乳腺癌组织CD44+CD24-/LowESA+Lin-干细胞比例及影响因素分析

目的 研究乳腺浸润性导管癌组织CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞比例及其相关影响因素。方法 收集四川大学华西医院甲状腺乳腺外科2011年4月至2011年12月经病理诊断为浸润性导管癌的新鲜标本40例进行流式细胞学检测,分析患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、腋窝Ⅰ-Ⅱ水平淋巴结转移状况、免疫组化指标 〔雌激素受体（ER)、孕激素受体(PR)、上皮因子生长受体-2(C-erbB-2)、Ki-67〕等与CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞比例的关系。结果 在乳腺浸润性导管癌组织中,CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-乳腺癌干细胞全部为阳性表达 （干细胞比例0.5%～16.8%）,平均值为4.38%,其中,低表达 （≤4.38%)20例,高表达 （＞4.38%）20例。单因素分析显示CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^-细胞比例与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、腋窝淋巴结转移状态、ER、PR以及C-erbB-2均无相关性。而以32.0%为界,把Ki-67分为高表达组 (＞32.0%)和低表达组 (≤32.0%),两组间干细胞比例差异有统计学意义 (P=0.008)。多因素logistic回归发现,Ki-67表达强度是CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^- 表达比例的独立影响因素 (P=0.012,OR=6.926, 95%可信区间1.529～31.377）。结论 乳腺癌组织中,Ki-67表达强度是CD44⁺CD24^-/LowESA⁺Lin^- 表达比例的独立影响因素。但干细胞比例与临床疗效和预后的关系仍需进一步研究。     

Hippo信号通路在乳腺癌干细胞中的研究进展

肿瘤干细胞(CSCs)被认为是肿瘤发生、复发、转移和耐药的主要原因。越来越多的研究发现,Hippo通路的失调与肿瘤的发生、发展密切相关。本文主要总结Hippo通路在调节乳腺癌干细胞增殖、分化、转移、耐药以及免疫微环境等方面的作用,希望为Hippo通路的相关研究提供参考。     

MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,我国乳腺癌发病率呈逐年增高趋势,在部分大城市已居女性恶性肿瘤发病率之首.MAPK通路是细胞内重要的信号传导途径,在细胞的恶性转化和肿瘤的发生发展中起重要作用;MAPK主要包括以下四类:细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38激酶以及大丝裂原活化蛋白激酶(BMK1/ERK5).其中ERK的激活与细胞增殖有关,JNK与细胞应激和细胞凋亡有关,p38与炎症反应有关,BMK1/ERK5可能与细胞增殖、细胞周期有关.据研究它的激活与多种恶性肿瘤发生有关~([1]).研究MAPK通路与乳腺癌的关系,有助于了解乳腺癌的发病机制,可能对乳腺癌治疗有意义.本文对MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展综述如下.     

真核细胞始动因子4E结合蛋白1在乳腺癌信号传导通路中的作用及其与预后的关系

对本院48例乳腺癌患者术后肿瘤组织的细胞信号传导通路的人类表皮生长因子受体2（HEPO）、丝氨酸与苏氨酸激酶（Akt）、真核细胞始动因子4E结合蛋白1（4EBP1）、核糖体蛋白S6激酶1（p70S6K1）和核糖体S6行免疫组化染色检测。HER2阳性与阴性表达的肿瘤比较,Akt表达率更高（P〈0．01）。Akt表达的水平与其下游因子4EBP1、p70S6K1的表达呈正相关（P〈0．01,P〈0．05）。4EBP1主要表达在低分化的肿瘤中（P〈0．01）,并与肿瘤大小（P〈0．05）、淋巴结的转移（P〈0．01）及局部复发相关（P〈0．01）。提示4EBP1与乳腺癌的肿瘤分级和预后密切相关。     

CD44v3在乳腺癌及其淋巴结转移组织中的表达

目的 探讨粘附分子CD44v3在乳腺肿瘤浸润转移中的作用及意义。方法 应用病理形态观察及免疫组织化学技术对50例乳腺癌及23例淋巴结转移灶的CD44v3蛋白表达情况进行检测。结果 CD44v3在乳腺良性组织表现为肌上皮细胞着色;在浸润性乳腺癌中,除肌上皮细胞外,有此癌细胞胞膜也着色。癌细胞胞膜表达阳性率达58．8％,与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移、癌栓、肿瘤大小及病理核分裂未见相关关系。CD44v3在淋巴结转移灶中仅表现为转移癌细胞胞膜表达,其阳性率为52．1％,与原发灶接近。结论 CD44v3在乳腺癌癌细胞胞膜呈阳性表达,其意义及在侵袭转移中的作用有待进一步探讨。     

肿瘤干细胞标志物CD133在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨肿瘤干细胞标志物CD133在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测109例乳腺癌组织和60例乳腺良性肿瘤组织中CD133的表达,分析其与乳腺癌亚型及临床病理参数间的关系.结果 109例乳腺癌组织中,CD133表达的阳性率为46.8%(51/109),60例乳腺良性肿瘤的阳性率为0.33%(2/60),两者差异具有高度统计学意义(P<0.01);109例乳腺癌组织中,CD133蛋白的表达随病理级别的增加而升高(P<0.05),随临床分期升高及肿瘤直径增大呈下降趋势(P>0.05);乳腺癌4种亚群中,Basal-like亚群中CD133蛋白的阳性率最高,为69.2%,显著高于其他亚群,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期低分化或未分化癌更富于干细胞,可能与肿瘤细胞恶性演进有关;CD133蛋白的表达具有区分不同乳腺癌亚型作用以及在乳腺癌的预后预测具有重要作用.     

Hedgehog信号传导通路与人类相关肿瘤研究的进展

Hedgehog信号传导通路首先在果蝇中发现,随后又在脊椎动物中证实,它在胚胎发育过程中起很重要的作用,特别是近几年来,发现很多疾病与Hedgehog信号传导通路有十分密切的关系,当Hedgehog信号传导通路异常激活,就会激发人类相关肿瘤的发生和发展。     

bFGF及其信号传导与乳腺癌的关系

肿瘤生物学研究认为,肿瘤是一类细胞增殖周期紊乱性疾病,表现为细胞增殖加速和凋亡障碍[1].恶性肿瘤目前是危害人类健康最严重的一类疾病,乳腺癌是女性主要恶性肿瘤之一,全球每年约有120万妇女患乳腺癌,且近年有逐年上升的趋势,其发生、发展与细胞周期的改变及细胞凋亡的抑制密切相关.     

肿瘤干细胞及其Wnt信号通路在胃癌患者中的表达

目的通过研究肿瘤干细胞及其Wnt信号通路在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎(伴肠化生或异型增生)、早期胃癌患者中的表达,来探讨肿瘤干细胞及其Wnt信号通路表达在胃癌患者中的作用机制。方法利用免疫组化技术分析了β-catenin和c-myc基因蛋白在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎(伴肠化生或异型增生)、早期胃癌患者非炎症区组织中的表达,并对其进行比较。结果在早期胃癌组和慢性萎缩性胃炎组,β-catenin和c-myc基因蛋白的表达均明显高于慢性非萎缩胃炎组,P<0.05;但早期胃癌组和慢性萎缩性胃炎组相比,β-catenin和c-myc基因蛋白的表达无显著差异,P>0.05。结论胃癌与胃的癌前病变与β-catenin和c-myc基因蛋白的过表达密切相关,Wnt信号通路在胃癌患者发病中具有重要意义。     

CD133~+细胞在结肠癌中的研究进展

<正>大量的研究表明实体瘤中有一小部分肿瘤细胞具有"干细胞"性质[1-2],即所谓的肿瘤起始细胞(tumor initiating cell)或者称肿瘤干细胞(cancerstem cell),其具有无限增殖和自我更新的潜能,能够驱动肿瘤的形成、生长、侵袭、转移,并具有抵抗放化疗的能力[3-4]。有研究证明在很多实体瘤中都存     

乳腺癌干细胞的检测及Hedgehog信号通路关键分子的表达

目的:探讨乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中是否存在乳腺癌起始细胞(CD44+/CD24-/low)亚群;并分析Hedgehog信号通路在CD44+/CD24-/low乳腺癌起始细胞亚群中的表达.方法:应用荧光激活细胞分选方法检测与分选MCF-7和MDA-MB-231中的CD44+/CD24-/low细胞亚群和非CD44+/CD24-/low细胞亚群,并在激光共聚焦显微镜下进行观察确认.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CD44+/CD24-/low细胞亚群和非CD44+/CD24-/low细胞亚群中Hedgehog信号通路重要基因PTCH(human patched gene)、SHH(sonic Hedgehog)、Gii-1(glioma-associated oncogene homoglog-1)和SMOH(smoothened homolog)的表达情况.结果:乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中CD44+/CD24-/low亚群,比例分别为(1.70±1.43)%和(94.2±1.2)%.乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231的CD44+/CD24-/low亚群中Hedgehog信号通路处于明显活化状态,其中Hedgehog信号通路中重要下游信号分子Gii-1在MCF-7和MDA-MB-231细胞系CD44+/CD24-/low细胞亚群中的表达要明显高于非CD44+/CD24-/low细胞亚群(P分别为0.007和0.005).结论:乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中存在CD44+/CD24-/low干细胞标志细胞亚群,其中Hedgehog信号通路处于明显活化状态.     

CD44+/CD24-/low/ABCG2-乳腺癌干细胞比例增高与临床治疗相关的探索性研究

目的:研究CD44 /CD24-/low/ABCG2-细胞与临床治疗及预后的相关性.方法:收集北京大学临床肿瘤学院经病理诊断为乳腺浸润性导管癌患者的手术切除石蜡标本共43例,进行免疫组织化学检测ABCG2和CD44/CIY24双染的表达情况,分析其与预后的相关性.同时收集北京大学临床肿瘤学院晚期乳腺浸润性导管癌患者共10例,分别于治疗前及化疗2周期后抽取空腹静脉血4 mL,流式细胞仪检测CD45-/CD44 /CD24-/low/ABCG2-的细胞比例,分析其与治疗的相关性,并与健康志愿者进行对照.结果:43例患者中,术后5年内复发23例,5年内无复发20例.免疫组织化学检测表明,复发组ABCG2表达高于术后无复发组,但差异无统计学意义(78.3%vs60.0%,P=0.32),且与牛存无相关性(P=0.086).CD44 /CD24-双染细胞10%者在复发组更常见,两组之间差异有统计学意义(65.2%体35.0%,P=0.048),这部分患者的无病牛存期更短,但不是独立预后因素.流式细胞检测CD45-/CD44 /CD24-/low/ABCG2-的细胞在晚期乳腺癌患者的数量为1～3 725个/105(中位数为679个/105),健康志愿者中该细胞数为0～98个/105(中位数为12个/105).该细胞数目在化疗前后出现了变化,但与治疗效果的相符性没有得出统计学意义.结论:乳腺癌组织中,CD44 /CD24-/low乳腺癌干细胞的比例与患者的预后相关,而乳腺癌患者外周血中的CD44 /CD24-/low/ABCG2-的细胞数目高于健康志愿者,其与临床疗效的相关性仍需进一步研究.     

膀胱癌细胞在不同生长环境中癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4表达情况的初步研究

目的 观察癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4在不同环境下膀胱癌细胞的变化情况,为人体膀胱癌干细胞的进一步研究提供前期数据与背景资料.方法 采用免疫组织化学与流式细胞术等技术,对体外培养、皮下移植瘤以及裸鼠淋巴结转移模型等不同的生长微环境的膀胱癌5637细胞系癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4的表达进行检测.结果 在体外培养环境中,膀胱癌5637的细胞膜蛋白CD44呈阳性表达,而CXCR4呈弱阳性表达;膀胱癌裸鼠移植瘤中CD44、CXCR4均呈阳性表达.与体外培养体系比较,流式细胞术检测发现膀胱癌细胞中5637的CD44阳性表达水平无显著变化,而CXCR4阳性表达水平显著高于体外培养体系（P＆lt;0.01）;在裸鼠淋巴结转移模型中,转移淋巴结均有CD44、CXCR4阳性表达.结论 膀胱癌细胞中部分癌干细胞相关标志物的变化受体内外不同环境变化的调控,也提示膀胱癌5637细胞系存在有癌干细胞.     

乳腺癌干细胞的树突状细胞疫苗对细胞毒性T淋巴细胞增殖的影响

目的探讨加载人类乳腺癌干细胞（BSC）的树突状细胞（DC）疫苗对细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活化效果的影响。方法从11例乳腺癌患者中分离并评价BSC,探讨BSC作为DC疫苗抗原的适用性,并在体外评估了杀伤BSC的能力。结果BSC表达高水平的干细胞相关分子CD44+、CD24-和CD133+,乳腺癌贴壁细胞表达CD44+、CD24＋和低CD133+。在体内,富集的乳腺癌细胞球表现出比贴壁细胞更强的致瘤能力。使用BSC裂解物的DC疫苗接种引发针对BSC的特异性T细胞应答。DC疫苗接种刺激Th1应答并诱导IFN-γ产生,与活化的CTL数量呈正相关。结论乳腺癌细胞球细胞具有干细胞特性和强致瘤功能,使用BSC抗原的DC接种可引发有效的抗原特异性Th1应答,进一步激活抗原特异性CTL并诱导IFN-γ产生。     

乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群初步研究

目的:检测不同乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群含量,并探讨使乳腺癌细胞系MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群富集的方法.方法:利用流式细胞仪检测3种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s中SP细胞(side population cells)比例及CD44 CD24-/low细胞比例.用Percoll不连续密度梯度法分离MCF-7细胞亚群,利用流式细胞仪筛选出SP细胞富集的亚群.用添加生长因子的无血清培养液培养MCF-7,检测其中CD44 CD24-/low细胞的比例.结果:MCF-7、MDA-MB-435s中SP细胞比例分别为3.61%和2.72%,MDA-MB-231中未检测到SP细胞.3种细胞系中CD44 CD24-/low细胞比例分别为0.87%、0.59%和94.04%.MCF-7经Percoll分选,D亚群SP细胞富集,比例高达25.23%.MCF-7中CD44 CD24-/low细胞比例随着无血清培养时间的增加而增加,3周时达29.35%.结论:SP检测与CD44 CD24-/low细胞检测是目前乳腺癌干细胞检测的两种常用方法,但两者在同一乳腺癌细胞系中的检测结果并不一致,两种方法均有一定的局限性.另外,Percoll分选或无血清培养均能使MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群(SP细胞或CD44 CD24-/low细胞)富集.     

乳腺癌^99m锝-甲氧基异丁基异腈显像与三种多药耐药蛋白表达的关系

目的探讨乳腺癌对^99mTc-甲氧基异丁基异腈（^9mTc—MIBI）摄取、滞留与三种多药耐药蛋白表达的关系及临床意义。方法对60例未经治疗的乳腺癌患者静脉注射^99mTc—MIBI740MBq进行早期（20rain）和延迟（120min）平面显像,采用感性趣区（ROI）技术计算早期摄取比值（T／Ne）、延迟摄取比值（T／Nd）以及滞留率（RI％）。采用免疫组化方法检测空心针穿刺或手术乳腺癌组织多药耐药蛋白P—gP、MRP和GST-π表达水平,并与T／Ne、T／Nd和RI％进行相关性分析。结果^99mTc—MIBI显像阳性率为93．33％;P—gP、MRP、GST-π表达的阳性率分别为73．21％、58．93％、51．79％,X^2=6．552,P〉0．05三者无统计学意义。P—gP表达阳性组和阴性组RI％间有统计学意义（Z=-2．120,P〈0．05）。P—gP表达与RI％呈负相关。结论^99mTc—MIBI显像能预测乳腺癌组织P-gp的表达水平．为临床个体化治疗提供参考。     

乳腺癌干细胞耐放射性与细胞周期的关系

肿瘤的放射疗法是一种建立在细胞周期基础上的治疗方法,乳腺癌干细胞在放疗过程中出现的G2/M期阻滞、衰老途径下调、APE1水平升高及细胞周期调控相关基因p21和p53活性等改变直接或间接导致细胞周期紊乱,均与乳腺癌干细胞的耐放射性密切相关,是分子遗传学和肿瘤生物学研究的热点.     

rAAV/CEA转染树突状细胞诱导特异性CTL杀伤MCF-7细胞系CD44+ CD24-/low乳腺癌干细胞

目的:携带癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)基因的重组人腺相关病毒(reconstructive human ade-no-association virus,rh-AAV)感染树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cyto-toxic lymphocyte,CTL),体外检测其对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。方法:分离供者外周血单个核细胞,以细胞因子白介素-4(interleukin-4,IL-4)、粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimu-lating factor,GM-CSF)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导培养获得DC,细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2),刺激培养获得T淋巴细胞。含CEA基因的rh-AAV感染培养DC,诱导成熟后将DC和T细胞混合培养获得CTL细胞。流式分选MCF-7和MA-MDB-231细胞系中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞,MTT法检测CTL细胞对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。结果:MCF-7和MDA-MB-231中CD44+/CD24-/low亚群比例分别为5.1%和76.3%。CEA基因转染DC诱导的CTL细胞对表达CEA抗原的MCF-7杀伤率为46.5%±15.0%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P=0.009);对MCF-7细胞中分选的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤率为44.7%±28.2%,明显高于未转染组。对非乳腺癌干细胞杀伤率为50.6%±22.2%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P=0.05)。在不表达CEA基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞,CEA转染诱导的CTL细胞对未分选细胞、分选的CD44+/CD24-/low亚群和非干细胞亚群的杀伤率与未转染的对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:携带CEA基因rh-AAV转染DC诱导产生的抗原特异性CTL细胞可杀伤表达CEA的乳腺癌细胞,对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞也具有一定的杀伤活性,提示免疫治疗可能是治疗乳腺癌干细胞潜在有效的手段。     

CD44~+/CD24~-细胞在乳腺癌细胞中所占比例及相关性分析

目的探讨CD44＋/CD24-细胞在乳腺癌细胞中的比例与乳腺癌远处转移之间的关系,研究其与各临床资料之间是否存在相关性。方法通过免疫组化双染技术,对60例病例的肿瘤石蜡切片进行分析,确定CD44＋/CD24-细胞在乳腺癌细胞中所占的百分率,并分析其与远处转移之间的关系及与各项临床资料间的关系。结果 CD44＋/CD24-细胞占肿瘤细胞百分比在两组中存在显著差异性,转移组中骨转移病例的CD44＋/CD24-细胞在肿瘤细胞中的比例有显著性差异。结论 CD44＋/CD24-细胞细胞在乳腺癌细胞中所占比例与乳腺癌远处转移密切相关,特别是骨转移。在临床病理类型,肿瘤大小,淋巴结转移情况,TNM分期,激素受体情况,肿瘤发生于绝经前后,Her-2情况中无明显差别。