两种辅助孵化方法应用于冻融胚胎移植时的妊娠结局比较

目的研究传统机械法和激光法两种辅助孵化技术对冻融胚胎移植的种植率和临床妊娠率的影响,并对比两种方法的差异。方法 147例FET患者共分为3组,PZD组(n=48)胚胎透明带采用PZD方法削薄;LAH组(n=62)胚胎采用LAH方法削薄;对照组(n=37)不采用任何辅助孵化技术,直接移植。比较三组的种植率和临床妊娠率。结果 PZD组和LAH组种植率均高于对照组(22.4%、23.6%vs 10%,P0.05),LAH组临床妊娠率高于对照组(43.5%vs 21.6%,P0.05)。两种方法之间在种植率、临床妊娠率和多胎率方面均无差异(22.4%vs 23.6%;39.6%vs 43.5%;42.1%vs 29.6%。P0.05)。结论 PZD和LAH法均可提高冻融胚胎种植率,两种方法之间无差异。     

激光辅助孵化在冻融胚胎移植中的应用探讨

目的探讨冻融胚胎移植（FET）周期应用激光辅助孵化（AH）的效果。方法回顾分析2012年6月～12月我生殖中心FET资料,常规采用玻璃化冷冻卵裂期胚胎,复苏后对于透明带异常或年龄≥35岁或种植失败≥1次或胚胎质量差患者选择性应用激光辅助孵化处理（激光削薄透明带长度为30～40μm,深度为透明带外2／3）。结果FET198个周期,总临床妊娠率53．54％,AH共155个周期,冷冻胚胎复苏率92．06％,平均移植胚胎2．54±0．70个,临床妊娠率为51．61％,种植率25．64％,流产率15．0％,多胎率23．75％,无单卵双胎发生。结论选择性对玻璃化冻融卵裂期胚胎实施激光辅助孵化可获得满意的FET临床妊娠率。     

聚集体对ICSI周期胚胎发育及临床妊娠结局的影响

目的探讨在卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)周期中,滑面内质网聚集体(smoothendoplasmicreticulumaggregate,SERa)对胚胎发育潜能及早期临床结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月期间的232个ICSI周期的临床资料。拆除颗粒细胞后根据MII卵母细胞是否出现SERa分为A组(所得卵母细胞均未出现SERa,n=184)和B组(至少一个卵母细胞出现SERa,n=48)。分析A、B两组患者的临床情况,包括Gn使用总量、Gn使用时间、基础和hCG注射日雌激素(E_2)、黄体酮(P)、黄体生成素(LH)水平、子宫内膜厚度、周期种植率、临床妊娠率、早期流产率,实验室指标包括平均获卵数、受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、可冻囊胚形成率;将B组分为SERa-(n=365)和SERa+(n=91)卵母细胞组,比较两组实验室指标;再根据移植胚胎的卵子来源情况将B组分为两个亚组:SERa-来源组(移植的胚胎均为非SERa卵子来源,n=26)和SERa+来源组(移植的胚胎至少有一个为SERa卵子来源,n=13),比较临床结局。结果 A、B两组的临床基本情况、2PN受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、早期流产率无统计学差异(P0.05);相对于SERa-卵母细胞组,SERa+组的2PN受精率显著降低(P0.05),1PN受精率显著增高(P0.05),多PN受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、可冻囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、早期流产率无显著差异(P0.05)。结论卵母细胞滑面内质网聚集体显著影响ICSI周期正常受精率,但对胚胎发育参数及临床妊娠结局并无影响。     

不同辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育影响的研究

目的探讨不同辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育的影响。方法将冷冻复苏后的小鼠胚胎随机分为人工辅助孵化组、激光辅助孵化组、对照组,比较各组的囊胚孵出率。结果熟练操作人员人工辅助孵化组和激光组囊胚完全孵出率差异不显著,均高于对照组(P0.05,差异显著;不同人员人工辅助孵化组差异显著(P0.05);不同人员激光辅助孵化组差异不显著(P0.05)。结论不同形式的辅助孵化方式均能有效提高囊胚孵出率;激光与人工的辅助孵化相比较,更省时、安全,值得推广。     

卵母细胞滑面内质网聚集体对胚胎发育及妊娠结局的影响

目的探讨卵母细胞滑面内质网聚集体(SERC)对早期胚胎发育、妊娠情况的影响及其原因分析。方法回顾性性分析荆州市中心医院生殖中心于2012年1月至2013年12月行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗共238周期,其中MII期卵母细胞存在SERC周期28周期(研究组),不存在SERC周期共210周期(对照组)。比较两组患者年龄、HCG日E2、FSH、P、LH水平、子宫内膜厚度、Gn总量、Gn天数、受精率、种植率、临床妊娠率、流产率等的差异。同时比较研究组中SERC+与SERC-卵母细胞的受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率。结果两组患者在在年龄、病程、平均治疗周期数、内分泌基础水平、Gn首剂量、子宫内膜厚度、受精率、可利用胚胎率、种植率、临床妊娠率等方面无明显差异性(P0.05);而与对照组相比,研究组在Gn总量及天数、HCG日E2水平、流产率等明显升高(P0.05),优质胚胎率明显降低(P0.05)。研究组中SERC+卵母细胞的优质胚胎率明显低于SERC-卵母细胞(P0.05)。结论 ICSI周期卵母细胞SERC不利于体外胚胎发育及妊娠结局,而SERC现象可能与Gn长时间、大剂量刺激及HCG日高水平E2效应有关。     

内毒素对去卵透明带2-细胞小鼠胚胎体外发育的影响

目的 观察不同剂量浓度内毒素对去卵透明带2—细胞小鼠胚胎体外发育的影响。方法 获取小鼠2—细胞胚胎，用胰蛋白酶法去除卵透明带后，分别置于含有0，1pg/ml，5pg/ml和10pg/ml内毒素的CZB液滴中培养，此外，用蛋白酶法去除卵透明带，在不含内毒素的CZB液滴中培养，观察胚胎体外发育情况。结果 用胰蛋白酶法去卵透明带的2—细胞小鼠胚胎，其囊胚率随着培养液中内毒素剂量的增加而降低，且5pg/ml和10pg/ml时与对照组(不含内毒素)相比差异显著(P＜0．001)。在有内毒素存在时，停滞在2—细胞或4细胞期的胚胎彼此分离排成列，不再呈球形。部分卵裂球出现空泡或碎裂。另外，用蛋白酶法去除透明带的2—细胞鼠胚的囊胚率为61．7％，显著低于胰蛋白酶法的73．8％(P＜0．001)。结论 微量内毒素即明显抑制去卵透明带2—细胞小鼠胚胎的体外发育，并表现出剂量效应；去卵透明带2—细胞小鼠胚胎试验可应用于培养液的微量内毒素检测；胰酶法去除卵透明带后胚胎的囊胚率优于蛋白酶法。     

植入前诊断中胚胎活检的动物实验研究

目的以小鼠胚胎为材料进行植入前胚胎活检的研究.方法通过输卵管冲洗,获得4～8细胞期胚胎,用"一"字机械法、化学法和激光法分别对4、8细胞的胚胎进行活检,观察其囊胚形成及孵出情况并进行比较.结果 "一"字机械法、化学法、激光法胚胎活检后胚胎的囊胚形成率、囊胚孵出率与未活检对照组比较无显著性差异(P>0.05). "一"字机械法与化学法、激光法的囊胚形成率有显著性差异(P<0.05)、囊胚孵出率无显著性差异(P>0.05).化学法与激光法的囊胚形成率、囊胚孵出率均无显著性差异(P>0.05).logistic回归分析表明:细胞数越多越有利于胚胎进一步发育.结论用"一"字机械法进行单个卵裂球活检,不影响胚胎的进一步发育,是一种较好的胚胎活检方法.     

辅助生殖的膳食中脂肪摄入量与辅助生殖参数的相关性研究

目的研究辅助生殖的膳食中脂肪摄入量与辅助生殖参数之间的关系,为临床提供基线资料。方法通过前瞻性研究对221例不孕妇女进行观察分析,确定辅助生殖的治疗周期,测定脂肪的消耗量,食物的来源。检测卵母细胞数,中期的Ⅱ期卵母细胞数,受精率,胚胎质量及临床妊娠率。收集到的数据采用SPSS20.0软件进行t检验和相关性分析。当P值小于0.05时为由统计学意义。结果将干扰因素排除后,两组之间的差异具有统计学意义(P0.05),且通过相关性分析可发现,脂质的摄入量过高与卵母细胞数量及胚胎质量是相关的(P0.05),且与卵母细胞数呈正相关,而与胚胎质量呈负相关的关系(P0.01),但与MⅡ期细胞数,受孕率及临床受孕率之间是没有相关性的(0.05)。通过食物来源分析发现MⅡ期细胞,受精率和临床受孕率都受到食用油的影响(P0.05),皆呈负相关关系(r分别为-5.7,-20,-18)。其次香肠会减弱卵母细胞(r=1.1,P0.05)MⅡ期细胞(r=-4.6,P0.05)的发育,而多不饱和脂肪酸的摄入会对受精率,临床受孕率及胚胎质量产生影响,且皆为负面的影响(r分别为-63,-61,-0.24,P0.01)。结论研究结果表明,脂肪的摄入量增加会使得卵母细胞数的复苏数量增加,但高脂肪摄入也是胚胎发育不良的一个因素。而在脂肪的来源中相比,植物油,香肠和肥肉等食物可能是对辅助生殖参数产生不利影响的因素。     

卵母细胞玻璃化冷冻技术在体外受精-胚胎移植中的应用

目的探讨卵母细胞玻璃化冷冻技术在体外受精-胚胎移植中的应用价值。方法选取取卵日取精失败进行卵母细胞冷冻的174枚卵母细胞,按冷冻方法分为两组,A组共101枚卵母细胞,行慢速程序化冷冻;B组共73枚卵母细胞行玻璃化冷冻。比较两组卵母细胞的复苏率、受精率、2PN受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率。结果 B组(玻璃化冷冻组)的复苏率、受精率、2PN率、可利用胚胎率、优质胚胎率,均显著高于A组(慢速冷冻组),两组患者平均年龄、平均移植胚胎数、妊娠率均无显著性差异。结论与慢速冷冻相比,卵母细胞玻璃化冷冻的冷冻效率更高,卵母细胞玻璃化冷冻是体外受精治疗中取精失败后保存女性生育力最佳的补救措施,避免了女性生殖细胞的浪费。     

探究MⅠ期未成熟卵母细胞的培养方法及发育潜能

目的探讨在ICSI周期中,不同的培养成分对人MⅠ期未成熟卵母细胞的应用价值。方法随机将ICSI周期中316枚MⅠ期未成熟卵母细胞分成四组:A组(HTF培养液),B组(A组+卵泡液),C组(A组+颗粒细胞),D组(A组+卵泡液+颗粒细胞)。分别记录各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、优质胚胎率及可用胚胎率,并进行组间对比,所得数据采用SPSS13.0软件进行统计学处理。计数资料比较采用χ2检验,计量资料采用t检验,P0.05有统计学意义。结果 1C组中24h成熟率、优质胚胎率和可用胚胎率均高于其它各组数值,比较均有统计学意义(P0.05);2B组中24h成熟率、优质胚胎率和可用胚胎率均高于A组中各数值,比较均有统计学意义(P0.05);3B组中24h成熟率、优质胚胎率和可用胚胎率与C组中各值比较无统计学意义(P0.05);结论培养基中添加卵泡液及颗粒细胞对MⅠ期未成熟卵母细胞的成熟及发育潜能有重要作用。