Rho激酶抑制剂对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚的影响

目的 研究Rho激酶抑制剂对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)诱导大鼠心肌肥厚的影响及其机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为5组:空白对照组、Iso模型组、法舒地尔(fasudil,Fas)低剂量组、高剂量组及卡托普利(captopril,Cap)组,每组8只.除空白对照组外,各组皮下注射Iso建立大鼠心肌肥厚模型.给药结束后分别测定各组大鼠体重(BW)、心脏重量(HW),计算心脏重量指数(HW/BW);测定左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左心室压力上升及下降最大速率(±dp/dtmax)等指标;取心肌组织作病理学检测;RT-PCR测定心肌组织RhoA、Rho激酶mRNA表达.结果 Iso模型组大鼠HW/BW增大;LVEDP增加,而LVSP、±dp/dtmax下降;心肌细胞直径增大、胶原纤维增生;左心室组织RhoA、Rho激酶mRNA表达上调.使用Fas和Cap干预,上述指标均出现不同程度的改善.结论 肾上腺素β受体兴奋所诱导的心肌肥厚伴有Rho激酶信号通路的激活,Rho激酶抑制剂可改善Iso所致心肌肥厚动物模型的心功能和病理学变化.     

Rho/Rho激酶在压力负荷心力衰竭大鼠心肌组织的表达

目的　探讨升主动脉缩窄压力超负荷心力衰竭 (心衰 )大鼠心肌组织Rho/Rho激酶的表达及Rho激酶抑制剂法舒地尔 (fasudil)对心衰的影响。方法　结扎大鼠升主动脉 ,同时制备假手术模型。 2 0周后成功建立慢性心衰模型。随机分为三组 ,每组 10只大鼠 :(1)假手术组 :生理盐水 0 1ml,腹腔注射 ,每日 2次 ;(2 )心衰组 :生理盐水 0 1ml,腹腔注射 ,每日 2次 ;(3)fasudil组 :fasudil 5mg/kg ,腹腔注射 ,每日 2次 ,疗程 4周。治疗前后检测各组大鼠血流动力学指标 ,疗程结束后处死大鼠 ,检测左室肥厚指数、心肌组织RhoA、Rho激酶mRNA表达及Ca2 + 浓度即 [Ca2 + ]i 的变化。结果心衰组与假手术组相比 ,左室舒张末压明显增高 ,而左室收缩压和左室压力变化最大上升和下降速率明显减低 ,P <0 0 1;左室肥厚指数明显增加 ,P <0 0 1;心肌组织RhoA、Rho激酶mRNA表达显著增高 ,P <0 0 1;心肌组织内 [Ca2 + ]i 显著增高 ,P <0 0 1。fasudil组与心衰组相比 ,左室舒张末压明显减低 ,左室收缩压和左室压力变化最大上升和下降速率明显增高 ,P <0 0 1;左室肥厚指数下降 ,P <0 0 1;心肌组织RhoA、Rho激酶mRNA表达明显下降 ,P <0 0 1;心肌细胞内 [Ca2 + ]i 变化无统计学意义 ,P >0 0 5。结论　心衰大鼠心肌组织RhoA、Rho激     

辛伐他汀抑制RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性表达逆转兔心室重构

目的:在兔前后负荷增加心力衰竭模型,观察辛伐他订对心肌肥厚、心功能的影响,探讨辛伐他订抑制心肌肥厚、改善心功能的机制。方法:24只新西兰白兔分为4组,一组假手术组,为健康对照。2、3、4组通过破坏主动脉瓣和缩窄腹主动脉,增加左心室前、后负荷,建立慢性心力衰竭模型;2组:心力衰竭对照组;3组:心力衰竭早干预组,术后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察8周;4组:心力衰竭晚干预组:手术4周后每天给与辛伐他汀5 mg/kg灌胃,观察4周。各组术后及观察结束时行超声心动图检查;Western blot分析心肌细白膜RhoA蛋白表达,[γ-32P]GTP结合分析检测Rho GTPase活性。结果:早干预组及晚干预组室间隔厚度(IVST)、左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室后壁厚度(LVPwd)、左心室收缩期内径(LVIDs)、心脏质量(HW)、左心室质量(LVW)、心脏/体质量比(HW/BW radio)、显著低于心力衰竭对照组,射血分数(EF)、左室长轴缩短率(FS)显著高于心衰对照组。早干预组左心室/体质量比(LVW/BW radio)显著低于心力衰竭对照组。心力衰竭组心肌细胞膜RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性明显高于健康对照组,辛伐他汀早干预组及晚干预组心肌细胞膜RhoA蛋白表达及Rho GTPase活性显著低于心力衰竭对照组。结论:辛伐他订通过抑制RhoA蛋白由胞浆转至新胞膜、抑制Rho GTPase活性而抑制心肌肥厚,改善心功能。     

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌纤维化的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对压力超负荷大鼠心肌纤维化的影响及机制。方法:从60只SD大鼠中随机选取52只采用腹主动脉缩窄术制备心肌纤维化模型,其余8只行假手术(假手术组)。手术4周后,将存活的成模大鼠(n=39)随机分为模型组(n=10)、卡托普利组(n=9)、STS高剂量组(STS-H组,n=10)和STS低剂量组(STS-L组,n=10)。分别给药4周后,测定各组大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI),观察心肌病理学改变,计算胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原容积分数(PCVF),碱水法检测羟脯氨酸含量,免疫组化法分析心肌转化生长因子(TGF)β1、骨桥蛋白(OPN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western blot检测RhoA和Rho激酶1(ROCK1)的表达。结果:与模型组比较,卡托普利组、STS-H组和STS-L组大鼠HMI、LVMI、羟脯氨酸水平、CVF和PCVF显著降低,TGFβ1、OPN、α-SMA和RhoA、ROCK1表达也显著降低(P0.05);STS-H组上述指标与卡托普利组无显著差异,STS-L组除HMI和LVMI外其余指标显著高于卡托普利组和STS-H组(P0.05)。结论:STS可显著改善压力超负荷大鼠心肌纤维化,可能与抑制细胞向肌成纤维细胞表型分化有关。     

法舒地尔对压力超负荷大鼠心脏的肌成纤维细胞表型分化的影响

目的 Rho激酶介导的肌动蛋白细胞骨架重组在肌成纤维细胞(MFB)表型分化中具有重要作用。本实验拟观察Rho激酶抑制剂法舒地尔对压力超负荷大鼠心脏MFB表型分化的影响。方法采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷诱导的心肌纤维化大鼠模型。假手术组(Sham组)仅分离但不予结扎腹主动脉。术后4周末,将存活大鼠按随机数表法分为模型组(Model组)、法舒地尔高剂量组(FH组)和法舒地尔低剂量组(FL组)。药物干预4周末,观察大鼠心肌病理学改变,并检测心肌羟脯氨酸(HYP)含量,评估心肌纤维化程度;酶联免疫吸附法检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量;免疫组织化学法分析心肌磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶蛋白亚基1(p-MYPT1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果 Model组大鼠心肌纤维化程度较Sham组明显加重,AngⅡ含量显著升高,p-MYPT1(0.063±0.009比0.029±0.014)、α-SMA(0.034±0.009比0.004±0.003)、OPN(0.043±0.007比0.012±0.006)和TGF-β1(0.058±0.019比0.019±0.009)的表达均明显升高(均为P<0.01);FH组和FL组大鼠心肌纤维化程度较Model组减轻,AngⅡ含量均显著下降,p-MYPT1(0.029±0.013和0.040±0.011)、α-SMA(0.016±0.006和0.027±0.007)、OPN(0.018±0.004和0.036±0.006)和TGF-β1(0.022±0.013和0.039±0.014)的表达也不同程度下降(P<0.01或P<0.05)。结论法舒地尔改善压力超负荷大鼠心肌纤维化的作用至少与部分抑制MFB表型分化有关。     

Rho激酶在急性心肌梗死大鼠中的表达及其对心肌细胞凋亡的影响

目的: 分析心肌梗死(MI)后大鼠心肌组织中Rho激酶表达的变化,探讨Rho激酶信号通路与心肌细胞凋亡的关系及其选择性抑制剂法舒地尔对MI后心肌的保护作用。 方法: 选取雄性Wistar大鼠,结扎其左前降支建立急性心肌梗死(AMI)模型。将术后24 h存活的24只大鼠随机分为治疗组（n=12）和AMI组（n=12）,另随机选取10只大鼠作为假手术组,只在其左前降支下穿线不结扎。治疗组腹腔注射法舒地尔5 mg/kg,每日两次;AMI组和假手术组给予等量的生理盐水。4周后,用Evens蓝及四唑氮蓝试验(NBT)双染确定缺血及梗死面积;用RT-PCR法测定Rho激酶mRNA的表达;DNA片段分析观察心肌细胞凋亡的情况;用免疫组化染色法测定凋亡相关蛋白bcl-2及bax表达的变化。结果: 与AMI组相比,治疗组的梗死面积显著减小(P<0.05)。AMI大鼠缺血心肌组织中DNA片段分析显示,有DNA梯状条带(ladder)形成,假手术组大鼠却没有。AMI组大鼠中Rho激酶mRNA及凋亡相关蛋白bax的表达明显增加(P<0.01,P<0.01);bcl-2的表达明显减少(P<0.01)。以法舒地尔治疗4周后,Rho激酶mRNA及bax的表达均显著减少,bcl-2的表达显著增加(均P<0.01)。结论: MI大鼠心肌组织中Rho激酶的表达升高,心肌细胞凋亡增加。法舒地尔能够减少Rho激酶的表达,减少心肌细胞凋亡,发挥对心肌的保护作用。     

卡托普利防治心肌肥厚效应与心肌肌球蛋白重链基因表达及儿茶酚胺氧自由基代谢的关系

目的 :应用大鼠腹主动脉狭窄心肌肥厚模型 ,观察血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)卡托普利防治心肌肥厚的作用 ,以及该作用与心肌组织内儿茶酚胺、氧自由基、血管紧张素 (AngⅡ )含量和心肌肌球蛋白重链(MHC)基因表达的关系。方法 :取体重 15 0～ 2 2 0 gSD大鼠 2 0只 ,随机分成 3组 :对照组 (7只 )、心肌肥厚组 (6只 )、心肌肥厚加卡托普利组 (卡托普利组 ,7只 )。卡托普利组大鼠每天服用卡托普利 6 0mg/kg ,药粉末溶于饮水中。 3组动物均于手术后 8周处死。结果 :①卡托普利组大鼠全心重 (HW )、左心室重 (LVW )、HW /体重 (BW )、LVW /BW各指标与心肌肥厚组比较均明显降低 ;②卡托普利可明显抑制去甲肾上腺素、多巴胺含量的降低 ,以及肾上腺素含量的增高 ;③卡托普利可增强心肌组织超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Pχ)活性 ,减少过氧化脂质 (LPO)的生成 ;④卡托普利可降低压力超负荷所致的心肌肥厚组织AngⅡ含量的增高 ;⑤卡托普利可使心肌α MHC基因表达增强 ,β MHC基因表达减弱 ,并提高α MHCmRNA/β MHCmRNA比值。 结论 :卡托普利能有效地防治心肌肥厚的发生。其作用机制不仅与卡托普利调整和改善心脏局部儿茶酚胺、氧自由基代谢有关 ,而且还与卡托普利直接抑制体内肾素 血管紧张     

法舒地尔对压力超负荷大鼠心肌肝细胞生长因子表达的影响

目的:观察法舒地尔对压力超负荷大鼠心肌肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨法舒地尔防治心肌纤维化的作用机制。方法:采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷心肌纤维化大鼠模型。假手术组(n=8)仅分离但不予结扎腹主动脉。术后4周末,将手术组存活的28只大鼠随机分为模型组(n=10)、法舒地尔高剂量组(FH组,n=9)和法舒地尔低剂量组(FL组,n=9)。药物干预4周后,计算大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI)。观察心肌病理学改变,测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原容积分数(PCVF)。免疫组织化学法分析心肌α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶蛋白亚基1(p-MYPT1)、HGF和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:FH和FL组较模型组HMI、LVMI、CVF、PCVF及α-SMA、p-MYPT1、TGF-β1的平均光密度值明显降低,HGF的平均光密度值明显升高(P均0.05),且FH组与FL组相比作用更明显。结论:法舒地尔改善压力超负荷大鼠心肌纤维化的作用可能与促进HGF的表达有关。     

稳心颗粒对大鼠心肌肥厚的影响及作用机制研究

目的 观察稳心颗粒对大鼠心肌肥厚的影响,并探讨其相关机制.方法 将30只大鼠随机分为对照组、异丙肾上腺素(ISO)组和ISO +稳心颗粒组,每组10只.检测心脏质量/体质量(HW/BW)及左室质量/体质量(LVW/BW),观察心肌细胞β-连环蛋白(β-catenin)及c-myc蛋白的变化被观察.结果 与对照组比较,ISO组大鼠HW/BW和 LVW/BW明显增加(P<0.05),β-catenin及c-myc蛋白表达明显增加(P<0.05);与ISO组比较,ISO+稳心颗粒组大鼠HW/BW和 LVW/BW明显降低(P<0.05),β-catenin及c-myc蛋白表达明显减少(P<0.05).结论 稳心颗粒可明显减轻大鼠心肌肥厚,这可能与β-catenin及c-myc蛋白表达的变化有关.     

牛磺酸对压力超负荷大鼠心肌中钙调神经磷酸酶和肾上腺髓质素的影响

目的观察牛磺酸灌服6周后对压力超负荷大鼠心肌中钙调神经磷酸酶（CaN）和肾上腺髓质素（ADM）的影响。方法将Wistar大鼠随机分为3组：对照组、缩窄组和给药组。参照Anderson方法制作压力超负荷心肌肥厚大鼠模型。术后1周开始给予牛磺酸50mg·kg^-1·d^-1,给药6周后处死动物,检测左心系数（左室重／体重比,LVW／BW）、CaN活性及ADM含量。结果与对照组相比,缩窄组大鼠SBP、LVW／BW显著升高（P〈0．05）,心肌中CaN活性、ADM含量显著增高（P〈O．05）。给药组与缩窄组相比,SBP、LVW／BW下降（P〈0．05）,心肌中CaN活性、ADM含量显著下降（P〈0．05）。结论牛磺酸有降低压力超负荷大鼠收缩压及减轻心肌肥厚的作用,该作用可能与其抑制CaN活性和ADM分泌有关。