白介素17A抑制博来霉素诱导的小鼠NIH/3T3细胞凋亡

目的探讨细胞因子白介素17A对于博来霉素诱导的小鼠成纤维细胞NIH/3T3凋亡的影响。方法使用博来霉素诱导细胞凋亡,使用TUNEL荧光染色试剂盒检测细胞凋亡情况,使用Western blot检测Caspase-3以及Bcl-2的蛋白表达情况。结果博来霉素可以促进NIH/3T3细胞DNA发生断裂,促进活性Caspase-3的蛋白表达,降低Bcl-2蛋白含量;白介素17A可以抑制NIH/3T3细胞DNA断裂,抑制活性Caspase-3的蛋白表达,促进Bcl-2的蛋白含量。结论博来霉素可以诱导小鼠NIH/3T3细胞发生凋亡,白介素17A可以抑制博来霉素诱导的细胞凋亡。     

白藜芦醇诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制

目的探讨白藜芦醇诱导人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用及其分子机制。方法应用不同浓度的白藜芦醇作用于人宫颈癌Hela细胞,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡、细胞周期分布：免疫组化法检测Survivin及Caspase-3的表达。结果白藜芦醇能明显抑制Hela细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。经白藜芦醇处理Hela细胞后,FCM分析发现各实验组S期细胞比例增高,G2／M期细胞比例减少,凋亡率明显高于对照组,并呈剂量依赖性（P〈0．01）;各实验组Heal细胞Survivin的表达均低于对照组,而Caspase-3的表达均高于对照组（P〈0．01）。结论白藜芦醇能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制Survivin的表达、上调Caspase-3的表达有关。     

鹰嘴豆芽提取物对Caco-2细胞凋亡的作用

目的研究鹰嘴豆芽乙醇提取物（CSE）对人结肠腺癌Caco-2细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法提取鹰嘴豆芽的活性成分并测定含量;MTT法观察提取物对Caco-2细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞超微结构;琼脂糖凝胶电泳法进行细胞凋亡的DNA分析;流式细胞术检测凋亡情况。结果 CSE含23.53%皂苷、14.73%异黄酮;不同浓度的CSE对Caco-2细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;细胞出现染色质边移和凋亡小体;DNA电泳呈现梯度条带,表明CSE可诱导Caco-2细胞凋亡;3、5、10μg/ml的CSE作用后,细胞凋亡率分别为32.6%、68.8%、73.9%,与对照组（0.9%）比较差异显著（P〈0.05）。结论 CSE可通过诱导细胞凋亡而抑制人结肠腺癌株Caco-2细胞的生长,为鹰嘴豆应用于结肠癌的临床治疗和预防提供了理论依据。     

大黄素甲醚调节miR-370诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的：观察大黄素甲醚调节miR-370诱导肝细胞癌（HCC）细胞的凋亡情况,并探讨其作用机制。 方法：将大黄素甲醚作用于SMMC7721和HepG2两组HCC细胞,使用TaqMan探针用实时定量PCR法检测miR-370的表达;用Western blot检测Sp1和DNMT1相应的蛋白表达水平。 结果：大黄素甲醚抑制肝细胞癌细胞增长和诱导凋亡。肝细胞癌细胞中通过上调miR-370造成大黄素甲醚诱导型细胞凋亡。大黄素甲醚处理的细胞中通过miR-370抑制剂抑制miR-370水平能明显降低凋亡细胞的百分比（P<0.01）。大黄素甲醚通过AMPK/Sp1/DNMT1信号调节miR-370的水平（P<0.01）。AMPK/Sp1/DNMT1信号参与大黄素甲醚诱导的HCC细胞凋亡。 结论：大黄素甲醚通过上调miR-370诱导HCC细胞凋亡,通过调节AMPK/Sp1/DNMT1信号通路对miR-370发挥调节作用。     

As2O3治疗急性早幼粒细胞白血病的作用机制

目的：研究三氧化二砷（As2O3）治疗M3型急性早幼粒细胞白血病（APL）的作用机制。方法：将培养的NB4细胞加入不同浓度（0．5μM,1μM,1．5μM,2μM,3μM）的As203作用48h后,采用MTT比色法观察不同浓度As2O3对NB4细胞活力的影响,用流式细胞术及Caspase-3活性检测试剂盒检测As2O3引起NB4细胞凋亡情况,用westernBlot检测As203对Caspase-3蛋白的作用。结果：MTT比色法结果显示,As2O3明显抑制NB4细胞增殖,且呈浓度依赖性,2μMAs2O3孵育48hNB4细胞活力下降约50％;流式细胞术结果显示,2μMAs2O3作用48h后,NB4细胞凋亡率显著增加,且以早期凋亡率增加为主（P〈0．01）;同时As2O3处理后的NB4细胞Caspase-3活性明显增加,为对照组的2．2倍（P〈0.01）;WesternBlot结果显示,As2O3显著增加Caspase-3总蛋白及其激活型cleaved—Caspase-3（p17）蛋白表达量。结论：As2O3可诱导NB4细胞凋亡,此作用与激活依赖Caspase-3的细胞凋亡通路相关,但是具体是通过何种凋亡通路,以及参与其中的信号分子需要进一步验证。     

维生素 D 对足细胞钙敏感受体表达的影响简

目的观察活性维生素D（VitD）对足细胞钙敏感受体（CaSR）表达的影响,探讨其对足细胞保护作用的可能机制。方法体外分化培养的小鼠永生化足细胞随机分为：（1）正常对照组;（2）脂多糖（LPS）＋足细胞组;（3）LPS＋VitD＋足细胞组。AnnexinV-FITC／PI标记流式细胞测定足细胞的凋亡百分率,骨架蛋白F-肌动蛋白免疫荧光染色及半定量分析,Fura-2／AM负载检测细胞内Ca2＋浓度变化,Westernblot分别检测足细胞CaSR、p-ERKl／2蛋白的表达。结果LPS诱导足细胞凋亡,足细胞应力纤维及F-肌动蛋白减少,足细胞内的ca2＋浓度增加,CaSR、p-ERKl／2蛋白表达亦增加：而VitD明显减少LPS引起的足细胞凋亡,降低足细胞内的ca2＋浓度,部分恢复应力纤维及F-肌动蛋白结构,下调CaSR、p-ERKl／2蛋白的表达水平。结论VitD可能通过抑制CaSR-P-ERKl／2信号通路引起的细胞内ca2＋水平增加,拮抗LPS引起的足细胞凋亡,对足细胞有保护作用。     

2-羟基-3-甲基蒽醌联合紫杉醇对卵巢癌细胞Caspase-8、Caspase-9及Caspase-3表达影响

目的研究中药白花蛇舌草的有效成分2-羟基-3-甲基蒽醌联合紫杉醇对人卵巢癌细胞A2780生长的抑制作用和细胞凋亡的影响,以探讨两药联合对A2780细胞的作用机制。方法将对数生长期的A2780细胞随机分为空白对照组(A组)、B组(紫杉醇3μg/ml)、C组(2-羟基-3-甲基蒽醌50μM)和D组(2-羟基-3-甲基蒽醌50μM+紫杉醇3μg/ml)。采用MTT法检测各组细胞的活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用荧光比色法测定Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白酶的活性。结果与A组比较,B、C、D组对A2780细胞均有明显的抑制生长及诱导凋亡作用;D组对A2780细胞的抑制及诱导凋亡作用显著高于C组或B组(P<0.05);各组抑制率及凋亡率均呈时间依赖性(P<0.05)。Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白酶的表达从A~D组呈逐渐升高的趋势。结论 2-羟基-3-甲基蒽醌可协同紫杉醇促进A2780细胞凋亡,其机制可能是通过增加Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的表达。     

125I粒子照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨^125I粒子持续低剂量率照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的作用机制。方法用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分析^125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞的凋亡诱导作用，检测天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶Caspase-3活性来观察其对PC3细胞的凋亡诱导途径，并通过间接免疫荧光技术检测其对Bcl-2表达的影响。结果DNA琼脂糖凝胶电泳可观察到清晰的“DNA梯度”，流式细胞仪检测^125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞具有明显的凋亡诱导作用。Caspase-3活性检测表明，Caspase-3活性无明显变化。流式细胞仪分析表明Bcl-2的表达随^125I粒子剂量的增加而下降。结论^125I粒子持续低剂量率照射可诱导PC3细胞凋亡，其诱导凋亡与Bcl-2表达有关，与Caspase-3活性无关。     

白杨黄素影响两种胃癌细胞系增殖与凋亡的研究

 目的 研究白杨黄素对两种胃癌细胞系SGC-7901和MKN-45是否具有抑制作用的分子生物学机制.方法 通过MTT法检测白杨黄素对SGC-7901和MKN-45细胞的增殖抑制作用,流式细胞术测定经白杨黄素处理后两种细胞的细胞周期,Westen-blot测定凋亡相关因子Caspase-3、Survivin和Bcl-2的表达水平.结果 白杨黄素对SGC-7901和MKN-45细胞具有增殖抑制作用,呈时间浓度依赖性;能够将细胞周期阻滞于Sub G1期;能上调Caspase-3,下调Survivin和Bcl-2的基因表达.结论 白杨黄素能够诱导SGC-7901和MKN-45细胞的凋亡并有效地抑制其增殖.其机制可能与干扰细胞周期及激活Caspase-3,抑制Survivin和Bcl-2有关.     

地高辛对人B细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制的研究

目的通过观察强心甾类药物地高辛对人B细胞淋巴瘤Raji细胞增殖和凋亡的影响,研究其可能的分子机制。方法体外培养Raji细胞,实验组细胞培养基中加入二甲基亚砜溶解的地高辛,分别以不同浓度地高辛对其进行干预;对照组细胞培养基中加入与实验组等体积的二甲基亚砜。通过四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖的变化,流式细胞术检测其对细胞周期的影响及细胞凋亡情况,反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分析细胞内Survivin、Caspase-3 mRNA的变化。结果地高辛体外对Raji细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05),在一定范围内与时间、剂量呈依赖关系。实验组地高辛作用于Raji细胞48 h后,与对照组相比,G0/G1期细胞数减少,G2/M期细胞数增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组出现明显的凋亡峰,对照组未见凋亡峰,或仅有低平的凋亡峰。与对照组相比,Raji细胞中Survivin mRNA的表达减少,Caspase-3 mRNA的表达增加(P<0.05),并与剂量呈依赖关系。结论地高辛对Raji细胞具有抑制增殖及诱导凋亡的作用,通过阻滞细胞于G2/M期,抑制Raji细胞的增殖,通过下调Survivin的表达进而激活Caspase-3诱导其凋亡,此可能为地高辛抗肿瘤作用的机制之一。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肺组织凋亡及相关因子的影响及其机制

目的观察2型糖尿病大鼠肺组织细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法8周龄SD大鼠高热量饮食1月后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ30mg/kg）,成模后分别于12、24周将动物处死,采用光镜、原位末端标记法检测肺组织细胞凋亡及用免疫组织化学（immunohistochemistry）方法检测各组肺组织Caspase-3、Caspase-9表达水平。结果糖尿病大鼠肺组织凋亡细胞数明显增多,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著上调,但无统计学意义。罗格列酮干预组凋亡率降低（P〈0.01）,升高的Caspase-3、Caspase-9蛋白表达下调,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异（P〉0.05）。结论肺组织细胞凋亡在糖尿病大鼠肺损害病程中起一定作用,罗格列酮可抑制肺组织细胞凋亡,可能对糖尿病肺有保护作用。     

紫檀芪对人食管癌EC9706细胞生长的影响及其机制

目的探讨紫檀芪（PrIT）对人食管癌EC9706细胞生长影响及其抗凋亡的机制。方法EC9706细胞分为对照组（正常DMEM培养液孵育）和肿组（DMEM培养液中含PTT,分别为15、30、45、60trM）,各组细胞分别处理24、48、72h。MTr法检测各组细胞存活率;黏附实验测定各组细胞黏附率;Westernblot方法检测各组细胞抗凋亡相关蛋白Bcl-2和凋亡相关蛋白Caspase．3表达。结果MTY结果显示,Prr对EC9706细胞生长有抑制作用,其中60trM处理72h组抑制效果最明显,呈药物浓度及时间依赖效应;黏附实验结果显示,PrITll处理72h可以显著减弱EC9706细胞黏附能力,并呈浓度依赖效应;Westernblot结果显示（72h）：P1Tr处理72h可以显著降低EC9706细胞Bcl-2的表达,同时显著升高其Caspase-3的表达。结论紫檀芪可抑制EC9706细胞生长,促进其凋亡,其机制与激活Caspase-3并抑制Bcl-2表达有关。紫檀芪可能是食管癌治疗领域具有开发前景的新药。     

川芎嗪对顺铂诱导豚鼠耳蜗毛细胞模型中JNK/c-JUN信号转导通路调控及Caspase-3表达影响

目的通过观察川芎嗪对顺铂诱导豚鼠耳蜗毛细胞中JNK、c-JUN及Caspase-3蛋白表达水平的影响,探讨其抗凋亡的机制。方法将60只听力正常的健康白毛红目豚鼠按照随机字数表法分为空白组与模型组,空白组豚鼠正常饲养,模型组豚鼠腹腔注射顺铂,诱导药物性耳聋模型。造模成功后,将空白组及模型组分别随机分为两组,即空白对照组、空白+川芎嗪组、模型对照组、模型+川芎嗪组。空白+川芎嗪组、模型+川芎嗪组豚鼠腹腔注射川芎嗪注射液进行干预,2周后处死豚鼠,采用Western-blot法对各组豚鼠耳蜗组织中c-JUN、JNK及Caspase-3蛋白表达水平进行检测。结果与空白组相比,模型组豚鼠听性脑干反应(ABR)阈值显著提高,差异有统计学意义(P<0.01);空白组豚鼠耳蜗毛细胞排列整齐、均匀,无缺失及坏死细胞出现;模型组豚鼠耳蜗毛细胞变形明显,排列不均,溶解破坏的毛细胞较多。与空白对照组和空白+川芎嗪组比较,模型对照组豚鼠耳蜗组织中c-JUN、JNK、Caspase-3蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型对照组比较,模型+川芎嗪组豚鼠耳蜗组织中c-JUN、JNK、Caspase-3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论川芎嗪可通过调控JNK/c-JUN信号通路的活化,进而调控Caspase-3来抑制细胞凋亡途径,进而发挥其抗凋亡作用。     

Caspase8、3蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化

目的研究Caspase8、3蛋白在补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病K562细胞凋亡时的变化。方法用不同浓度的中药补骨脂中提取的PSO和(或)不同照射时间、波长为360nm的UVA作用于K562细胞,检测细胞凋亡率、在电镜下细胞超微结构改变及Caspase8、3蛋白的表达,用多因素方差分析法对定量资料进行统计分析。结果PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,后两者上调Caspase8、3蛋白的表达,PUVA的作用显著强于前两者;PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。结论PUVA可通过激活Caspase8、3基因诱导K562细胞凋亡。     

TNF-α、Caspase-3在大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡中相关性研究

目的探讨大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在神经细胞凋亡中的动态表达,验证TNF-α和Caspase-3之间的相关性。方法将70只成年健康SD大鼠按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8、T9)急性压迫损伤模型,HE染色观察脊髓组织病理学变化;免疫组化染色测定各时间点TNF-α、Caspase-3的表达变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(d UTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平;通过Western blot法检测大鼠脊髓中TNF-α、Caspase-3蛋白的表达水平。结果正常大鼠脊髓神经细胞TNF-α、Caspase-3的阳性细胞表达率较少;脊髓损伤后8 h,脊髓神经细胞中TNF-α、Caspase-3的阳性表达率明显增多,分别为(24.13%±3.02%)及(40.79%±3.43%),1 d达高峰,分别为(51.36%±4.26%)及(70.78%±5.97%),3 d表达减弱,分别为(20.24%±2.93%)及(37.71%±2.88%),与正常大鼠比较,差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL阳性细胞率在大鼠脊髓损伤后8 h明显增多(39.81%±2.27%),1 d达高峰(71.58%±3.87%),3 d表达减弱(40.55%±2.36%),与正常大鼠比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。大鼠脊髓损伤后1 d,与损伤组比较,抑制剂组TNF-α、Caspase-3、TUNEL阳性细胞率明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。造模后7 d,与空白对照组比较,损伤组TNF-α、Caspase-3蛋白的表达上升;与损伤组比较,抑制剂组TNF-α、Caspase-3蛋白的表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓损伤后TNF-α、Caspase-3的表达增强,TNF-α抑制剂使Caspase-3表达减弱,且其参与了脊髓损伤细胞凋亡的调节。     

ANTP-SmacN7对肿瘤细胞的辐射增敏作用及其机制

目的 探讨ANTP-SmacN7融合蛋白对肿瘤细胞的辐射增敏作用及其机制。方法 合成ANTP-SmacN7融合蛋白并观察其细胞渗透能力,Western blot法检测辐射对XIAP表达量的影响,克隆形成实验观察ANTP-SmacN7融合蛋白的辐射增敏作用。Annexin V-FITC/PI双染法测定药物及射线对肿瘤细胞凋亡的影响,Western blot法检测ANTP-SmacN7阻断XIAP前后Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的变化。结果 ANTP-SmacN7融合蛋白可以进入细胞内,并在细胞内蓄积;辐射诱导肿瘤细胞体外XIAP表达量与肿瘤辐射敏感性呈负相关（r=0.82）;ANTP-SmacN7对肿瘤细胞有辐射增敏作用,增敏比为1.41;ANTP-SmacN7融合蛋白可促进4、8和10 Gy γ射线诱导的XIAP高表达肿瘤细胞的凋亡（t=-14.924、-7.294和-15.866,P<0.05）。辐射可诱导Caspase-3表达水平的升高,ANTP-SmacN7对Caspase-3蛋白表达水平不产生影响,但可增加活化Caspase-3的裂解片段的数量。结论 ANTP-SmacN7融合蛋白可通过诱导Caspase-3的活化降低肿瘤细胞的辐射抗性。     

脂联素对氯化钴诱导肾小管上皮细胞凋亡及炎症反应影响研究

目的 探讨脂联素对氯化钴诱导的肾小管上皮细胞凋亡及炎症反应的影响.方法 将人肾小管上皮细胞株HK-2细胞分入4组:正常对照组,用DME/F-12培养液培养细胞24 h;氯化钴诱导缺氧模型组,用含600.0μM氯化钴的培养液培养细胞24 h;单独脂联素处理组,用含2.5μg/ml脂联素的培养液培养细胞24 h;氯化钴+脂...     

CDT1基因过表达对辐射诱发基因组不稳定肝细胞HL-7702凋亡及细胞周期的影响

目的 研究CDT1基因过表达对辐射诱发基因组不稳定肝细胞凋亡及细胞周期的影响.方法 选择基因组不稳定肝细胞HL-7702,利用慢病毒介导的过表达技术,上调辐射诱发基因组不稳定肝细胞中CDT1基因的表达,通过流式细胞术研究CDT1基因过表达对细胞周期及细胞凋亡的影响;利用实时荧光定量PCR方法,检测CDT1基因上调后p53、ATM、ATR、Bcl-2、Caspase-3基因的表达变化.结果 慢病毒介导的过表达能有效上调HL-7702细胞中CDT1基因的表达(t=15.56, P<0.05),与阴性对照组相比,CDT1基因的上调能够导致基因组不稳定肝细胞HL-7702凋亡率升高(t=4.19, P<0.05);CDT1基因的过表达能诱发基因组不稳定肝细胞p53、Bcl-2基因的表达显著下调(t=-4.21、-2.06, P<0.05),同时,ATM基因上调,ATR和Caspase-3基因下调,但差异均无统计学意义.结论 CDT1基因的过表达通过参与非p53依赖的凋亡途径以及细胞周期检查点适应性对基因组不稳定性进行调控.     

电离辐射诱导EL-4细胞Caspase-3、P53蛋白表达及其生物学作用

目的研究电离辐射对EL-4细胞中Caspase-3和P53蛋白表达的影响，及其对辐射诱导细胞凋亡及多倍体细胞的作用。方法采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化，采用PI荧光标记及流式细胞术检测细胞凋亡及多倍体细胞的变化。结果实验表明，4．0GyX射线照射后8及12h，EL-4细胞中Caspase-3蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；照射后2、4、8、12及24h，P53蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。实验还表明，4．0Gy照射后2、4、8、12、24、48及72h，EL-4细胞凋亡与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05～P〈0．001）；而照射后2～48h，多倍体细胞数与对照组比较则未见明显变化。结论电离辐射可诱导EL-4细胞Caspase-3及P53蛋白表达增高，可能在辐射诱导细胞凋亡中起重要作用，而辐射诱导多倍体细胞的分子通路则可能是P53非依赖性的。     

Survivin和Caspase-3在大鼠颅脑损伤中的作用

目的：探讨大鼠颅脑损伤后Survivin蛋白表达和Caspase-3活性变化的规律和意义。方法：42只Wistar大鼠随机分为对照组（n=6）与损伤组（n=36）。采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型，分别于伤后不同时间点，应用免疫组织化学法检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化，利用分光光度法测定Caspase-3活性变化，应用流式细胞仪检测神经细胞凋亡情况。结果：与对照组相比，Caspase-3活性、细胞凋亡率及Caspase-3、Survivin蛋白表达在大鼠脑损伤后均显著升高（P〈0．01）。通过相关性分析，大鼠脑损伤后脑组织Caspase-3的活性与细胞凋亡率具有正相关性（P〈0．01），而和Survivin表达具有负相关性（P〈0．01）。结论：大鼠颅脑损伤后，Survivin表达增加可下调Caspase-3的活性，减少细胞凋亡。