阿尔茨海默病小鼠脑Aβ和LC3分布差异及相关性

目的观察阿尔茨海默病(AD)转基因小鼠不同脑区β-淀粉样蛋白(Aβ)与微管相关蛋白1轻链3(LC3)的分布,探讨二者的变化及其相关性。方法应用免疫组织化学和体视学方法检测Aβ与LC3在AD转基因小鼠各脑区的含量变化。结果 (1)突变型小鼠脑内的Aβ与LC3表达量多于野生型小鼠;(2)Aβ与LC3在突变型小鼠的M1、M2、GD、CA1、CA3、CPu的表达量高于野生型小鼠的相应区域;(3)Aβ与LC3在突变型小鼠海马的GD、CA1、CA3脑区与躯体运动区的M1、M2中的表达量相当,且上述区域的表达量多于CPu,在Cb中表达最少;(4)突变型小鼠LC3与Aβ的分布呈正相关性(r=0.486,P<0.05)。结论 (1)Aβ与LC3在野生型与突变型小鼠相应脑区的分布具有差异性,且二者在突变型小鼠不同脑区中的表达存在差异;(2)LC3在AD转基因小鼠脑中的表达随Aβ表达的增加而增多,提示LC3在AD的发病中发挥作用。     

烟碱对AD大鼠海马αnAChR的影响及意义

目的探讨烟碱对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠认知功能的作用及海马αnAChR的影响。方法采用海马部位注射建立Aβ25-35AD大鼠模型,用Morris水迷宫实验测定认知功能、免疫组化、Western blotting观察大鼠海马α7nAChR变化。结果烟碱AD组大鼠在Morris水迷宫试验中显示比对照组学习记忆能力增强。烟碱AD组海马α7nAChR蛋白含量及免疫阳性细胞数较AD组增加。结论烟碱可增加AD大鼠海马α7nAChR的表达,烟碱拮抗Aβ25-35的神经毒性作用与α7nAChR有关。     

LXRβ调节海马突触可塑性改善APP/PS1小鼠认知功能的研究

目的 探讨肝X受体(LXR)β激动剂T0901317对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马突触可塑性及认知功能的影响.方法 共纳入30只9个月龄雄性小鼠,其中10只野生型(WT)小鼠作为WT组,20只APP/PS1转基因AD模型小鼠分为AD组和AD+T0组.采用新物体识别实验、Morris水迷宫、免疫组织化学及Wester...     

胆碱改善脂多糖诱导的小鼠中枢神经系统炎症反应及认知功能障碍

目的 观察胆碱对脂多糖(LPS)诱导的中枢神经系统(CNS)炎症反应及认知损伤的影响,并对其作用机制进行分析.方法 采用侧脑室注射LPS建立小鼠CNS炎症模型,随机分为生理盐水对照组、LPS组、LPS+胆碱40 mg/kg组、胆碱40 mg/kg组4组.药物干预组和药物对照组胆碱预处理3d,下午12、2和4 pm各1次腹腔注射,对照组和LPS组生理盐水预处理3 d(时间次数同上),胆碱给药贯穿整个实验.观察小鼠自发活动,测定小鼠空间学习和记忆能力.检测海马齿状回IBA-1蛋白表达情况,测定海马TNF-α、IL-1β水平,分析海马α7nAchR、MAPK p38蛋白和磷酸化p38蛋白表达情况.结果 与对照组相比,LPS组小鼠在水迷宫测试中穿台次数明显减少(P＜0.05),胆碱预处理后穿台次数显著上升(P＜0.05);与对照组相比,LPS组小鼠海马IBA-1蛋白(P＜0.0001)、TNF-α(P＜0.001)与IL-1β(P＜0.01)明显升高,胆碱干预后明显降低IBA-1蛋白(P＜0.05)和IL-1β(P＜0.05)的升高,部分抑制TNF-α的升高;LPS处理后p38MAPK磷酸化水平明显升高(P＜0.05),胆碱预处理后显著降低其磷酸化水平(P＜0.05);胆碱干预组α7nAchR表达与其他3组相比显著增高(P＜0.05).结论 胆碱可能通过激活αnAchR来抑制LPS诱导的小鼠海马p38MAPK磷酸化,对LPS诱导的CNS炎症以及认知功能障碍的小鼠具有保护效应.     

不同方式的轻度跑步机锻炼对阿尔茨海默鼠认知功能的影响

目的 探讨不同方式的轻度跑步机锻炼对阿尔茨海默病(AD) APP转基因小鼠认知功能的影响及可能的作用机制.方法 将24只6月龄App+小鼠随机均分为4组:对照组、有规律锻炼组(RE组)、无规律不同时刻锻炼组(ITE组)和无规律不同持续时间锻炼组(IDDE组).锻炼结束后,比较各组小鼠的空间认知能力,小鼠海马组织中可溶性及不溶性淀粉样蛋白(Aβ)40、42水平,β分泌酶与γ分泌酶活性,小鼠海马组织中脑啡肽酶(NEP)、胰岛素降解酶(IDE)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA水平;以及小鼠海马存活神经元、脑源性神经营养因子(BDNF)、BDNF酪氨酸激酶受体B(TrkB)及磷酸化TrkB(p-TrkB)蛋白水平.结果 与对照组比较,RE组小鼠的空间认知能力明显提高(P＜0.05),海马组织中可溶性与不溶性Aβ40、42水平及β分泌酶与γ分泌酶活性均明显下降(P＜0.05).4组小鼠海马组织中NEP、IDE及MMP-9 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,RE组小鼠海马组织中存活神经元数量明显增加(P＜0.05),BDNF与p-TrkB蛋白水平明显升高(P＜0.05).与ITE组、IDDE组比较,RE组小鼠的空间认知能力、海马组织中Aβ40、42水平及存活神经元数量、BDNF和p-TrkB蛋白水平差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 轻度有规律跑步机锻炼能有效提高AD鼠认知功能,可能与调节BD-NF/TrkB通路有关.     

Bβ448野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系的建立

目的构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础。方法以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A)。应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达。结果野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功。结论野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础。     

白藜芦醇通过调节海马中小胶质细胞的极化状态改善APP/PS1小鼠的认知功能

目的 探讨白藜芦醇(RSV)对阿尔茨海默病(AD)小鼠认知功能的影响及其机制.方法 共纳入45只9月龄雄性小鼠,其中包括15只野生型(W T)小鼠和30只A PP/PS1转基因AD模型小鼠.实验分为野生型对照组(WT组,n=15),AD模型组(AD组,n=15)和AD RSV治疗组(AD+RSV组,n=15).采用Morris水迷宫、实时定量PCR、免疫荧光及Western blot等方法,检测小鼠认知功能、海马炎性因子水平、海马小胶质细胞数量及其极化状态.结果 与WT组比较,AD组小鼠Morris水迷宫试验找到平台所需要的时间明显增加(P<0.01),在目标象限停留的时间明显降低(P<0.01),海马促炎因子白细胞介素(IL)-1β和IL-6表达明显增加(P<0.05),沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)与离子钙接头蛋白1(Iba-1)双标的小胶质细胞数量明显降低(P<0.05);与AD组比较,AD+RSV组小鼠找到平台所需要的时间明显降低(P<0.05),在目标象限停留的时间明显增加(P<0.05),IL-1β和IL-6表达明显降低(P<0.01),而抗炎因子IL-10和Argi-nase1表达明显增高(P<0.05),SIRT1与Iba-1双标的小胶质细胞数量明显增加(P<0.05).结论 RSV改善AD小鼠的认知功能障碍,可能与其促使海马小胶质细胞M2型极化进而减轻炎性损伤有关.     

远志醇提取物改善阿尔茨海默病小鼠病理学的研究

目的探讨远志醇提取物对正常老年小鼠及阿尔茨海默病(AD)小鼠海马区新生神经元的生长、大脑皮层神经元纤维缠结(NFT)、淀粉样纤维弥散性老年斑(SP)病理的影响,并检测其对大脑氧化应激(OS)、β淀粉样蛋白40(Aβ40)、β淀粉样蛋白42(Aβ42)的作用。方法将9月龄小鼠按雌雄分类制作AD小鼠模型,并随机分为正常组和模型组,每组又分为安慰剂组(对照组)和给药组。采用免疫组化(IHC)法,检测齿状回颗粒细胞下层(SGZ)新生神经元生长情况;硫磺素S染色,检测小鼠海马区大脑皮层NFT、SP状况;ELISA检测小鼠大脑8-异构前列腺素、Aβ40、Aβ42水平。结果与正常组比较,模型组SGZ新生神经元生长减慢,海马区大脑皮层的NFT和SP增加明显;治疗组新生神经元生长增速明显,NFT和SP显著降低,雌性小鼠效果更显著;8-异构前列腺素、Aβ40、Aβ42水平降低显著。结论远志醇提取物能促进小鼠大脑皮层神经元生长,减少海马区大脑皮层的NFT和SP,降低大脑氧化应激、Aβ40、Aβ42水平,改善AD病理症状,维护正常神经元功能,是潜在的治疗AD的药物。     

Nicastrin在阿尔茨海默病转基因小鼠脑内星形胶质细胞中的表达

目的观测阿尔茨海默病（AD）中Nicastrin（NCT）和β-淀粉样蛋白（Aβ）在脑内星形胶质细胞中的表达情况,探讨星形胶质细胞在AD中的病变机制。方法应用荧光免疫组织化学法对5×FAD转基因小鼠海马区染色后,激光共聚焦扫描显微镜观察Nicastrin、A0和星形胶质细胞三者位置关系,半定量分析星形胶质细胞、Nicastrin和Aβ的表达变化。结果（1）野生型小鼠的海马区中未见Nicastrin和Aβ聚积,突变型小鼠海马的第一亚区（CA1）、第三亚区（CA8）、齿状回（DG）中可见Nicastrin和Aβ共定位于星形胶质细胞。（2）荧光半定量结果显示,Nicastrin、AG和星形胶质细胞在突变型小鼠的CA1、CA8、DG区的荧光强度均大于野生型小鼠的相应脑区（P〈0．05）。（3）体视学计数结果显示,突变型小鼠海马的Aβ、Nicastrin和GFAP的阳性共定位数多于野生型小鼠海马的各相应脑区（P〈0．05）。结论Nicastrin在AD转基因小鼠脑内的星形胶质细胞中表达增多。导致星形胶质细胞损伤的Aβ可能由表达于其中的β-淀粉样前体蛋白切割而成,而非摄取自神经元。     

大麻素2型受体激动剂JWH-015对阿尔茨海默病样小鼠认知功能的改善作用及其可能机制

目的 观察大麻素2型受体(CB2R)激动剂JWH-015对阿尔茨海默病(AD)小鼠认知功能下降的改善作用,并探讨其作用机制是否与脑内小胶质细胞激活表型转化密切相关.方法 20只成年雄性C57BL/6J小鼠随机分为溶剂对照组、JWH-015对照组、AD模型组和JWH-015治疗组.侧脑室注射4μg寡聚态β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)和等体积生理盐水构建AD模型和模型对照组后,分别接受连续3周腹腔注射JWH-0150.5 mg/kg或等量溶剂处理.采用新物体识别实验检测小鼠认知功能;实时定量PCR方法检测皮质、海马脑区M1型小胶质细胞标记分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型小胶质细胞标志物几丁质酶3样蛋白(Ym1/2)mRNA表达水平.同时,取15只CB2R基因敲除C57BL/6J小鼠(CB2RKO)和5只同窝野生型(CB2RWT)小鼠按基因型和处理随机分为CB2RKO溶剂对照组、CB2RKO AD模型组、JWH-015处理组和CB2RWT小鼠溶剂对照组,用来研究CB2R对认知功能改善作用和小胶质细胞激活表型转化作用的特异性.结果 与溶剂对照组相比,C57BL/6J AD模型组小鼠新奇物体识别指数显著降低(P<0.01),同时伴随皮质和海马脑区iNOS mRNA表达显著升高(均为P<0.05)和Ym1/2 mRNA表达显著降低(均为P<0.01);而JWH-015处理可显著提高C57BL/6J AD模型组小鼠新物体识别指数(P<0.05),下调皮质和海马区iNOS mRNA表达水平(均为P<0.05),上调Ym1/2 mRNA表达水平(均为P<0.05);与脑室注射生理盐水的CB2RKO溶剂对照组小鼠相比,CB2RKO AD模型组小鼠识别指数显著降低(P<0.05),皮质和海马脑区iNOS mRNA表达显著升高(均为P<0.05),皮质脑区Ym1/2 mRNA表达显著降低(P<0.05);与CB2RKO AD模型组小鼠相比,JWH-015处理组长时程给药对新奇物体识别指数无显著影响,并对皮质、海马脑区内iNOS及Ym1/2 mRNA的表达水平无显著影响.结论 JWH-015通过特异性激动CB2R改善Aβ诱导的AD模型小鼠的认知能力下降,其机制可能与其直接作用于相关脑区小胶质细胞CB2受体,引起小胶质细胞M1/M2表型转化,减轻脑内小胶质细胞介导的神经源性炎症反应有关.     

糖尿病大鼠认知功能及海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α和Aβ表达

目的 研究糖尿病大鼠认知功能的变化及其海马组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、IL-1β、TNF-α和β-淀粉样蛋白(Aβ)的表达,探讨糖代谢异常在阿尔茨海默病(AD)发病中的可能作用.方法 30只Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组和模型组.模型组大鼠腹腔注射链脉佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,随后根据建模后时间分为模型4、6、8周组.穿梭箱实验、Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知行为学改变;ELISA法、Western blotting和免疫组化法检测各组大鼠海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α和Aβ表达,并进行相关性分析.结果 与正常组和假手术组比较,各模型组大鼠遭受电击次数显著增加,而主动逃避次数显著减少;学习和记忆潜伏期显著增加;组间比较差异有统计学意义(P<0.01).模型组大鼠海马GFAP、IL-1β、TNF-α、Aβ表达明显增加,与正常组和假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01).上述检测指标在各模型组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).相关性分析表明,Aβ表达与记忆潜伏期呈显著正相关;GFAP、IL-1β、TNF-α表达与Aβ表达呈显著正相关.结论 糖尿病大鼠认知功能受损,其程度与Aβ表达呈正相关;糖尿病大鼠海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α表达与Aβ表达均显著增高,且呈正相关.糖代谢异常可能通过激活星形胶质细胞释放炎症因子使Aβ表达增加而参与AD的发病.     

帕金森病α-Synuclein转基因小鼠模型的建立

目的建立人α-Synuclein野生型及两个突变型A53T和A30P基因的转基因动物模型,研究α-Synuclein在帕金森病发病过程中的作用。方法构建人α-Synuclein表达载体,利用显微注射法制备人α-Synuclein基因的转基因小鼠。通过PCR方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。通过RT-PCR和Western blotting方法鉴定转基因小鼠脑组织中人α-Synuclein mRNA和蛋白表达情况。采用免疫组化鉴定人α-Synuclein在小鼠脑组织中的表达情况。通过Rotatingrod实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果得到表达水平不同的野生型人α-Synuclein转基因小鼠2个品系。得到表达水平不同的A53T突变型α-Synuclein转基因小鼠2个品系。得到表达水平不同的A30P突变型α-Synuclein转基因小鼠3个品系。免疫组化显示,转基因小鼠大脑海马、新皮层、纹状体区出现人α-Synuclein阳性标记的细胞。Rotating rod实验结果显示转基因小鼠表现出明显的进行性运动能力障碍。结论建立了转人α-Synuclein基因的帕金森病小鼠模型。     

糖尿病大鼠认知功能及海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α和Aβ表达

目的 研究糖尿病大鼠认知功能的变化及其海马组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、IL-1β、TNF-α和β-淀粉样蛋白(Aβ)的表达,探讨糖代谢异常在阿尔茨海默病(AD)发病中的可能作用.方法 30只Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组和模型组.模型组大鼠腹腔注射链脉佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,随后根据建模后时间分为模型4、6、8周组.穿梭箱实验、Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知行为学改变;ELISA法、Western blotting和免疫组化法检测各组大鼠海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α和Aβ表达,并进行相关性分析.结果 与正常组和假手术组比较,各模型组大鼠遭受电击次数显著增加,而主动逃避次数显著减少;学习和记忆潜伏期显著增加;组间比较差异有统计学意义(P<0.01).模型组大鼠海马GFAP、IL-1β、TNF-α、Aβ表达明显增加,与正常组和假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01).上述检测指标在各模型组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).相关性分析表明,Aβ表达与记忆潜伏期呈显著正相关;GFAP、IL-1β、TNF-α表达与Aβ表达呈显著正相关.结论 糖尿病大鼠认知功能受损,其程度与Aβ表达呈正相关;糖尿病大鼠海马组织GFAP、IL-1β、TNF-α表达与Aβ表达均显著增高,且呈正相关.糖代谢异常可能通过激活星形胶质细胞释放炎症因子使Aβ表达增加而参与AD的发病.     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠认知功能和海马Aβ、磷酸化JNK、ERK1/2、Tau蛋白表达的影响

目的探讨嗅三针治疗阿尔茨海默病(AD)小鼠的作用机理。方法 AD动物模型采用APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、嗅三针组、嗅神经切断嗅三针组和盐酸多奈哌齐组,正常组和假手术组采用同窝阴性小鼠。嗅三针组和嗅神经切断嗅三针组取印堂穴和双侧迎香穴进行电针治疗,盐酸多奈哌齐组取盐酸多奈哌齐进行灌胃治疗。Y迷宫检测各组小鼠认知功能,免疫组化、Western blot检测小鼠海马内Aβ和p-JNK、p-ERK1/2、p-Tau(Ser 396)蛋白表达情况。结果嗅三针组小鼠认知功能显著改善,有统计学意义(P0.05);模型组小鼠海马内Aβ和p-JNK、p-ERK1/2、p-Tau(Ser 396)蛋白表达显著高于正常组(P0.05),经嗅三针和盐酸多奈哌齐治疗后表达显著减少,均具有统计学意义(P0.05);嗅神经切断嗅三针组治疗后表达无显著变化。结论嗅三针可通过降低AD小鼠海马Aβ和p-JNK、p-ERK1/2、p-Tau(Ser 396)蛋白表达,改善认知功能,而嗅觉通路的完整性是其发挥治疗效果的作用途径。     

蜂毒明肽对阿尔茨海默病小鼠认知功能的影响

目的观察蜂毒明肽对阿尔茨海默病（AD）小鼠认知功能的影响。方法 10周龄昆明种雌性小鼠60只,随机分成6组,每组10只,分别为正常对照组、假手术组、AD模型组、蜂毒明肽低剂量组、蜂毒明肽中剂量组、蜂毒明肽高剂量组。正常对照组不做任何处理,假手术组小鼠侧脑室注射生理盐水。采用侧脑室注射β-淀粉样肽25-35（β-amyloid protein,Aβ25-35）法构建AD小鼠模型。造模14 d后,蜂毒明肽干预的各组小鼠分别腹腔注射不同剂量的蜂毒明肽,连续5 d。Morris水迷宫测试认知功能,免疫组化染色观察海马CA1区Aβ25-35的表达。结果与正常对照组相比,蜂毒明肽各组和AD模型组小鼠逃避潜伏期时间较长,目标象限停留时间较短,穿越平台次数降低,海马CA1区Aβ25-35阳性表达增强（P均〈0.05）,而假手术组无统计学差异（P均〉0.05）。蜂毒明肽中、高剂量组小鼠与AD模型组小鼠相比,前者逃避潜伏期有所缩短,目标象限停留时间增加,穿越平台次数有所增多,海马CA1区Aβ25-35阳性表达有所减低（P均〈0.05）。结论蜂毒明肽能提高AD小鼠认知功能,减少海马CA1区Aβ25-35的表达。     

G209A突变型α-synuclein基因真核表达质粒的构建

目的构建人G209A突变型α-synuclein基因真核表达质粒.方法采用RT-PCR从人胚脑组织中扩增人α-synuclein基因,再采用SOE法定点突变,构建G209A突变型α-synuclein基因真核表达质粒.结果酶切和DNA测序证实,突变型(G209A)α-synuclein基因除第209位碱基G被A替代以外,其余序列与野生型完全一致.结论成功构建G209A突变型α-synuclein基因真核表达质粒,为研究帕金森病发病机制奠定基础.     

阿尔茨海默病小鼠脑中p75神经营养因子受体和老年斑的表达

目的探讨阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)中p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)表达和老年斑形成的时相关系及变化情况。方法取3、6、9月龄雄性B6C3-Tg(APPSwePSEN1dE9)85Dbo/J转基因小鼠及同窝雄性野生型小鼠脑组织,采用刚果红、免疫组化和荧光染色方法观察脑片中老年斑和变性p75NTR阳性神经纤维的表达以及共定位情况,并分别通过ELISA、Western blot方法检测脑匀浆中总β淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)和p75NTR蛋白水平。结果转基因小鼠3月龄时皮层、海马未见老年斑形成,6月龄时皮层和海马可见到少量老年斑形成,在9月龄时此处老年斑沉积明显增多。ELISA检测结果提示Aβ水平随小鼠月龄增加而增多。与同龄野生型小鼠相比,3月龄转基因小鼠皮层和海马可见p75NTR阳性神经纤维增多,且部分神经纤维末梢变性膨大;6月龄者皮层、海马p75NTR阳性神经纤维增多,出现部分呈不规则球形的变性神经末梢;9月龄者皮层、海马p75NTR变性神经末梢显著增多。野生型小鼠在各年龄段均未见变性的p75NTR阳性神经末梢。Western blot结果表明转基因和野生型小鼠脑内p75NTR水平均随着年龄增加而增加,且同月龄间相比前者高于后者(P<0.01)。共聚焦显微镜观察到p75NTR阳性的变性神经末梢位于老年斑中心部位,而不表达p75NTR的变性神经末梢位于老年斑外周。结论在转基因小鼠脑内Aβ能增加p75NTR的表达;p75NTR阳性神经纤维早于老年斑出现,且在老年斑形成后位置靠近老年斑中心,提示其促进了Aβ沉积的起始过程。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠Aβ及Aβ寡聚体表达的影响

目的运用免疫组织化学方法和蛋白质印迹(Western-blot)方法观察淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠治疗前后β淀粉样蛋白42(Aβ42)、β淀粉样蛋白40(Aβ40)和可溶性Aβ寡聚体(ADDLs)的变化,判断姜黄素(curcumin)对Aβ级联反应的影响。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组(罗格列酮组)及姜黄素大、中、小剂量组。灌胃3个月后,以免疫组织化学方法和Western blot方法检测Aβ42、Aβ40和ADDLs蛋白表达量的变化。结果免疫组织化学检测模型组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs阳性细胞均较正常组增加,Aβ40和Aβ42相比,阳性细胞计数增加以Aβ42更加明显,各干预组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs阳性细胞明显降低。Western blot检测模型组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs蛋白表达比正常对照组明显增加(P<0.01);与模型组小鼠相比,虽然各干预组小鼠海马Aβ40、Aβ42和ADDLs蛋白表达均减少,罗格列酮组和姜黄素中剂量组小鼠海马Aβ40和Aβ42的蛋白表达显著减低(P<0.01);罗格列酮组小鼠海马ADDLs的蛋白表达减低显著(P<0.01),姜黄素大、中剂量组小鼠海马ADDLs的蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论姜黄素给药3个月能显著减少APP/PS1双转基因小鼠脑内海马CA1区Aβ40、Aβ42和ADDLs的表达,对Aβ42减低更为明显。其潜在的神经保护机制是否通过下调Aβ42和ADDLs的产生,增强Aβ42和ADDLs的降解影响Aβ级联反应,有待进一步研究。     

脑红蛋白改善AD双转基因（APPswe/PS1dE9）小鼠认知功能及其机制研究

目的：观察过表达脑红蛋白（neuroglobin,Ngb）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）双转基因（APPswe/PS1dE9）小鼠认知功能的影响,并探讨其机制。方法：成功构建过表达Ngb质粒pNgb和对应的空质粒pCDNA3.1,对AD双转基因小鼠进行侧脑室注射,使其过表达Ngb。采用Morris水迷宫评价过表达Ngb对AD小鼠学习记忆能力和空间探索能力的影响;采用免疫组织化学法检测其对β淀粉样蛋白-42(amyloid β-protein 42,Aβ42)生成的影响;半胱氨酸蛋白酶Caspase-3和Caspase-9酶活性检测试剂盒检测酶活性变化;Western blot检测海马组织中磷酸化蛋白激酶B p-Akt(ser473)、总Akt、Caspase-3和Caspase-9表达。结果：过表达Ngb提高了AD转基因小鼠的学习记忆和空间探索能力（P<0.05）;明显降低了转基因小鼠海马组织中Caspase-3和Caspase-9酶活性及Aβ42生成（P<0.05）;Western blot显示过表达Ngb能抑制脑组织中Caspase-3和...