人肝癌组织血管内皮生长因子及微血管密度分析的临床价值

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在肝癌(HCC)微血管形成、生长和转移方面的作用。 方法 以免疫组织化学法分析36例HCC组织中VEGF表达状态和细胞内分布,采用微血管染色方法测定微血管密度(MVD),并定量检测癌及癌周组织中总RNA和VEGF水平。 结果 所有HCC组织中VEGF阳性率为63.9％,无包膜组为78.3％,伴有远处转移组为90.9％;VEGF表达与MVD密切相关(t=4.49,,P<0.01);HCC组织VEGF水平或MVD值,在肿瘤直径大小组及肿瘤分化程度高低组间差异无显著性;HCC组织总RNA水平低于癌旁及远癌组织,而VEGF水平明显高于癌旁和远癌组织(q=6.10,P<0.01)。 结论VEGF过度表达和MVD异常是反映HCC侵润生长及转移的有效指标。     

HBx和VEGF与HBV相关性肝癌组织血管生成及转移的关系

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)和血管内皮生长因子(VEGF)与HBV相关性肝癌组织血管生成及转移的关系。方法选择84例HBV相关性肝癌组织和22例非HBV相关性肝癌组织,免疫组织化学法检测HBx、VEGF及血管内皮细胞表面抗原(CD34)表达,光镜下记录微血管计数(MVD)。结果84例HBV相关性肝癌组织中HBx阳性表达率为73.81%(62/84),阴性率为26.19%(22/84);62例HBx阳性表达组中的VEGF阳性率为74.19%(46/62),明显高于22例HBx阴性组36.36%(8/22)和非HBV相关性肝癌组36.36%(8/22)(P0.05);HBx阴性表达的HBV相关性肝癌组和非HBV相关性肝癌组中VEGF阳性表达差异无统计学意义(P0.05);HBx和VEGF的表达呈正相关(r=0.552,P0.01);二者在高分化肿瘤组织中的表达高于低分化组织(P0.05),且转移组表达高于无转移组;HBx阳性表达组平均MVD值明显高于HBx阴性组和非HBV相关性肝癌组(P0.01),有转移组MVD高于无转移组(P0.01);有门脉侵犯组高于非侵犯组(P0.05)。结论HBx和VEGF广泛表达于HBV相关性肝癌组织中,二者呈正相关;HBx可能通过上调VEGF的表达在HBV相关性肝癌组织血管生成及转移中起促进作用。     

CD34和VEGF在肝癌组织中的表达及与肿瘤血管生成的相关性

目的探讨CD34和血管内皮生长因子（VEGF）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及微血管密度（MVD）的临床病理意义。方法应用链霉素扰生物素蛋白-过氧化物酶法（S—P法）对50例HCC患者进行肿瘤血管生成免疫组织化学检测。对CD34阳性血管进行MVD计数．对VEGF进行半定量计数，并分析与HCC的临床病理特征的关系及意义。结果CD34在HCC组织中呈广泛、窦隙状表达，MVD值在有汇管区癌栓和肝内转移者高于无汇管区癌栓和无肝内转移者（P〈0．05），VEGF表达的阳性率在有汇管区癌栓和肝内转移者明显高于元汇管区癌栓及无肝内转移者（P〈0．05）。MVD值在VEGF阳性组和阴性组之间差异有显著性（P〈0．05）。结论HCC中MVD值和VEGF阳性表达率明显增高，由自分泌和旁分泌产生的VEGF通过促进HCC肿瘤血管生成而促进HCC的生长和转移。     

VEGF与MMP-2在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的　研究肝细胞肝癌 (HCC)血管内皮生长因子 (VEGF)和基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )表达的相关性和临床意义。方法　应用免疫组化方法检测 6 7例 HCC组织、41例癌旁组织以及正常肝组织 VEGF和MMP- 2的蛋白表达。结果　 6 7例肿瘤组织 41例 VEGF呈阳性表达 ;41例癌旁组织 11例 VEGF呈表达阳性 (P<0 .0 1)。VEGF的表达与 HCC癌灶大小、镜下门静脉癌栓发生以及肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 6 7例肿瘤组织 36例 MMP- 2呈阳性表达 ;癌旁组织仅有 13例阳性表达 (P<0 .0 5 )。MMP- 2的表达与 HCC癌灶大小、肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 VEGF与 MMP- 2同时阳性表达者为 2 7例。结论　 VEGF和 MMP- 2在HCC肿瘤组织中表达上调 ,且与 HCC临床病理特征有一定相关性。VEGF与 MMP- 2在 HCC肿瘤组织中的表达具有相关性。表明 VEGF与 MMP- 2在 HCC发生发展过程中起重要作用。     

骨桥蛋白和P21在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的　探讨骨桥蛋白(OPN)和P2 1在原发性肝癌组织中的表达及它们在肝癌转移中的作用。方法　采用免疫组化S P法检测69例原发性肝癌组织中OPN和P2 1的表达情况。结果　①OPN和P2 1的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞浆;OPN、P2 1在69例肝癌组织中阳性表达率分别为72 .5 % (5 0 / 69)和62 .3 % (4 3 / 69)。②在发生转移的肝癌组织中OPN和P2 1阳性表达率分别为84.2 % (3 2 / 3 8)和76.3 % (2 9/ 3 8) ,高于无转移的肝癌组织中OPN(5 8.1% ,18/ 3 1)和P2 1(4 5 .2 % ,14 / 3 1)阳性表达率,差异具有显著性,P <0 .0 5。③两者均阳性表达的3 5例肝癌中有2 4例(74.3 % )已发生转移,与两者均阴性表达的11例肝癌中仅有1例(9.1% )发生转移比较差异有显著性,P <0 .0 5 ,提示OPN和P2 1均阳性表达与肿瘤转移的发生密切相关。④OPN和P2 1的表达与肿瘤的大小、AFP水平、有无HBV感染、肿瘤分化、性别、年龄等因素无关,但与肿瘤侵袭转移的发生有关,P <0 .0 5。⑤OPN和P2 1的表达呈显著正相关(r =0 .2 5 7,P <0 .0 5 )。结论　OPN和P2 1的表达与肝癌侵袭转移的发生有密切关系,两者均阳性表达时对预测肝癌已发生转移具有指导意义。     

survivin和VEGF在胆囊癌中的表达及其与肿瘤微血管密度相关性研究

采用免疫组化sP法检测42例原发性胆囊癌患者癌组织标本（观察组）凋亡抑制基因（survivin）与血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤微血管密度（MVD）的相关性，将结果与40例胆囊息肉患者息肉组织（对照组）比较。免疫组织化学sP法检测survivin、VEGF和CD34在胆囊癌组织中的表达情况，用CD。单抗标记的血管计数MVD。结果：观察组survivin、VEGF阳性表达率及MVD明显高于对照组P〈0．01；观察组Ⅲ、Ⅳ期患者survivin和VEGF的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者P〈0．05；高分化者survivin和VEGF阳性表达率低于中、低分化者（P〈0．05）；有淋巴结转移者survivin和VEGF阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（P〈O．01）；两者在腺癌中的阳性表达率无统计学意义（P〉0．05）；VEGF与survivin的阳性表达呈正相关。认为survivin、VEGF在胆囊癌组织中呈高表达，且与淋巴结转移和病理分级有关；两者表达成正相关，且与肿瘤微血管形成密切相关。     

肝细胞癌组织中Cyr61、VEGF和HSP27的表达及意义

目的观察富半胱氨酸蛋白61（Cyr61）、血管内皮生长因子（VEGF）和热休克蛋白27（HSP27）在肝细胞癌（HCC）中的表达,分析其与HCC病理学特征和转移的关系。方法采用免疫组化SP法分别检测34例HCC患者肝癌组织和癌旁肝组织中的Cyr61、VEGF和HSP27表达情况,并与HCC患者的临床、病理学特征进行相关性分析。结果VEGF和HSP27在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P〈0．05）,Cry61在癌旁组织中的表达显著高于肝癌组织（P〈0．05）;HCC转移者的Cyr61、VEGF和HSP27阳性表达率明显高于无转移者（P〈0．06）。结论Cyr61、VEGF和HSP27的表达与HCC转移密切相关;联合检测Cyr61、VEGF和HSP27的表达情况对判断HCC转移和预后有—定的临床价值。     

微血管密度与肝细胞癌侵袭性关系的研究

目的　研究肿瘤微血管密度 (MVD)与肝细胞癌 (下称肝癌 )侵袭性的关系 ,探讨肝癌的生物学特性及侵袭转移机制。方法　将 37例经病理证实的肝癌手术切除标本 ,分为侵袭性肝癌和非侵袭性肝癌 ,用 L SAB免疫组化法利用 F R抗原抗体分别行血管内皮细胞染色计数 MVD。结果　 MVD在肝癌组织内呈异质性分布 ,血管形态不规则 ,瘤内 MVD较癌旁区和正常组织区明显增高 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。两组中侵袭性肝癌组 MVD明显高于非侵袭性肝癌组 (P <0 .0 5 )。 MVD与肝癌 TNM分期有相关性 ,但与肿瘤的大小、有无包膜和分化程度无关。结论　肿瘤血管形成与肝癌的侵袭性和生物学行为密切相关     

非小细胞肺癌组织及癌旁组织VEGF、P16蛋白的表达及意义

目的分析P16蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及癌旁组织的表达情况。方法应用免疫组化SP法检测NSCLC组织65例,距肿瘤边缘5 cm以上癌旁正常组织20例中VEGF、P16蛋白的表达。结果①VEGF在肺癌组织的阳性表达率72.3%,明显高于癌旁组织的阳性表达率35.0%(P<0.05);P16蛋白在肺癌组织的阳性表达率47.7%,明显低于癌旁组织的阳性表达率85.0%(P<0.05)。②P16蛋白的表达与肺癌淋巴结转移、临床分期、分化程度有关,而与病理类型无关;VEGF的表达与临床分析、淋巴结转移有关。NSCLC组织中P16蛋白与VEGF之间呈负相关(rs=-0.537,P<0.01)。结论 NSCLC组织中存在VEGF与P16蛋白表达的异常,且两者表达呈负相关,推测NSCLC的发病与血管生成及P16表达异常有关。     

CD44 V6和VEGF在肝癌组织中的表达及其预后价值的研究

目的探讨CD44 V6和VEGF在肝细胞癌(HCC)中的表达及其在临床预后中的价值。方法对随访的40例原发性肝癌临床病理学资料进行回顾性分析分类,并按照1年内有无复发和转移分组,然后进行常规HE染色及CD44 V6、VEGF的免疫组化染色(S_P法)。结果结果CD44 V6和VEGF主要定位于癌细胞的胞膜,部分胞质同时出现阳性表达;在40例肝癌组织中,CD44 V6和VEGF的阳性表达率分别为75%(30/40)和77.5%(31/40);CD44 V6、VEGF在复发和转移组的表达均高达88.9%(16/18,16/18),明显高于未复发和转移组,和肿瘤侵袭转移的发生有相关性(P<0.05),癌组织中的表达均明显高于癌旁组织,而在肿瘤大小及组织学分级间未见明显差异。结论资料提示肝癌组织中CD44 V6和VEGF过表达分析,有助于肝癌侵袭、转移预测和肝癌预后判断。     

外周血白蛋白mRNA分析在肝癌诊断和转移监测中的价值

目的     

Caspase-9和Survivin在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Caspase-9和Survivin在肝细胞癌(HCC)患者肝癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测92例肝癌患者肝癌组织及其对应癌旁正常肝组织中Caspase-9和Survivin的表达,并分析其表达与HCC临床恶性生物学行为的相关性。组间比较采用卡方检验,相关性分析采用Spearman等级相关法。结果 Caspase-9在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而Survivin在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ2=6.48、7.05,P0.05)。在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、门静脉癌栓、淋巴结转移的肝癌组织中Survivin的阳性表达率明显增高(χ2=5.07、6.18、8.29,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义;在病理分级Ⅲ~Ⅳ级的肝癌组织中Caspase-9的阳性表达率明显降低(χ2=7.63,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义。结论 Caspase-9低表达和Survivin异常高表达均参与肝癌的发生过程,Caspase-9低表达可能与肝癌细胞恶性分化密切相关,而Survivin高表达与肝癌的浸润或远处转移等恶性发展密切相关。     

肝癌细胞中γ-谷氨酰转肽酶基因甲基化研究

目的:研究肝癌细胞中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)甲基化的改变。方法:纯化人肝癌及癌旁组织中总GGT及RNA,观察总GGT、膜结合和可溶性GGT的表达,并以逆转录巢式PCR扩增GGT非编码区基因片段,分析M_3位点的甲基化状态。结果:肝癌、癌旁和远癌组总RNA浓度呈明显的梯度升而趋势(P<0.05);癌组织总GGT、膜结合和可溶性GGT均高于癌周又远癌组织(P<0.05);在癌、癌旁及远癌组织中,特定基因片段的扩增检出率分别为100％、85％、75％,M_3位点低甲基化频率分别为75％、55％、50％。结论:肝癌组织中GGT呈异常表达与基因低甲基化状态有关。     

人肝癌组织中γ-谷氨酰转移酶异常表达及其基因甲基化程度的研究

目的探讨γ谷氨酰转移酶（ＧＧＴ）基因在人类肝癌发生过程中的表达及改变机制。方法以病理组织学、生物化学和分子生物学方法,将自身配对的肝癌、癌旁组织和远癌组织中总ＲＮＡ纯化,对ＧＧＴ的表达与改变进行了分析;并设计两套引物,以逆转录巢式ＰＣＲ法扩增ＧＧＴ５′非编码区（ＮＣ）基因和限制性内切酶消化分析了不同肝癌组织中ＧＧＴ基因的甲基化程度。结果在病理组织学证实的２４例肝癌、癌旁和远癌组织中：①从肝癌灶至远癌的不同组织中,总ＲＮＡ浓度呈逐步升高趋势,三种不同组织间的差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）;②癌组织中总ＧＧＴ比活性（Ｕ／ｇ）较癌周和远癌组织明显升高（Ｐ＜０．０５）;③以自行设计建立的逆转录巢式ＰＣＲ法,成功地扩增ＧＧＴ的５′ＮＣ基因片段,特异性强且区带清晰,ＰＣＲ产物经酶切分析证明,ＧＧＴ基因５′ＮＣＭ３位点（ＣＣＧＧ）,其内位Ｃ在癌灶、癌周和远癌组织中的低甲基化频率分别为７０．８３％,５８．３３％和５４．１７％,非常明显地高于同组中已甲基化程度。结论肝癌组织中ＧＧＴ基因甲基化程度较低,且与肝癌ＧＧＴ的异常表达关系密切,对肝细胞癌变可能起促进作用。     

肝细胞癌癌组织caspase-3和DcR3蛋白及SNHG12 mRNA水平变化及其临床意义探讨*

目的 研究肝细胞癌(HCC)患者癌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和诱捕受体3(DcR3)蛋白表达及小分子核仁宿主基因12(SNHG12)mRNA水平变化及其临床意义。方法 2016年5月～2019年5月我院收治的68例HCC患者,行肝叶切除术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用EnVision法检测caspase-3和DcR3蛋白表达,采用RT-qPCR法检测SNHG12 mRNA水平,应用Logistic多元回归分析影响HCC患者死亡的危险因素。结果 HCC患者癌组织caspase-3阳性率为47.1%,显著低于癌旁组织的77.9%(P＜0.05),而DcR3阳性率为61.8%,SNHG12 mRNA水平为(2.9±0.8),显著高于癌旁组织【分别为33.8%和(1.6±0.5),P＜0.05】;18例有淋巴结转移的癌组织caspase-3阳性率为33.3%,显著低于50例无淋巴结转移者的62.0%(P＜0.05),而DcR3蛋白阳性率为88.9%,显著高于无淋巴结转移者的50.0%,SNHG12 mRNA水平为(2.6±0.4),显著高于无淋巴结转移者【(1.5±0.3),P＜0.05】,45例肿瘤直径>5 cm癌组织SNHG12 mRNA水平为(2.7±0.4),显著高于23例无淋巴结转移者【(1.4±0.3),P＜0.05】;随访结束时,本组68例HCC患者生存30例(44.1%),死亡38例(55.9%);多元Logistic回归分析显示,肿瘤直径大、合并肝硬化、存在淋巴结转移、Caspase-3低表达、DcR3高表达和SNHG12高水平是HCC患者死亡的危险因素。结论 HCC患者癌组织存在基因水平和蛋白表达的显著变化,了解这些变化并探讨其临床意义,将为肝癌防治提供有价值的线索。     

胰腺癌组织中COX-2、VEGF-C表达和淋巴管密度

目的 检测胰腺癌及癌旁组织中COX-2、VEGF-C的表达与淋巴管密度(LVD),探讨它们之间的关系.方法 应用组织芯片技术和免疫组化方法检测40例胰腺癌及相应癌旁组织和12例远处正常胰腺组织中COX-2、VEGF-C的表达及LVD,分析它们之间的关系,以及与临床病理指标的关系.结果 胰腺癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为70.0%(28/40)和67.5%(27/40),显著高于癌旁组织的42.5%(17/40)和35.O%(14/40,P＜0.01),也显著高于正常胰腺的8.3%(1/12)和25.0%(3/12).癌、癌旁及正常胰腺的LVD分别为4.75±2.77、15.20±4.70和1.67±1.15,以癌旁组织最高(P＜0.01).癌组织COX-2表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关;VEGF-C的表达与淋巴结转移相关.癌旁组织LVD与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关,并与癌组织COX-2、VEGF-C表达存在一定相关性.结论 胰腺癌新生淋巴管主要存在于癌旁,淋巴管的形成可能有COX-2及VEGF-C的参与.     

Immunohistochemical assessment of angiogenesis in hepatocellular carcinoma and surrounding cirrhotic liver tissues

AIM: To investigate whether vascular endothelial growth factor (VEGF) was over-expressed in hepatocellular carcinoma (HCC) or in surrounding cirrhotic liver tissues. METHODS: Immunohistochemistry was performed to investigate the expression of VEGF proteins in HCC tissues from 105 consecutive patients undergoing curative resection for HCC. The immunostaining results and related clinicopathologic materials were analyzed with statistical methods. Kaplan-Meier method was used to calculate survival curves, and Log-rank test was performed to compare differences in survival rates of the patients with positive HCC staining and negative VEGF. RESULTS: VEGF-positive expression was found in 72 of 105 HCC patients (68.6%). Capsular infiltration (P= 0.005), vascular invasion (P= 0.035) and intrahepatic metastasis (P=0.008) were observed more frequently in patients with VEGF-positive expression than in those with VEGF-negative.expression. Kaplan-Meier curves showed that VEGF-positive expression was associated with a shorter overall survival (P= 0.014). VEGF-positive expression was found in 47 of tissues 68 HCC (69.1%), and VEGF-positive expression was found in 54 of 68 surrounding cirrhotic liver tissues (79.4%). VEGF-positive expression was significantly higher in surrounding cirrhotic liver tissues than in HCC (P=0.017). CONCLUSION: VEGF may play an important role in the angiogenesis and prognosis of HCC, as well as in the angiogenesis of liver cirrhosis.     

Recurrence or metastasis of HCC:predictors, early detection and experimental antiangiogenic therapy

AIM To investigate the predictors for recurrence or metastasis of HCC, and to evaluate the effect of antiangiogenic therapy on the growth of transplantable human HCC in nude mice. METHODS RT-PCR was used to measure the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in 56 pairs of nontumorous liver and tumor samples. Sixty blood samples from human HCC were examined by nested RT-PCR to find out AFP mRNA. Recombinant human endostatin and polyclonal antibody against VEGF were administered to treat human HCC transplanted in nude mice. RESULTS Thirty of 56 HCC samples showed stronger expression of MMP-9 in tumorous tissues than in nontumorous tissues. Fifteen of the 26 patients with relative expression level of MMP-9 more than 0.34 developed tumor recurrence or metastasis, whereas only 7 of 30 patients with relative expression level less than 0.34 developed tumor recurrence (P＜0.05).There was no significant difference in the relative expression level of VEGF between patients with postoperative recurrence or metastasis and those without recurrence. AFP mRNA was detectable in 53.3% of patients with HCC. The sensitivity and specificity of AFP mRNA as a marker to detect hematogenous dissemination of HCC cells was 81.8% and 84.4%, respectively. Recombinant human endostatin and polyclonal antibody against VEGF inhibited the growth of transplantable HCC in nude mice by 52.2% and 45.7%, respectively.CONCLUSION MMP-9 expression in HCC correlates with the postoperative recurrence or metastasis of HCC. Patients with high level of MMP-9 expression in HCC are susceptible to metastasis. AFP mRNA could serve as an indicator of hematogenous spreading of HCC cells in circulation and a predictor of recurrence or metastasis of HCC. Antiangiogenesis may be an adjuvant therapy for HCC.