儿为OTC基因杂合变异,性别为女性,出生后新生儿筛查结果阴性,随访12个月,生长发育未见异常。结论OTC基因变异为7个OTCD家系的致病原因,致病变异的检出为家系的遗传咨询和产前诊断提供了依据。     

怀化地区7859例孕中期唐氏筛查和产前诊断结果分析

目的探讨孕中期唐氏筛查和产前诊断对检出胎儿染色体异常和妊娠不良结局的临床价值。方法应用时间分辨荧光免疫法对7859例孕中期(14-20周)妇女进行血清标记物三联方案(hA;FP+free-β-hCG+uE3)检测。筛查结果应用Multical软件计算21三体、18三体综合征和开放性神经管畸形的风险(rish)概率。对于高风险孕妇经遗传咨询,知情同意,自愿选择行产前诊断,于孕18-24周左右在超声引导下进行羊膜腔穿刺,抽取羊水培养进行胎儿染色体核型分析。并继续追踪胎儿和孕妇情况。结果在7859例孕妇中,筛查到高风险732例,唐氏筛查阳性率为7.65%(601/7859)。其中367例接受羊水或脐血穿刺产前诊断,占筛查高风险孕妇的50.13%(367/732);发现胎儿染色体异常16例,异常检出率4.36(16/367),其中6例唐氏综合征、5例18-三体综合征、4例Turner’s综合征、1例9号染色体臂间倒位。唐氏筛查高风险和低风险组不良妊娠结局分别为6.15%和1.46%,呈显著性差异(<0.05)。结论孕中期产前筛查是预测异常胎儿和不良妊娠结局的有效指标。结合羊水培养或脐血培养等产前诊断技术和方法,对预防先天缺陷儿出生、提高人口素质有重要临床应用价值。     

化学发光法孕中期三联筛查高危孕妇221例产前诊断结果分析

目的探讨孕中期母血AFP、β-hCG、uE3三联筛查在减少出生缺陷中的应用价值。方法采用化学发光法对孕14-20w的孕妇进行血清学筛查。通过检测母血AFP、β-hCG、uE3三种激素并结合孕妇年龄、孕周、体重等因素,用ACCESS2配套的产前筛查软件综合评价孕中期孕妇之胎儿患21-三体综合征、18-三体综合征和神经管缺陷的风险度。对其中筛查高危的孕妇进行产前诊断,并对产前诊断临床资料进行回顾分析。结果在筛查的2834例孕妇中,风险度超过筛查标准的共221人,其中21-三体综合征高危妊娠179例,筛查阳性率为6.33%,18-三体综合征高危妊娠28例,筛查阳性率为0.98%,经过羊水染色体核型分析,出生缺陷监测和新生儿外周血染色体核型分析,共确诊3例21-三体综合征患儿,未见18-三体综合征患儿。检出神经管缺陷高危妊娠14例,筛查阳性率为0.5%,均经过彩超检查,共检出3例神经管缺陷胎儿。结论化学发光法孕中期三联筛查对于诊断胎儿染色体病及神经管缺陷具有重要的临床价值,可有效降低染色体病及神经管缺陷患儿的出生率,并对预测不良妊娠结局具有一定的应用价值。