骨髓间充质干细胞在大鼠小肠缺血-再灌注损伤的保护作用

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠小肠缺血.再灌注(I/R)损伤时肠屏障的保护作用.方法:Ficoll法分离培养大鼠的MSC.36只大鼠随机分为对照组和治疗组,每组18只.治疗组在建模后60 min,通过尾静脉将1 X 10<'6>/ml的MSC注射至大鼠体内,对照组注射等量的等渗盐水.于输注后6、24和72 ...     

大鼠小肠缺血-再灌注损伤后隐窝细胞增殖在肠黏膜屏障损伤修复中的作用

目的:探讨大鼠肠道缺血-再灌注(I-R)损伤后肠道隐窝细胞的增殖特征及其在肠黏膜屏障损伤修复中的作用。方法:选50只大鼠,随机分为对照组(n=5)和I-R组(缺血30 min),其中I-R组根据再灌注(R)0、0.5、1、2、4、6、12、24和48 h再分为9组,每组5只。观察各组大鼠小肠组织的病理学改变。用免疫组化法检测小肠隐窝细胞的增殖程度(Ki67,Musashi-1)。用蛋白质印迹法检测小肠黏膜组织中紧密连接蛋白ZO-1和Oc-cludin的表达。用ELISA法检测血清中D-乳酸和IL-6浓度。从回肠灌注FITC-Dextran-4溶液后,用荧光分光光度法测算其在血清中的浓度。结果:与对照组比,I/R组在R 0～1 h时出现明显的肠黏膜结构损害,渗透性增高,炎性反应增强,黏膜屏障损伤。R 1～2 h时隐窝细胞增殖明显,肠黏膜屏障功能开始修复。R 2 h时肠道渗透性显著降低,紧密连接蛋白表达开始恢复。至R 12～24 h时肠黏膜损伤基本恢复。结论:肠道I-R损伤后,隐窝细胞的增殖在肠黏膜屏障修复中起着重要作用。     

双歧杆菌黏附素对大鼠肠缺血-再灌注损伤的防护作用

目的:研究双歧杆菌分泌型黏附素对大鼠缺血-再灌注(I/R)后肠黏膜屏障的防护作用。方法:将54只大鼠随机分为假手术组(对照组)、模型组(I/R组)和黏附素预处理组(实验组),每组各24只。于造模成功后6 h、第1、第4和第7天,分别取6只大鼠的血和小肠标本,观察小肠组织病理改变,检测各时间点血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)I、L-6I、L-10、二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸(D-LAC)的活性和含量。结果:与对照组比较I,/R组血中TNF-αI、L-6I、L-10、DAO和D-乳酸水平在各时相点均升高(P<0.05);与I/R组比较,实验组各时间点IL-6和DAO水平明显降低(P<0.05),TNF-α浓度术后第1天低于I/R组(P<0.05),术后第4和第7天实验组大鼠血浆D-LAC浓度明显低于I/R组(P<0.05),小肠病理改变较I/R组减轻(P<0.05)。结论:双歧杆菌黏附素对大鼠I/R后肠黏膜屏障具有防护作用,能减轻肠黏膜的I/R损伤。     

1,6-二磷酸果糖在大鼠小肠缺血再灌注损伤中的保护作用

目的研究1,6-二磷酸果糖(fructose-1熏6-diphosphate,FDP)对大鼠小肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法制成大鼠小肠I/R模型。从肠系膜上动脉夹闭开始,经肠系膜上动脉分别间断注入FDP和生理盐水,在缺血前、缺血40min、再灌注30min及再灌注60min,分别观察各期的小肠组织线粒体Ca2+浓度、小肠组织Na+-K+ATPase活力及小肠组织病理学改变。结果在缺血40min、再灌注30min和再灌注60min,实验组的小肠组织线粒体Ca2+浓度和小肠组织Na+-K+ATPase活力,均明显优于对照组相应各期穴P<0.01雪。组织病理学检查显示熏实验组的小肠组织结构相当完整,而对照组的小肠组织结构损害较重。结论FDP对大鼠小肠I/R损伤有明显的保护作用。     

缺血预适应对大鼠肠系膜缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的观察缺血预适应(IPC)对小肠缺血再灌注(I/R)的影响,探讨IPC对I/R的保护作用。方法 90只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=30),I/R损伤组(n=30)和重组人IPC+l/R损伤组(n=30)。构建大鼠肠系膜I/R损伤模型和肠系膜IPC模型。采用硫代巴比妥酸反应方法来测定大鼠血清丙二醛(MDA)含量,采用比色法测定大鼠肠组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性。采用Park/Chiu对肠组织损伤程度进行组织病理学评分。结果 IPC+l/R损伤组大鼠肠黏膜损伤较轻,显微镜下没有观察到绒毛剥脱,固有层崩解,溃疡,出血,大片上皮下间隙等表现。IR损伤组大鼠血清MDA、MPO水平及Chiu评分显著高于假手术组,相比较差异有统计学意义(t=6.912,24.376,19.553,P﹤0.05);经IPC处理后,IPC+l/R损伤组大鼠血清MDA、MPO水平及Chiu评分显著降低,与IR损伤组比较差异有统计学意义(t=3.293,6.010,4.302,P﹤0.05)。结论缺血预适应可以减轻大鼠肠系膜缺血再灌注诱导的氧化应激损伤,减轻肠组织中性粒细胞积聚,对小肠缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

硫化氢对大鼠骨骼肌缺血再灌注所致心肌损伤的保护作用

目的 研究外源性硫化氢(H2S)对大鼠骨骼肌缺血再灌注后心肌损伤的保护作用.方法 选雄性Wistar大鼠31只,随机分为4组:(1)正常对照组(8只);(2)缺血再灌注组(8只),应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,缺血4 h再灌注4 h;(3)硫氢化钠(NaHS)组(8只),缺血前及再灌注前腹腔注射NaHS 0.78 mg/kg;(4)炔丙基甘氨酸(PPG)组(7只),缺血前及再灌注前腹腔注射PPG 50 mg/kg.观察各组心肌病理、血浆H2S、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(TnT)及心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性的变化.结果 与正常对照组比较,缺血再灌注组血浆H2S及心肌CSE活性明显下降,血浆CK-MB、TnT明显升高(P＜0.05).与缺血再灌注组比较,NaHS组血浆H2S浓度升高59%(P＜0.05),心肌CSE活性升高93%(P＜0.05),血浆CK-MB降低29%(P＜0.05),血浆TnT降低67%(P＜0.05);PPG组血浆H2S浓度下降20%,但无统计学差异,心肌CSE活性降低38%(P＜0.05),血浆心肌酶学改变无统计学差异.心肌病理提示,缺血再灌注组心肌明显肿胀、血管充血,心肌细胞间可见明显分叶核粒细胞浸润,红细胞漏出增多,NaHS组干预后心肌损伤明显减轻.结论 外源性H2S补充可以减轻骨骼肌缺血再灌注所致的心肌损伤.     

丙泊酚对脊髓缺血再灌注损伤保护作用的研究进展

<正>随着溶栓疗法、动脉搭桥术、胸腹主动脉瘤手术的建立和推广,使缺血器官、组织更快地重新获得血液供应,明显减少了细胞损伤,提高了临床疗效。但是,在动物实验和临床观察中也发现,恢复血液循环后,部分动物和患者细胞功能代谢障碍及结构破坏反而加重。     

硫酸镁对小鼠肾缺血再灌注损伤保护作用

目的 观察硫酸镁对小鼠肾缺血再灌注损伤的抗氧化保护作用.方法 雄性小鼠随机分为假手术组、模型组和硫酸镁高、低剂量(120、60 mg/kg)组,无创动脉夹夹闭左肾蒂45 min和再灌注3 h制备急性肾缺血再灌注损伤模型,检测肾脏指数、血清尿素氮(BUN)和肌酐含量、肾组织丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,HE染色观察肾组织学变化.结果 硫酸镁高、低剂量组小鼠肾指数分别为(0.72±0.05)和(0.74±0.07)、血清BUN含量为(12.36±2.24)和(15.58±1.92)mmol/L、血清肌酐水平为(98.23±4.37)和(114.63±6.24)μmol/L、肾组织MDA含量为(2.11±0.24)和(2.27±0.21)nmol/(mg.prot),肾组织SOD活力为(4.03±0.68)和(3.51±0.58)U/(mg.prot),硫酸镁高剂量组肾组织GSH-Px活力为(323.90±23.50)U/(mg.prot),与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且肾组织病理变化较轻.结论 硫酸镁对小鼠急性肾缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化反应有关.     

硫化氢对大鼠骨骼肌缺血再灌注所致心肌损伤的保护作用

目的研究外源性硫化氢(H2S)对大鼠骨骼肌缺血再灌注后心肌损伤的保护作用。方法选雄性Wistar大鼠31只,随机分为4组:(1)正常对照组(8只);(2)缺血再灌注组(8只),应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,缺血4h再灌注4h;(3)硫氢化钠(NaHS)组(8只),缺血前及再灌注前腹腔注射NaHS0.78mg/kg;(4)炔丙基甘氨酸(PPG)组(7只),缺血前及再灌注前腹腔注射PPG50mg/kg。观察各组心肌病理、血浆H2S、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(TnT)及心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性的变化。结果与正常对照组比较,缺血再灌注组血浆H2S及心肌CSE活性明显下降,血浆CK-MB、TnT明显升高(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,NaHS组血浆H2S浓度升高59%(P<0.05),心肌CSE活性升高93%(P<0.05),血浆CK-MB降低29%(P<0.05),血浆TnT降低67%(P<0.05);PPG组血浆H2S浓度下降20%,但无统计学差异,心肌CSE活性降低38%(P<0.05),血浆心肌酶学改变无统计学差异。心肌病理提示,缺血再灌注组心肌明显肿胀、血管充血...     

谷氨酰胺对缺血再灌注损伤早期小肠粘膜细胞凋亡的影响

目的探讨谷氨酰胺(Gln)对缺血再灌注(I/R)损伤早期小肠粘膜细胞凋亡的影响。方法30只Wistar大鼠被随机分为A～E共5组(每组6只)。采用肠系膜上动脉夹闭法复制小肠I/R(15min/60min)模型。A～D组大鼠分别于缺血前或后经右颈外静脉微泵持续输注肠外营养(PN)或PN+3%Gln(1小时),于复流1小时后取小肠组织备检。E组为空白对照组,不行I/R,输注PN1小时后采取标本。观察各组小肠上皮的形态学改变、原位细胞凋亡、肠粘膜还原型谷胱甘肽(GSH)含量及增殖抗原(PCNA)和Bcl-2的表达。结果缺血前、后输注PN+3%Gln与仅输注TPN各组相比,小肠形态学改变不明显,但粘膜细胞凋亡显著减少(P<0.01),肠粘膜总GSH及GSH含量增加(P<0.05),Bcl-2表达增强,而PCNA表达差异无显著性。结论输注Gln对短暂性I/R损伤所致的小肠粘膜细胞凋亡具有一定预防与治疗作用,其机制可能与提高肠粘膜GSH含量及Bcl-2表达增强有关。     

SDG对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用

目的 探讨开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷(SDG)对雌性去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 雌性3周龄SD大鼠分为7组:假手术组, 去卵巢组、再灌注组、SDG干预组(10、20、50、100 mg/kg), 生化方法检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)含量, 超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量, 心肌组织中caspase-3比活性;用伊文氏蓝和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积;光镜观察心肌细胞病理变化;用DNA原位末端标记法检测心肌细胞凋亡变化。结果 与去卵巢组比较, 再灌注组大鼠血清中HDL明显降低(P<0.05), TC、TG、LDL明显升高(P<0.05);心肌病理损伤加重、心肌梗死面积增大;血清SOD水平降低、MDA含量增加(P<0.05);心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05);与再灌注组比较, 50 mg/kg SDG组大鼠血清中HDL[(3.285±0.327)mmol/L]升高、TC、TG、LDL[分别为(5.508±0.479)、(0.535±0.129)、(3.290±0.358)mmol/L]降低(P<0.05);心肌梗死面积缩小、心肌组织病理损伤减轻;血清SOD水平[(285.786±31.287)U/mL]升高, MDA含量[(2.483±0.391)nmol/mL]降低(P<0.05);心肌细胞凋亡指数(17.57±0.84)明显降低(P<0.05);呈剂量效应关系。结论 SDG对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用, 其机制可能与SDG提高心肌组织抗氧化能力和减少心肌细胞凋亡有关。     

Protective effect of aqueous garlic extract against renal ischemia/reperfusion injury in rats

Oxygen free radicals are important components involved in pathophysiological tissue alteration observed during ischemia/reperfusion (I/R). This study was designed to determine the possible protective effect of aqueous garlic extract (AGE) on renal I/R injury. Wistar albino rats were unilaterally nephrectomized and subjected to 45 minutes of renal pedicle occlusion followed by 6 hours of reperfusion. AGE (1 mL/kg, i.p., corresponding to 500 mg/kg) or vehicle was administered twice: 15 minutes prior to ischemia and immediately before the reperfusion period. At the end of the reperfusion period, rats were killed by decapitation. Kidney samples were taken for histological examination or determination of levels of free radicals; renal malondialdehyde (MDA), an end product of lipid peroxidation; glutathione (GSH), a key antioxidant; and myeloperoxidase (MPO) activity, an index of tissue neutrophil infiltration. Renal tissue collagen content, as a fibrosis marker, was also determined. Creatinine and urea concentrations in blood were measured for the evaluation of renal function. The results revealed that I/R-induced nephrotoxicity, as evidenced by increases in blood urea and creatinine levels, was reversed by AGE treatment. The levels of free radicals, as assessed by the nitro blue tetrazolium test, were increased. Moreover, the decrease in GSH levels and the increases in MDA levels and MPO activity induced by I/R indicated that renal injury involves free radical formation. Treatment of rats with AGE (1 mL/kg) restored the reduced GSH levels, while it decreased free levels of radicals and MDA as well as MPO activity. Collagen contents of the kidney tissues increased by I/R were reversed back to the control levels with AGE. Since AGE administration reversed these oxidant responses and improved renal function and damage at the microscopic level, it seems likely that AGE protects kidney tissue against I/R-induced oxidative damage.     

依达拉奉对大鼠肠部分缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的 探讨依达拉奉(edaravone)对大鼠肠部分缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 选择健康雄性SD大鼠30只,体重240～280 g,随机分为3组,假手术组(C组)、肠部分缺血再灌注组(IR组)、依达拉奉治疗组(E组),每组10只.除C组外,其他两组大鼠分离SMA后,用自行设计的血流阻断器阻断SMA血流量70%左右,缺血60 min,然后开放SMA,再灌注120min,E组于开放SMA同时静脉内给予依达拉奉3 mg/kg,所有大鼠在实验过程中均以生理盐水10 ml·kg-1·h-1持续输注.观察肠部分缺血再灌注后肠黏膜的损伤程度,测定血和肠组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、二胺氧化酶(DAO)的水平.结果 依达拉奉治疗组肠黏膜损伤程度较轻,能够反映肠黏膜损伤程度的DAO活性在肠组织中明显下降,血中的DAO明显升高,过度氧化应激指标MDA、MPO在血和肠组织中明显升高,SOD活性下降.结论 依达拉奉对大鼠肠缺血再灌注损伤具有良好的保护作用,这种保护作用的部分机制是清除自由基,减轻肠部分缺血再灌注损伤后肠组织的过氧化应激,减少肠缺血再灌注损伤后肠组织内PMN的聚集,进而减轻PMN所参与的炎症反映损伤.     

栀子苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用

目的 探讨栀子苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 采用结扎左冠状动脉方法制备心肌缺血再灌注损伤动物模型,实验设假手术组、缺血再灌注组、栀子苷(25、50、100 mg/kg)组和阳性对照组;采用试剂盒法检测大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca²⁺-ATPase水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western blot法检测心肌细胞p53、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 与缺血再灌注组比较,栀子苷50、100 mg/kg组大鼠血清LDH[分别为(4598.6±638.7)、(4386.9±549.8)U/L]及心肌组织MDA含量[分别为(2.12±0.47)、(1.63±0.29)nmol/mgpro]明显降低,心肌组织SOD活性[分别为(41.48±3.86)、(43.47±3.88)NU/mgpro]和Ca²⁺-ATPase水平[分别为(0.71±0.11)、(0.72±0.130)mol/mg.h]明显增加(P<0.05);TUNEL结果显示,栀子苷50、100 mg/kg组大鼠缺血区心肌细胞凋亡率[分别为(12.3±1.8)%、(11.2±1.6)%]明显降低(P<0.05);Western blot结果显示,栀子苷50、100 mg/kg组大鼠心肌组织p53蛋白表达[分别为(1.71±0.35)、(1.62±0.5)]、Bax蛋白表达[分别为(0.95±0.24)、(0.89±0.19)]明显降低,心肌组织Bcl-2蛋白表达[分别为(0.71±0.11)、(0.78±0.170)]明显增加(P<0.05)。结论 栀子苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有一定程度保护作用,其机制可能与栀子苷降低氧化应激反应,抑制P⁵³蛋白水平,上调Bcl-2/Bax比率,减少细胞凋亡有关。     

多ADP-核糖聚合酶在大鼠心脏缺血／再灌注损伤中的作用

目的探讨多ADP-核糖聚合酶[Poly（ADP-ribose）polymerase,PARP]在大鼠心脏缺血／再灌注（ischemiaandreperfusion,I／R）损伤中的作用。方法将48只大鼠按随机数字法分为I／R组、I／R＋DPQ（PARP抑制剂）组、I／R＋DMSO（二甲基亚枫）组和对照组,建立大鼠心脏I／R模型,检测各组大鼠心肌中PARP的表达、心功能和心肌细胞凋亡的变化。结果在大鼠心脏I／R损伤中PARP表达增加,应用DPQ后,PARP表达显著减少（5．04±1．25VS2．334-0．65,t=1．35,P〈0．05）;抑制PARP的活性能使大鼠心脏左心室内压（LVDP）、室内压最大上升速率（＋dp／dt）和室内压最大下降速率（-dp／dt）显著增加,改善心脏功能。抑制PARP的活性能使大鼠心肌细胞凋亡率从（34±6．2）％显著降低至（23±3．8）％（t=2．25,P〈0．05）。结论在大鼠心脏I／R过程中,PARP的表达明显增加,并加重心脏损伤。应用药物抑制PARP的表达可以减少心脏损伤,具有心脏保护作用。     

硒对家兔心肌缺血再灌注损伤膜磷脂保护作用

目的观察硒对家兔心肌缺血再灌注损伤(IRI)膜磷脂的保护作用。方法 24只家兔,雌雄各半,随机分成假手术组、缺血再灌注组、硒组,分别检测心肌组织中总磷脂(PL)、总胆固醇(Ch)、磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)含量。结果缺血再灌注组与假手术组比较,缺血再灌注组PL、PE、CL含量(41.21±9.71、415.30±31.25、200.56±29.41)明显降低(P<0.05),Ch含量(88.75±14.03)明显升高(P<0.05)。硒组与缺血再灌注组比较,硒组PL、PE、CL含量(58.73±11.12、764.34±51.87、325.79±31.14)明显升高(P<0.05),硒组Ch含量(62.41±12.11)明显降低(P<0.05)。结论硒对家兔心肌缺血再灌注损伤膜磷脂有保护作用。     

实验性家兔缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的采用家兔心肌缺血再灌注损伤动物模型，观察缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的心肌保护作用。方法将家兔随机分成3组，即假手术组、缺血再灌注组、缺血预适应组，观察血清心肌酶学变化及心肌细胞的超微结构。结果（1）缺血预适应组心肌酶水平与缺血再灌注组相比差异均极为显著（P〈0．01）；（2）缺血预适应可明显改善亚细胞结构损害。结论缺血预适应可以降低心肌酶活性，缩小梗死面积，改善亚细胞结构损害，对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

实验性家兔缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的采用家兔心肌缺血再灌注损伤动物模型,观察缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的心肌保护作用.方法将家兔随机分成3组,即假手术组、缺血再灌注组、缺血预适应组,观察血清心肌酶学变化及心肌细胞的超微结构.结果(1)缺血预适应组心肌酶水平与缺血再灌注组相比差异均极为显著(P＜0.01);(2)缺血预适应可明显改善亚细胞结构损害.结论缺血预适应可以降低心肌酶活性,缩小梗死面积,改善亚细胞结构损害,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用.