N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓凋亡的影响

[目的]探讨大鼠脊髓损伤后N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后对大鼠脊髓细胞凋亡的影响.[方法]将动物分为大鼠脊髓半切洞损伤后,分为应用胚胎脊髓和MK-801治疗组(A组),大鼠脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组(B组),单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组(C组).手术后1、3、7、14 d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TUNEL),以及Bcl-2蛋白免疫反应表达的测定(免疫组化法).采用计算机图像分析技术,进行定量分析.[结果]A、B、C三组中均发现凋亡细胞及BCL-2蛋白免疫反应阳性细胞,图像分析发现,细胞凋亡率为:C＞B＞A,Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为:A＞B＞C.[结论]大鼠脊髓损伤后应用NMDA受体拮抗剂MK-801和胚胎脊髓移植能抑制脊髓损伤后细胞凋亡.     

脑源性神经生长因子转基因细胞移植和大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠脊髓损伤后腺病毒介导的脑源性神经生长因子（AxCA-BDNF）体外转基因成肌细胞移植和静脉内注射大剂量甲基强的松龙（MP）对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法：120只Wistar大鼠分为：脊髓挫伤组（A组），脊髓挫伤后AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组（B组），脊髓挫伤后静脉内注射大剂量MP治疗组（C组），脊髓挫伤后同时应用AxCA-BDNF和MP组（D组）。手术后1、3、7、14、28d用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况，并用计算机图像分析技术对脊髓损伤区细胞凋亡（TUNEL法）和Bcl-2蛋白表达（免疫组化法）进行定量分析。结果：四组中均发现凋亡细胞及Bcl-2蛋白阳性表达细胞．图像分析发现四组凋亡细胞核数为A组〉B组〉C组〉D组；Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为D组〉C组〉B组〉A组。大鼠后肢功能恢复和电生理检查也有类似的变化趋势。结论：体外转基因成肌细胞移植和大剂量MP都能抑制大鼠脊髓损伤后的细胞凋亡，促进大鼠后肢功能恢复，两者联合应用具有协同作用。     

胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓c-Jun免疫反应的变化及其意义

目的：研究大鼠胚胎脊髓移植后能否影响,c-Hun免疫反应的表达和脊髓损伤后大鼠功能的恢复,方法;将动物分为脊髓半切洞损伤加胚胎脊髓移植组（A组）和单纯脊髓板切洞损伤加明胶海绵填塞组（B组）,每个时相点每组6只动物,术只1,3,7,14和28天,应用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,应用免疫细胞化学方法,c-Jun免疫反应的表达,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果：大鼠脊髓损伤后c-Jun免疫反应的表达A组明显高于B组,胚胎脊髓抑制后可使损伤脊髓高表达c-Jun 免疫反应持续到术后7天,增加的c-Jun免疫反应阳性细胞数目与神经功能的改善相平行。结论：胚胎脊髓移植后可使损伤脊髓高表达c-Jun,并促进大鼠功能恢复。     

胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用

[目的]研究胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用。[方法]将成年大鼠分为四组，A组：单纯脊髓挫伤和半切洞组；B组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植组；C组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植＋损伤区上下神经根吻合组；D组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植＋带蒂大网膜移植组。移植后6周，应用行为学检查，观察大鼠功能恢复情况，用光、电镜检查计算轴突和观察轴突病理变化，采用计算机图像分析技术，进行定量分析。[结果]作者发现脊髓损伤后6周A组轴突丢失最严重，各组轴突都有不同程度的减少，其减少程度顺序是A组〉B组〉C组〉D组。D组与其它三组比较有显著差异性。残留的轴突数目与神经功能的改善相平行。[结论]大鼠胚胎脊髓和大网膜移植后能增强损伤脊髓轴突再生并能促进大鼠后肢神经功能的恢复。     

脑源性神经营养因子转基因细胞移植和神经节苷脂对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

目的研究脑源性神经营养因子（BDNF）转基因细胞移植和神经节苷脂（GM-1）对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体的影响。方法将成年大鼠分为四组，A组：单纯脊髓损伤组；B组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组；C组：脊髓损伤＋GM-1组；D组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植＋GM-1组。伤后1、3、7、14d采用[^3H]MK-801放射性配基分析法检测大鼠损伤后脊髓NMDA受体的变化。结果发现各组[^3H]MK-801放射性配基分析最大结合容量都有不同程度的减少，其减少程度顺序是A组〉B组〉C组〉D组。结论应用GM-1和BDNF转基因细胞移植后可以通过影响脊髓NMDA受体，从而减轻脊髓继发性损伤。     

胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴索病理的影响

目的研究胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴索病理的影响。方法将成年大鼠40只均分为四组,A组：单纯脊髓挫伤和半切洞组;B组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植组;C组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植＋损伤区上下神经根吻合组;D组：脊髓挫伤和半切洞＋胚胎脊髓移植＋带蒂大网膜移植组。移植后6周,应用行为学检查,观察大鼠功能恢复情况,用光、电镜检查计算轴索和观察轴索病理变化,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果脊髓损伤后6周A组轴索丢失最严重,各组轴索都有不同程度的减少,其减少程度顺序是A组〉B组〉C组〉D组。D组与其它三组比较有显著差异性。残留的轴索数目与神经功能的改善相平行。结论大鼠胚胎脊髓和大网膜移植后对损伤的大鼠脊髓轴索有保护作用并能促进大鼠后肢神经功能的恢复。     

胚胎脊髓不同移植方法对成年大鼠损伤脊髓神经元的影响

目的：探讨胚胎脊髓不同移植方法防止成年鼠脊髓轴突损伤后引起的神经元萎缩的作用。方法：采用Wistar成年大鼠腰脊髓半切洞损伤模型。将实验动物分为五组：A组为正常对照组,B组为损伤组;C组为损伤＋移植组;D组为损伤＋移植＋椎旁肌组;E组为损伤＋移植＋大网膜组,手术后应用行为学和电生理检查观察大鼠神经功能恢复情况,应用尼氏染色方法观察神经元的大小,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果 胚胎脊髓不同移植方法均可以防止老年鼠脊髓轴突损伤引起的神经元萎缩,图像分析发现其作用为E组＞D组＞C组＞B组＞A组,尤以E组效果最好,可以完全恢复损伤神经元的形态,大鼠神经功能的恢复也出现了相同的变化趋势。结论 鼠胚胎脊髓不同移植方法能维持神经元的细胞形态,对成年大鼠损伤脊髓功能恢复有促进作用。     

胚胎脊髓移植联合应用MK-801促进大鼠脊髓损伤后功能恢复

目的　研究胚胎脊髓移植并应用N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)受体拮抗剂MK 80 1能否促进半切洞脊髓损伤后功能恢复。方法　将成年大鼠分为 3组 ,A组 :单纯脊髓半切洞损伤组 ;B组 :脊髓半切洞损伤 胚胎脊髓移植组 ;C组 :脊髓半切洞损伤 胚胎脊髓移植 MK 80 1组。手术后应用联合行为评分 (CBS)、感觉诱发电位 (SEP)、运动诱发电位 (MEP)检查。结果　 3组CBS得分A组>B组 >C组 ,SEP和MEP潜峰时A组 >B组 >C组 ,统计学分析差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　胚胎脊髓移植联合应用NMDA受体拮抗剂MK 80 1能够促进脊髓损伤后功能恢复     

大鼠胚胎脊髓移植后增加损伤脊髓生长抑素mRNA的表达

[目的] 研究大鼠胚胎脊髓移植后是否能够影响生长抑素（SOM）mRNA的表达。[方法]将动物分为单纯半切洞损伤组（A组）、胚胎脊髓移植组（B组）。术后1、3、7、14、28d，采用原位杂交方法观察SOM mRNA的表达，采用计算机图像分析技术，进行定量分析。[结果] 胚胎脊髓移植组SOM mRNA蛋白表达明显多于单损伤组。[结论] 作者的研究表明胚胎脊髓移植后可使损伤脊髓SOM mRNA表达增多。     

胚胎脊髓移植联合反应MK—801促进大鼠脊髓损伤后功能恢复

目的 研究胚胎脊髓移植并应用Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗剂ＭＫ－８０１能否促进半切洞脊髓损伤后功能恢复。方法 将成年大鼠分为３组,Ａ组：单纯脊髓半切洞损伤组;Ｂ组：脊髓半切洞损伤＋胚胎脊移植组;Ｃ组：脊髓半切洞损伤＋胚胎脊髓移植＋ＭＫ－８０１组。手术后应用联合行为评分（ＣＢＳ）、感觉诱发电位（ＳＥＰ）、运行诱发电位（ＭＥＰ）检查。结果 ３组ＣＢＳ得分Ａ组〉Ｂ组〉Ｃ组;ＳＥＰ和ＭＥＰ     

转基因细胞移植对损伤脊髓天门冬氨酸受体的影响

[目的]研究腺病毒介导的脑源性神经生长因子(brainderivedneurotrophinfactor,AxCABDNF)转基因细胞移植和大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓组织N甲基D天门冬氨酸(NMDA)受体的影响。将成年大鼠分为4组,A组单纯脊髓损伤组;B组脊髓损伤+AxCABDNF基因转染的成肌细胞移植组;C组脊髓损伤+甲基强的松龙组;D组脊髓损伤+细胞移植+甲基强的松龙组。应用后1、3、7、14d,采用[3H]标记的地卓西平马来酸盐([3H]MK801)放射性配基分析法检测大鼠损伤后脊髓NMDA受体的变化。[结果]发现各组[3H]MK801放射性配基分析最大结合容量都有不同程度的减少,其减少程度顺序是A组>B组>C组>D组。表明应用甲基强的松龙(MP)和BDNF转基因细胞移植可以通过影响脊髓NMDA受体减轻脊髓继发性损伤。     

带血运的组织移植对损伤脊髓细胞凋亡的影响

目的：探讨带蒂的大网膜和椎旁肌移植覆盖脊髓对脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法：应用改良的Ａｌｌｅｎ‘ｓ法致伤脊髓,将动物分为单纯脊髓损伤组（Ａ组）,损伤＋椎旁肌组（Ｂ组）,损伤＋大网膜组（Ｃ组）。移植后１、３、７、１４、２８天对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测（ＴＵＮＥＬ）以及Ｂｃｌ－２蛋白表达的测定（免疫组化法）。结果：Ａ、Ｂ、Ｃ组中均发现凋亡细胞及ＢＣＬ－２蛋白阳性表达,图象分析发现,细胞凋亡率为Ａ     

不同的组织移植到宿主脊髓组织病理学观察

目的：研究胚胎脊髓,肋间神经,大网膜,椎旁肌移植到宿主脊髓后发育过程中形态变化。方法：应用脊髓半切洞模型,移植后１,２,４,１２周,进行ＨＥ、Ｎｉｓｓｌ、嗜银染色和电镜检查,观察移植植物存活、分化及其与宿主之间的关系。结果：胚胎脊髓移植到损伤的脊髓后,可在宿主脊髓内继续分化发育,与宿主脊髓形成部分纤维连接;助间神经移植后,可能通过存活的雪工细胞与宿主脊髓建立一定的结构联系;带蒂的大网膜移植后,可与宿主脊髓形成血管连接;带蒂的椎旁肌移植最终形成瘢痕组织。结论：胚胎脊髓组织能较好地修复损伤的脊髓。     

大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓GAP-43 mRNA表达的影响

目的观察大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓 GAP－ 43 mRNA表达和大鼠后肢功能恢复的影响。方法成年 Wistar大鼠 66只,随机被分为脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组 (脊髓移植组, 30只 )、单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组 (单纯损伤组, 30只 )、正常对照组 (6只 )。术后第 1、 3、 7、 14、 28 d,对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能。应用原位杂交的方法观察 GAP－ 43 mRNA的表达,记录阳性细胞数,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果脊髓损伤后第 1 d,在脊髓移植组和单纯损伤组的损伤脊髓灰质中都可见到 GAP－ 43 mRNA的表达。于损伤后迅速增加,第 7 d时达到高峰。脊髓移植组 GAP－ 43 mRNA蛋白表达为 39.24± 6.83,约是单纯损伤组 (21.48± 7.83)的 2倍 (P< 0.05)。胚胎脊髓移植后可使损伤的脊髓中 GAP－ 43 mRNA持续高表达至术后第 28 d,而单纯损伤组仅持续到术后第 14 d。增加的 GAP－ 43 mRNA阳性细胞数与神经功能的改善平行。结论胚胎脊髓移植后可使损伤大鼠脊髓高表达 GAP－ 43 mRNA,并促进大鼠功能的恢复。     

肋间神经转位脊髓神经根桥接联合应用GDNF促进大鼠脊髓损伤后功能恢复

目的：肋间神经转位脊髓神经根桥接联合应用胶质源性神经营养因子(GDNF)恢复大鼠脊髓损伤的功能。方法：将成年大鼠分为脊髓半切洞损伤组(A组)、脊髓半切洞损伤 肋间神经转位脊髓神经根桥接组(B组)、脊髓半切洞 肋间神经转位脊髓神经根桥接 胶质源性神经营养因子(C组)。手术后应用联合行为评分(CBS)。感觉诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检查，测定脊髓功能恢复情况。结果：3组CBS得分A组＞B组＞C组，SEP和MEP潜峰时，均A组＞B组＞C组，统计分析均有显著差异性(P＜0.05)。结论：肋间神经转位脊髓神经根桥接联合应用胶质源性神经营养因子能促进损伤脊髓功能的恢复。