人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立

本文应用兔抗ｈＡＦＰ ＩｇＧ包被板条，以异硫氰酸苯基－ＥＤＴＡ－Ｅｕ＾３＋标记抗ｈＡＦＰ ＭｃＡｂ，建立了固相“夹心”二步法分析ｈＡＦＰ技术，结果显示，分析范围是６．２５ｎｇ／ｍｌ－１００ｎｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９），变异系数在１．６７％－１７．７４％之间，ｈＡＦＰ最小可测值为０．３５ｎｇ／ｍｌ。测定７６例孕妇血清样品，同所购ＤＥＬＦＩＡ ｈＡＦＰ最小可测值为０．３５ｎｇ／ｍｌ。测定７６例孕妇血清样     

多抗－单抗夹心法时间分辨免疫荧光分析人甲胎蛋白

本文应用免抗ｈＡＦＰＩｇＧ包板，异硫氰酸苯基－ＥＤＴＡ－ＥＵ３＋标记抗ｈＡＦＰＭＣＡｂ，建立了固相夹心二步法分析ｈＡＦＰ技术。结果显示，分析范围是６．２５～１００．００μｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９），变异系数在１．６７～１７．７４％之间，ｈＡＦＰ最小可测值为０．３５μｇ／ｍｌ．测定７６例孕妇血清样品，同所购ＤＥＬＦＩＡｈＡＦＰ药盒结果相关性好（ｒ＝０．９７）。表明该法较为实用。     

去甲肾上腺素影响单核细胞抗原提呈的机制

１０＾－１３～１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ的去甲肾上腺素体外作用时能促进人外周血单核细胞的抗原提呈功能（ＡＰＦ）。ＰＫＣ激活剂ＰＭＡ和抑制剂４ａ－ＰＤＤ分别能加强和抑制ＮＥ对Ｍｏｎ的ＡＰＦ的促进作用；异搏定能抑制ＮＥ的这种作用，而ＰＫＡ的抑制剂ＰＫＩ对ＮＥ的这种作用无。结果提示ＮＥ促进ＭｏｎＡＰＦ的机制可能涉及到Ｃａ＾２＋和ＰＫＣ，而与ＰＫＡ无关。     

兔抗人C1qIgG（Fab‘）2的制备及鉴定

本文利用硫酸铵盐析及ＤＥＡＥ纤维素层析提取兔抗人Ｃ１ｑＩｇＧ．经胃蛋白酶消化及ＳＰＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ层析，制备了兔抗人ｃ１ｑＩｇＧ（Ｆａｂ＇）２．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析分子量为９３ＫＤ；经Ｃ１ｑＥＬＩＳＡ滴定其效价为１０＾－４，与人ＩｇＧ无交叉反应；当该制剂预先经人Ｃ１ｑ的处理后，阻断其与Ｃ１ｑ特异结合的能力，在合适的条件下可抑制Ｃ１ｑ和Ｒａｊｉ细胞上Ｃ１ｑＲ的结合。表明用该法制备的兔抗人     

血小板活化因子对嗜酸性粒细胞的活化作用

用多粘菌素Ｂ注射，造成豚鼠腹腔渗出液中嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）增多，分离出其中的Ｅｏｓ，测定血小板活化因子（ＰＡＦ）对Ｅｏｓ过氧化物酶（ＥＰＯ）活性、Ｅｏｓ沉淀密度和存活时间的作用。结果表明：ＰＡＦ能增强ＥＰＯ活性，诱导Ｅｏｓ脱颗粒，其最大作用浓度分别为１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ。淋巴细胞培养上清液能显著增强ＰＡＦ的脱颗粒作用。１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＰＡＦ还能使１５．９％的正常密度Ｅ     

高浓度抗CD3单抗诱导人外周血单个核细胞凋亡及细胞因子对？…

使用抗ＣＤ３单抗诱导新鲜分离的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡，同时观察细胞因子对其影响，１８ｈ后电镜发现处理组发生典型凋亡改变，ＤＮＡ电泳出现典型阶梯状条。ＴＵＮＥＬ法流式细胞仪检测发现处理组凋亡发生率３９．６％，显著高于对照组（Ｐ〈０．０１），ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α可显著增强抗ＣＤ３单抗诱导的凋亡，ＩＬ－１￣ＩＬ－３，ＴＮＦ－α对凋亡无明显影响。ＣｓＡ可抑制剂ＣＤ３单抗诱导的凋亡，但加入ＩＦ     

兔抗人ClqIgG（Fab＇）_2的制备及鉴定

本文利用硫酸铵盐析及ＤＥＡＥ纤维素层析提取兔抗人ＣｌｑＩｇＧ．经胃蛋白酶消化及ＳＰＡ－Ｓｅｐｌｉａｒｏｓｅ４Ｂ层析，制备了兔抗人ＣｌｑＩｇＧ（Ｆａｂ＇）＿２．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析分子量为９３ＫＤ；经Ｃｌｑ－ＥＬＩＳＡ滴定其效价为１０￣（－４）．与人ＩｇＧ无交叉反应；当该制剂预先经人Ｃｌｑ处理后，阻断其与Ｃｌｑ特异结合的能力，在合适的条件下可抑制Ｃｌｑ与Ｒａｊｉ细胞上ＣｌｑＲ的结合。表明用该法制备的兔抗人ＣｌｑＩｇＧ（Ｆａｂ＇）＿２具有较好的纯度及特异性，可用于ＣｌｑＲ功能的研究。     

缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其传递途径

本文观察了低氧对离体培养成年牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的影响，并用异搏定、Ｈ７、ＰＭＡ和ＥＧＦ进行干预实验，对ＭＳＣ增殖中信息传递途径作了初探。结果显示：（１）缺氧２４ｈ，ＰＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入显著增高。（２）异搏定及Ｈ７显著降低低氧Ｈ－ＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，而ＰＭＡ及ＥＧＦ显著增加ＨＳＭＣ＾３ＨＴｄＲ参入。（３）Ｈ－ＳＭＣ对ＰＭＡ和ＥＧＦ反应强于常氧Ｎ－ＳＭＣ；     

表达人膜辅助因子蛋白基因的猪内皮细胞可抑制人血清补体的细胞毒作用

目的研究转染人膜辅助因子蛋白基因的猪内皮细胞抗补体的细胞毒作用。方法从人胎盘组织提取总ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增得到人膜辅助因子蛋白（ｈＭＣＰ）基因全长ｃＤＮＡ,将其克隆到带有巨细胞病毒（ＣＭＶ）ＩＥ启动子的ｐＣＩ－ｎｅｏ哺乳动物表达载体和以ｐＣＩ－ｎｅｏ为基础构建成的带有人ＥＦ－１α启动子的ｐＥＦ－ｎｅｏ哺乳动物表达载体上,得到质粒ｐＣＩＭ和ｐＥＦＭ。利用电穿孔基因转移方法分别转染猪内皮细胞（ＰＥＣ）,以Ｇ４１８筛选稳定表达克隆。用正常人血清处理此转基因细胞来检测其抗补体作用。结果Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明,在ＥＦ－１α启动子引导下的ｈＭＣＰ基因得到了高效表达。死细胞计数和ＬＤＨ释放实验结果表明,表达ｈＭＣＰ基因的ＰＥＣ可有效抑制人血清补体对其的裂解作用（Ｐ＜０．０１）。结论克隆的ｈＭＣＰ基因在ＥＦ－１α启动子引导下于ＰＥＣ可高效表达,且使ＰＥＣ能够抗人补体的细胞毒作用。     

粗氨酸加压素对慢性肾衰大鼠心功能及其心肌细胞钠—钾—ATP酶…

用ＳＤ大鼠制作慢性肾衰（ＣＲＦ）动物模型，观察其乐与心肌精氨酸加压素（ＡＶＰ）含量的变化；ＣＲＦ大鼠静脉分别注射ＡＶＰ及其抗血清，观察其对平均动脉压、左心室压峰值和心肌细胞钠－钾－ＡＴＰ酶（Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶）活力的影响。结果表明，ＣＲＦ大鼠血浆及心肌ＡＶＰ含量与血肌酐水平同步增高；静脉注射ＡＶＰ标准品，可使心ａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活力明显降低，并加重心功能指标的异常变化，而给予ＡＶＰ抗     

高频喷射通气治疗PE—SWD兔血气和Na^＋—K^＋—ATPase图？…

为了探讨高频喷射通气（ＨＦＪＶ）治疗海水淹溺肺水肿（ＰＥ－ＳＷＤ）的作用机理,采用全自动血气酸碱分析仪和计算机图像分析系统对海水淹溺肺水肿组（ＰＥ－ＳＷＤ－Ｇ）、高频喷射通气组（ＨＦＪＶ－Ｇ）和正常对照组（ＯＮＴＲＯＬ ＧＲＯＰＵ,ｃｇ）兔ＰａＯ２、ＰａＣＯ２血氧饱和度（ＳａＯ２和兔肺内Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ进行自动检测和定量分析。结果表明,ＰＥ－ＳＷＤ经ＨＦＪＶ治疗１００ｍｉｎ,ＨＦＪＶ     

人醛缩酶A单克隆抗体的制备及应用

纯化并鉴定了人醛缩酶Ａ、Ｂ、Ｃ（ｈＡＬＤ－Ａ、Ｂ、Ｃ）。用ｈＡＬＤ－Ａ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，将免疫的脾细胞和Ｐ＿３－Ｘ＿（６３）－Ａｇ８．６５３骨髓瘤细胞用ＰＥＧ进行融合，用ＥＬＩＳＡ法筛选，ｈＡＬＤ－Ｂ、Ｃ作阴性对照，将阳性反应的杂交瘤细胞进行克隆，获得３株杂交瘤细胞株。其ＭｃＡｂ的亚类分别为ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ１、ＩｇＭ，亲合常数分别为７．５×１０￣（１０）、３．５×１０￣９、２．３×１０￣９。３株细胞株分泌的单抗通过Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ得到证实。用亲合层析法从人肝癌细胞中提纯了ＡＬＤ－Ａ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为单一区带，但其电泳迁移率较ｈＡＬＤ－Ａ滞后。     

癫痫患者免疫状态的探讨

本文观察了７０例癫痫（ＥＰ）患者的免疫状态，首次检测了Ｂ淋巴细胞亚群，ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ，对各项免疫学指标进行了对比研究，发现ＩｇＡ，ＩｇＭ含量明显降低，ＣＩＣ含量明显增高（Ｐ＜０．０１），Ｃ３明显降低（Ｐ＜０．０５），显示患者体液免疫功能低下；淋巴细胞亚群测定发现ＣＤ３＾＋，ＣＤ４＾＋明显降低，ＣＤ８＾＋明显增高，ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），表明细胞免疫功能低下；     

血管内皮在猪离体肺内动脉缺氧性收缩反应中的作用及机制

浴槽内缺氧（ｐＯ２＝４０ｍｍＨｇ，５．３３ｋＰａ）可使内皮（ＥＣ）完整的猪离体肺内动脉（ＰＡ）收缩（张力升高０．８６±０．０９，ｎ＝１２）。去除ＥＣ后ＰＡ的缺氧收缩反应减弱（张力升高仅０．１１±０．０３ｇ，ｎ＝１２，Ｐ＜０．０１）。内皮衍的舒张因子（ＥＤＲＦｓ）的抑制剂美兰、棉子酚（均１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）及钙拮抗异搏停（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）可显著抑制ＥＣ完整ＰＡ的缺氧性收缩反应，而消炎痛、乙胺     

干扰素和肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞表达HLA—Ⅱ类抗原…

采用ｃｅｌｌ－ＥＬＩＳＡ法对ＩＦＮ－α，γ及ｒＴＮＦα单独或协同影响人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表达ＨＬＡ－Ⅱ类抗原作了定量观察，结果表明，ＩＦＮγ直接刺激ＨＵＶＥＣ可依浓度和时间依赖的方式提高其ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达量，而ｒＴＮＦα，ＩＦＮα单独处理ＨＵＶＥＣ无效，当ｒＴＮＦα和ＩＦＮγ同时诱导时，对ＨＵＶＥＣ表达ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ均表现抑制作用，但是，当先用ＩＦＮγ诱导ＨＵＶＥＣ２４ｈ后     

FPLC纯化单克隆抗体（Fab＇）_2片段

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱，在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了抗肝癌单克隆抗体（ＨＡｂ１８）Ｆ（ａｂ＇）２片段的快速纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ用胃蛋白酶消化１８ｈ后，上阴离子交换色谱柱纯化，用ｐＨ７．５１０ｍｍｏｌ／ＬＰＢ洗脱，即得到纯化的Ｆ（ａｂ＇）２．一次纯化周期仅需２５ｍｉｎ，一次上样量１２０～１６０ｎｇ蛋白，Ｆ（ａｂ＇）２得率为３４％，回收率为５１％。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定纯度大于９５％，免疫荧光法测定活性为１：４０００．该法操作简单、快速、实用性强，不需要高档次的色谱仪，只要有一台核酸／蛋白检测仪便可进行纯化，是实验室纯化Ｆ（ａｂ＇）２的理想方法．     

EPF单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文用纯化的早孕因子免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，通过鼠－鼠杂交瘤技术，成功地建立了２株分泌ＥＰＦ单克隆抗体的杂交瘤细胞。经检测，它们所分泌的抗体亚类均为ＩｇＧ１，毁交瘤染色体数目１００－１０６条，ＥＩＳＡ检测诱生腹水抗体效价为１：１．２８＊１０＾５，连续培养生物学性状稳定。抗ＥＰＦ抗原的单克隆抗体的建立，为深入研究ＥＰＦ的生物学性质、特征提供了有力的工具。     

糖尿病大鼠心肌MDA含量,SOD和Na—K—ATP酶活性的变化

实验用四氧嘧啶破坏Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺发诱导糖尿病模型，观察糖尿病大鼠心肌组织ＭＤＡ含量，ＳＯＤ和Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性的变化以及氧自由基清除剂（ＶｉｔＥ，亚硒酸钠）对糖尿病大鼠心肌的保护作用，结果表明：（１）糖尿病大鼠心肌组织ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ〈０．０５），而心肌细胞膜上Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶的活性显著下降（Ｐ〈０．０１），（２）ＶｉｔＥ和亚硒酸钠能显著降低糖尿病大鼠心肌组织ＭＤ     

c—myb对大鼠黄体细胞孕酮和雌二醇生成的影响

本文观察了反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ对黄体细胞ｈＣＧ诱导的Ｐ和Ｅ２产生的影响,并探讨了与二丁酰ｃＡＭＰ和ｖｅｒａｐａｍｉｌ的关系。结果发现, ｃ－ｍｙｂＯＤＮ能呈剂量相关方式抑制黄体细胞ｈＣＧ诱导的Ｐ和Ｅ２的产生。同时使ｃ－ｍｙｂ蛋白染色了性的黄体细胞百分数下降,而无义ｔａｔＯＤＮ上应的作用。当１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ二丁酰ｃＡＭＰ与反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ共同作用时能明显逆转反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ对Ｐ、Ｅ２产生     

凝胶色谱法半制备级纯化单克隆抗体

作者采用Ｓｅｐｈａｃｙ１Ｓ－２００凝胶色谱柱，在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰ－ＬＣ）建立了肝癌相关抗原单克隆抗体半制备级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经４０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用凝胶色谱纯化，一次上样量相当于５～１０ｍｌ腹水，可得纯化ＭｃＡｂ３０～６０ｍｇ，得率为６～５．５ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为６３％，一次色谱纯化周期２ｈ，整个分离纬化可在３ｈ内完成。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＤＥＡＥ离子交换色