诱导型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶在胃癌中的表达关系及临床意义

目的 检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在小鼠正常胃组织及原位移植人胃癌组织SGC-7901中的表达情况,探讨严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠胃癌不同阶段时iNOS和eNOS含量变化的相关性研究及临床意义.方法 采用苏木精-伊红染色法进行检测.结果 可见eNOS和iNOS在10只正常胃组...     

尾加压素Ⅱ对大鼠主动脉一氧化氮合酶/一氧化氮系统的影响

目的：研究尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ, U Ⅱ)对大鼠主动脉一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)/一氧化氮(nitric oxide, NO)系统的影响。方法：体外血管薄片孵育,以生化及放射活性分析方法分别测定孵育液中亚硝酸盐(NO－2)含量, 血管 NOS活性及cGMP含量。结果：孵育1.5 h到3 h,U Ⅱ（10－9～10－7 mol*L－1）呈浓度依赖地刺激血管NO－2生成增加（14.8%～80.9%)。 U Ⅱ刺激血管组织总NOS和固有型NOS活性显著增加（P<0.05或P<0.01）而不影响iNOS 活性(P>0.05）。10－9～10－7 mol*L－1的U Ⅱ呈浓度依赖的增加血管组织cGMP含量（P<0.01）。实验还观察到NOS抑制剂左旋硝基精氨酸（GN-L-nitro-arginine, L-NNA）显著抑制了U Ⅱ刺激的血管组织NOS激活、NO生成和cGMP含量增加。结论：U Ⅱ激活血管组织NOS/NO途径,增加血管NO生成与cGMP含量。     

硫酸镁对重度子痫前期患者血清尾加压素Ⅱ水平的影响

目的研究静脉滴注硫酸镁对重度子痫前期患者血清尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)水平的影响。方法对68例重度子痫前期患者静脉滴注硫酸镁治疗3d,比较治疗前后血清UⅡ水平、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、脐动脉血流收缩期与舒张期比值(umbilical artery systolic/diastolic ratio,S/D)及阻力指数(resistant index,RI)以及24h尿蛋白含量的变化,并记录自觉症状。结果(1)治疗前后血清UⅡ水平、MAP、S/D及RI、24h尿蛋白定量水平间差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗前后血清UⅡ与MAP、S/D及RI、24h尿蛋白均呈正相关关系(P<0.05)。(3)治疗后症状未消失的患者与症状消失的患者血清UⅡ下降值间差异有统计学意义(P<0.05)。结论硫酸镁可使重度子痫前期患者的血清UⅡ水平降低,UⅡ可能参与了妊娠期高血压疾病的发生、发展过程。     

内皮型一氧化氮合酶基因与冠心病

冠状动脉粥样硬化性心脏病 (简称冠心病 )是由遗传与环境因素共同所致的复杂疾病。分子遗传学的发展 ,为分析冠心病的遗传机制提供了可能。内皮细胞一氧化氮作为心血管功能上一种重要的调节分子 ,与冠心病的发生、发展有关［１］。一氧化氮合酶(ＮＯＳ)是左旋精氨酸一氧化氮途径的关键酶 ,其基因的突变可能影响ＮＯＳ蛋白的功能及活性 ［２］。ＮＯＳ基因被列为冠心病的一个候选基因［３］。因此 ,ＮＯＳ基因的突变可能与冠心病及心肌梗死风险有关 ,且已有证据证明此相关性 ［２ ,４～６］。人体内ＮＯＳ至少有３种 :内皮型 (ｅＮＯＳ)、神…     

AngⅡ抑制HUVECs内皮型一氧化氮合酶的表达和NO的释放

目的观察AngⅡ对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及内皮NO生成的影响,探讨其可能机制.方法 采用胰蛋白酶消化法进行HUVECs的原代培养,3～5代用于实验;通过RT-PCR和Western Blot检测eNOS的mRNA和蛋白表达水平;利用Griees反应原理测定上清NO释放量.结果与无刺激组相比, AngⅡ(10-8 M、10-7 M、10-6M)抑制HUVECs eNOS mRNA和蛋白表达(P《0.05);HUVECs未受刺激时NO生成量是(50.21±4.39)μM,不同浓度的AngⅡ(10-8 M、10-7 M、10-6M)与HUVECs共孵育12 h可明显减少NO 释放(30.01±4.10)μM、(21.33±4.81)μM、(16.35±2.56)μM,使其浓度分别下降49.7%、63.4%、71.1%.结论AngⅡ明显抑制HUVECs表达eNOS,并呈浓度效应减少内皮NO的释放.     

AngⅡ抑制HUVECs内皮型一氧化氮合酶的表达和NO的释放

目的:观察AngⅡ对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及内皮NO生成的影响,探讨其可能机制。方法:采用胰蛋白酶消化法进行HUVECs的原代培养,3~5代用于实验;通过RT-PCR和W estern B lot检测eNOS的mRNA和蛋白表达水平;利用G riees反应原理测定上清NO释放量。结果:与无刺激组相比,AngⅡ(10-8M、10-7M、10-6M)抑制HUVECs eNOS mR-NA和蛋白表达(P<0.05);HUVECs未受刺激时NO生成量是(50.21±4.39)μM,不同浓度的AngⅡ(10-8M、10-7M、10-6M)与HUVECs共孵育12 h可明显减少NO释放(30.01±4.10)μM、(21.33±4.81)μM、(16.35±2.56)μM,使其浓度分别下降49.7%、63.4%、71.1%。结论:AngⅡ明显抑制HUVECs表达eNOS,并呈浓度效应减少内皮NO的释放。     

内皮型一氧化氮合酶在心血管疾病中的调节作用研究进展

一氧化氮(NO)是由一氧化氮合酶(NOS)生成和释放的非常重要的气体信号分子,在心血管疾病发生发展中发挥非常重要的调节作用,本文就内皮型一氧化氮合酶(eNOS)与心血管疾病之间的关系进行综述,旨在为探讨心血管疾病的发病机制及可能的防治药物的研发提供参考。     

肝硬化患者血浆尾加压素Ⅱ和一氧化氮水平的变化

目的 探讨肝硬化患者血浆尾加压素Ⅱ(U Ⅱ)和一氧化氮(NO)水平变化以及与肝功能关系的临床意义.方法 采用放射免疫学法(ELISA}分别测定肝硬化患者及对照组外周血浆中U Ⅱ的含量,用硝酸还原酶法比色测定血浆中NO的含量,并进行比较.结果 肝硬化患者血浆U Ⅱ水平(41.37±22.68)pg/ml,显著低于对照组(21 3.75±95.80)pg/ml(P＜0.01),随着肝功受损程度增加,U Ⅱ水平则呈现逐步升高(r=0.393.P＜0.01);肝硬化患者血浆NO水平(142.04±28.99)μmol/L显著高于对照组(47.76±18.52)μmol/L(P＜0.01),并随着肝功受损程度增加而进一步增高(r=0.407.P＜0.01).结论 U Ⅱ及NO可能是参与肝硬化发生、发展的重要因素.     

内皮型一氧化氮合酶与冠心病的研究进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)是当今严重威胁人类生命健康的主要疾病之一。最近研究显示,内皮功能紊乱是冠心病早期发病的重要机制之一。一氧化氮合酶有三种亚型:神经型、内皮型、诱导型,其中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在冠心病的发生、发展中发挥重要的作用。该文对eNOS的生理作用、机制及其基因治疗与冠心病的关系予以综述。     

尾加压素Ⅱ对大鼠血管外膜阳离子氨基酸转运体的影响

目的观察尾加压素Ⅱ(UII)对大鼠主动脉血管外膜阳离子氨基酸转运体(CAT-1、CAT-2B)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达影响。方法 SD大鼠24只,250~300g,随机分为空白对照组、UII组(10-9和10-8mol.L-1)和脂多糖(LPS)阳性对照组,每组6只。分离雄性SD大鼠胸主动脉外膜,分别加入单纯孵育液、不同浓度UII和LPS孵育6h。测定孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量;RT-PCR方法测定CAT-1、CAT-2B和iNOS mRNA基因表达。结果与对照组比较UII(10-9~10-8.L-1)刺激血管外膜NO2-生成增加(27%,P<0.05,和49%,P<0.01);UII组血管外膜阳离子氨基酸转运体(CAT-1和CAT-2B)mRNA水平增加(均P<0.01),iNOS mRNA表达增加(P<0.01)。结论 UII可激活血管外膜CAT-1和CAT-2B基因表达,其变化可能参与了NO释放从而引起血管的扩张。     

尾加压素Ⅱ对大鼠血管外膜阳离子氨基酸转运体的影响

目的观察尾加压素Ⅱ（UII）对大鼠主动脉血管外膜阳离子氨基酸转运体（CAT-1、CAT-2B）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因表达影响。方法 SD大鼠24只,250~300g,随机分为空白对照组、UII组（10-9和10-8mol.L-1）和脂多糖（LPS）阳性对照组,每组6只。分离雄性SD大鼠胸主动脉外膜,分别加入单纯孵育液、不同浓度UII和LPS孵育6h。测定孵育液中亚硝酸盐（NO2-）含量;RT-PCR方法测定CAT-1、CAT-2B和iNOS mRNA基因表达。结果与对照组比较UII（10-9~10-8.L-1）刺激血管外膜NO2-生成增加（27%,P〈0.05,和49%,P〈0.01）;UII组血管外膜阳离子氨基酸转运体（CAT-1和CAT-2B）mRNA水平增加（均P〈0.01）,iNOS mRNA表达增加（P〈0.01）。结论 UII可激活血管外膜CAT-1和CAT-2B基因表达,其变化可能参与了NO释放从而引起血管的扩张。     

阿魏酸钠对早发型重度子痫前期患者胎盘中一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨阿魏酸钠结合常规疗法治疗早发型重度子痫前期的效果。方法:观察我院2008年6月~2011年2月间行剖宫产孕妇71例,其中早发型重度子痫前期患者45例,随机分为实验组和对照组,正常组孕妇26例,采用免疫组化方法检测胎盘中eNOS和iNOS表达,对各组结果进行统计学分析。结果:(1)eNOS表达:实验组对照组比较表达升高,P<0.01,有显著统计学意义;实验组与正常组比较P>0.05,无差别;对照组正常组比较表达减少,P<0.01,有显著统计学意义。(2)iNOS表达:实验组对照组比较表达降低,P<0.05,有统计学意义;实验组正常组比较升高,P<0.01,有统计学意义;对照组正常组比较,iNOS表达升高,P<0.01,有统计学差异。结论:通过三组间eNOS和iNOS的变化,反映了阿魏酸钠结合常规疗法治疗早发型重度子痫前期的有效性。     

一氧化氮合酶基因转染小鼠内皮祖细胞的实验研究

目的 探讨利用脂质体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因体外转染小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)的可行性.方法 密度梯度离心法分离ICR小鼠骨髓来源单个核细胞培养制备小鼠EPC并鉴定;构建、扩增、提取并纯化pcDNA3.0/eNOS基因质粒;用EPC培养基配成2×105·mL-1细胞悬液,按0.6 mL/孔重新铺6孔板,待细胞生长至80％左右融合时,用脂质体LipofectamineTM 2000体外转染eNOS基因至EPC.转染48 h后,采用RT-PCR检测EPC中eNOS的表达,硝酸还原酶法检测EPC中一氧化氮(NO)的含量,荧光探针DCFH-DA活性氧检测氧自由基(ROS)的含量.结果 成功培养EPC,成功构建pcDNA3.0/eNOS基因载体.转染48 h后,EPC中eNOS表达量明增加(P＜0.01),NO含量明显升高(P＜0.01),ROS含量明显降低.结论 脂质体介导eNOS基因能够有效转染小鼠EPC,并能在EPC中有效表达.     

内皮型一氧化氮合酶与一氧化氮在大鼠慢性低氧性肺动脉高压时的变化

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)与一氧化氮(NO)在大鼠慢性低氧性肺动脉高压(CHPH)发生、发展中的代谢改变. 方法 50只Wistar雄性成年大鼠随机分为5组:常氧组(N组)、低氧7 d组(H7d 组)、低氧14 d组(H14d组)、低氧21 d组(H21d组)和低氧28 d组(H28d组),每组10只.通过建立CHPH模型,观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP)、右心室肥大指数、肺动脉血NO含量及肺组织中eNOS蛋白的变化. 结果 H14d、H21d和H28d组的mPAP均显著高于N组(P值均＜0.01).H21d和H28d组的右心室肥大指数均显著高于N组(P值分别<0.05、0.01).H14d、H21d和H28d组的肺动脉血NO水平均显著低于N组(P值均＜0.05).H21d和H28d组的肺组织eNOS蛋白含量显著高于N组(P值均＜0.01). 结论 CHPH的发病与NO生物合成障碍有关.慢性缺氧时,eNOS表达水平呈上调趋势,然而与其相应的NO含量却降低,其可能的机制为eNOS/NO体系功能障碍,其中eNOS质的缺陷是内源性NO代谢障碍及NO生成不足的主要原因.     

内皮型一氧化氮合酶和精氨酸酶活性异常对动脉粥样硬化的影响

内皮型一氧化氮合酶(eNOS)脱耦联和内源性不对称二甲基精氨酸(ADMA)水平增高均与动脉粥样硬化关系密切。前者使机体生成过多的过氧化物,造成机体氧化应激状态,后者则竞争性地与eNOS结合,使一氧化氮生成减少。精氨酸酶可以与eNOS竞争底物L-精氨酸,其催化生成的产物是尿素和L-鸟氨酸而不是一氧化氮(NO),因此精氨酸酶可以调节NO的生成量,也可能与动脉粥样硬化有关。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与肝硬化门静脉高压的相关性研究

目的　探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因启动子 786T→C、第 4内含子VNTR及第 7外显子 894G→T多态性与肝硬化门静脉高压之间的关系。方法　采用病例对照和聚合酶链反应 单链构像多态性 (PCR SSCP)及限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)等技术 ,检测了 10 6例乙型肝炎后肝硬化病人和 10 8名健康对照者eNOS基因的多态性改变 ,比较等位基因及基因型频率 ,并进行联合分析。结果　eNOS基因启动子 786T→C多态性中 ,G等位基因和GT基因型频率在乙型肝炎后肝硬化组 (LC)及门静脉高压症组 (LC+ )和单纯肝硬化组 (LC-)与对照组之间差异无显著意义 (P>0 0 5 ) ;eNOS基因第 4内含子VNTR多态性中 ,LC+ 组a等位基因及ab基因型频率高于其他组 (P<0 0 5 ) ;eNOS基因第 7外显子 894G→T多态性中 ,LC+ 组T等位基因和TG基因型频率高于其他组 (P <0 0 1) ;采用Logistic多元回归分析显示 ,eNOS基因第 7外显子 894G→T多态性及第 4内含子VNTR多态性是门静脉高压症新的独立危险因素。结论　eNOS基因第 7外显子T等位基因及第4内含子a等位基因与门静脉高压症的发生密切相关 ,是门静脉高压症形成的两个新的独立危险因素。TGab基因型可能是门静脉高压症的易感基因型。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与2型糖尿病血管并发症关系的研究进展

代谢及血液动力学凶素与2型糖尿病(T2DM)微血管及大血管并发症有关,而内皮功能紊乱在T2DM血管并发症中起关键作用。2型糖尿病微血管并发症主要包括糖尿病肾病(DN)、糖尿病视网膜病变(DR),大血管并发症主要是心脑血管疾病。许多研究发现与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因多态性有关的内皮功能损害是T2DM血管并发症的主要原因之一。文章对eNOS基因多态性与糖尿病血管并发症的相关性进行综述。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与脑梗死的研究

一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase，NOS)的一个重要指征是不仅合成一氧化氮(Nitric Oxide，NO)，也能产生超氧离子。目前已确定的NOS的亚型有三种，根据不同的基因编码分别称为神经元型NOS(neuronal NOS，nNOS)、诱导型NOS(inducibl eNOS，iNOS)、内皮型NOS(endothel ialNOS，eNOS)。三种NOS亚型在血管内皮细胞中均可表达，但在生理情况下，血管内皮细胞中的eNOS合成和释放NO无疑是血管张力的主要调节因子。而nNOS与iNOS产生的NO则主要产生氧化作用，具神经毒性作用。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与新疆汉族原发性高血压的相关性研究

目的研究新疆汉族人内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase,eNOS）基因第7外显子G894T及第4内含子4b/a VNTR多态性与原发性高血压（essential hypertension,EH）的关系。方法分别采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（Polymerase chain reaction-restricted fragments length polymorphism,PCR-RFLP）技术及PCR技术检测176例原发性高血压患者、131例对照组eNOS基因G894T和4b/a多态性的基因型,分析其对原发性高血压的影响。结果原发性高血压组和对照组eNOS基因G894T、4b/a多态性的等位基因频率及基因型分布在两组间差异无统计学意义。结论 eNOS基因894G→T变异及4b/a VNTR多态性与新疆汉族原发性高血压无明显关联。     

人内皮型一氧化氮合酶结构和功能的生物信息学分析

目的运用生物信息学方法分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的结构和功能。方法利用生物信息学的各种软件,分析eNOS基因启动子、基因同源性,以及其所编码蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、二级结构、三级结构、翻译后修饰和蛋白质相互作用。结果 eNOS基因有14个启动子,基因同源性分析发现人与猪的eNOS基因序列接近度较高。eNOS蛋白属于亲水的不稳定蛋白,不属于分泌蛋白,且没有信号肽;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主,三级结构稳定可靠;N-糖基化位点和O-糖基化位点各有0和29位,磷酸化的位点有Ser:35,Thr:14,Tyr:4。eNOS蛋白可以与10个蛋白发生作用。结论 eNOS具有利于蛋白间相互作用的结构,并可在细胞膜定位,具有传递信息的功能。