光敏剂癌光啉对小鼠骨肉瘤LM-8细胞体外光动力作用的实验研究

目的 观察光敏剂癌光啉(PSD-007)对小鼠骨肉瘤LM-8细胞的体外光动力效应.方法 将不同浓度的光敏剂PSD-007(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)与小鼠骨肉瘤细胞株LM-8共同孵育4 h,再以630 nm波长的激光为光源,采用不同激光能量照射LM-8细胞(激光波长为630 nm,光照能量分别为1.5、3.0、6.0、9.0 J/cm2),与空白对照组(不加光敏剂且不接受激光照射)、暗毒性组(加光敏剂但不接受激光照射)、激光组(不加光敏剂但接受激光照射)比较,24 h后采用溴化四氮唑蓝(MTT)法测定其光密度值(D540)值,计算抑制率,并于光学显微镜下观察光动力疗法(PDT)后24 h细胞形态的变化.结果 单独照光或光敏剂孵育均无杀伤效应,光敏剂浓度及激光能量是影响杀伤效应的重要因素.PSD-007浓度为4.0μg/mL、光照能量为6.0 J/cm2时,对LM-8细胞有明显的光动力杀伤效果,抑制率为73.8%.光学显微镜下可见细胞形态发生明显的变化,呈坏死或凋亡样改变.结论 在体外,PSD-007对小鼠骨肉瘤LM-8细胞具有明显的光动力杀伤作用.PDT是很有前景的治疗骨肉瘤的新方法.     

盐酸氨基乙酰丙酸介导的635/670nm联合波长下光动力学治疗的抗肿瘤效应

目的通过实时测定单态氧(singlet oxygen,1 O2)评估635nm和(或)670nm激光照射下盐酸氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)介导的光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)抗肿瘤效果。方法以5-ALA为光敏剂,在单波长(635nm或670nm)及联合波长(635nm+670nm)下进行激光照射,利用新型高灵敏的检测系统测定PpIX溶液、肿瘤细胞(9L神经胶质肉瘤细胞和HeLa细胞)及HeLa负瘤裸鼠中的1 O2强度,H-E染色法检测肿瘤组织坏死深度。结果接受单一的635nm或670nm波长激光照射时,PpIX溶液1 O2强度在两者中无明显区别。635nm与670nm激光联合照射下,9L细胞的1 O2强度高于HeLa细胞;在两种细胞中670nm激光诱发1 O2强度均远远低于635nm激光。在HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤中,两种波长激光联合照射产生一定的肿瘤坏死深度,但低于635nm单波长照射。结论在5-ALA介导的PDT中,670nm波长激光显示了一定的PDT疗效。     

光动力学疗法联合局部注射化疗药物治疗进展期食管贲门癌——附202例报告

目的评价光动力学疗法联合局部注射化疗药物治疗进展期食管贲门癌的疗效。方法应用光动力学疗法（PDT）治疗食管贲门癌202例,按治疗方法分为单纯PDT组（42例）和PDT联合局部化疗组（160例）。对每一患者均先静脉输注光敏剂癌光啉（PSD-007）或血卟啉单甲醚（HMME）3-5 mg/kg,于用药后经内镜以激光照射肿瘤局部。PDT联合局部化疗组除PDT治疗外,于每次激光照射前肿瘤局部注射化疗药物5-Fu或平阳霉素,间隔1个月可重复治疗。结果经治疗后多数患者吞咽困难、下咽痛等临床症状不同程度缓解,其中PDT联合局部化疗组吞咽困难的缓解率显著高于单纯PDT组,生存质量亦提高。PDT联合局部化疗组的近期显效率显著高于单纯PDT组。部分病例随访12-36个月,PDT联合局部化疗组的平均生存期较单纯PDT组显著延长。结论PDT联合局部化疗治疗食管贲门癌的治疗方法安全有效,并能协同提高PDT的治癌效果,有临床推广应用价值。     

内镜下光动力治疗早期喉癌的探讨

目的探讨光动力治疗（PDT）对早期喉癌的治疗效果与喉功能的保护作用。方法从2001年起，我科采用副作用小、正常组织损伤少的PDT630nm对早期喉癌（Ⅰ—Ⅱ）进行光动力治疗，并追踪观察其治疗效果最长时间近4年。本组收集早期喉癌（Ⅰ-Ⅱ）16例，均使用进口半导俸PDT激光机与进口光敏剂PHOTOSAN。于静注PHOTOSAN2mg/kg 48h后，用PDT630激光照射300J／cm，第2天用PDT630激光300J／cm重复照射一次。对于团块增生型，肿瘤局部突起较明显者，先用大功率半导体980nm激光作局部切除，然后再按上述剂量照射PDT630激光。结果所有病人均能耐爱治疗操作，无一发生术中患外（1例术后喉头水肿，需气管切开通气），其中9例一次光动力治疗治愈，3例3～6月复发，经再次光动力治疗治愈，4例因肿瘤残留而改用手术治疗。本组病人随访时间最常近4年，最短者半年，经光动力治愈的患者喉功能保存完好，具有正常人的生活质量。结论光动力治疗副作用小、正常组织损伤少的特．点，经光动力治愈的惠者喉功能保存完好，生活质量高，特别适用于高龄或有手术禁忌证的患者，可以作为早期喉癌的首选方法之一，即使治疗失败，中转手术治疗，也不影响治愈率。     

光动力疗法治疗食管贲门癌11O例分析

目的评价光动力疗法(PDT)联合局部化疗治疗食管贲门癌的疗效.方法应用PDT治疗食管贲门癌110例,并对其中70例联合应用内镜下局部注射化疗药物.对每一患者均先静脉滴注癌光啉(PSD-007)3～5mg/kg,于用药后24、48或72h分别以激光照射肿瘤局部.PDT联合局部化疗组除PDT治疗外,于每次光照前肿瘤局部注射5-FU250～500mg或平阳霉素8mg.结果PDT联合局部化疗组的近期显效率高于单纯PDT组(P<0.05).部分病例随访10～18个月,PDT联合局部化疗组的平均生存期较单纯PDT组延长(P<0.01).结论PDT联合局部化疗治疗食管贲门癌安全而有效,并能提高PDT的治癌效果.     

金蒸汽激光治疗人肺腺癌裸小鼠移植瘤

应用肿瘤内照射和肿瘤表面照射两种方法在人肺腺癌裸小鼠移植瘤(lung adenocarcinoma xenograft,LAX-83)进行光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)的实验研究。结果表明PDT后LAX-83生长延缓。治疗后10天,肿瘤内照射组和肿瘤表面照射组之间的肿瘤体积和重量无显著差异。而在治疗组与对照组、单独激光组和单独光敏剂组之间存在显著差异。形态学观察结果表明肿瘤内照射组的病理改变比肿瘤表面照射组出现更早、更显著。后者肿瘤坏死深度在4～5mm左右,而前者则达10mm以上。光镜下发现肿瘤细胞胞浆、胞核浓缩,肿瘤细胞坏死。电镜检查提示线粒体受损最早。单独注射光敏剂和单独激光照射后均不产生肿瘤组织的显微结构和超微结构的改变。本实验证实PDT对人肺腺癌细胞的杀伤作用,为肿瘤内照射治疗的临床应用提供有益参考。     

二氢卟吩P6酰胺衍生物对小鼠S180移植肉瘤的初步光动力疗效

光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)始于70年代,现已发展成为一种新的肿瘤疗法.目前国内外临床所用的光敏剂血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HPD)、卟吩姆钠(porphymer sodium)、癌光啉(photocarcinorin,PSD-007)等均为多组分复杂卟啉混合物,特别是其中对肿瘤无选择性定位作用的卟啉含量高及在红光区(λ>600nm)的吸收系数小,导致组织有效光动力效应低和相对严重的光毒反应.     

癌光啉对人骨肉瘤MG-63细胞的光动力杀伤效应

目的 探讨癌光啉(PSD-007)在体外对人骨肉瘤MG-63细胞的光动力杀伤效应.方法 不同浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)的PSD-007与细胞孵育4 h后,以不同能量(1.5、3.0、6.0、12.0 J/cm2)激光照射,采用溴化四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞的光密度(D)值及存活率;不同浓度(1.0、2.0、4.0μg/mL)的PSD-007与细胞孵育4 h后,以6.0J/cm2能量的可见光照射,于光学显微镜下观察光动力治疗后细胞形态的变化,应用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染色流式细胞仪分析细胞死亡形式.结果 当PSD-007浓度为2.0μg/mL、光照能量为6.0 J/cm2时,细胞在光动力治疗处理后的存活率明显降低,为52.94%.光动力治疗处理后的细胞逐渐变圆,体积变小,核质比增大,折光性减弱,贴壁能力下降,细胞间隙增大,直到细胞漂浮死亡.流式细胞仪分析结果显示,光动力治疗后死亡细胞主要为坏死或晚期的凋亡细胞.结论 在体外,PSD-007对人骨肉瘤MG-63细胞具有光动力杀伤效应.     

肿瘤光敏诊治药物的研究——Ⅱ、新光敏剂PSD-007的研究

本文报道第二代血卟啉光敏剂PSD=007的制备及其理化待性和对肿瘤组织的选择性摄入作用及对小鼠S180肉瘤的实验性光敏诊治效果。作者用色谱法由血卟啉光敏剂分离除去70％左右的无关或低效组分,并保留其已知PRT效应较强的低极性组分而制备得组成稳定,光敏效应强的新光敏剂PSD-007。与血卟啉衍生物(HPD)对比测定结果表明,PDS-007于不同时间内在肿瘤组织中的滞留量均高于HPD约1倍,显示其具有较好的肿瘤选择性PRT效应的基础。静脉注射5～10mg/kg体重剂量的PSD-007于S180肉瘤带瘤小鼠后24及48小时,分别用体腔紫外线机及氩离子激光5145波段诊察,均见肿瘤显示鲜明桔红色荧光,后者与周围正常组织有清晰的边缘,在同一条件下用5145光连续进行辐照治疗20分钟,照光后24小时在肿瘤区出现淤血样青紫、瘤体变平坦、其中心区发生凹陷、硬结、个别的成块脱落,显示了明确的实验性肿瘤光敏诊治效果。本文还报道了家兔静脉注射PSD-007后的主要药物动力学参数,为临床合理用药提供了参考依据。     

新光敏剂(PSD—007)-激光所致小鼠白血病细胞DNA链断裂损伤

新光敏剂(PSD-007)合并激光可导致小鼠白血病细胞DNA产生链断裂损伤,且这些损伤在照射后保温过程中不能被修复。DNA链断裂量随着激光能量或光敏剂浓度增加而增加。但在1μg/ml PSD-007时,未测得DNA发生链断裂。当光敏剂达50μg/ml时,DNA链断裂不再随浓度增加而增加。与激光作用比较,~(60)Co γ线合并光敏剂照射后DNA链断裂产量未见明显增加,且在照射后可以得到重接修复。本文对以上结果进行了讨论。     

MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响。方法:建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,将荷瘤鼠分成4组,每组5只,分别给予腹腔注射。对照组:生理盐水0.2 ml,1次.d-1,共7 d。MG132组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d。顺铂组:3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。MG132联合顺铂组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d;3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。计算瘤体积,绘制瘤体生长曲线;称瘤重,计算抑瘤率及瘤体抑制率,比较各组荷瘤鼠瘤体积和瘤重的差异。结果:各组荷瘤鼠瘤体积两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),MG132组、顺铂组以及MG132联合顺铂组的瘤体生长较对照组明显缓慢。荷瘤鼠瘤重各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),各干预组的荷瘤鼠瘤重比对照组明显减轻。MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠抑瘤率分别为15%、48%和81%;MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠瘤重抑制率分别为9%、43%和69%。结论:MG132能抑制裸鼠体内Hela细胞移植瘤的生长,并增强顺铂对裸鼠Hela细胞移植瘤生长的抑制作用。     

芹菜素对人前列腺癌裸鼠移植瘤Bax和Bcl-2表达的影响

目的：探讨芹菜素对人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法：通过皮下种植PC-3细胞建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,成瘤后随机分为4组：对照组（DMSO＋NS,0.2 mL/d）、芹菜素低剂量组（12.5 mg.kg-1.d-1）、芹菜素中剂量组（25 mg.kg-1.d-1）、芹菜素高剂量组（50 mg.kg-1.d-1）,每组6只,每日腹腔注射1次,共28次。应用免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达变化。结果：免疫组织化学法结果显示,芹菜素中、高剂量组能促进Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,两组与对照组和低剂量组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。但芹菜素低剂量组Bax和Bcl-2蛋白的表达和对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：中、高剂量组芹菜素能上调前列腺癌裸鼠移植瘤Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。     

新光敏剂PSD—007的光毒反应

本文报道新光敏剂PSD-007及美国和国产(北京制药工业研究所的血卟啉衍生物(HPD)在2·5mg/kg及其以上剂量静脉注射可致小鼠的光毒反应。光毒反应的强度随剂量增加而加重。在等重剂量条件下。PSD-007所致光毒反应较美国和国产HPD为轻;轻度光毒反应的恢复也以PSD-007为快。     

人参黄连组合物对糖尿病肾病小鼠的治疗作用

目的：探讨人参黄连组合物对糖尿病肾病（DN）小鼠生化指标和肾脏病理组织形态的作用,为其应用于DN治疗提供依据。方法：取10只C57小鼠设为正常对照组,另取240只C57小鼠采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲菌素（STZ）诱导制备DN模型,将成模的小鼠随机分为模型对照组和低（80 mg·kg^-1+20 mg·kg^-1）、中（160 mg·kg^-1+40 mg·kg^-1）、高（320 mg·kg^-1+80 mg·kg^-1）剂量人参黄连组合物组及黄连总生物碱组（320 mg·kg^-1）、人参总皂苷组（80 mg·kg^-1）、卡托普利（8 mg·kg^-1）组,每组10只。于用药8周后观察各组小鼠的一般生理状况,检测各组小鼠空腹血糖（FBG）、尿微量白蛋白（MAU）、血肌酐（Scr）、血清尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平和24小时尿量;HE染色观察小鼠肾脏病理组织形态表现。结果：与模型对照组比较,各剂量人参黄连组合物组小鼠尿量和体质量增加等一般情况明显改善,FBG水平降低（P<0.05）;MAU及血清BUN、TC和TG水平降低（P<0.05）。各剂量人参黄连组DN小鼠肾小球-肾间质病变明显改善。结论：人参黄连组合物对早期DN具有一定治疗作用。     

斜脉暗罗茎提取物对S（180荷瘤抗肿瘤作用及其机制研究

目的：研究斜脉暗罗茎提取物对S180荷瘤抗肿瘤作用的影响。方法：制备S180荷瘤小鼠动物模型,于接种肿瘤后第2日始分别隔日腹腔注射生理盐水或0.1、0.2、0.4 mg/kg-1·d-1的斜脉暗罗茎提取物溶液,7天后处死各组小鼠,观察小鼠胸腺、脾、肿瘤的重量及胸腺指数、脾指数、肿瘤指数等指标。结果：0.2和0.4 mg·kg-1·d-1的斜脉暗罗茎提取物与溶剂对照组相比,胸腺指数、脾指数明显增加（P〈0.05;P〈0.01）,且肿瘤生长明显缓慢,肿瘤重量明显降低（P〈0.05;P〈0.01）。结论：斜脉暗罗茎提取物能明显抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长,其作用机制可能是通过增强荷瘤小鼠自身免疫功能来实现。     

麦冬提取物对妊娠期胰岛抵抗小鼠尿蛋白水平和脂联素表达的影响

目的：探讨麦冬提取物对妊娠期胰岛抵抗小鼠脂联素及尿蛋白水平的影响。方法取妊娠1周内的小鼠建立妊娠期胰岛抵抗小鼠模型。造模成功小鼠随机分为麦冬多糖125 mg·kg-1组、500 mg·kg-1组、模型组,每组各10只。另选10只正常妊娠小鼠,作为对照组。连续灌胃给药14 d后,观察其血糖及胰岛抵抗情况,并检测血清中的脂联素水平和尿蛋白的含量。结果与模型组小鼠相比,麦冬提取物各剂量组均可明显降低妊娠糖尿病小鼠的空腹血糖、改变胰岛素抵抗状况,升高血清中脂联素水平（ P﹤0.05）。结论麦冬提取物有改善妊娠期小鼠胰岛素抵抗作用,并对预防妊高征的发生有一定的帮助。     

持续小剂量化疗对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤VEGF-C及其受体Flt-4表达的影响

目的探讨持续小剂量(LDM)化疗对肺腺癌A549细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)/fms-样酪氨酸激酶-4(Flt-4)轴的影响及其机制。方法将人肺腺癌A549细胞接种于18只裸鼠皮下,建立荷瘤动物模型,以随机数字表法将其分为最大耐受剂量(MTD)组(CTX 100mg.kg-1腹腔注射,隔日1次,连续3次;n=6)、LDM组(CTX 20mg.kg-1.d-1腹腔注射,n=6)和对照组(0.1mL生理盐水腹腔注射,1次/d;n=6)。治疗21d后脱颈处死裸鼠,取皮下肿瘤组织,采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测肿瘤组织中VEGF-C、Flt-4的蛋白及mRNA表达。结果 LDM组裸鼠肿瘤组织VEGF-C、Flt-4蛋白及mRNA的表达水平均显著低于MTD组和对照组(P<0.05)。结论 LDM化疗可能通过降低肿瘤组织VEGF-C、Flt-4的表达而减少肺腺癌A549荷瘤裸鼠肿瘤的淋巴转移。     

参芎葡萄糖注射液及其丹参组分对小鼠核受体表达的调控作用

目的 考察参芎葡萄糖注射液(SGI)及其丹参组分(SM)对小鼠肝细胞中芳香烃受体(AhR)、肝细胞核因子4α(HNF-4α)、孕烷X受体(PXR)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA表达的影响.方法 采用随机数表法将40只雄性小鼠分为8组,每组5只,分别为空白组、阳性组(苯巴比妥)、SGI低剂量组(以丹参素计2.6 mg·kg-1·d-1)、SGI中剂量组(以丹参素计3.9 mg·kg-1·d-1)、SGI高剂量组(以丹参素计5.2 mg·kg-1·d-1)、SM低剂量组(以丹参素计2.6 mg·kg-1·d-1)、SM中剂量组(以丹参素计3.9 mg·kg-1·d-1)、SM高剂量组(以丹参素计5.2 mg·kg-1·d-1),连续给药7 d.提取各组小鼠肝脏组织中的RNA,检测相关核受体mRNA的变化.结果 与空白组相比,SGI高剂量组可以上调AhR mRNA的水平(P<0.05),上调倍数为1.7倍,但是SGI对PPARα、PXR、HNF-4α的mRNA水平没有显著性影响(P>0.05);SM对AhR、PPARα、PXR和HNF-4α的mRNA表达均无显著性影响(P>0.05).结论 高剂量的参芎葡萄糖注射液能够影响AhR mRNA的表达,但这种影响并不是由其丹参组分导致的.     

5-氨基酮戊酸-光动力学疗法治疗荷瘤裸鼠宫颈癌的实验研究

目的 分析5-氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)对宫颈癌裸鼠移植瘤的体内疗效,对不同给药途径的光动力学治疗(PDT)效果进行比较,以寻找光毒反应最小的给药方式.探讨ALA-PDT诱导宫颈癌细胞凋亡的作用途径.方法 选择人宫颈癌Me180细胞系建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型,通过人宫颈癌裸鼠移植瘤体内抑瘤实验、常规染色、免疫组化法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白表达的影响等方法,对局部给药和尾静脉给药两种给药方法 进行比较研究.相对实时荧光定量法检测ALA-PDT对宫颈癌肿瘤组织凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2、促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达的影响.结果 局部给药PDT组的肿瘤体积[(0.09 ±0.02)cm3]与对照组[(0.67±0.06)cm3]相比明显减小,差异有统计学意义(P＜0.01),其中局部给药PDT组在7～14 d时体积最小,且体积减小最明显.HE常规染色可观察到PDT组肿瘤受激光照射的皮下细胞区域坏死明显.免疫组化检测结果 表明,ALA-PDT可显著地抑制宫颈移植瘤组织的Survivin和VEGF的蛋白表达.移植瘤组织mRNA的相对实时荧光定量结果 证明PDT治疗后凋亡抑制基因Survivin和Bcl-2的mRNA的表达明显降低(均P＜0.01),而促凋亡基因P53、Bax、Bad mRNA表达水平稍有增高,但差异无统计学意义.结论 ALA-PDT对宫颈癌治疗是有效的.临床用光动力治疗宫颈癌或癌前病变患者应尽量使用局部给药方式,以减少PDT光毒作用的危害和不便.     

2,3-吲哚醌对小鼠的抗抑郁作用研究

目的观察2,3-吲哚醌（2,3-indolinedione,isatin,ISA）对小鼠实验性抑郁病的影响。方法 5O只昆明种小鼠随机分为5组：空白对照组、ISA（15 mg、45 mg、75 mg.kg-1）组和阿米替林（50 mg·kg^-1）组,各组给予相应药物10 d后,对小鼠进行强迫游泳实验。记录小鼠强迫游泳不动时间。结果 ISA（75 mg·k^g-1）组与阿米替林（50 mg·kg^-1）组的小鼠强迫游泳不动时间分别为（581±567）秒和（132±43）秒,均高于空白对照组（125±83）秒,并且两者之间存在显著性差异（P〈0.05）。结论 ISA能增加小鼠的游泳时间,具有抗抑郁作用。