抗纤二号对大鼠肝纤维化的I,III胶原表达的影响

目的　在过去临床实践的基础上 ,欲探讨复方抗纤二号抗肝纤维化的治疗机制。　方法　雄性Wistar大鼠分成五组 ,除正常对照外 ,余四组大鼠肝纤维化造模均采用腹腔注射猪血清 (0 .5ml /次 ,2次 /周 )。抗纤二号早期治疗组在第三周给予中药灌胃 ,1g/10 0 g每天一次。抗纤二号晚期治疗组在造模第九周给予中药灌胃 ,1g/10 0g每天一次。γ -干扰素治疗组在造模第九周每天皮下注射 10万单位的干扰素。模型组和正常对照组给等量的生理盐水灌胃。在 12周杀大鼠 ,HE和Masson染色观察肝纤维化的形成 ,RT -PCR检测肝组织中I ,III型胶原mRNA的表达 ,免疫组化观察I ,III型胶原蛋白的表达。　结果　病理学观察 ,抗纤二号早期治疗组显著逆转了猪血清诱导的肝纤维化 ,与模型组比较 ,经HE和Masson染色抗纤二号治疗组能明显降解纤维化大鼠肝中的胶原 (P <0 .0 5 )。PT -PCR分析I ,III型胶原mRNA的表达在抗纤二号治疗组均明显减少。同时分析表明I ,III型胶原蛋白的表达在抗纤二号治疗组均明显减少。　结论　抗纤二号能逆转免疫引起的肝纤维化 ,这是由于能促进肝脏胶原的降解作用 ,最终导致肝纤维化的逆转。肝纤维化的早期治疗用药优于后期的治疗。     

纤维化淤胆性肝炎肝组织α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达

目的了解纤维化淤胆性肝炎（FCH）肝星状细胞（HSC）活化状态及其与肝纤维化的关系。方法肾移植术后乙型肝炎病毒（HBV）相关性FCH患者9例，正常者5例作为对照。用免疫组织化学的方法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（a—SMA）及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果FCH肝组织α—SMA与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达显著增加，表达分布部位一致，定量分析呈明显正相关（P〈0．01）。结论肾移植术后HBV相关性FCH患者肝纤维化的发生与HSC的活化状态有关。     

纤维化淤胆性肝炎肝组织α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达

目的了解纤维化淤胆性肝炎(FCH)肝星状细胞(HSC)活化状态及其与肝纤维化的关系。方法肾移植术后乙型肝炎病毒(HBV)相关性FCH患者9例,正常者5例作为对照。用免疫组织化学的方法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果FCH肝组织α-SMA与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达显著增加,表达分布部位一致,定量分析呈明显正相关(P<0.01)。结论肾移植术后HBV相关性FCH患者肝纤维化的发生与HSC的活化状态有关。     

博莱霉素大鼠肺纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原表达

特发性肺纤维化病因不明,中位生存时间仅3年左右,肺移植是目前唯一有望提供长期生存的方法。由于部分研究结论难以从临床患者中得到,肺纤维化动物模型便成为研究人类特发性肺纤维化的有力工具⁽¹⁾。20世纪70年代初,Snider等⁽²⁾首次用博莱霉素造模成功,由于该模型病理学特点与人类特发性肺纤维化十分相似,目前成为国内外公认的用于研究人类肺纤维化的动物模型。Ⅰ、Ⅲ型胶原是肺组织中的主要胶原成分,也成为评价博莱霉素肺纤维化模型的特异指标⁽³⁾。     

牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ和Ⅲ型胶原合成及比例的影响

目的 探讨牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织不同时相Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及比例的影响.方法 将Wistar大鼠144只随机分为对照组（生理盐水,普饲）、矽肺组（普饲）和牛磺酸组（牛磺酸饲料）给予气管内注入1 ml矽尘混悬液（50 mg/ml）,每组48只.分别在第1、3、7、14、21、28天时,用高效液相色谱法测定其血浆中牛磺酸含量;取肺组织制作石蜡切片,天狼猩红法染色,偏振光显微镜观察各组动物肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成及比例的变化,图像分析系统对其进行定量分析.结果 第7、14、21和28天,矽尘组Ⅰ型胶原含量分别比对照组增加3.84%、3.77%、3.73%、9.83%,差异有统计学意义（P＜0.01）.第7、21和28天时,牛磺酸组Ⅰ型胶原含量分别比矽尘组降低2.39%、1.62%和7.13%;与对照组比较,第14、21和28天Ⅰ型胶原含量分别增加2.12%、2.11%和2.70%,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.第28天时,牛磺酸组Ⅲ型胶原含量比矽尘组减少2.62%,差异有统计学意义（P＜0.05）.矽尘组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例第7天开始增加,第28天时达到最大比值1.87,牛磺酸组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例从第7天开始增加,且增加幅度高于矽尘组,第28天时增加幅度低于矽尘组.结论 牛磺酸对矽尘诱导大鼠肺组织不同时相的Ⅰ、Ⅲ型胶原合成抑制作用不同.     

血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型胶原及Ⅳ型胶原对肝纤维化诊断的意义

肝纤维化的形成是由于肝星状细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ)生成过多 ,在肝内大量沉积所致 ,是慢性肝炎发展为肝硬化的前期阶段。早期诊断和治疗肝纤维化有利于控制肝硬化的形成 ［１ -２］。我们对９１例慢性乙型肝炎患者进行了肝脏穿刺 ,同时抽血检测血清透明质酸 (ＨＡ)、层粘连蛋白 (ＬＮ)、Ⅲ型前胶原 (ＰＣⅢ )及Ⅳ型胶原 (ⅣＣ) ,以探讨血清ＨＡ、ＬＮ、ＰＣⅢ及ⅣＣ在肝纤维化诊断中的意义。１材料与方法１．１观察对象为１９９９年１０月～２０００年１０月在本院住院的慢性乙型肝炎患者共９１例 ,其…     

愈肝颗粒对DMN诱发肝纤维化大鼠的实验研究

目的探讨中药复方对二甲基亚硝铵（DNM）诱导大鼠肝纤维化的作用及机制。方法采用二甲基亚硝铵4周注射诱导大鼠肝纤维化模型,实验分为正常组、模型组和愈肝组,每个组再分层为4、6、8周,共计九组,检测血清肝功能、PC—1]I、C—IV的变化及肝脾指数,观察肝脏组织病理学。结果DMN注射可成功复制大鼠肝纤维化模型;愈肝颗粒方能显著改善肝功能、肝脾指数,逆转干纤维化（6周P〈0．05,8周组P〈0．01）及肝脏病理纤维化分级（P〈0．05）。结论愈肝颗粒方有效改善肝脏微循环,阻止肝损伤及抗肝纤维化作用．抗纤机制可能与抑制HSC激活和一系列细胞因平表达有英．     

慢性乙型肝炎肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP1、TIMP1的表达

目的观察慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的沉积以及基质金属蛋白酶1（MMP1）和金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）的表达，从胶原降解的角度探讨慢性乙型肝炎肝纤维化的发病机制。方法不同纤维化程度慢性乙型肝炎肝组织标本50例，用免疫组化方法检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP1、TIMP1的表达。结果随着肝组织纤维化程度的加剧。慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TIMP1表达显著增加，肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与TIMP1呈明显正相关。结论慢性乙型肝炎患者肝纤维化的发生与TIMP1增加、间质胶原蛋白的分解降低有关。     

久效磷对大鼠皮肤成纤维细胞胶原Ⅰ和ⅢmRNA表达的影响

目的 研究久效磷对体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞生长及胶原Ⅰ和Ⅲ合成的影响.方法取4只出生3d清洁级SD大鼠背部皮肤,以组织块法培养大鼠皮肤成纤维细胞,正常传代.取第4代成纤维细胞,按1.0×10(6)个/瓶接种于25 c㎡培养瓶中,当细胞至亚融合状态,分别加入0(对照)、0.01、0.1、1 μg/L的久效磷溶液,培养...     

Ⅰ型胶原基因调控与肝纤维化

直纤维化的实质是胶原蛋白等细胞外间质成分的代谢异常，尤其是Ⅰ型胶原的达量合成及积聚。近年肝纤维化研究已进入分子水平。本文从染色质构型、顺式作用元件与反式作用因子的相互作用、ＤＮＡ甲基化状态以及转录调控因子等几个方面，扼要介绍肝纤维化过程中Ⅰ型胶原基因的表达调控的研究进展。     

姜黄素脂质体对人黄韧带细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的观察姜黄素（Cur）对人黄韧带细胞（LFCs）Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,探讨其抗黄韧带纤维化的机制。方法采用组织块加酶预消化法培养LFCs作为研究模型,予以不同浓度姜黄素0、10、50、100、200ng／ml刺激人LFCs12h,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测姜黄素对人LFCs的抑制效应,采用Real—time PCR法检测姜黄素对人LFcs的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。结果MTT检测结果显示：10ng,／ml姜黄素作用于人LFCs,表现为增殖倾向,其光吸收值（OD值）显著地高于正常对照组。而在50-100ng／ml的浓度范围内,随着姜黄素药物浓度的增加,其抑制作用逐渐增强,100ng/ml和200ng／ml姜黄素能显著抑制人LFCs增殖（p≤0．05）;Real—timePCR结果显示200．g／ml姜黄素组能够显著抑制人LFCsⅠ、Ⅲ型胶原合成（p≤O．05）。结论较高浓度的姜黄素能有效抑制人LFCs增殖和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成,对人黄韧带纤维化可能有治疗作用。     

不同矿尘对大鼠肺中Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量的影响

采用酶联免疫法研究肺中Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量,以比较不同矿尘所致肺纤维化程度。用此方法测定胶原含量比传统方法有快速、特异性强的优越性。矿尘是采自瑶岗仙钨矿现场和化学品金属氧化物如三氧化钨及二氧化锰。所得结果表明,矿尘中的金属如钨、锰、砷等本身均无明显促使肺胶原增生的作用;锡与铁有轻微的促进作用,矿浆与矿壁沉降尘的作用不明显。矿脉石英尘有较强的促进胶原增生作用,说明该矿粉尘的主要危害与矿尘中石英含量有关。     

烟酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原形成的影响

目的 阐明饲料中添加烟酸对染矽尘大鼠早期Ⅰ型、Ⅲ型胶原形成的影响。方法 采用气管暴露法建立矽肺动物模型,高效液相色谱法测定血浆烟酸含量,天狼红染色法结合偏振光显微镜观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成,图像分析系统对胶原定量分析。结果 烟酸组不同时点血浆中烟酸含量明显升高,与对照组和矽尘组相比,差异均有显著性。染矽尘后第7天、第28天,与对照组比较,矽尘组大鼠肺组织Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比显著增加,而烟酸组Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比则明显低于矽尘组。染矽尘后第28天,Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比显著高于对照组,而烟酸组Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比则显著低于矽尘组。结论烟酸通过抑制Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成,而有效地阻断矽尘诱导的大鼠肺纤维化。     

矽肺大鼠肺组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量及其比值变化的研究

用胃酶和醋酸自大鼠肺中提取Ⅰ和Ⅲ型胶原,並用酶联免疫法对其含量及比值进行测定。实验结果表明自大鼠气管注入石英后,在肺部所引起的纤维化的过程中,Ⅰ型与Ⅲ型胶原的含量均不断增长。在染尘后10天时,Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值低于未染尘时的数值,而在20天后,此比值明显升高,並维持恒定。通过Ⅰ型与Ⅲ型肺胶原含量及其比值的测定表明电焊烟尘所引起的大鼠肺纤维化病变进展缓慢,其纤维化程度也轻。本实验结果证明Ⅰ/Ⅲ型胶原之比值可用来表示不同粉尘所引起的纤维化程度。     

PCⅢ与肝纤维化

采用国产血清Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）试剂盒，应用放免法测定早期肝硬化１５例，血清ＰＣⅢ含量为２５４±３９．０６μｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５），与正常对照组９３．０８±２０．９６μｇ／Ｌ相比较，有显著性差异（Ｐ＜０．０１），提示早期肝硬化患者体内肝纤维合成代谢旺盛，ＰＣⅢ明显升高，有助于肝纤维化程度的判断。     

肝病患者血清Ⅲ型前胶原的测定

肝病患者血清Ⅲ型前胶原的测定吴佳玉，孙琦，邱功，唐荣珍肝纤维化是慢性肝病的主要病理改变之一，是慢性肝病向肝硬化发展的必然阶段，它的发生和发展直接影响慢性肝病的预后。血清Ⅲ型前胶原（Ｐｒｅｃｏｕａｇｅｎ．Ｔｙｐｅ．ｐｃⅢ）是由肝细胞分泌的，其血清水平反...     

铀矿尘致大鼠肺纤维化过程中Ⅰ和Ⅲ型胶原及层粘连蛋白表达的变化

目的 探讨铀矿尘致大鼠纤维化过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原、层粘连蛋白(Laminin,LN)表达的变化特征.方法 60只Wistar大鼠随机分为铀矿尘组(30只)和对照组(30只),铀矿尘组大鼠一次性非暴露气管内滴注20 mg/ml的粉尘悬液1 ml,对照组大鼠一次性气管内滴注生理盐水1 ml,分别于处理后7、14、21、30及60 d每组随机处死6只,取肺组织,HE染色观察肺组织形态学改变,天狼猩红染色法观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原变化,免疫组织化学法检测LN蛋白的表达.结果 铀矿尘致肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原增生为主.铀矿尘组21、30、60d时Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维面积百分比明显增高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).LN主要见于肺组织内血管、支气管周围、血窦壁以及肺间隔的基底膜,形态上以增粗的线状或丛状分布为主.铀矿尘组21、30、60 d时肺组织中LN阳性细胞积分吸光度(14.89±2.25、22.98±2.29、30.34±2.19)增加,与对照组(9.06±1.21、8.98±0.86、10.04±2.00)比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 铀矿尘诱导大鼠肺组织纤维化早期以Ⅰ型胶原纤维为主,后期Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维均大量增多,分布范围扩大.肺组织过程中有LN高表达.

Abstract：

Objective To explore the characteristics of LN and type Ⅰ, Ⅲ collagen in pulmonary fibrosis induced by uranium ore dust in rats. Methods 60 adult Wistar rats were divided randomly into two groups, control group (30 rats)and uranium ore dust group (30 rats). Non-exposed intratracheal instillation method was used. Uranium ore dust group was exposed 20 mg/ml uranium ore dust suspension 1ml per rat,meanwhile control group was exposed normal saline 1ml per rat. Post-exposed the 7, 14, 21, 30 and 60 d, 6 rats in each group were killed randomly, lung tissue were collected. The pathological changes in lung tissue were observed by microscope using HE staining, the collagen Ⅰ and Ⅲ in lungs were observed by polarizing microscope using Biebrich scarlet staining. The expression of LN protein in lung tissue was observed by immunohistochemistry-SP. Results During lung fibrosis, a large amount of the proliferated Ⅰ and Ⅲ collagen in lungs were observed. Post-exposure to uranium ore dust, the characteristics in proliferated collagen in lungs were type Ⅰ collagen deposited in lung interstitium mainly in the early stage. The area percentage of collagen Ⅰ and Ⅲ was increased significantly at 7,14, 21, 30 and 60 d in the experimental group as compared with that in the control group (P＜0.05 or P＜0.01). The over expression of LN in the lung tissue were observed. The expression of LN was distributed in the lung tissue as thickening of the linear or cluster. The integral optical density of LN was increased significantly at 21,30 and 60d in the experimental group as compared with that in the control group(P＜0.05 or P＜0.01). Conclusions After exposure to uranium ore dust, the characteristics in proliferated collagen in lungs are the type of Ⅰ collagen deposited in lung interstitium mainly in the early stage, while the type of Ⅲ collagen increase significantly at the later period. The overexpression of LN exists in the process of pulmonary fibrosis. It suggests that LN has a role effect in the process of pulmonary fibrosis.     

肝纤维化检测指标对肝硬化和肝癌诊断的价值

目的 探讨肝纤维化检测指标对肝硬化和肝癌诊断的意义。方法 放射免疫分析法与病例对照研究方法。结果 肝硬化和肝癌血清中ＰｃⅢ、ＬＮ、Ⅳ－Ｃ、ＨＡ及ＡＦＰ水平均明显高于正常对照组,肝癌血清ＡＦＰ高于肝硬化。结论 四项肝纤维化检测指标,不仅能较好的反映肝纤维化的发展,也能反映肝癌病情的程度,其与ＡＦＰ联合检测对于肝癌诊断具有较好的临床价值。     

慢性乙型肝炎肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP1、TIMP1的表达

目的观察慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的沉积以及基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)的表达,从胶原降解的角度探讨慢性乙型肝炎肝纤维化的发病机制。方法不同纤维化程度慢性乙型肝炎肝组织标本50例,用免疫组化方法检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP1、TIMP1的表达。结果随着肝组织纤维化程度的加剧,慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TIMP1表达显著增加,肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与TIMP1呈明显正相关。结论慢性乙型肝炎患者肝纤维化的发生与TIMP1增加、间质胶原蛋白的分解降低有关。     

稀土氧化钕粉尘染毒大鼠不同时间点Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量及IL-12表达的研究

目的 探讨稀土氧化钕粉尘暴露对大鼠不同时间点肺组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-12(IL-12)表达的变化。方法 选用125只SPF级成年SD雄性大鼠,体重(200±16)g,随机分为染尘组和对照组,采用气管非暴露插管灌注法建立模型,分别用稀土氧化钕粉尘悬液0.8 m L(50 mg/m L)和0.9%生理盐水0.8 m L进行一次性染尘。分别于染尘后第3、7、14、21和28 d各处死15只染尘组和10只对照组大鼠,收集BALF;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定染尘组和对照组大鼠BALF上清液中IL-12含量,肺组织分别进行HE染色、天狼猩红染色,运用Image-Pro Plus Version 4.5for Windows TM图象分析系统对肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量进行定量分析。结果 稀土氧化钕粉尘致实验大鼠肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的大量增生,染尘后早期主要以Ⅰ型胶原纤维增生为主。其中Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达量明显增加,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理学观察证实,染尘大鼠早期肺组织以炎症反应为主,且随染尘时间的延长炎症反应程度呈现加重的趋势。染尘后不同时间点大鼠BALF上清液中IL-12出现先减少后增加,在第7 d达到最低值后又呈现增加趋势,但均高于对照组(P<0.05)。结论 稀土氧化钕粉尘诱导大鼠肺纤维化过程中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量增多,且分布范围扩大。同时BALF上清液中IL-12出现高表达,表明IL-12的含量变化与稀土氧化钕粉尘致大鼠肺纤维化发生发展密切相关。