骨髓瘤细胞对血管内皮细胞的促生长作用及机制

目的:研究多发性骨髓瘤细胞对人内皮细胞增殖、迁移、血管生成及对内皮细胞AKT、pAKT蛋白水平的影响。方法:采用多发性骨髓瘤细胞株U266与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)混合共培养;以同期单独培养的HUVEC为对照,用CCK-8、划痕试验检测共培养组和对照组HUVEC的增殖、迁移能力。观察在Matrigel基质中两组HUVEC管状结构生成的情况;Western blot方法检测共培养组和对照组HUVEC AKT、pAKT的蛋白表达水平。结果:与同期单独培养的HUVEC相比,共培养体系中的HUVEC细胞增殖明显增加,共培养组HUVEC迁移能力明显增强(125±21/视野vs.332±37/视野),共培养组HUVEC管状结构形成数量明显增加(小管数量分别为3.7±1.3/视野vs.8.3±2.7/视野)。共培养体系中HUVEC pAKT表达水平明显升高,AKT表达无明显变化。结论:骨髓瘤细胞能明显促进血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成。多发性骨髓瘤促进HUVEC增殖、迁移和血管生成的作用与AKT信号通路有关。     

SCGN 和CgA 在胰腺神经内分泌肿瘤的表达

目的：考察促泌素（SCGN）和嗜铬粒蛋白A（CgA）在胰腺神经内分泌肿瘤的表达。方法选择2007年10月至2013年10月到该院住院治疗并行手术的胰腺神经内分泌肿瘤（PNETs）患者共54例,采用免疫组织化学法检测肿瘤标本中SCGN、CgA的表达情况。结果54例胰腺神经内分泌肿瘤标本均有SCGN和CgA表达。在非功能性PNETs、肿瘤体积大于30 cm3、有包膜、侵犯血管和淋巴结转移中,SCGN较CgA高（P＜0．05）。在功能性PNETs、不同肿瘤部位、肿瘤体积小于或等于30 cm3、无包膜、无侵犯血管和淋巴结转移中SCGN和CgA表达差异无统计学意义（P＞0．05）。结论将PNETs形态学改变,肿瘤侵犯包膜、血管,局部组织浸润,淋巴结及脏器转移等病理参数,结合SCGN与CgA 在肿瘤组织的表达可综合评估 PNETs的恶性程度。     

多西紫杉醇体外抑制血管生成的作用

目的探讨多西紫杉醇在细胞和器官水平抗血管生成的作用和机制.方法采用四唑盐比色实验(MTT)、内皮细胞迁移和小管形成实验、大鼠动脉环培养等方法检测药物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、小管形成和大鼠动脉环血管生成的作用.以上实验均分为空白对照组和多西紫杉醇的溶剂对照、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 ng/mL 7个组.结果①各组MTT的平均吸光度值分别为0.307±0.07、0.305±0.08、 0.301±0.05、0.298±0.06、0.251±0.04、0.224±0.05、0.205±0.02;②每高倍镜下发生迁移的细胞数量各自为44.36±4.8、42.28±5.2、37.75±4.6、28.65±3.6、15.59±2.1、10.82±1.3、7.43±0.6;③平均小管形成长度依次为192.36±11.54、188.89±7.59、175.53±11.54、166.78±12.35、151.62±16.38、118.65±11.58、78.93±3.67 μm;④大鼠动脉环第13天新生血管数目依次为101.00±10.8、97.88±7.8、73.00±6.6、60.88±5.8、52.25±5.3、33.13±2.8、18.13±1.3.以上4项实验的空白和溶剂对照、MTT实验的前4组之间的两两比较均不存在显著差异(P>0.05),其余各组间两两比较均具有显著差异(P<0.01).结论无论有无细胞毒作用,多西紫杉醇均具有不同程度的抑制HUVEC增殖、迁移、小管形成和大鼠动脉环血管生成的作用,提示该药在抑制血管生成方面具有良好应用前景.     

褪黑素减轻高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的机制

目的 探究褪黑素(MLT)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及其可能的分子机制。方法 培养HUVEC并分为3组：对照组、模型组和治疗组。对照组用葡萄糖浓度为5.5 mmol/L的DMEM培养基处理,模型组用高糖(葡萄糖浓度为30 mmol/L)的DMEM培养基处理,治疗组用含有100μmol/L MLT的高糖DMEM培养基处理。MTT法检测高糖及MLT对HUVEC增殖的影响,试剂盒法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,流式细胞术检测活性氧(ROS)的生成,Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡和坏死情况,Western blot检测高糖及MLT对HUVEC内质网应激和细胞焦亡相关蛋白表达的影响。结果 与对照组相比,模型组的细胞增殖水平下降;细胞培养上清液中LDH释放量增加;HUVEC中ROS生成增加;双染试验显示,蓝色荧光和红色荧光增加,GRP78、ATF4、CHOP、IRE1α、PERK、ATF6α、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β蛋白表达量增加。与模型组相比,治疗组的细胞增殖水平升高;细胞培养上清液中LDH释放量减...     

带伴行营养血管蒂腓肠神经电缆式神经移植体的设计

目的 探讨设计带伴行营养血管蒂腓肠神经电缆式神经移植体的解剖学基础。方法 观察26例成人下肢腓肠内侧皮神经(MSCN),腓神经交通支(PCN),腓肠神经(SN)及其伴行营养血管等。设计带伴行营养血管蒂腓肠神经电缆式神经移植体。结果 (1)腓肠内侧皮神经、腓神经交通支、腓肠神经的长度分别为20.01±0.61 cm、20.19±0.80 cm、12.98±0.61 cm,其横径分别为1.51±0.10 mm、2.50±0.10 mm、2.95±0.12 mm。(2)腓肠内侧皮神经伴行动脉(ANV)1支,外径为0.80±0.04 mm,伴行神经干的长度为8.78±0.52 cm。腓神经交通支伴行营养动脉1支,外径为0.91±0.03 mm,伴行神经干的长度为7.61±0.41 cm。结论可设计和应用带伴行营养血管蒂腓肠神经电缆式神经移植体桥接神经缺损。     

血管内皮钙黏蛋白在非小细胞肺癌血管生成中的作用

［摘 要］ 目的:探讨血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）在非小细胞肺癌(NSCLC)血管生成中的作用,为NSCLC的抗血管生成治疗提供实验依据。方法:将人肺癌A549细胞分为空白对照组、干扰组和阴性对照组,VE-cadherin-siRNA瞬时转染A549细胞,实时定量PCR和Western blotting法检测VE-cadherin在各组细胞中表达水平;新型四唑氮盐（MTS）比色法检测A549细胞吸光度(A490)值的变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;ELISA法分析A549细胞瞬时转染上清中VE-cadherin的表达水平;并分析上清液作用后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)A490值、各周期(G0/G1、G2/M和S)细胞比率、凋亡率和Matrigel小管形成数的改变。结果:干扰组VE-cadherin mRNA的表达水平（0.299±0.039）明显低于空白对照组（1.137±0.082）和阴性对照组（1.001±0.076）（P<0.05）;干扰组VE-cadherin蛋白的表达水平（0.297±0.045）明显低于空白对照组（0.833±0.119）和阴性对照组（0.794±0.095）(P<0.05);各组A549细胞A490值、各周期细胞比率和凋亡率比较差异无统计学意义;干扰组上清液中VE-cadherin的表达水平［(2.89±0.07) μg/L］明显低于空白对照组［（11.43±0.09）μg/L］和阴性对照组［（11.15±0.04）μg/L］（P<0.05）。干扰组与阴性对照组上清液作用后G0/G1、G2/M和S期HUVECs所占百分比比较差异无统计学意义(P>0.05);干扰组上清液明显抑制了HUVECs的增殖,作用24、48和72 h细胞增殖抑制率分别为29.2%、33.8%和30.1%;作用48 h干扰组HUVECs的凋亡率为27.12%±5.22%,显著高于阴性对照组(13.43%±3.50%)（P<0.05）。干扰组HUVECs小管形成数为1.53±0.31,显著低于阴性对照组（14.53±1.51）（P<0.05）。结论:VE-cadherin可能通过促进血管生成参与NSCLC的发生发展,有望成为NSCLC抗血管生成治疗的新靶点。     

氧糖剥夺条件下p75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用

目的 探讨氧糖剥夺（OGD）条件下p75神经营养素受体（p75NTR）在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中的表达变化和作用。方法 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法。模型成功建立后设立3组：无血清常规培养组（对照组）、OGD组和OGD+p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组（OGD+LM11A-31组）。在细胞培养12 h时用利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达。结果 成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型。细胞培养12 h时,对照组、OGD组和OGD+LM11A-31组细胞存活率分别为（94.80±4.06）%、（50.34±5.55）%、（64.68±4.59）%,LDH释放活力分别为（46.93±5.49）U/L、（353.09±30.67）U/L和（282.20±25.60）U/L,凋亡细胞比例分别为（1.82±0.45）%、（14.98±2.59）%和（7.36±1.98）%,p75NTR蛋白相对表达量分别为0.06±0.01、0.41±0.02和0.19±0.03,差异均有统计学意义（F=67.94、142.10、36.28、221.20,P均<0.05）。多重比较显示,OGD组细胞存活率低于对照组,LDH释放活力高于对照组,凋亡细胞比例高于对照组,p75NTR蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）;而LM11A-31处理后OGD+LM11A-31组细胞存活率高于OGD组,LDH释放活力低于OGD组,凋亡细胞比例低于OGD组,p75NTR蛋白表达低于OGD组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）。结论 OGD条件下p75NTR在人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中表达增加,可能促进了神经损伤和凋亡。     

轴突诱导因子4D对人胰腺癌细胞增殖、迁移及血管生成的影响

目的探讨siRNA沉默轴突诱导因子4D(Sema4D)对人胰腺癌细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法设计合成Sema4D-siRNA,转染至人胰腺癌细胞系中,瞬时转染48 h后利用反转录-聚合酶链反应检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化;瞬时转染72 h后利用Western blot法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell迁移实验、划痕修复实验检测转染后人胰腺癌细胞迁移性的改变;小管形成实验观察转染后人胰腺癌细胞培养上清液对血管形成能力的影响。结果转染siRNA后,人胰腺癌细胞中Sema4D mRNA和Sema4D蛋白表达、胰腺癌细胞的生长速度均较阴性对照组和空白对照组下降(P<0.05);Transwell迁移实验和划痕修复实验显示,胰腺癌细胞穿膜细胞数和划痕修复率显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);小管形成实验显示,转染siRNA组、阴性对照组和空白对照组血管形成数目分别为0.50±0.02、1.45±0.60、1.37±0.52,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Sema4D-siRNA能够在胰腺癌细胞中引发RNA干扰效应,下调Sema4D基因表达,抑制胰腺癌细胞增殖,使胰腺癌细胞迁移能力明显下降,抑制血管生成。     

巨大无功能性胰腺神经内分泌肿瘤1例附文献复习

胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors,PNETs),是胰腺肿瘤中一类极为少见的肿瘤,占胰腺肿瘤的2%~3%,其中30%~40%为无功能性PNETs[1],该类肿瘤在临床上罕见且表现各异,因此如何及时发现、准确诊断以及正确的治疗,对患者的生存质量和预后有很大的影响。本文就我科近期收治的1例巨大无功能性RNETS进行分析,并结合相关文献总结如下。     

外源性一氧化氮对小鼠神经祖细胞增殖的抑制作用

目的　探讨外源性一氧化氮 (NO)对小鼠神经祖细胞 (NPC)增殖的抑制作用。方法　用含上皮生长因子 (EGF)的培养基原代培养NPC ,以硝普钠 (SNP)作为NO的体外供体。用Griess还原法检测细胞上清液中NO的含量 ;MTT法试验检测活细胞数 ;用含血清培养基诱导NPC分化。结果　 2 4h后细胞上清液中NO含量随SNP浓度的增高而增加 ;经 10 0、15 0、2 0 0 μmol/L的SNP作用后 ,NPC吸光度值分别为 0 .5 4 6± 0 .0 16、0 .4 84± 0 .0 0 7、0 .35 7± 0 .0 0 7,对照组为 0 .6 4 2± 0 .0 2 1;在解除SNP抑制后 ,NPC仍能保持旺盛的增殖能力并能被诱导分化为神经细胞样细胞。结论　外源性NO对培养状态下的小鼠NPC有抑制作用。     

The effect of alphastatin peptide suppressing the hypoxia-induced vasculogenic mimicry formation of glioma

Objective： To investigate the vasculogenic mimicry formation induced by hypoxia in Ⅱ-Ⅲ human glioma cell and the effect of alphastatin peptide suppressing the hypoxia-induced vasculogenic mimicry formation and the mechanism. Methods： MTT, Transwell and three- dimentional culture were used to detect the proliferation, migration and tubule formation of SHG44. The expression of vascular endothelial growth factor-α（VEGF-α, erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma-A2 （EphA2） and matrix metalloproteinases 2 （MMP2） was detected by RT-PCR and Western blotting analysis. Results： The OD490 in hypoxia group was 0.60±0.06 and in control group was 0.46±0.05. The number of cell migration was 178.71±18.81 in hypoxia group and 85.86±17.92 in control group. The tubule formation was 56.80±12.21 in hypoxia group and 4.20±2.62 in control group. The proliferation, migration and tubule formation in hypoxia group were significantly higher than that in control group. The expression of VEGF-α, EphA2 and MMP2 was upregulated in hypoxia. When various concentrations of alphastatin （100, 1 000, 10 000 nmol/L） were added to hypoxia group, the numbers of cell migration were 142.57±12.12, 92.71±17.68, 30.00±7.72 and the tubule formation were 47.71±10.58, 18.86±8.40, 8.43±5.62. The cell migration and tubule formation were significantly suppressed by alphastatin in a dose-dependent manner. In alphastatin group, the phosphorylation of EphA2 protein （P=0.037, F=4,629） and activation of MMP2 protein （P=0.005, F=9.331） were significantly suppressed but there was no change in VEGF-α protein. Conclusion： Ⅱ-Ⅲ human glioma cell is able to form vasculogenic mimicry induced by hypoxia and alphastatin peptide can suppress the hypoxia-induced vasculogenic mimicry. VEGF-α induced EphA2 phospharilation and MMP2 activation maybe the key pathway to form vasculogenic mimicry.     

下调泛素样含PHD和环指域1基因的表达对喉癌Hep-2细胞增殖侵袭能力的影响

目的 探讨下调泛素样含PHD和环指域1(ubiquitin-like protein containing PHD and RING finger domains 1,UHRF1)基因在喉癌Hep-2细胞中的表达后对其增殖,凋亡,侵袭迁移能力的影响.方法 实验分为空白组,阴性对照组和干扰组.利用UHRFl-siRNA干扰UHRF1在喉癌Hep-2细胞中的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测UHRF1的表达变化.采用MTT法、流式细胞术、Transwell实验检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的变化.Western blot检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞内Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达的变化情况.结果 与空白组和阴性对照组相比干扰组下调UHRF1的表达后可明显抑制喉癌Hep-2细胞的增殖能力(P ＜0.001).空白组,阴性对照组,干扰组凋亡率分别为(5.47±2.77)％,(3.95±0.66)％,(18.95±1.10)％,干扰组凋亡率明显提高(P ＜0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野侵袭细胞数分别为(213.7 ±13.1),(221.3±10.3),(97.7±7.5),干扰组侵袭细胞数明显降低(P＜0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野迁移细胞数分别为(230.7±5.5),(222.7±11.2),(111.7±7.6),干扰组迁移细胞数明显降低(P ＜0.001).干扰组细胞Bax蛋白表达上调(P ＜0.001),Bcl-2蛋白表达下调(P ＜0.001),MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达下调(P ＜0.001).结论 在喉癌Hep-2细胞中下调UHRF1的表达后可明显抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞的侵袭迁移能力.     

回阳生肌膏抗小鼠骨髓内皮祖细胞功能损伤的研究

目的观察回阳生肌膏对过氧化氢(H₂O₂)诱导的小鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)功能损伤的影响。方法通过密度梯度离心法联合差速贴壁法提取、分离、培养小鼠骨髓EPCs,观察细胞形态及采用FITC标记的荆豆凝集素-1联合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)双摄取法鉴定EPCs。制备回阳生肌膏水提取物,采用细胞增殖/毒性试剂盒(CCK-8)筛选出最大无毒质量浓度(C)。针对回阳生肌膏水提取物进行化学成分定性分析。以0.12 mL/L H₂O₂刺激EPCs模拟糖尿病足溃疡氧化应激状态建立模型,将细胞密度调整至5×10⁸ L^-1,分别种于培养板,5孔为1组。将细胞分为空白对照组,模型组,回阳生肌膏高、中、低剂量组。空白对照组与模型组不予干预,各给药组分别予回阳生肌膏水提取物高剂量(C)、中剂量(C/2)、低剂量(C/4)。采用CCK-8法、Transwell实验、小管形成实验分别检测细胞的增殖、迁移、小管形成功能,酶联免疫吸附测定(ELISA)及硝酸还...     

手术切除治疗胰腺神经内分泌肿瘤肝转移的Meta分析

目的 探讨手术切除治疗胰腺神经内分泌肿瘤（pancreatic neuroendocrine tumors,PNETs）肝转移的价值.方法 搜索截至2012年8月的CNKI、CBM、MEDLINE、The Cochrane Library、EMBASE的相关随机研究.收录并比较单纯手术切除术和非手术治疗（射频消融、化疗、肝动脉栓塞及药物等）的随机临床研究（不受语言、盲法及发表状况限制）.由2位评价者依据检索策略收集资料,按纳入标准筛选文献.主要观察围手术期（30 d）的死亡率、症状缓解率及术后生存率指标.使用RevMan 5.1软件进行Meta分析.结果 目前无手术治疗PNETs肝转移临床效果的Meta-anlaysis、临床随机对照实验（randomized controlled trial,RCT）、非完全随机研究（quasi-randomised controlled trial,QRCT）文献.查得6篇回顾性队列研究（retrospective cohort study,RCS）纳入,涉及1020例.单纯手术切除术与肝动脉栓塞术（hepatic artery embolization,HAE）、经动脉治疗（intra-arterialtherapy,ITA）、药物（奥曲肽）、全身化疗等非手术治疗PNETs相比较,3年生存率[OR =0.24,95％CI（0.11,0.53）,P=o.0004]及5年生存率[OR =0.16,95％CI （0.12,0.22）,P＜0.00001]显著升高,中位生存期明显延长[（109.5±19.02）vs（31.2±5.97）个月,P＜ 0.01],差异有统计学意义.手术组症状缓解率显著高于非手术组[（98.3±2.8）vs（62.5±22.0）,P＜ 0.05],差异有统计学意义.手术组的围手术期死亡率低.结论 手术切除术是治疗PNETs肝转移首选的治疗方法.手术切除治疗安全有效,生存期明显延长,症状缓解率明显提高.由于目前缺乏RCT,手术切除治疗PNETs肝转移有效的证据需进一步的随机对照研究.     

人脐带间充质干细胞培养上清液对甲状腺乳头状癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞血管形成的影响

目的: 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）血管形成的作用。方法: 使用不同浓度的hUCMSCs培养上清液（hUCMSC-CM）刺激甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;采用基质胶小管形成实验检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞对HUVEC血管形成的影响;CCK-8法检测hUCMSC-CM对TPC-1细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的mRNA和蛋白表达及其培养上清液中VEGF的含量。结果： 与对照组相比,hUCMSC-CM可显著抑制TPC-1细胞的增殖（P<0.05和P<0.01）;经hUCMSC-CM刺激后的TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成能力显著下调（P<0.001）,且TPC-1细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.001）,其培养上清液中VEGF含量显著降低（P<0.05）。结论： hUCMSC-CM可显著下调TPC-1细胞中VEGF的表达及分泌,抑制TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成的能力。     

咬合干扰致大鼠咬肌能量代谢产物含量变化

目的：观察咬合干扰后不同时间大鼠咬肌能量代谢产物腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate,ATP）、腺嘌呤核苷二磷酸（adenosine diphosphate,ADP）、次黄嘌呤核苷酸（inosine monophosphate,IMP）、磷酸肌酸、肌酸、乳酸及pH水平的变化,分析咬合干扰对咀嚼肌能量代谢的影响。方法：选用雄性Sprague-Dawley大鼠（220~250 g）50只,随机分为实验组（40只）和对照组（10只）,实验组于右上第一磨牙粘固0.4 mm厚金属冠建立咬合干扰,并分别维持3、7、10、14 d（每个时间点各10只）, 对照组不施加咬合干扰。各组大鼠全麻下取双侧咬肌组织,其中5只大鼠样本加入0.4 mol/L高氯酸（10 mL/g）充分匀浆,离心、过滤后采用高效液相色谱分析ATP、ADP、IMP、磷酸肌酸、肌酸及乳酸含量,另外5只大鼠样本加入含5 mmol/L碘醋酸钠的匀浆液（10 mL/g）,充分匀浆后在37 ℃恒温水浴环境中利用pH计测试pH值。结果：与对照组相比,大鼠双侧咬肌ATP含量在咬合干扰3 d ［右侧：（5.36±0.13） μmol/g,左侧：（5.77±0.25） μmol/g］ 升高（P<0.05）,7、10和14 d没有显著改变;大鼠双侧咬肌IMP［右侧：（0.21±0.03） μmol/g,左侧：（0.19±0.03） μmol/g］、肌酸［右侧：（24.76±2.94） μmol/g,左侧：（27.75±2.23） μmol/g］含量在咬合干扰7 d升高（P<0.05）,3、10和14 d没有显著改变;大鼠双侧咬肌磷酸肌酸含量在咬合干扰7、10和14 d降低［右侧分别为：（10.70±0.71） μmol/g、（11.57±0.52） μmol/g、（10.74±1.39） μmol/g,左侧分别为：（10.05±0.57） μmol/g、（10.75±1.12） μmol/g、（10.61±1.15） μmol/g, P<0.05］,3 d没有显著改变;大鼠双侧咬肌ADP、乳酸含量及pH水平在咬合干扰后各时间点均没有显著改变（P>0.05）。结论：咬合干扰导致大鼠咀嚼肌能量代谢产物含量改变,可能与咬合干扰诱发咀嚼肌疼痛、功能紊乱、肌纤维构筑改变等病理过程相关。     

端粒酶逆转录酶线粒体转位促进肝癌细胞干性及耐药的研究

目的 探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,hTERT)线粒体转位对肝癌细胞干性及耐药的影响.方法 采用大剂量顺铂(CDDP)冲击、间歇诱导的方法诱导肝癌细胞HepG2、Huh7耐药,构建耐药细胞株HepG2/CDDP、Huh7/CDDP,CCK-8检测细胞耐药能力;Western blot检测细胞线粒体hTERT表达情况;激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位;流式细胞术检测耐药细胞干性相关蛋白CD133、EpCAM表达情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Western blot检测耐药细胞干性相关因子OCT-4蛋白表达水平变化.结果 与亲本细胞HepG2[耐药指数(7.69±0.86)μg/mL及Huh7 (7.18±0.35) μg/mL]相比,耐药细胞株对CDDP耐药指数明显增加[HepG2 (41.16±0.42) μg/mL,Huh7 (33.48±0.33)μg/mL,P＜0.01],经顺铂(CDDP)诱导耐药细胞线粒体hTERT表达显著升高,线粒体膜电位增强,CD133+细胞比例[HepG2 (1.44±0.41),HepG2/CDDP (23.15±1.55),P＜0.01]及EpCAM+细胞比例[HepG2 (0.85 ±0.10),HepG2/CDDP (3.96 ±0.10),P＜0.01]增加,克隆形成能力增强,干性相关因子OCT4蛋白表达水平增加.结论 经顺铂诱导的肝癌耐药细胞线粒体hTERT转位显著增加,且具有明显的肿瘤干细胞特征.     

绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织和血浆H_2S的影响

目的:观察绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织和血浆硫化氢(H_2S)含量的影响。方法:40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组,T2DM并NAFLD模型组。模型组造模周期8周。将模型大鼠随机分为模型组(予同等体积的纯净水灌胃),对照组[予绞股蓝0.5 g·(kg·d)-1灌胃干预],治疗组[予绞股蓝0.5 g·(kg·d)-1联合银杏叶提取物0.1 g·(kg·d)-1]灌胃干预。继续予高糖高脂饲料造模;整个实验周期共14周。检测肝组织H_2S和三酰甘油(triacylglycerol,TG)水平,检测血H_2S、血糖、TG水平。结果:1血浆H_2S浓度比较:与空白组比较,治疗组、对照组、模型组血浆H_2S下降;但治疗组、对照组高于模型组,差异有统计学意义(P0.01),治疗组高于对照组,差异有高度统计学意义(P0.01)。2肝组织H_2S含量比较:治疗组、对照组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01),治疗组高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。3空腹血糖水平比较:空白组为(5.56±0.42)mmol·L~(-1)、治疗组为(10.24±1.18)mmol·L~(-1)、对照组为(12.28±1.86)mmol·L~(-1)、模型组为(18.12±2.26)mmol·L~(-1),治疗组、对照组低于模型组,差异有统计学意义(P0.01),治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。4血TG水平比较:空白组(1.02±0.10)mmol·L~(-1)、治疗组(1.92±0.44)mmol·L~(-1)、对照组(2.45±0.51)mmol·L~(-1)、模型组(3.82±0.58)mmol·L~(-1),治疗组、对照组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01),治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。5肝组织TG水平:空白组(30.26±2.48)mg·g~(- 1)、模型组(228.46±8.48)mg·g~(- 1)、治疗组(153.12±9.98)mg·g~(- 1)、对照组(196.24±9.78)mg·g~(- 1),治疗组、对照组低于模型组(P0.05或P0.01),治疗组低于对照组(P0.05)。结论:绞股蓝联合银杏叶提取物能调整T2DM并NAFLD模型血糖、血脂代谢,抑制血浆和肝组织H_2S的表达。